LY-T1283-1998木材防腐劑對(duì)腐朽菌毒性實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)方法.pdf

L Y / r 1 2 8 3 -1 9 9 8前言 本標(biāo)準(zhǔn)參考了美國(guó)木材防腐者協(xié)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)“ 實(shí)驗(yàn)室土壤一 木塊培養(yǎng)測(cè)定木材防腐劑的標(biāo)準(zhǔn)方法”( A m e r i c a n Wo o d P r e s e r v e r s A s s o c i a t i o n S t a n d a r d E 1 0 - 9 1 S t a n d a r d m e t h o d o f t e s t i n g w o o d p r e s e t -v a t i v e s b y l a b o r a t o r y s o i l - b l o c k c u lt u r e s ) ， 采用了該標(biāo)準(zhǔn)中的試菌、 培養(yǎng)和試驗(yàn)時(shí)間、 重量損失的 計(jì)算、 試驗(yàn)結(jié)果的評(píng)價(jià)等。本標(biāo)準(zhǔn)的主要特點(diǎn)是可操作性強(qiáng)、 準(zhǔn)確、 快速、 簡(jiǎn)便易行。 本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A是標(biāo)準(zhǔn)的附錄。 本標(biāo)準(zhǔn)由中國(guó)木材標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。 本標(biāo)準(zhǔn)起草單位: 南京林業(yè)大學(xué)化工學(xué)院。 本標(biāo)準(zhǔn)起草人: 金重為、 趙桂華、 何文龍。免費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t ) 標(biāo)準(zhǔn)最全面免費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t ) 無(wú)需注冊(cè) 即可下載中華 人 民 共 和 國(guó)林 業(yè)行 業(yè) 標(biāo) 準(zhǔn)木材防腐劑對(duì)腐朽菌毒性實(shí)驗(yàn)室 試 驗(yàn) 方 法L Y / T 1 2 8 3 -1 9 9 8Me t h o d o f l a b o r a t o r y t e s t f o r t o x i c i t y o f w o o d p r e s e r v a t i v e s t o d e c a y f u n g i1 范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了在最適宜的實(shí)驗(yàn)室條件下， 通過(guò)測(cè)定經(jīng)防腐劑處理的木材受腐朽菌侵染后造成木材重量損失. 確定該防腐劑毒效的試驗(yàn)方法。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于測(cè)定木材防腐劑對(duì)腐朽菌毒性極限。2 定義 本標(biāo)準(zhǔn)采用下列定義。2 . 1木材重量損失 百分率 w e i g h t l o s s p e r c e n t a g e o f w o o d 在室內(nèi)毒性試驗(yàn)中， 經(jīng)防腐劑處理的木材受腐朽菌侵染后的重量損失百分率。2 . 2 木材中防腐劑的保持量 p r e s e r v a t i v e r e t e n t i o n i n w o o d 每立方米處理木材所吸收的防腐劑干鹽( 水溶性防腐劑) 或有效成分( 水不溶防腐劑) 的千克數(shù)。