腫瘤免疫及其免疫檢測(cè)瑞金醫(yī)院檢驗(yàn)科顧志冬.ppt

腫瘤免疫 及其免疫檢測(cè) 瑞金醫(yī)院檢驗(yàn)科 顧志冬,什么是腫瘤？為什么會(huì)發(fā)生腫瘤？,腫瘤是正常組織異常增生所形成的贅生物。按其所引起的后果不同可分為惡性和良性兩種。,第一節(jié) 概述,實(shí)踐表明，內(nèi)在的遺傳因素、免疫狀態(tài)和外部的誘變因子，是構(gòu)成腫瘤發(fā)生發(fā)展的基礎(chǔ)和條件。 其中，機(jī)體的免疫狀態(tài)，尤其是細(xì)胞免疫功能的強(qiáng)弱，已被視為是否發(fā)生腫瘤的重要內(nèi)在因素。,腫瘤發(fā)病率和死亡率,WHO：每年腫瘤死亡人數(shù)為630萬(wàn)，至2020年， 全世界腫瘤患者將達(dá)1500萬(wàn)。 我國(guó)：惡性腫瘤死亡率為108.39/10萬(wàn)，占死亡 人數(shù)17.94%，居死亡原因第二位。 腫瘤的早期發(fā)現(xiàn)和早期治療可明顯提高患者生 存率。,最普遍的惡性腫瘤死亡原因,臨床：病史、體癥,物理檢查：X光、CT、磁共振、B超、紅外、 核醫(yī)學(xué),術(shù)前：穿刺、刮片、拉網(wǎng) 術(shù)后：組織切片,免疫：腫瘤抗原和代謝物測(cè)定,分子生物：腫瘤相關(guān)基因分析,腫 瘤 診 斷,輔助,病理,正常 間變 惡性 可見(jiàn)前期 不可見(jiàn)前期,物質(zhì)分析,影像診斷,腫瘤的發(fā)展及診斷期,腫瘤的免疫逃避機(jī)制？,腫瘤細(xì)胞缺乏有效的抗原性表位，難以觸發(fā)足夠的抗腫瘤免疫效應(yīng)。 腫瘤細(xì)胞的MHC分子表達(dá)發(fā)生改變，異常表達(dá)的MHC分子，有礙機(jī)體免疫細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的識(shí)別，影響抗原遞呈作用。 不能正常表達(dá)B7等活化免疫細(xì)胞的共刺激分子和黏附分子。 患者血清中存在著封閉因子。 腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的某些細(xì)胞因子對(duì)T細(xì)胞的產(chǎn)生有抑制作用。 腫瘤細(xì)胞表達(dá)FasL，和活化CTL的Fas結(jié)合，介導(dǎo)CTL凋亡。,第一節(jié) 概述,體液免疫效應(yīng),激活補(bǔ)體的溶細(xì)胞作用 介導(dǎo)殺傷細(xì)胞的細(xì)胞毒作用 調(diào)理吞噬作用 干擾腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)行為 其他作用,第二節(jié) 機(jī)體的抗腫瘤免疫效應(yīng)機(jī)制,細(xì)胞免疫效應(yīng),T細(xì)胞 生物學(xué)效應(yīng)包括T細(xì)胞的直接殺傷和對(duì)免疫系統(tǒng)其它成分的活化。 （1）CD4陽(yáng)性的輔助T細(xì)胞 （2）CD8陽(yáng)性的細(xì)胞毒T細(xì)胞,第二節(jié) 機(jī)體的抗腫瘤免疫效應(yīng)機(jī)制,CD4陽(yáng)性的輔助T細(xì)胞 在胸腺中分為T(mén)h1和Th2，其中和腫瘤免疫關(guān)系密切的是Th1細(xì) 胞。 激活：腫瘤細(xì)胞抗原+抗原遞呈細(xì)胞（樹(shù)突狀細(xì)胞）+MHC II類(lèi)分子形成復(fù)合物，被CD4陽(yáng)性的T細(xì)胞的TCR識(shí)別并使自身活化。 效應(yīng)：通過(guò)釋放細(xì)胞因子（TNF，IFN-）發(fā)揮抗腫瘤作用。 Th表面的CD154分子和APC表面的CD40分子結(jié)合，釋放IL-12。促進(jìn)CTL分化和增殖。 Th和APC釋放共刺激信號(hào)分子，協(xié)助CTL的分化和增殖。 可增強(qiáng)B細(xì)胞活化引起的抗體應(yīng)答及CD8陽(yáng)性CTL的細(xì)胞毒 其亞群可分泌因子促進(jìn)體液免疫應(yīng)答。,第二節(jié) 機(jī)體的抗腫瘤免疫效應(yīng)機(jī)制,CD8陽(yáng)性的細(xì)胞毒T細(xì)胞 是腫瘤免疫的主要途徑。 