動物細(xì)胞融合與單克隆抗體.ppt

動物細(xì)胞融合與單克隆抗體,一、動物細(xì)胞融合,細(xì)胞融合是正常的生命活動,兩個細(xì)胞正在融合,受精作用,動 物 細(xì) 胞 融 合,細(xì)胞A,細(xì)胞B,雜種細(xì)胞,滅活的病毒,物理法 化學(xué)法,仙臺病毒 皰疹病毒 新城雞瘟病毒,用滅活的病毒誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合過程,細(xì) 胞 核,過程：,病毒顆粒,制備單克隆抗體,用途：,二、單克隆抗體,什么是抗體？,抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的免疫球蛋白。,B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體。,B淋巴細(xì)胞與抗體,B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后，可以產(chǎn)生抗體。 動物體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生百萬種以上的抗體，每種抗體對特定的抗原具有特異性免疫作用。 每一個淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體。,1 .單克隆抗體,由單個B淋巴細(xì)胞經(jīng)過無性繁殖（克?。?，形成基因型相同的細(xì)胞群，這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。 特點(diǎn)： 特異性強(qiáng)、靈敏度高,如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？,利用淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能 利用腫瘤細(xì)胞無限增殖的特性 利用細(xì)胞融合的技術(shù)將兩種細(xì)胞融合獲得具有淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞特性的雜交瘤細(xì)胞 利用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,2.單克隆抗體制備過程,骨髓瘤細(xì)胞,細(xì)胞融合、篩選,足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群,單克隆抗體,為何要經(jīng)過兩次篩選?,思考：,1、本過程利用了哪些原理？,免疫原理，細(xì)胞融合原理 和動物細(xì)胞培養(yǎng)原理,2、為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B細(xì)胞融合？,這樣融合成的雜交瘤細(xì)胞，繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，不僅具有B細(xì)胞分泌抗體的能力，而且還有無限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體,3.單克隆抗體的應(yīng)用,與常規(guī)抗體相比，單克隆抗體產(chǎn)量高，特異性強(qiáng)，靈敏度高，優(yōu)越性十分明顯。,應(yīng)用主要有：,a、臨床診斷,b、作為載體，運(yùn)載抗癌藥物，形成“生物導(dǎo)彈”治療腫瘤,資料：目前世界各國已經(jīng)研制出數(shù)以百計的單克隆抗體。許多缺乏良好診斷手段的傳染病、免疫性疾病、血液病、內(nèi)分泌疾病和遺傳病，用單克隆抗體作為診斷手段，是一個必然趨勢。另外，用單克隆抗體做體內(nèi)診斷，借以鑒別和定位體內(nèi)“病灶”也引起人們的注意，目前，主要用于腫瘤追蹤及心肌梗塞的診斷。,4.植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合的比較,四.動物的胚胎移植,解決某些妊娠時間長、每胎產(chǎn)子數(shù)量少的優(yōu)良種畜的繁殖速度問題。,胚胎移植技術(shù),試管動物（嬰兒）培養(yǎng)過程,受精卵,五、動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物,1、動物細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度不同,受精卵,胚胎干細(xì)胞,多能干細(xì)胞,單能干細(xì)胞,體細(xì)胞,體細(xì)胞核具有全能性,核移植,胚胎細(xì)胞核移植,體細(xì)胞核移植（難度高）,2、動物體細(xì)胞核移植是將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核,移如入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中.使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎,這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。,3.培育過程,母體子宮,4、原理,動物體細(xì)胞核具有全能性,細(xì)胞質(zhì),細(xì)胞核,細(xì)胞核移植,多莉羊的培育過程,克隆羊的成功證明了什么？,1、動物體細(xì)胞核具有全能性； 2、細(xì)胞質(zhì)具有調(diào)控細(xì)胞核發(fā)育的作用。,動物體細(xì)胞核移植是一種無性繁殖技術(shù)， 用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。,意義： 1、有利于遺傳疾病的治療，優(yōu)良品種的培育 2、對物種的優(yōu)化、瀕危動物的保護(hù)和 轉(zhuǎn)基因動物的擴(kuò)群有重要意義 3、降低畜牧業(yè)的成本，縮短育種年限，提高生產(chǎn)效率,體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題：,許多克隆動物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷，如體型過大，異常肥胖，發(fā)育困難，臟器缺陷，免疫失調(diào)等。,動物細(xì)胞特點(diǎn)？ 分化潛能變窄：隨著細(xì)胞分化程度的提高而逐漸受到限制，分化潛能變窄，這是指整體細(xì)胞而言。 細(xì)胞核仍具有全能性：細(xì)胞核，它含有保持物種遺傳性所需的全套基因，而且并沒有因細(xì)胞分化而丟失基因，因此高度分化細(xì)胞的細(xì)胞核仍具有全能性,根據(jù)動物細(xì)胞核仍具有全能性的特點(diǎn),怎樣將動物細(xì)胞的全能性表達(dá)?,利用動物體細(xì)胞核移植技術(shù),動物核移植：,將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。,用核移植的方法得到的動物。,克隆動物：,多莉羊的培育過程,無性生殖,2.體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景,克隆動物的研究意義,1.克隆動物作為生物反應(yīng)器，生產(chǎn)醫(yī)用蛋白 2.改良動物品種 3.治療人類疾病，作為供體 4.保護(hù)瀕危動物,體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題,1.許多克隆動物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷，如體型過大，異常肥胖，發(fā)育困難，免疫失調(diào)等。 2.成功率非常低及克隆