粗糙脈孢菌順序四分子分析.ppt

粗糙脈孢菌順序四分子分析,實驗目的,了解粗糙脈孢菌的生活周期及特性 學習順序四分子的遺傳學分析方法 計算基因與著絲點之間的距離,粗糙脈孢菌,粗糙脈孢霉(Neurospora.crassa)屬于球殼目（Sphaeriales）的一種真菌，菌絲多核，附有分生孢子。野生型可分離出營養(yǎng)缺陷型突變株，有性生殖形成梨形的子囊果，產生包含8個子囊孢子的子囊。子囊孢子為黑色，直線排列。主要在土壤中和禾本料植物上，尤其在玉米芯和棉籽殼上，是食用菌菌種最大的危害之一。 1927年BODodge 研究其生活史和孢子的形成 1932年CCLindegren 把它用做遺傳材料，用于分離交配型因子的研究 1941年GWBeadle和ELTatum分離出突變株，開展以基因與酶假說為基礎的研究。 后來分離出很多突變株，制作出與n=7的染色體數(shù)相對應的連鎖圖，被應用于突變機制、重組機制、基因的微細結構、互補性等的研究，為遺傳學發(fā)展做了重要貢獻。,粗糙脈孢菌作為遺傳材料的優(yōu)勢 后代多，樣本大，統(tǒng)計分析誤差小 生活周期短 易培養(yǎng)，易篩選突變型 單倍體，不存在顯隱問題 孢子按順序排列在子囊中,粗糙脈孢菌的生活周期,第一次分裂分離子囊,+ + + + - - - -,非重組型子囊：目的基因與著絲粒之間未發(fā)生重組,+,+,+,+,+,+,+,+,_,_,_,_,_,_,_,_,MI MII Mt,順序四分子分析用于著絲粒作圖,+ + - - + + - - - - + + - - + + - + + + + - - + + - - - - + +,重組型子囊：目的基因與著絲粒之間發(fā)生重組,第二次分裂分離子囊,+,_,+,+,+,+,+,+,+,_,_,_,_,_,_,_,_,+,+ + - - - - + +,例子,基因與著絲點間距離的計算,其它分離子囊,基因轉換：一個基因在聯(lián)會過程中受到等位基因的影響而發(fā)生變化，基因轉換總是伴隨著染色體之間的交換。,實驗材料,粗糙脈孢菌（Neurospora crassa） 野生型菌株，Lys+，接合型為A,分生孢子呈粉紅色 缺陷型菌株， Lys-，接合型為a,分生孢子呈白色,實驗步驟,1、雜交接種與培養(yǎng)： 野生型菌株（Lys+，A） 缺陷型（Lys-，a） 2、壓片觀察子囊：（注意觀察時期） 1）將附有子囊果的濾紙放入裝有來蘇爾溶液的培養(yǎng)皿中 2）取一張載玻片，滴1-2滴來蘇爾，用接種針將子囊果挑出，放在載玻片上 3）蓋上另一張載玻片，用手指壓片，將子囊果壓破 4）顯微鏡觀察，統(tǒng)計各種類型子囊的數(shù)量，每人統(tǒng)計200個左右的子囊,一個子囊果中散出30-40個子囊,實驗報告,品系,性狀,思考,假