通過(guò)釋放毒性物質(zhì)或促發(fā)靶細(xì)胞上的死亡受體，而直接溶解靶細(xì)胞，或通過(guò)分泌IFN- 間接殺傷腫瘤細(xì)胞，在機(jī)體發(fā)揮免疫監(jiān)視的作用。,第二節(jié) 機(jī)體的抗腫瘤免疫效應(yīng)機(jī)制,細(xì)胞免疫效應(yīng),NK細(xì)胞 NK細(xì)胞是宿主固有免疫或一線防御機(jī)制的一部分，非MHC限制性，她們不需要對(duì)宿主或其免疫功能進(jìn)行調(diào)整適應(yīng)。對(duì)腫瘤細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞比對(duì)大多數(shù)正常細(xì)胞更具有毒性作用。其作用機(jī)制類(lèi)似于CTL，還可分泌大量的細(xì)胞因子以調(diào)節(jié)機(jī)體免疫反應(yīng)。 新發(fā)現(xiàn)的NKT細(xì)胞在胸腺外發(fā)育，其發(fā)育依賴(lài)于TCR與類(lèi)MHC I類(lèi)分子CD1的相互作用，經(jīng)TCR觸發(fā)，主要介導(dǎo)NK類(lèi)細(xì)胞毒活性。,第二節(jié) 機(jī)體的抗腫瘤免疫效應(yīng)機(jī)制,細(xì)胞免疫效應(yīng),巨噬細(xì)胞 活化的巨噬細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞的結(jié)合可觸發(fā)細(xì)胞毒活性，細(xì)胞毒性介質(zhì)有細(xì)胞溶解蛋白酶、TNF-及其相關(guān)的因子、IFN- 和IFN-、IL-1，氧化反應(yīng)的中介物如過(guò)氧化氫，氮化反應(yīng)的中介物如NO、精氨酸酶等也可能屬于此列。 它是參與抗腫瘤、抗感染的主要效應(yīng)細(xì)胞。,第二節(jié) 機(jī)體的抗腫瘤免疫效應(yīng)機(jī)制,細(xì)胞免疫效應(yīng),樹(shù)突狀細(xì)胞 是一類(lèi)專(zhuān)職抗原遞呈細(xì)胞，輔佐T、B細(xì)胞參與特異性殺傷腫瘤的過(guò)程。 可利用制備腫瘤特異性樹(shù)突狀細(xì)胞以進(jìn)行腫瘤的生物療法。,第二節(jié) 機(jī)體的抗腫瘤免疫效應(yīng)機(jī)制,腫瘤抗原是細(xì)胞癌變過(guò)程中所表達(dá)的新生物或過(guò)量表達(dá)產(chǎn)物，它的產(chǎn)生與下列因素有關(guān)： 細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化而產(chǎn)生新的蛋白 點(diǎn)突變或基因重組致細(xì)胞內(nèi)癌基因活化，促使表型 改變 隨機(jī)病變而產(chǎn)生新的蛋白 胚胎抗原的過(guò)度表達(dá)或分化抗原的異常表達(dá)。,第三節(jié) 腫瘤抗原的分類(lèi),腫瘤特異性抗原 為腫瘤細(xì)胞所特有，只表達(dá)于腫瘤細(xì)胞，而不存在于任何處于不同發(fā)育階段的正常細(xì)胞。 1.化學(xué)物質(zhì)誘發(fā) 其抗原的顯著特征是高度個(gè)體化，即高度的個(gè)體特異性。不同腫瘤，甚至同一化學(xué)致癌物誘導(dǎo)的腫瘤，所表達(dá)的腫瘤抗原可有不同，而不同化學(xué)物質(zhì)引起的腫瘤，其抗原的差異性更大。,第三節(jié) 腫瘤抗原的分類(lèi),腫瘤特異性抗原 2.病毒誘發(fā) 無(wú)嚴(yán)格的特異性，通常由同一種病毒誘發(fā)的所有腫瘤，都具有相同的TSA。血清學(xué)試驗(yàn)和腫瘤特異性CTL的檢測(cè)，均有助于抗原的檢定。其可誘導(dǎo)機(jī)體的免疫應(yīng)答，故又被稱(chēng)為腫瘤特異性移植抗原。其成分多系病毒基因的表達(dá)成分。,第三節(jié) 腫瘤抗原的分類(lèi),腫瘤特異性抗原 3.自發(fā) 自發(fā)腫瘤系無(wú)明顯誘因的腫瘤，很難檢測(cè)到特異性的抗原標(biāo)志物，其原因可能有： 早期腫瘤細(xì)胞及近親本子代細(xì)胞一定時(shí)間內(nèi)可以表達(dá)，但后代細(xì)胞因?yàn)槿旧w的隨機(jī)突變而失去表達(dá)。 可能存在，但單獨(dú)使用抗原抗體方法難以得到確定答案。