2 . 3 木材防腐劑毒性極限 t o x i c l i m i t o f w o o d p r e s e r v a t i v e s 木材防腐劑有效抑制腐朽菌腐朽木材的最低保持量。3 試驗(yàn)設(shè)備3 . 1 培菌室或電 熱恒溫培養(yǎng)箱: 溫度3 0 士2 C， 相對(duì)濕度7 5 a a -8 5 a/ o o3 . 2 鼓風(fēng)干燥烘箱: 溫度1 0 5 士2 C o3 . 3 蒸汽滅菌器: 壓力。 . 2 5 MP a 4A度1 3 8 0C ,3 . 4 無(wú)菌接種室或超凈工作臺(tái)。3 . 5 分析天平: 感量。 . 0 1 g .3 . 6 真空泵: 真空度。 . 1 MP a ,3 . 7 培養(yǎng)皿: 玻璃， 直徑9 c m,3 . 8 波美計(jì): 波美度1 . 0 0 1 . 1 0 ,3 . 9 培養(yǎng)瓶: 5 0 0 mL廣口玻璃錐形瓶。3 . 1 0 防腐劑浸注試樣裝置， 見(jiàn)圖1 ,國(guó)家林業(yè)局1 9 9 8 一 0 9 一 2 2 批準(zhǔn)1 9 9 8 一 1 2 一 0 1 實(shí)施免費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t ) 標(biāo)準(zhǔn)最全面免費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t ) 無(wú)需注冊(cè) 即可下載L Y / r 1 2 8 3 一 1 9 9 8I 一 聚乙 烯管沼 一 錐形瓶悶一防腐劑溶液過(guò) 一旋塞, 5 一橡皮塞; s -真空接管; 7 一真空干操器; 8 一玻璃燒杯; 9 一壓試樣玻璃重物; 1 。 一試樣 圖 1 真空浸注裝置4 試樣與飼木4 門(mén) 試材: 供試驗(yàn)用樹(shù)種， 針葉材選用馬尾松( P i n u s m a s s o n i a n a L a m b . ) ， 闊葉材選用毛白楊( P o p u l u st o m e n t o s a C a r r . ) 或擬赤楊 A l n i p h y l l u m f o r t u n e i ( H e m s h . ) P e r k ) 。 每種樹(shù)各2 - 3 株， 胸徑2 0 0 m m 一3 0 0 m m， 每株在胸高部位向上截取長(zhǎng)l m的試材一段。4 . 2 試樣: 試樣均等取自2 -3 株試材段橫截面邊材均勻分布處。 各面均應(yīng)平整， 不允許有可見(jiàn)的缺陷，未經(jīng)任何化學(xué)藥劑處理。尺寸為 2 0 m m X 2 0 m m X 1 0 m m 順紋方向) ， 逐一稱(chēng)重， 并將重量相近的相同樹(shù)種的試樣分在同一組， 編號(hào)， 備用。針葉材試樣用于褐腐菌試驗(yàn)， 闊葉材試樣用于白腐菌試驗(yàn)。4 . 3 飼木: 飼木應(yīng)與試樣取自同一樹(shù)種的邊材， 尺寸為2 2 m mX 2 2 m mX3 m m( 順紋方向) 。5 試菌5 . 1 褐腐菌5 . 1 . 1 密粘褶菌 G l o e o p h y l l u m t r a b e u m ( P e t s . e x F r . ) M u r r . 。5 . 1 . 2 綿腐臥孔菌C P o s t i a p l a c e n t a ( F r i e s ) M. L a r s e n e t L o m b a r d ) o5 . 2 白腐菌5 . 2 . 1 彩絨革蓋菌 T r a m e t e : 二 。 r s i c o l o r ( L . e x F r . ) P i l a t ) ,5 . 2 . 2 乳白 耙菌U r p e z l a c t e u s ) ,5 . 