YY-T 0127.11-2001 牙科學(xué) 用于口腔的醫(yī)療器械 生物相容性臨床前評價 第2單元口腔材料生物 試驗(yàn)方法 蓋髓試驗(yàn).pdf

Y Y / T 0 1 2 7 . 1 1 一 2 0 0 1 前 扭牙 b 本標(biāo)準(zhǔn)非等效采用國際標(biāo)準(zhǔn)化組織I S O 7 4 0 5 : 1 9 9 7 牙科學(xué)用于牙科的醫(yī)療器械生物相容性臨床前評價牙科材料試驗(yàn)方法） 。 本標(biāo)準(zhǔn)主要依據(jù)I S O 7 4 0 5 : 1 9 9 7 牙科學(xué) 用于牙科的醫(yī)療器械生物相容性臨床前評價牙科材料試驗(yàn)方法 ， 對試驗(yàn)步驟進(jìn)行了細(xì)化。 本標(biāo)準(zhǔn)是 Y Y / T 0 1 2 7 標(biāo)準(zhǔn)的一個部分。為了和 I S O 7 4 0 5 : 1 9 9 7 標(biāo)準(zhǔn)名稱統(tǒng)一， 本標(biāo)準(zhǔn)名稱中的引導(dǎo)要素為“ 牙科學(xué)用于口腔的醫(yī)療器械生物相容性臨床前評價” 。另外， 已發(fā)布的Y Y / T 0 1 2 7 標(biāo)準(zhǔn)名稱的引導(dǎo)要素在修標(biāo)時也將作相應(yīng)的修改。 本標(biāo)準(zhǔn)由國家藥品監(jiān)督管理局提出。 本標(biāo)準(zhǔn)由全國口腔材料和器械設(shè)備標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸 口。 本標(biāo)準(zhǔn)由國家藥品監(jiān)督管理局北大醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心負(fù)責(zé)起草。 本標(biāo)準(zhǔn)起草人： 林紅、 劉文一、 岳林。v v / T 0 1 2 7 . 1 1 -2 0 0 1 I S O前言 I S O（ 國際標(biāo)準(zhǔn)化組織） 是由各國標(biāo)準(zhǔn)化團(tuán)體（ I S O成員團(tuán)體） 組成的世界性的聯(lián)合會。國際標(biāo)準(zhǔn)的制定工作通常由I S O的技術(shù)委員會完成。各國團(tuán)體若對某技術(shù)委員會確立的標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng) 目感興趣， 均有權(quán)參加該委員會的工作。與 I S O保持聯(lián)系的官方或非官方的國際組織也可參加有關(guān)工作。I S O與國際電工委員會（ I E C ） 在電工技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)化方面保持密切的合作關(guān)系。 由技術(shù)委員會通過的國際標(biāo)準(zhǔn)草案提交各成員團(tuán)體表決。 國際標(biāo)準(zhǔn)草案需取得至少 7 5 %以上 參加表決的成員團(tuán)體的同意才能作為國際標(biāo)準(zhǔn)發(fā)表。 國際標(biāo)準(zhǔn)I S O 7 4 0 5 由I S O/ T C 1 0 6 牙科技術(shù)委員會與世界牙科聯(lián)盟( F D I ) 共同起草。 該第一版國際標(biāo)準(zhǔn)取代 r I S O / T R 7 4 0 5 : 1 9 8 4 ， 在技術(shù)上進(jìn)行了修改， 并轉(zhuǎn)化成本國際標(biāo)準(zhǔn)。 本標(biāo)準(zhǔn)的附錄 A 、 附錄 B及附錄 C僅作為參考信息。 本國際標(biāo)準(zhǔn)是有關(guān)用于牙科的醫(yī)療器械牙科材料的臨床前試驗(yàn)。它是從I S O / T R 7 4 0 5 : 1 9 8 4 牙科材料生物學(xué)評價及其附件發(fā)展而來， 并取代I S O / T R 7 4 0 5 。 使用時應(yīng)與I S O 1 0 9 9 3 醫(yī)療器械生物學(xué)評價系列標(biāo)準(zhǔn)結(jié)合使用。 