,第三節(jié) 腫瘤抗原的分類(lèi),腫瘤相關(guān)抗原 指非腫瘤細(xì)胞所特有的抗原成分，也少量存在于正常細(xì)胞，但在腫瘤發(fā)生的機(jī)體可異常表達(dá)，可分為胚胎性抗原和分化抗原兩種類(lèi)型。 胚胎抗原 分化抗原,第三節(jié) 腫瘤抗原的分類(lèi),第四節(jié) 常見(jiàn)腫瘤的免疫診斷及應(yīng)用原則,一、腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)及臨床意義,腫瘤標(biāo)志物,是顯示腫瘤存在的生物化學(xué)指示物 與腫瘤相伴產(chǎn)生 抗原或激素或酶蛋白 存在于血液、體液及組織中 可定量或定性檢測(cè)到 可以作為辨認(rèn)和追蹤腫瘤存在和發(fā)展的標(biāo)志,腫瘤標(biāo)志物研究歷史,1845 Bence-Jones 本周蛋白 1930 Zondek HCG 1959 Markert 同工酶 1963 Abelev AFP 1965 Gold & Freeman CEA 1969 Hubner & Todaro 癌基因 1975 Kohler & Milstein 單克隆抗體 1978 Herberman 提出腫瘤標(biāo)志物概念 1979 英國(guó)第7屆腫瘤發(fā)生生物學(xué)和醫(yī)學(xué)會(huì)議 腫瘤標(biāo)志物被確認(rèn)并應(yīng)用臨床 1980 Koprowski CA19-9 1981 Bast et al CA125 1981 Colcher et al CA72-4 1984 Kufe et al CA15-3 .,已建立的腫瘤標(biāo)志物,腫瘤標(biāo)志物的分類(lèi),細(xì)胞腫瘤標(biāo)志物：位于細(xì)胞中的物質(zhì)或抗原，如激素受體、白血病表型。 體液腫瘤標(biāo)志物：病理情況下，濃度增加時(shí)可在血液、尿液或其他體液中測(cè)得的物質(zhì)，如AFP、CA19-9、 CEA、 CA15-3等。 腫瘤表型標(biāo)志物：酶、胚胎性抗原、異位性蛋白、激素等。出現(xiàn)于癌細(xì)胞轉(zhuǎn)化和臨床進(jìn)展階段。 腫瘤基因標(biāo)志物：基因突變、基因表達(dá)異常等，出現(xiàn)于癌前起動(dòng)階段。,在各種肝病中AFP的變化,AFP在各類(lèi)肝病中的陽(yáng)性率,AFP陽(yáng)性后查找肝癌,腫瘤直徑 五年生存率 5 cm 31.25% 10cm 3.7%,癌胚抗原,一. 正常值 (直接法 ng/mL),胸，腹水 10ng/mL,二. 病理值 (直接法 ng/mL),一) 病種： 陽(yáng)性檢出率 (Ca) 1. 胰、膽 腸、胃 泌尿、乳房 6080% 5060% 2030%,胰、膽、腸、胃、肺炎癥等良性病變一般不 25 ng/mL,癌胚抗原,二. 病理值 (直接法 ng/mL),2. 胸腹水陽(yáng)性率高于血液 3. AFP，CEA聯(lián)合檢測(cè)鑒別原發(fā)/繼發(fā)肝癌,總PSA和游離PSA,PSA的兩種主要形式,游離PSA,結(jié)合PSA (PSA-ACT) -1-antichymotrypsin,抗原結(jié)合部位,PSA,PSA,ACT,PSA的檢測(cè),PSA66MAb,PSA10 MAb,35%,30%,25%,20%,15%,10%,5%,0%,良性疾病的可能性增加,前列腺癌的可能性增加,FREE PSA % 結(jié)果解釋,前 列 腺 癌 的 可 能 性 %,CI* Confidence Interval,糖類(lèi)抗原12-5（CA125） 是卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌的腫瘤標(biāo)志物 分子量為20萬(wàn)的糖蛋白 可被單克隆抗體OC125所識(shí)別 在卵巢腫瘤上皮和Mullerian副腎管來(lái) 源的病理和正常組織中表達(dá)，其生物 學(xué)功能不明。,糖類(lèi)抗原12-5（CA125）,正常人血清中CA125的臨界值為35U/ml CA125的半衰期僅4.8天，在血中很快代謝，所測(cè)即時(shí)結(jié)果能反映腫瘤近期的變化狀態(tài),CA125在卵巢癌，尤其是上皮性卵巢 癌、子宮內(nèi)膜癌可出現(xiàn)升高，還可在 肺癌、宮頸癌等腫瘤狀態(tài)時(shí)升高。 