3 除以上標(biāo)準(zhǔn)試菌外， 增加對(duì)試驗(yàn)防腐劑有抗藥性和處理木材使用場(chǎng)合特別普遍的菌種是可取的。例如用煤雜酚油處理鐵道枕木時(shí)， 應(yīng)增加試菌潔麗香菇 N e o l e n t i n u s l e p i d e u s ( F r . ; F r . ) 。 在測(cè)定含銅的木材防 腐劑的抗腐力時(shí)， 應(yīng)增加試菌粉抱革菌 C o n i o p h o r a p u t e a n a ( F r . ) K a r s t ) ,6 試驗(yàn)步驟6 . 1 培養(yǎng)基制備6 - 1 . 1 麥芽糖瓊脂培養(yǎng)基的配制: 在5 0 0 m L 細(xì)口 錐形瓶?jī)?nèi)加入麥芽糖液( 波美度1 . 0 3 ) 1 0 0 m L 、 瓊脂1 . 5 寫(xiě)-2 線( 重量) ， 在水浴鍋中加熱， 使瓊脂溶化。 在培養(yǎng)基中加0 . 0 0 5 %( 重量) 的酵母浸提物， 加速許多腐朽菌的生長(zhǎng)。瓶口 塞棉塞并包防水紙， 置于蒸汽滅菌器中， 在壓力。 . 1 M P a , 溫度1 2 1 滅菌3 0 m i n 5 7 4免費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t ) 標(biāo)準(zhǔn)最全面免費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t ) 無(wú)需注冊(cè) 即可下載L Y / T 1 2 8 3 一 1 9 9 8后， 在無(wú)菌接種室或超凈工作臺(tái)上冷至不燙手時(shí)， 把培養(yǎng)基分別倒入 5 個(gè)已滅菌( 壓力。 . 1 MP a , 溫度1 2 1 C ) 的培養(yǎng)皿( 直徑9 c m ) 中， 等冷卻凝固后備用。6 . 1 . 2 如選用馬鈴薯、 葡萄糖培養(yǎng)基時(shí)， 取去皮洗凈馬鈴薯2 0 g ， 切成小塊， 加水1 0 0 m L , 煮沸3 0 m i n ,濾去馬鈴薯塊， 將濾液用水補(bǔ)足到1 0 0 m L ， 倒人5 0 0 m L 細(xì)口 錐形瓶中， 加葡萄糖2 g , 瓊脂1 . 5 g ， 加熱溶化， 瓶口 塞棉塞并包防水紙， 以下操作步驟同6 . 1 . 1 ,6 . 1 . 3 河砂鋸屑培養(yǎng)基的配制: 將紅塘、 玉米粉、 馬尾松邊材鋸屑( 0 . 4 - 0 . 7 5 m m) 、 洗凈干河砂( 0 . 4 -0 . 7 5 m m ) 按1 = 8 . 5 : 1 5 : 1 5 0 ( 重量) 的比 例拌勻， 倒入5 0 0 m L廣口 錐形瓶中， 每瓶為1 6 0 g 該種混合物， 待表面平整后， 在其表面放入 2 片飼木( 互相分開(kāi)) ， 向瓶?jī)?nèi)徐徐加人 9 0 m L麥芽糖液( 波美度1 . 0 3 ) , 塞棉塞并包防水紙， 在燕汽滅菌器中( 條件同6 . 1 . 1 ) 滅菌1 h 后， 取出， 置于無(wú)菌接種室或超凈工作臺(tái)上冷卻后備用。6 . 2 試菌的接種與培養(yǎng)6 . 2 . 1 麥芽糖( 或馬鈴薯、 葡萄糖) 瓊脂培養(yǎng)基的接種和培養(yǎng): 在無(wú)菌條件下， 將按 6 . 1 . 1 配制好的培養(yǎng)基接種試菌， 然后置于培菌室或培養(yǎng)箱中， 在溫度2 8 士2 *C ， 空氣相對(duì)濕度7 5 %-8 5 %的條件下培養(yǎng)7 - 1 0 d ， 備用。6 . 2 . 2 河砂鋸屑培養(yǎng)基的接種和培養(yǎng): 在無(wú)菌接種室或超凈工作臺(tái)上， 在按6 . 2 . 1 制得的菌絲前緣部分割取直徑5 m m的菌絲塊( 帶有瓊脂培養(yǎng)基) 放在與飼木相接的河砂鋸屑培養(yǎng)基( 6 . 1 . 