（內(nèi)科學(xué)專業(yè)論文）ctgf和hif1α在胰腺癌組織中的表達(dá)及意義.pdf

目錄 一、摘要 中文論著摘要一1 英文論著摘要3 二、英文縮略語5 三、論文 前言”6 0剛看” 材料與方法7 結(jié)果1 0 討論1 2 結(jié)論13 四、本研究創(chuàng)新性的自我評價1 5 五、參考文獻(xiàn)1 6 六、附錄 綜述18 在學(xué)期間科研成績2 8 致謝2 9 個人簡介3 0 中文論著摘要 c t g f 和h i f 1 僅在胰腺癌組織中的表達(dá)及意義 目的 胰腺癌是消化系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一，通常所說的胰腺癌指的是胰腺導(dǎo)管 腺癌，占所有胰腺腫瘤的8 5 - - 9 0 。胰腺癌惡性程度高，起病隱匿，預(yù)后很差。 鑒于胰腺癌如此高的致死率和目前有效治療手段的匱乏，分析研究胰腺癌的發(fā)生 發(fā)展機(jī)制及其內(nèi)在的分子生物學(xué)特性，從而尋找有效的診治手段已成為多年來胰 腺癌研究的焦點問題，本研究觀察結(jié)締組織生長因子( c o n n e c t i v et i s s u eg r o w t h f a c t o r c t g f ) 和缺氧誘導(dǎo)因子一l a ( h y p o x i ai n d u c i b l ef a c t o r - 1 a ，h i f l a ) 在胰腺 癌組織中的表達(dá)情況，探討c t g f 及h i f 1 a 在胰腺癌中表達(dá)的臨床意義和二者表達(dá) 的關(guān)系。 方法 收集4 2 例胰腺導(dǎo)管腺癌的組織蠟塊，其中男性3 0 例，女性1 2 例；年齡4 3 7 9 ( 平均5 9 5 ) 歲；t n m 分期：i 期9 例，i i 期2 0 例，i i i 期1 1 例，期2 例；組 織學(xué)分級為：高分化腺癌1 6 例，中低分化腺癌2 6 例，其中伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者1 8 例， 無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者2 4 例；選取正常胰腺組織1 0 例為對照。采用免疫組化s p 法檢測 4 2 份胰腺癌組織( p c 組) 和1 0 份正常胰腺組織( 對照組) 中c t g f 和h i f - l a 的表達(dá)水平，分析其表達(dá)與胰腺癌患者臨床特征的關(guān)系，并分析兩者表達(dá)的相關(guān) 性。 結(jié)果 l 、c t g f 主要表達(dá)在腫瘤細(xì)胞的胞漿或胞膜，間質(zhì)細(xì)胞中亦有表達(dá)。在胰腺 癌組織中，c t g f 表達(dá)陽性率為7 3 8 ，在正常胰腺組織中，c t g f 表達(dá)陽性率3 0 ，差別有統(tǒng)計學(xué)意義( ，= 5 0 5 0 ，p 0 0 5 ) 。 2 、h i f 1 a 主要表達(dá)在腫瘤細(xì)胞的胞漿和胞核，在胰腺癌組織中，h i f 1 a 表 達(dá)陽性率為7 1 4 ，在正常胰腺組織中均未見h i f 1 a 的表達(dá)，差別有統(tǒng)計學(xué)意義 ( ，= 1 4 0 8 4 ，p 0 0 5 ) 。 3 、p c 組中c t g f 的表達(dá)與年齡、性別、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期 均無明顯相關(guān)性，h i f - l a 與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期密切相關(guān)，而與年齡、性別、 分化程度無明顯相關(guān)性，在胰腺癌中c t g f 的表達(dá)與h i f 1 a 的表達(dá)存在相關(guān)性 ( f - - 0 3 9 2 ，p - - 0 0 1 0 ) 。 結(jié)論 l 、c t g f 的陽性表達(dá)在胰腺癌組織中和正常胰腺組織中存在顯著差異，然而 與胰腺癌的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期均無明顯相關(guān)性。 2 、h i f 1 a 的陽性表達(dá)在胰腺癌組織中和正常胰腺組織中存在顯著差異，且 與胰腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期密切相關(guān)。 3 、c t g f 與h i f l a 在胰腺癌組織中的表達(dá)存在相關(guān)性( r = o 3 9 2 ，p = 0 0 1 0 ) 。 它們的異常表達(dá)可能與腫瘤生長和轉(zhuǎn)移有關(guān)。檢測腫瘤組織中c t g f 和h i f 1 a 的 表達(dá)有助于預(yù)測預(yù)后。 