此標(biāo)準(zhǔn)在許多重要方面與 I S O / T R 7 4 0 5 不同。 首先它包含有一些僅適用于牙科材料的具體的試驗(yàn)方法。以前在 I S O / T R 7 4 0 5 中的許多試驗(yàn)方法現(xiàn)在已包含在 I S O 1 0 9 9 3 系列標(biāo)準(zhǔn)中， 故在此標(biāo)準(zhǔn)中不包含這些方法的細(xì)則。 其次， 僅僅是委員會成員國認(rèn)為已有足夠發(fā)表的資料的試驗(yàn)方法才包含在本標(biāo)準(zhǔn)中。第三， 推薦試驗(yàn)方法時， 首先要考慮盡可能地減少使用動物的原則。 中華 人 民共 和 國 醫(yī) 藥 行 業(yè) 標(biāo) 準(zhǔn) 牙科學(xué)用于口腔的醫(yī)療器械 生物相容性臨床前評價 第 2 單元： 口腔材料生物 試驗(yàn)方法蓋髓試驗(yàn)Y Y / T 0 1 2 7 . 1 1 - 2 0 0 1 n e q I S O 7 4 0 5 ： 1 9 9 7 D e n t i s t r y -P r e c l i n i c a l e v a l u a t i o n o f b i o c o mp a t i b i l i t y o f me d i c a l d e v i c e s u s e d i n d e n t i s t r y - P a r t 2 : B i o l o g i c a l e v a l u a t io n t e s t m e t h o d o f d e n t a l m a t e r i a l s -P u l p c a p p i n g t e s t1 范 圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了口腔材料蓋髓試驗(yàn)方法。 本標(biāo)準(zhǔn)用于評價直接蓋髓材料與牙髓的生物相容性。材料在臨床應(yīng)用中所需的操作過程亦包含在此評價 中。 注； 此試驗(yàn)進(jìn)行稍許改動就可用于切髓試驗(yàn)。2 引用標(biāo)準(zhǔn) 下列標(biāo)準(zhǔn)所包含的條文， 通過在本標(biāo)準(zhǔn)中引用而構(gòu)成為本標(biāo)準(zhǔn)的條文。本標(biāo)準(zhǔn)出版時， 所示版本均為有效。所有標(biāo)準(zhǔn)都會被修定 ， 使用本標(biāo)準(zhǔn)的各方應(yīng)探討使用下列標(biāo)準(zhǔn)最新版本的可能性。 G B / T 1 6 8 8 6 . 2 -2 0 0 0 醫(yī)療器械生物學(xué)評價第2 部分： 動物保護(hù)要求3 試樣 按廠家要求調(diào)制試驗(yàn)材料。若廠家要求用其他沖洗劑或試劑進(jìn)行止血或用特殊的牙髓傷口 處理方法， 則按廠家要求操作。4 對照材料 滅菌生理鹽水 0 . 9 o o ( m / m) 與化學(xué)純氫氧化鈣。使用前將二者調(diào)和成糊狀。5 試驗(yàn) 動物5 門動物保護(hù)應(yīng)按照 G B / T 1 6 8 8 6 . 2 -2 0 0 0 或?qū)嶒?yàn)動物的國家法規(guī)要求。5 . 2 可從猴、 狗或小型豬中任選一種。 每一試驗(yàn)周期至少使用一只動物。動物應(yīng)有完整的恒牙（ 除 M3外的所有恒牙均已萌出） ， 且牙根尖完全形成。國家藥品監(jiān)督管理局2 0 0 1 一 1 1 一 0 9 批準(zhǔn)2 0 0 2 一 0 3 一 0 1 實(shí)施 V Y / T 0 1 2 7 . 1 1 -2 0 0 16 試驗(yàn)周期 7d 士2d 及 7 0 d 士5 d o了 試驗(yàn)步驟7 門動物準(zhǔn)備 選擇足夠的動物以保證每一試驗(yàn)周期至少有 7 顆牙齒含試驗(yàn)材料。了 2 牙齒預(yù)備7 . 2 . 1 用合適的麻醉劑對動物實(shí)行全身麻醉。 去除牙面所有的牙石及菌斑。 用 1 0 0 碘酒， 7 5 乙醇消毒口周。 用3 0 o ( V / V ） 過氧化氫清潔牙冠表面、 牙眼及口內(nèi)軟組織。放置橡皮障以隔離所用牙齒。 用含碘汀或洗必泰的消毒劑消毒牙面及術(shù)區(qū)。 