3 ) 上( 每一片飼木接一塊菌絲塊) ， 塞棉塞并包防水紙， 放在培養(yǎng)室或培養(yǎng)箱中， 在與6 . 2 . 1 相同條件下培養(yǎng)， 直到飼木表面完全被菌絲筱蓋( 約2 周) ， 此時(shí)即可放人經(jīng)防腐劑處理過(guò)的試樣。6 . 3 試樣準(zhǔn)備及用防腐劑浸注6 . 3 . 1 試樣數(shù)量: 測(cè)定一種試驗(yàn)防腐劑對(duì)每一種試菌的抗腐力需4 2 塊試樣。 其中防腐劑需配制5 個(gè)梯度濃度， 每一 個(gè)濃 度至 少需6 塊 試樣; 6 塊試樣只 用 溶劑或含。 % 有 效成分的 配方處理， 以確 定溶劑或配方中的非有效成分對(duì)試菌的抗腐力; 6 塊試樣未經(jīng)任何處理以確定所用試菌的活性。6 . 3 . 2 防腐劑處理溶液的配制: 將防腐劑配成5 個(gè)梯度濃度， 使得處理后的試樣中防腐劑保持量有2組低到足以使試菌能腐朽試樣造成明顯的重量損失。 水溶性防腐劑用燕餾水配制. 油類(lèi)或有機(jī)溶劑防腐劑用甲苯或其他溶劑溶解和稀釋。 在測(cè)定新防腐劑的抗腐力時(shí)， 還應(yīng)包括3 組經(jīng)防腐劑處理的已 知抗腐力的試樣。6 . 3 . 3 試樣的防腐劑浸注( 見(jiàn)圖1 ) : 在行浸注前， 先將每一塊試樣放在4 0 的鼓風(fēng)干燥箱中烘至恒重，稱(chēng)重， 準(zhǔn)確到。 . 0 1 g ， 該重量( T , ) 為試樣處理前重量。 將用同一濃度防腐劑處理的試樣， 在真空干燥器中真空( 0 . 0 1 M P a ) 浸注處理3 0 m i n ， 等試樣飽和下沉后， 取出， 用滅菌吸水紙吸去每塊試樣表面的浮液， 立即稱(chēng)重， 準(zhǔn)確到。 . 0 1 g ， 得浸注后的試樣重量( T ) ,6 . 3 . 4 試樣中防腐劑保持量( R ) 的計(jì)算按式( 1 ) 進(jìn)行:R 二D f。 cX 1 0” 。 . “. ” 。 “ “ 。 “ .。 (1)M =T , 一T , . . .。 ” 。 . “ . . ” (2): R 試樣中防腐劑的保持量, k g / m M 試樣吸收防 腐劑溶液重量， 9 ; V 試樣體積, C M , C -防腐劑溶液濃度， %( 重量) 。防腐劑的耐久性試驗(yàn)， 水溶性防腐劑的流失試驗(yàn): 經(jīng)防腐劑處理后的試樣， 經(jīng)充分氣千后， 將同一組保持量的試樣放在中4車(chē)式6.6.6 0 0 m L燒杯中的不銹鋼或塑料網(wǎng)架上， 用玻璃壓塊壓住， 按每塊試樣加5 0 m L燕餾水的比例加入蒸餾水。 將燒杯放在真空干燥器中， 抽真空至真空度 9 0 k P a 以下， 保持 3 0 m i n ， 或直到?jīng)]有氣泡逸出液面為止。 消除真空， 在大氣壓下保持2 4 h ， 移去燒杯中的水， 用等量的新鮮蒸餾水取代。 以后， 每隔2 4 h 重復(fù)免費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t ) 標(biāo)準(zhǔn)最全面免費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t ) 無(wú)需注冊(cè) 即可下載L Y / T 1 2 8 3 一 1 9 9 8上述操作， 總共1 4 d 。 將每次取代水和洗滌燒杯壁的洗滌水加在一起， 如有需要， 可用于分析水溶防腐劑中各種成分的流失量。6 . 4 . 2 油類(lèi)或有機(jī)溶劑防腐劑的耐久性試驗(yàn): 試樣用油類(lèi)或有機(jī)溶劑防腐劑處理后三天， 開(kāi)始耐久性試驗(yàn)， 耐久性試驗(yàn)是先流失， 后揮發(fā)。6 . 4 . 2 . 1 流失試驗(yàn): 將同一組保持量的試樣， 放在6 0 0 m L燒杯內(nèi)的不銹鋼或塑料網(wǎng)架上， 用玻璃重物壓住， 加蒸餾水充滿(mǎn)燒杯， 在室溫條件下保持2 h ， 傾去水， 取出壓塊， 繼續(xù)進(jìn)行揮發(fā)試驗(yàn)。