關(guān)鍵詞 胰腺癌；免疫組織化學(xué)；結(jié)締組織生長因子；缺氧誘導(dǎo)因子1 a 2 英文論著摘要 e x p r e s s i o na n ds i g n i f i c a t i o no fc o n n e c t i v et i s s u e g r o w t hf a c t o ra n d h y p o x i ai n d u c i b l ef a c t o r - l ai n 1 、j 1 r a n c r e a t i cu a r c i n o m a o b j e c t i v e p a n c r e a t i cc a n c e ri so n eo ft h ec o m m o nm a l i g n a n tt u m o ri nd i g e s t i v es y s t e m ，i t s h i g h l ym a l i g n a n to c c u l to n s e t ，t h ep r o g n o s i si sp o o ra n a l y s i so fp a n c r e a t i cc a n c e r d e v e l o p m e n tm e c h a n i s ma n di t si n h e r e n tm o l e c u l a rb i o l o g y , i no r d e rt of i n de f f e c t i v e m e a n so fd i a g n o s i sa n dt r e a t m e n to fp a n c r e a t i cc a n c e rr e s e a r c hh a sb e c o m et h ef o c u so f m a n yy e a r s ，t h i ss t u r d yi st od e t e c t t h ee x p r e s so fc o n n e c t i v et i s s u eg r o w t hf a c t o r ( c t g f ) a n dh y p o x i ai n d u c i b l ef a c t o r - 1a ( h i f la ) i np a n c r e a t i cc a r c i n o m a sa n d i n v e s t i g a t e t h e i r r e s p e c t i v er e l a t i o n s h i p w i t l l c l i n i c o p a t h o l o g i c f e a t u r e sa n dt h e c o r r e l a t i o n m e t h o d s c o l l e c t4 2c a s e so fp a r a f f i ne m b e d d e dp a n c r e a t i cc a r c i n o m a s a m o n gt h e m ，t h e r a t i o no fs e xm a na n dw o m a nw a s3 0 ：12 ；t h ea g ev a r i e df r o m4 3t o7 9y e a r so l da n dt h e m e d i a na g ew a s5 9 5 ；t n ms t a g e ；9c a s e so fis t a g e ，2 0c a s e so fi is t a g e ，11c a s e so fi i i s t a g ea n d2c a s e so fi vs t a g e ；a m o n gt h e m ，16 c a s e sw e r ew e l l - d i f f e r e n t i a t e d ，a n d2 6 c a s e sw e r em o d e r a t e l ya n dp o o r - d i f f e r e n t i a t e d ；18 c a s e sh a dl y m p hn o d em e t a s t a s i sa n d 2 4w i t h o u t a n d10c a s e so fn o r m a lp a n c r e a s e st i s s u e s i m m o n o h i s t o c h e m i s t r ys t a i n i n g ( s pm e t h o d ) w a su s e dt od e t e c te x p r e s s i o no f c t g fa n dh i f - lai n4 2c a s e so fp a r a f f i ne m b e d e dp a n c r e a t i cc a r c i n o m a sa n d10c a s e s o fn o r m a lp a n c r e a s e st i s s u e s t h er e l a t i o n s h i pb e t w e e nc t g f 、h i f - lae x p r e s s i o n a n dc l i n i cp a r a m e t e r so fp a t i e n t sw a sa n a l y z e da n dt h ec o r r e l a t i o nb e t w e e nc t g f e x p r e s s i o na n dh i f - l a e x p r e s s i o nw a s a l s oa n a l y z e d r e s u l t s 1 c t g fi se x p r e s s e dm a i n l yi ne n d o c h y l e m ao rc y t o m e m b r a n eo ft u m o rc e l l ，a l s o 3 i ni n t e r s t i t i a lc e l l ，i np a n c r e a t i cc a r c i n o m a s ，t h ep o s i t i v i t yr a t eo f c t g fw a s7 3 8 w h i c hw a ss i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a n3 0 i nn o r m a lp a n c r e a s et i s s u e s ( p l o 為陽性。 