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文檔簡介

實驗三 腦脊液蛋白質(zhì)定性檢查,一、潘迪試驗 【目的】 掌握腦脊液蛋白質(zhì)定性潘迪試驗的方法。 【原理】 腦脊液中球蛋白與苯酚結(jié)合，形成不溶性蛋白鹽而下沉，產(chǎn)生白色渾濁或沉淀，渾濁的程度與球蛋白含量相關(guān)。,【操作】 1加試劑 2加標本 3觀察結(jié)果 4判斷結(jié)果 5 報告方式,【注意事項】 1實驗所用的試管應(yīng)選擇小口徑的試管為宜，內(nèi)徑一般為12mm左右，加入試劑后立即觀察。所用的試管和滴管必須潔凈，否則易出現(xiàn)假陽性。 2苯酚不純可引起假陽性，當室溫在l0以下時，應(yīng)將酚試劑保存在37溫箱中，否則飽和度降低，可致假陰性結(jié)果。 3因穿刺出血，標本中如紅細胞過多，應(yīng)離心沉淀取上清液檢測；標本有血清蛋白混入可引起假陽性。 4可在正常腦脊液或配制與正常腦脊液基本成分相似的基礎(chǔ)液中加不同濃度的球蛋白作考核實驗的對照。 5潘迪試驗過于敏感，致使部分正常人亦出現(xiàn)極弱陽性結(jié)果，應(yīng)注意正確評價實驗結(jié)果。,二、硫酸銨試驗 【目的】 掌握硫酸銨試驗羅-瓊(Ross-Jonce) 試驗與諾-愛（Nonne-Apelt）氏試驗的方法。 【原理】 飽和硫酸銨溶液可以沉淀球蛋白，正常腦脊液內(nèi)球蛋白含量很低，加入飽和硫酸銨后無白色反應(yīng)環(huán)出現(xiàn)，為陰性；若球蛋白增加即可在兩液交界處出現(xiàn)白色反應(yīng)環(huán)，為陽性，此為羅瓊氏試驗。除去球蛋白以后，用乙酸煮沸法測定白蛋白，為諾-愛氏試驗。,【操作】 1加入飽和硫酸銨溶液 2將試管內(nèi)兩種液體振搖混合，3分鐘內(nèi)再仔細觀察有無渾濁或沉淀，即諾-愛氏試驗相。 3將上述混合液過濾，于濾液內(nèi)滴入5乙酸溶液少許，使其成為酸性，再加熱煮沸，3分鐘內(nèi)觀察有無沉淀出現(xiàn)為陰性，此為諾愛氏試驗相 。,4結(jié)果判斷 （1）按“l(fā)”操作：3分鐘內(nèi)在兩液交界面處出現(xiàn)白色渾濁環(huán)形成，為羅-瓊氏試驗陽性，否則為陰性。 （2）按“2” 操作：3分鐘內(nèi)如見有白色渾濁或沉淀為諾-愛氏試驗相陽性，表示腦脊液內(nèi)球蛋白含量增高。如仍清晰或僅顯微白色，為陰性。 （3）按“3”操作：3分鐘內(nèi)如出現(xiàn)白色沉淀，為諾-愛氏試驗相陽性，提示腦脊液內(nèi)白蛋白含量增高，如加酸加熱煮沸后仍然清晰，或顯輕度乳白色，或微白色，都屬

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