在水噴霧冷卻下， 用鋒利鉆針在牙齒頰面或唇面頸部距釉牙骨質(zhì)界 1 m m處的釉質(zhì)部位制備 V類洞。洞周均應(yīng)有牙釉質(zhì) ， 并擴(kuò)展至牙齒近遠(yuǎn)中面， 深達(dá)內(nèi)三分之一牙本質(zhì)或至洞底透出粉紅色。用無菌生理鹽水 0 . 9 0 o ( in / m ) 沖洗窩洞， 在窩洞中央， 在無菌生理盆水 D . 9 Y o O n 1 m ) 沖洗下 ， 仔細(xì)制備一直徑 。 . 5 m m-1 . 0 m m露髓孔 ， 且鉆針不能進(jìn)人牙髓組織內(nèi)（ 如可用直徑 。 . 5 m m 的1 / 2 號小球鉆在窩洞中央輕輕穿通髓腔） 。 用無菌生理鹽水徹底沖洗窩洞直至出血停止。 用無菌棉球擦干洞壁。 若廠家要求用其他沖洗劑或試劑進(jìn)行止血或用特殊的牙髓傷口 處理方法， 則按廠家要求操作。 注： 若動物有明 顯t o 炎， 應(yīng)在窩洞制備前 1 周去除結(jié)石及菌斑， 必要時可反復(fù)上述操作直至眼炎得到控制。7 . 2 . 2 按隨機(jī)原則 ， 每一試驗(yàn)周期用試驗(yàn)材料蓋髓至少 7 個窩洞， 用對照材料蓋髓 5 個窩洞。 在消毒調(diào)和板上調(diào)和受試材料及對照材料。 將材料放于露髓孔上， 不施壓。 用氧化鋅丁香酚或聚竣酸鋅水門汀墊底。最后可用粘接技術(shù)充填復(fù)合樹脂或玻璃離子水門汀。8 術(shù)后觀察8 . 1 在試驗(yàn)期中， 定期觀察每只動物的反應(yīng)， 如飲食改變或口腔組織的炎癥或化膿。8 . 2 切片制備8 . 2 . 1 7 d 士2 d及 7 o d 士5 d 后， 用過量麻醉劑處死足夠數(shù)量的動物以獲得至少 7 顆含試驗(yàn)材料的牙齒。檢查充填體、 牙齒及其支持組織， 記錄任何異常細(xì)節(jié)。切下每一包含牙齒及其周圍軟硬支持組織的組織塊， 用福爾馬林液或其他合適的固定劑固定。 若在處死動物切取組織塊之前， 用固定劑進(jìn)行組織血管內(nèi)灌注， 固定效果更好。8 - 2 . 2 固定后， X線片檢查每一組織塊， 檢查是否發(fā)生影像改變。8 . 2 , 3 用合適的脫鈣劑 如 1 0 o O C V / V ） 甲酸或 p H7 . 4 的 0 . 5 m o l / L乙二 胺四乙酸( E D T A ) 溶液 。石蠟包埋， 連續(xù)切片。 通過牙齒唇（ 頰） 舌面沿牙長軸過穿髓孔自冠部至根尖部進(jìn)行連續(xù)切片， 切片厚5 .m-1 0 IM， 間隔取片， H - E染色。 必要時， 用合適的細(xì)菌染色方法（ 如B r o w n &, . B r e n n 法） 或其他檢查微漏的方法另取切片染色。9 牙髓評價 檢查切片， 描述組織學(xué)特點(diǎn)。 盲法檢查切片。 對每一連續(xù)切片， 詳細(xì)描述并記錄牙本質(zhì)、 牙髓及根尖周組織的全部組織學(xué)特點(diǎn)（ 炎癥浸潤的程度和范圍、 炎細(xì)胞類型、 成牙本質(zhì)細(xì)胞的改變、 充血、 牙髓變性、牙髓壞死的性質(zhì)及范圍、 牙本質(zhì)橋形成等） ， 包括任何可能由窩洞制備所引起的組織學(xué)變化。 按下列分級方法并分別對牙髓表層組織（ 成牙木質(zhì)細(xì)胞層、 無細(xì)胞層及多細(xì)胞層） 及深部牙髓組織的炎癥浸潤程度進(jìn)行分級。 Y Y / T 0 1 2 7 . 1 1 -2 0 0 1 分級觀察 0無炎癥 1輕度炎癥 2中度炎癥 3重度炎癥 4膿腫形成或擴(kuò)散至根尖周組織區(qū) 在每一試驗(yàn)周期計(jì)算這兩個部位的炎癥反應(yīng)指數(shù)， 即將各切片所得分級的分?jǐn)?shù)相加之后除以所觀察的總切片數(shù)。 應(yīng)分別報(bào)告用試驗(yàn)材料蓋髓的牙齒和對照組蓋髓的牙齒的反應(yīng)指數(shù)。 另外， 必要時記錄每一試驗(yàn)周期含細(xì)菌的窩洞數(shù)目。 另外， 對牙本質(zhì)橋進(jìn)行分級 ， 分為無、 部分及全部。1 0 結(jié)果評價 試驗(yàn)中的所有信息在結(jié)果評價時均應(yīng)考慮， 尤其是試驗(yàn)與對照組間結(jié)果的