三、統(tǒng)計學(xué)方法 采用s p s s l 3 0 軟件分析。c t g f 和h i f 一1 a 表達(dá)陽性率的比較用p e a r s o n z 2 檢驗， 9 若理論頻數(shù)小于5 ，可用校正礦檢驗，相關(guān)性分析采用s p e a r m a n 相關(guān)分析，兩者表 達(dá)的一致性檢驗可用配對，檢驗，檢驗水準(zhǔn)a = 0 0 5 。 結(jié)果 l 、c t g f 的表達(dá)：c t g f 主要表達(dá)在腫瘤細(xì)胞的胞漿或胞膜( 圖1 ) ，間質(zhì)細(xì) 胞中亦有表達(dá)。在4 2 例胰腺癌組織中，c t g f 表達(dá)陽性3 l 例( 7 3 8 ) ，1 0 例正 常胰腺組織中，c t g f 表達(dá)陽性3 例( 3 0 ) 差別有統(tǒng)計學(xué)意義( 產(chǎn)5 0 5 0 ，p 0 0 5 ) 。 2 、h i f 1 a 的表達(dá)：h i f 1 a 主要表達(dá)在腫瘤細(xì)胞的胞漿和胞核( 圖2 ) ，在4 2 例胰腺癌組織中，h i f l a 表達(dá)陽性3 0 例( 7 1 4 0 a ) ，1 0 例正常胰腺組織中均未見 h i f 1 a 的表達(dá)。差別有統(tǒng)計學(xué)意義( x z = - 1 4 0 8 4 ，p 0 0 5 ) 。 3 、c t g f 和m f 1 a 的表達(dá)與胰腺癌患者臨床特征的關(guān)系( 表1 ) ，c t g f 的 陽性表達(dá)在胰腺癌組織中和正常胰腺組織中存在顯著差異，然而與胰腺癌的分化 程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期均無明顯相關(guān)性。h i f 1 a 的陽性表達(dá)在胰腺癌組織 中和正常胰腺組織中存在顯著差異，且與胰腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期密切相 關(guān)。 4 、c t g f 和h i f l a 表達(dá)的相關(guān)性：s p e a r m a n 相關(guān)分析顯示c t g f 與h i f 1 a 表達(dá)成正相關(guān)( r - - 0 3 9 2 ，卿0 1 0 ) ，且兩者表達(dá)一致性較好。( 表2 ，產(chǎn) 0 0 0 0 p = - i 0 0 0 ) 。 圖片l ，a 為c t g f 在胰腺癌中的陰性表達(dá)，b 為c t g f 在胰腺癌中的陽性表達(dá) 均( 4 0 0 倍) 1 0 ， 。 1 b 毋 1 圖片2 ，a 為h i f 1 a 在胰腺癌中的陰性表達(dá)，b 為h i f 1 a 在胰腺癌中的陽性表達(dá) 均( 4 0 0 倍) 表1 ，c t g f 及h i f l e t 的表達(dá)與胰腺癌患者臨床特征的關(guān)系 性別 男 女 年齡( 歲) 5 8 分化程度 中低 高 淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 有 無 1 8 2 4 2 0 ，6 6 7 l l ，9 1 7 1 6 2 90 2 0 2 1 6 8 8 9 1 5 ，6 2 52 4 6 60 11 6 2 l ，8 0 8 lo 6 2 50 8 9 60 3 4 4 1 2 ，6 6 7 1 9 ，7 9 2 0 3 1 2 l ，7 0 0 9 ，7 5 0 01 0 0 0 。 1 5 8 3 3 1 5 。6 2 5 2 1 8 8o 1 3 9 s 2 l ，8 0 8 9 ，5 6 3 1 8 4o 1 7 5 1 6 ，8 8 9 0 5 7 7 1 4 ，5 8 3 4 7 0 60 0 3 0 s 臨床分期 i 2 9 2 0 ，6 6 71 9 ，6 0 0 i i i - - - i v 1 3 1 1 ，9 1 7 0 4 7 20 4 9 2 1 3 ，1 0 0 04 1 3 60 0 4 2 注：校正卡方檢驗；5p e a r s o n 卡方檢驗 屹 掩m 拍 m 表2 ，c t g f 及h i f 1 a 表達(dá)的一致性 討論 c t g f 是b r a d h a m t ”】等于1 9 9 1 年首次在人的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞條件培養(yǎng)基中發(fā) 現(xiàn)的細(xì)胞因子，屬于c c n 家族成員。廣泛存在于人類多種組織器官，如心臟，肝 臟腎臟和結(jié)締組織中。病理情況下，c t g f 過度表達(dá)與纖維化疾病的發(fā)生密切相 關(guān)，如胰腺纖維化，腎纖維化及肺纖維化等。近年來研究發(fā)現(xiàn)c t g f 可能在很多 腫瘤中扮演著一個關(guān)鍵因子，在介導(dǎo)腫瘤與基質(zhì)的交互行為中發(fā)揮突出的作用。 如在腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤，肝細(xì)胞癌中高表達(dá)者較低表達(dá)者病情惡化快，腫瘤的浸潤轉(zhuǎn) 移能力強(qiáng)，很可能是一種促腫瘤生長及轉(zhuǎn)移的因子【6 , 1 6 ，而c t g f 在胰腺癌中是促 腫瘤因子還是抑制腫瘤因子存在爭議，以往認(rèn)為胰腺癌中腫瘤周邊的結(jié)締組織纖 維化反應(yīng)是一種保護(hù)作用，有限制腫瘤的生長，誘導(dǎo)細(xì)胞外基質(zhì)形成及抑制轉(zhuǎn)移 發(fā)生的作用1 1 7 , 1 8 ，但最近的證據(jù)表明這種活化的基質(zhì)具有致惡變的性質(zhì)。