6 . 4 - 2 . 2 揮發(fā)試驗(yàn): 將裝有試樣的燒杯放入鼓風(fēng)烘箱中， 在5 0 士2 下?lián)]發(fā)1 7 h ,6 . 4 . 3 耐久性試驗(yàn)后試樣的恒重: 在耐久性試驗(yàn)后， 將試樣放到鼓風(fēng)烘箱中， 在4 0 下干燥至恒重。 稱(chēng)重( 每塊試樣準(zhǔn)確至0 . 0 1 g ) , 得試樣在腐朽前的重量( T 3 ) e6 . 5 試樣的滅菌及接種 將同一組保持量的試樣放到盛有用5 m L蒸餾水浸泡的濾紙的密閉容器內(nèi)， 或用多層紗布包好， 放在蒸汽滅菌器中， 在1 0 0 士2 下汽蒸3 0 m i n 。待冷卻后， 在無(wú)菌的條件下， 將試樣以寬面與培養(yǎng)瓶中被菌絲覆蓋的飼木相接觸， 放在飼木( 6 . 2 . 2 ) 上。每片飼木上放一塊試樣， 每一培養(yǎng)瓶中放2 塊試樣( 見(jiàn)圖 2 ) e 1 一防水紙; 2 -棉花塞; 3 -5 0 0 m L廣口 錐形瓶攤 一試樣瀝 一飼木; 6 一培養(yǎng)基 圖 2 培養(yǎng)瓶6 . 6 試樣的腐朽試驗(yàn) 將盛有試樣的培養(yǎng)瓶放置于培養(yǎng)室或培養(yǎng)箱中， 保持溫度2 8 士2 C， 相對(duì)濕度7 5 % 8 5 %, 腐朽1 2 周。除檢查時(shí)必須開(kāi)燈外， 其余時(shí)間不要開(kāi)燈。6 . 7 試驗(yàn)終了時(shí)試樣的稱(chēng)重 經(jīng)1 2 周腐朽后， 將試樣從培養(yǎng)瓶中取出， 仔細(xì)地刮除試樣表面的菌絲和雜質(zhì)。 將試樣放到鼓風(fēng)烘箱中， 在4 0 下干燥至恒重， 逐個(gè)稱(chēng)重， 準(zhǔn)確至。0 1 g 。腐朽后試樣恒重重量為T(mén)7 結(jié)果計(jì)算計(jì)算每塊試樣腐朽后的重量損失百分率( L ) ， 見(jiàn)式( 3 ) ; T，一 TI - = 一一 下 拼 r ， 一 x 1 0 0 1 ， . ”。 . . (3)式中: L 試樣重量損失率， %; T 3 試樣腐朽前恒重重量， 9 ， T d 試樣腐朽后恒重重量， g ,免費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t ) 標(biāo)準(zhǔn)最全面免費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)網(wǎng)( w w w . f r e e b z . n e t ) 無(wú)需注冊(cè) 即可下載L Y / T 1 2 8 3 一1 9 9 88 防腐劑棄性極限的評(píng)定8 . 1 防腐劑毒性極限值是按本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的試驗(yàn)方法所測(cè)定的能抑制試菌腐朽的最低保持量。 試樣失重率3 % 可忽略不計(jì)， 即腐朽后失重率3 ?/ o 的防腐劑保持量為防 腐劑對(duì)該試菌的毒性極限值. 防腐劑對(duì)一種試菌的毒性極限值愈小， 則說(shuō)明 該種防腐劑對(duì)這種試菌的抗腐力愈大。 反之， 若防腐劑對(duì)一種試菌的毒性極限值愈大， 那么該種防腐劑對(duì)這種試菌的擾腐力愈小。82 應(yīng)該將溶劑( 或用。 0 0 有效成分的配方) 處理試樣的失重率和未處理對(duì)照試樣的失重率相比較以確定溶劑( 或配方中非有效成分) 對(duì)腐朽的影響。 未處理的對(duì)照試樣在腐朽后的失重率低于4 5 %的任何試驗(yàn)都是無(wú)效的。9 毒性極限位的貢斷測(cè)定 如果由于所選擇的保持量間的間距太大而不能準(zhǔn)確地確定毒性極限值，