在p d a c 中，c t g f 可增加i 型膠原蛋白，纖維結(jié)合蛋白和5 整合素在成纖維細(xì)胞中的 m r n a 表達(dá)，促進(jìn)基質(zhì)的合成，而i 型膠原蛋白等已經(jīng)被證明有促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生 長，藥物抵抗和轉(zhuǎn)移作用【1 9 1 。有研究顯示c t g f 可能通過異常的自分泌或是旁分 泌途徑，促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞的生長，浸潤，轉(zhuǎn)移和血管生成【2 0 1 。 在本實驗中，c t g f 在胰腺癌組織中的陽性表達(dá)率高于正常胰腺組織，且有 統(tǒng)計學(xué)意義，但與胰腺癌分級，分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移未有明顯相關(guān)。提示c t g f 的 陽性表達(dá)是胰腺癌中的常見的異常表達(dá)，可能由于本實驗例數(shù)較少所致其表達(dá)與 胰腺癌分級，分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無明顯相關(guān)。 研究已發(fā)現(xiàn)，缺氧是所有實體瘤的特性，它與腫瘤的侵襲，血管生成及化療 耐藥有關(guān)，腫瘤的缺氧甚至有可能是發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化甚至是轉(zhuǎn)移的始動因素，而 h i f 1 a 是缺氧狀態(tài)下最常見的調(diào)解因子。h i f 1 是s e m e n z a l 于1 9 9 2 年在缺氧誘 1 2 導(dǎo)的肝細(xì)胞癌細(xì)胞株h e p 3 b 細(xì)胞核提取物中發(fā)現(xiàn)的一種核轉(zhuǎn)錄因子【2 l 】，h i f 1 a 是h i f 1 的調(diào)節(jié)及活性亞基，可被缺氧誘導(dǎo)表達(dá)，缺氧狀態(tài)下發(fā)揮活性，促進(jìn)缺 氧反應(yīng)基因的轉(zhuǎn)錄，通過編碼血管內(nèi)皮生長因子( v a s c u l a re n d o t h e l i a lg r o w t h f a c t o r ，v e g f ) ，促紅細(xì)胞生成素( e r y t h r o p o i e t i n ，e p o ) ，胰島素樣生長因子( i n s u l i n l i k eg r o w t hf a c t o r ，i g f ) 等多種因子參與腫瘤細(xì)胞的代謝，血管擴(kuò)張，新血管形成 及腫瘤轉(zhuǎn)移等【2 2 】。 研究表明h i f 1 a 在多種腫瘤組織中存在高表達(dá)，如膀胱癌，乳腺癌，胰腺癌 等實體腫瘤中均呈過度表達(dá)，且與腫瘤的臨床分期及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。本實驗研究 表明，h i f 1 a 在胰腺癌組中陽性表達(dá)率顯著高于正常胰腺組織，具有統(tǒng)計學(xué)意義， 且與臨床分期，淋巴轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)，而與腫瘤的分級，年齡，性別無關(guān)。與文 獻(xiàn)報道結(jié)果基本一致。這就說明h i f 1 a 可能在胰腺癌的發(fā)生發(fā)展及浸潤轉(zhuǎn)移過程 中其起著促進(jìn)作用。提示h i f 1 a 可作為判斷胰腺癌浸潤轉(zhuǎn)移及預(yù)后有價值的指 標(biāo)。 有研究發(fā)現(xiàn)低氧狀態(tài)下，體外胰腺癌細(xì)胞表達(dá)和分泌c t g f 的量增加，且 c t g f 及缺氧共區(qū)域化【2 3 1 。提示部分c t g f 的功能由h i f 1 a 來調(diào)節(jié)。有文獻(xiàn)報道， 在h c s 2 8 細(xì)胞系中，重組c t g f ( r c c n 2 ) 在常氧狀態(tài)下及低氧狀態(tài)下均可刺激 h i f 1 am r n a 的水平，重組c t g f 劑量愈大，h i f 1 am r n a 的水平愈高，呈劑 量依賴方式。提示在h c s 2 8 細(xì)胞系中，c t g f 可調(diào)節(jié)h i f 1 a 的表達(dá)【2 4 1 。本研究顯 示，c t g f 和h i f 1 a 在胰腺癌組織中的陽性表達(dá)率呈明顯相關(guān)性，且具有統(tǒng)計學(xué) 意義。據(jù)本次試驗結(jié)果推測，在胰腺癌細(xì)胞中，c t g f 為促腫瘤因子，促進(jìn)腫瘤 發(fā)生發(fā)的可能機(jī)制之一是通過上調(diào)h i f 1 a 的水平而實現(xiàn)的。本實驗提示c t g f 及 h i f 1 a 在胰腺癌組織中的高表達(dá)與腫瘤生長及轉(zhuǎn)移有關(guān)，二者對預(yù)測胰腺癌的預(yù) 后有重要作用。關(guān)于其機(jī)制需進(jìn)一步研究。 結(jié)論 1 、c t g f 的陽性表達(dá)在胰腺癌組織中和正常胰腺組織中存在顯著差異，然而 與胰腺癌的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期均無明顯相關(guān)性。 2 、h i f 1 a 的陽性表達(dá)在胰腺癌組織中和正常胰腺組織中存在顯著差異，且 與胰腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期密切相關(guān)。 1 3 3 、c t g f 與h i f 1 a 1 4 本研究創(chuàng)新 雖然國內(nèi)已 z j 結(jié)厶i e i ，探討它# 口，叼p 1 巳 1 5 參考文獻(xiàn) 1 l a t i n k e cb v o b r i e nt r l 跏l f - p r o m o t e rf u n c t i o na n ds n u c t u r eo ft h er o w t hf a c t o r - i n d u c i b l e i m m e d i a t ee a r l yg e n ec y r 61 n u c l e i ca c i d sr e s 19 91 ，19 ：2 3 61 - 7 2 柳剛，關(guān)廣聚，李學(xué)剛，等結(jié)締組織生長因子與腎臟纖維化的關(guān)系叨山東醫(yī)藥，2 0 0 3 ，4 3 ( 3 4 ) ：2 3 3s h i m ot , n a k a n i s h it , n i s h i d al e ta 1 c o n n e c t i v et i s s u eg r o 、舳f a c t o ri n d u c e st h e p r o l i f e r a t i o n ，m i g r a t i o n ，a n dt u b e f o r m a t i o nf ov a s c u l a re n d o t h e l i a lc e l l si nv i t r oa n d a n g i o g e n e x i si nv i v o jb i o c h e m ，1 9 9 9 ，1 2 6 ( 1 ) ：1 3 7 - 1 4 5 4b a b i ca m , c h e nc c l a ul ff i s p12 m o r s ec o n n e c t i v et i s u eg r o hf a c t o rm e d i a t e se n d o t h e l i a l c e l la d h e s i o na n dm i g r a t i o n t h r o u g hi n t e g r i na l p h a v b e t a 3 ，p r o m o t e s e n d o t h e l i a lc e l l s u r v i v a l ，a n di n d u c e sa n g i o g e n e s i si nv i v o m o lc e l lb i o l ，1 9 9 9 ，1 9 ( 4 ) ：2 9 5 8 2 9 6 6 5f r a z i e rk , w i l l i a m ss , k o t h a p a l l id ，e ta 1 s t i m u l a t i o no ff i b r o b l a s tc e l lg r o w t h ，m a t r i xp r o d u c t i o n a n dg r a n u l a t i o nt i s s u ef o r m a t i o nb yc o n n e c t i v et i s s u eg r o w t hf a c t o r ji n v e s td e r m a t o l ，19 9 6 ， 1 0 7 ( 3 ) ：4 0 4 1 1 6 楊常春，王穗暖，張一，等結(jié)締組織生長因子在腦膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)和腫瘤級別的關(guān) 系【j 】臨床神經(jīng)外科雜志，2 0 0 6 ，3 ( 3 ) ：8 9 1 0 1 7 曾志軍，楊連粵，王偉，等c y r 6 1 ，c t g f 和n o v 基因在肝癌細(xì)胞中的表達(dá)及與臨床特征的 關(guān)系【j 】中華肝膽外科雜志，2 0 0 5 ，1 1 ( 7 ) ：4 5 2 - 4 5 4 8 劉魯英吳淑華等結(jié)締組織生長因子在胃癌組織中的表達(dá)及其與預(yù)后的關(guān)系中國誤診 學(xué)雜志2 0 0 8 ，8 ( 10 ) ：3 5 - 3 6 9 k o l i o p a n o s a ，f r i e s sh ，d i m o l af f e ta 1 c o n n e c t i v et i s s u eg r o w t hf a c t o rg e n ee x pr e s s i o n a l t e r st u m o r p r o g r e s s i o ni ne s o p h a g e a lc a n c e r 【j 】w o r l djs u r g ，2 0 0 2 ，2 6 ( 4 ) ：4 2 0 4 2 7 1 0c o v e l l ok l ，s i m o n m c ，k e i t hb t a r g e t e dr e pl a c e m e n to f h y p o x i a - i n d u c i b l ef a c t o r - 1 a l p h ab y ah y p o x i ai n d u c i b l ef a c t o r - 2 a l p h ak n o c k i na l l e l ep r o m o t e st u m o rg r o w t h j 】c a n c e rr e s ， 2 0 0 5 ，6 5 ：2 2 7 7 - 2 2 8 6 1l s e m e n z ag l w a n g g lan u c l e a rf a c t o ri n d u c e db yh y p o x i av i ad e n o v o p r o t e i ns y n t h e s i sb i n d s t ot h eh u m a ne r y t h r o p o i e t i ng e n ee n h a n c er a t a s i t er e q u i r e df o rt r a n s c r i p t i o n a la c t i v a t i o n j 】 m o lc e l lb i o l ，1 9 9 2 ，1 2 ( 1 2 ) ：5 4 4 7 - 5 4 5 6 1 12r a t c l i f f ep j hi f 21a n dh i f 一2 ：w o r k i n ga l o n eo rt o g e t h e ri nh y p o x i a 【j 】? jc l i ni n v e s t ，2 0 0 7 ， 1 1 7 ( 4 ) ：8 6 2 8 6 5 13a k a k u r an ，k o b a y a s h im ，h o r i u c h iie ta 1 c o n s t i t u t i v ee x p r e s s i o no fh y p o x i ai n d u c i b l ef a c t o r - 1 a l p h ar e n d e r sp a n c r e a t i cc a n c e rc e l l sr e s i s t a n tt oa p o p t o s i si n d u c e db yh y p o x i aa n dn u t r i e n t d e p r i v a t i o n c a n c e rr e s ，2 0 01 ，61 ：6 5 4 8 - 5 4 1 4 s h i b a j it , n a g a om e ta 1 p r o g n o s t i cs i g n i f i c a n c eo fh i f l a l p h ao v e r e x p r e s s i o ni nh u i m a n p a n c r e a t i cc a n c e r a n t i c a n c e rr e s ，2 0 0 3 ，2 3 ：4 7 21 - 2 7 15 b r a d h a m d m ，l g a r a s h i a ，p o t t e r r l ，e t a l c o r m e c t i v e t i s s u e g r o w t h f a c t o r ：a e y s t e i n e - r i c h m i t o g e n s e c r e t e d b yh u m a nv a s c u l a re n d o t h e l i a lc e l l s i sr e l a t e dt ot h es r c - i n d u c e di m m e d i a t e e a r l yg e n e p r o d u c t c e f - 1 0 jc e l lb i o l ，1 9 9 1 ，1 1 4 ，( 6 ) ：1 2 5 8 - 1 2 9 4 1 6 曾志軍，楊連粵，王偉，等c y r 6 1 ，c t g f 和n o v 基因在孤立性大肝癌中的表達(dá)及其意義 【j 】肝膽外科雜志，2 0 0 6 ，1 4 ( 5 ) ：3 9 5 3 9 7 1 7 楊竹林黃生福等胰腺癌組織中c c n 家族基因和轉(zhuǎn)化生長因子- b 1 表達(dá)及其臨床病理意 義中華實驗外科雜志，2 0 0 5 ，2 2 ( 1 0 ) ：1 2 7 6 18h a r t e lm ，d im o l af f , e ta l ，d e s m o p l a s t i cr e a c t i o ni n f l u e n c e sp a n c r e a t i cc a n c e rg r o t hb e h a v i o r w o r l djs u r g 2 0 0 4 ，2 8 ( 8 ) ：8 1 8 2 5 1 9s h i n t a n iy , h o l l i n g s w o r t hm a w h e e l o c km j , e ta 1 c o l l a g e nip r o m o t e sm e t a s t a s i si np a n c r e a t i c c a n c e rb ya c t i v a t i n gc - j u nn h ( 2 ) - t e r m i n a lk i n a s e1a n du p - r e g u l a t i n gn - c a d h e r i ne x p r e s s i o n c a n c e rr e s ，2 0 0 6 ，6 6 ( 2 4 ) ：1 1 7 4 5 11 7 5 3 2 0a i k a w at , g u n nj ，s p o n gs m , e ta 1 c o n n e c t i v et i s s u eg r o w t hf a c t o r - s p e c i f i ca n t i b o d ya t t e n u a t e s t u m o rg r o w t h , m e t a s t a s i s ，a n da n g i o g e n e s i si na no r t h o t o p i cm o u s em o d e lo fp a n c r e a t i c c a n c e r m o lc a n c e rt h e r , 2 0 0 6 ，5 ( 5 ) 110 8 - 16 2 1 s e m e n z ag l s i g n a lt r a n s d u c t i o nt oh y p o x i a - i n d u c i b l ef a c t o r l 【j 】b i o c h e m i c a lp h a r m a c o l o g y 2 0 0 2 6 4 ( 3 ) ：9 9 3 9 9 8 2 2p o w i sg ，k i r k p a t r i c kl h y p o x i ai n d u c i b l ef a c t o r la l p h aa sac a n c e rd r u gt a r g e t 【j 】m o l c a n c e r1 1 1 e r ，2 0 0 4 ，3 ( 5 ) ：6 4 7 - 6 5 4 2 3b e n n e w i t hk l ，h u a n gx ，h a mc m ，e ta 1 t h er o l eo ft u m o rc e l l d e r i v e dc o n n e c t i v et i s s u e g r o w t hf a c t o r ( c t g f c c n 2 ) i np a n c r e a t i ct u m o rg r o w t h 一c a n c e rr e s , 2 0 0 9 ，6 9 ( 3 ) ：7 7 5 8 4 2 4n i s h i d at k o n d os ，m a e d aa ，k u b o t as ，l y o n sk m ，t a k i g a w am c c nf a m i l y 2 c o n n e c t i v e t i s s u eg r o w t hf a c t o r ( c c n 2 c t g f ) r e g u l a t e st h ee x p r e s s i o no fv e g ft h r o u g hh i f - la l p h a e x p r e s s i o n i nac h o n d r o c y t i cc e l ll i n e ，h c s 一2 8 ，u n d e rh y p o x i cc o n d i t i o nb o n e2 0 0 9 ， 4 4 ( 1 ) ：2 4 - 3 1 1 7 綜述 結(jié)締組織生長因子、缺氧誘導(dǎo)因子1 僅與胰腺癌 摘要：胰腺癌是消化系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一，其惡性程度高，起病隱匿， 預(yù)后很差。分析研究胰腺癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)制及其內(nèi)在的分子生物學(xué)特性，從而尋 找有效的診治手段已成為多年來胰腺癌研究的焦點問題，結(jié)締組織生長因子廣泛 存在于人類多種組織器官中，在介導(dǎo)細(xì)胞的增值，遷移，分化，生存及導(dǎo)致血管 發(fā)生中起作用。如今發(fā)現(xiàn)c t g f 在很多類型的腫瘤中表達(dá)過量，c t g f 在肝細(xì)胞 癌、胃癌、食管腺癌等癌組織中高表達(dá)，且高表達(dá)者較低水平表達(dá)者，病情惡化 快，患者生存期短，預(yù)后差；因此c t g f 可能在這些腫瘤中起到了促進(jìn)腫瘤的生 長，轉(zhuǎn)移，浸潤的作用而在胰腺癌組織中c t g f 的高表達(dá)是促進(jìn)胰腺癌的發(fā)展還 是抑制胰腺癌的發(fā)展存在爭議。缺氧誘導(dǎo)因子10 是一個在缺氧狀態(tài)下發(fā)揮活性的 核轉(zhuǎn)錄因子，是h i f 1 的活性單位。很多研究均表明h i f 1 在腫瘤的生長及浸潤 轉(zhuǎn)移中具有重要意義。它可調(diào)節(jié)多種靶基因如血管內(nèi)皮生長因子( v e g f ) ，促紅細(xì) 胞生成素( e p o ) 等的表達(dá)。近年來發(fā)現(xiàn)h i f 1 的活性對維持腫瘤的能量代謝， 新生血管生成，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖，凋亡和轉(zhuǎn)移等起重要作用h i f 1 a 是h i f 1 的 活性單位，在多種腫瘤組織中存在高表達(dá)，在腫瘤的低氧適應(yīng)調(diào)節(jié)中起關(guān)鍵作用 很多研究表明胰腺癌組織中h i f 1 a 的含量和胰腺癌惡性生物學(xué)行為呈正相關(guān)。 關(guān)鍵詞：胰腺癌；結(jié)締組織生長因子；缺氧誘導(dǎo)因子1 a 胰腺癌是消化系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一，通常所說的胰腺癌指的是胰腺導(dǎo)管 腺癌( p a n c r e a t i cd u c t aa d e n o c a r c i l l o m ap d a c ) ，占所有胰腺腫瘤的8 5 - - 9 0 。胰 腺癌惡性程度高，起病隱匿，預(yù)后很差。鑒于胰腺癌如此高的致死率和目前有效 治療手段的匱乏，分析研究胰腺癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)制及其內(nèi)在的分子生物學(xué)特性， 從而尋找有效的診治手段已成為多年來胰腺癌研究的焦點問題，隨著分子生物學(xué) 迅速發(fā)展，近幾年人們對胰腺癌發(fā)生發(fā)展機(jī)制的認(rèn)識有了較大的進(jìn)步，但是胰腺 癌在其發(fā)生發(fā)展過程中有諸多基因參與，且他們的作用機(jī)制和信號傳導(dǎo)途徑仍不 清楚。因此，繼續(xù)發(fā)掘胰腺癌相關(guān)蛋白及基因，為胰腺癌的早期診斷和生物治療 1 8 提供新的途徑和靶點，仍是目前 一、結(jié)締組織生長因子 結(jié)締組織生長因子( c o n n e c t i v et i s s u eg r o w t hf a t c o r ，c t g f ) ，是b r a d h a m 等 于1 9 9 1 年首次在人的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞條件培養(yǎng)基中發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子。它屬于一種 即刻早期基因c c n ( c t g f , c y r 6 1 ，n o v ，w i s p - 1 ，2 ，3 等) 家族的成員之一，廣泛存在 于人類的多種組織器官，如心臟，肝臟，腎臟和結(jié)締組織中，病理情況下，c t g f 過度表達(dá)與某些增生性和纖維化疾病的發(fā)生密切相關(guān)，如腎纖維化，胰腺纖維化， 肝硬化，肺纖維化等。 ( 一) 結(jié)締組織生長因子的合成和分子結(jié)構(gòu) c t g f 由上皮細(xì)胞，成纖維細(xì)胞，軟骨細(xì)胞，平滑肌細(xì)胞和一些腫瘤細(xì)胞株 合成分泌。人c t g f ( h c t g f ) 是一種富含半胱氨酸的長度為3 4 9 個氨基酸的 分泌型多肽，其分子量約為3 6 3 8 k d ，其基因定位于染色體6 q 2 3 1 區(qū)，包含5 個大 小相對恒定的外顯子和4 個大小不定的內(nèi)含子眩1 。這5 個外顯子分別編碼c t g f 的分泌信號肽和4 個共能相關(guān)片段。其氨端有一個分泌信號肽結(jié)構(gòu)域，其后依次 排列著4 個功能相關(guān)片段，構(gòu)成c t g f 的調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)。( 1 ) 胰島素樣生長因子結(jié)合 區(qū)。 ( 2 ) v w f 因子的c 型重復(fù)c r 結(jié)構(gòu)域。( 3 ) i i i d , 板反應(yīng)蛋白1 型重復(fù)區(qū)。( 4 ) c 末端。c t g f 可與低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋t 蘭t ( l p r ) a 2 巨球蛋白的受體結(jié)合，后 者在介導(dǎo)c t g f 的生物活性發(fā)面發(fā)揮著重要的作用。 ( 二) c t g f 的生物學(xué)效應(yīng) c t g f 的一個主要功能是通過一種整合素和硫酸肝素蛋白糖依賴機(jī)制促進(jìn)細(xì) 胞粘附。c t g fc 末端的1 8 k d a 的片段與硫酸肝素結(jié)合，已經(jīng)被充分的證明可以 促進(jìn)細(xì)胞的粘附引，同時，此片段也促進(jìn)成纖維細(xì)胞的增值h 1 。依據(jù)細(xì)胞類型的 不同，c t g f 通過不同的整合素促進(jìn)細(xì)胞粘附。例如，人包皮成纖維細(xì)胞通過a 6 1 3 1 介導(dǎo)粘附作用，人類血小板細(xì)胞通過a i i l 3 3 介導(dǎo)，而上皮細(xì)胞則通過a 1 3 3 介導(dǎo)等瞪1 。 其次c t g f 在很多纖維化損傷中都有高表達(dá)，表明它在促纖維化中的重要作 用。近幾年研究表明，c t g f 是介導(dǎo)t g f 8 1 促纖維化作用的一個重要的下游因子 n 1 ，應(yīng)用反義c t g f 技術(shù)或抗c t g f 中和抗體可以阻斷t g f 1 3 引起的促纖維化效 應(yīng)嘶3 。在血管內(nèi)皮細(xì)胞，平滑肌細(xì)胞以及成纖維細(xì)胞、系膜細(xì)胞、上皮細(xì)胞等間 1 9 充質(zhì)細(xì)胞中t g f p 均可上調(diào)c t g f 的表達(dá)。c t g f 有促進(jìn)成纖維細(xì)胞有絲分裂和 趨化作用。有報道說c t g f 可增加i 型膠原蛋白，纖維結(jié)合蛋白a 5 整合素在成纖維 細(xì)胞中的m r n a 表達(dá)，促進(jìn)基質(zhì)的合成r 刀。c t g f 與a 5 3 1 整合素結(jié)合之后，即 通過增強(qiáng)p s c 的增值和增加基質(zhì)蛋白的合成，又通過致炎細(xì)胞因子的釋放與慢性 炎癥相關(guān)來表明在纖維化過程中的作用。在上皮細(xì)胞中，c t g f 介導(dǎo)上皮細(xì)胞的 增值，遷移，分化，生存及導(dǎo)致血管發(fā)生 8 3 。 ( 三) 結(jié)締組織生長因子與胰腺癌 作為c c n 家族的一員，c t g f 是介導(dǎo)t g f b 1 促纖維作用的一個重要的下游 因子。在纖維化效應(yīng)中起重要作用，c t g f 的研究熱點以往主要集中在傷口愈合 和各種纖維化疾病，如今發(fā)現(xiàn)c t g f 在很多類型的腫瘤中表達(dá)過量，c t g f 在腫 瘤發(fā)病機(jī)制作用的研究主要集中在胰腺癌和乳腺癌。有文獻(xiàn)報道，c t g f 很可能 參與了乳腺癌的血管形成全過程，并對其轉(zhuǎn)移機(jī)制產(chǎn)生重要影響哼1 。在胰腺癌組 織c t g f 高表達(dá)，但其與腫瘤的發(fā)生機(jī)制不清。 胰腺導(dǎo)管腺癌的獨特的特性就是它廣泛的結(jié)締組織纖維化反應(yīng)，這在胰腺的 其它腫瘤中幾乎不出現(xiàn)的