CA125在子宮內(nèi)膜異位癥、1%的健 康婦女、3%的患良性卵巢疾病婦女 及其他非腫瘤患者也可見(jiàn)到升高。,CA125的臨床應(yīng)用,卵巢癌的輔助診斷 觀察病情及預(yù)測(cè)預(yù)后 -血清CA125升高（或降低）2倍的患者 中大于80%的病例為病情進(jìn)展（或消退） -CA12535U/ml的病人中有95%在第二次 手術(shù)時(shí)仍有腫瘤存在,早期復(fù)發(fā)的監(jiān)測(cè) 75%的患者在腫瘤復(fù)發(fā)前一年左右時(shí)間CA125的水平就已升高,CA125的臨床應(yīng)用,CA125升高：90%的卵巢癌和期 50%的期和90%的期 CA125升高水平與腫瘤大小和分期有關(guān) CA125可以區(qū)別可觸及的良性或惡性實(shí)體瘤,CA125的臨床應(yīng)用,卵巢癌和良性卵巢疾病的鑒別診斷 連續(xù)測(cè)定CA125 聯(lián)合檢測(cè)CA199可提高準(zhǔn)確性，敏感性可從83.3%提高到91.6% 卵巢上皮性癌患者CA125明顯高于對(duì)照組，敏感性可達(dá)82%到93.5% 8%的良性患者CA125大于65U/ml，而惡性患者占75%,CA125的臨床意義,術(shù)后 CA125 的升高是癌腫復(fù)發(fā)的重要標(biāo)志， 當(dāng)CA125大于65U/ml時(shí)則不需作第二次手術(shù)探查,CA125的臨床應(yīng)用,糖類(lèi)抗原19-9（CA199） CA19-9是胰腺、胃和腸癌的標(biāo)記物。 正常人群血清CA19-9陽(yáng)性的臨界值為 37U/ml,癌組織中的濃度要高于正常組織或 炎性組織；是胰腺癌診斷較好的指 標(biāo)，還可用于胃腸癌的檢測(cè)和篩選。 伴有黃疸的良性疾病患者也可出現(xiàn) CA19-9升高，但一般不120/ml， 經(jīng)臨床處理后可恢復(fù)到正常值范圍。,CA19-9的臨床應(yīng)用,診斷 -可以作為胰腺和膽管癌較好的標(biāo)志物用于臨床，胰腺癌的陽(yáng)性率可達(dá)70%92%，膽管癌為66.7% -對(duì)胃癌、肝癌和結(jié)直腸癌的陽(yáng)性率分別可達(dá)25%60%、56%60%，18%58%,療效監(jiān)測(cè) 治療中及術(shù)后含量下降乃至正常表示治療方案正確 復(fù)發(fā)跟蹤 升高可作為腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的亞臨床診斷或重要的輔助診斷指標(biāo),CA19-9水平在胰腺癌診斷中反應(yīng)參數(shù)的比較,神經(jīng)原特異性烯醇化酶（NSE）,同功酶類(lèi)腫瘤標(biāo)志物，正常僅存于神 經(jīng)組織和紅細(xì)胞中 正常人血清值為 13g/L 小細(xì)胞肺癌、神經(jīng)母細(xì)胞瘤和神經(jīng)內(nèi) 分泌腫瘤及腦損傷時(shí)升高 待測(cè)標(biāo)本絕對(duì)禁止溶血，溶血可出現(xiàn) NSE血清水平升高,NSE的臨床意義,NSE在小細(xì)胞肺癌中的陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組，NSE可作為小細(xì)胞肺癌的高特異、高靈敏的腫瘤標(biāo)志物,跟蹤監(jiān)測(cè)癌腫病情進(jìn)展和療效判斷 -肺癌 NSE高于11.8 g/L預(yù)示肺癌患者生存 期較短 化療24小時(shí)后 NSE下降是治療效果良 好的標(biāo)志,其他癌癥 癌癥復(fù)發(fā)的早期標(biāo)志，尤其是存在胸腔、肝、骨骼、腦、脊髓轉(zhuǎn)移 NSE升高的癌癥患者5年存活率僅為5%12%,NSE的臨床應(yīng)用,腫瘤標(biāo)志物對(duì)分型的比較,陽(yáng)性率,Ebert, W., et al. Anticancer Research, 1996,16:2161-2168,人絨毛膜促性腺激素（HCG）,糖蛋白類(lèi)激素，由蛋白核心與位于 羧基端的以唾液酸為終止的側(cè)鏈組成 兩個(gè)亞基組成: & : 與 - LH, TSH 和 FSH相同 :與-LH有交叉 由合胞體滋養(yǎng)層細(xì)胞產(chǎn)生 被證實(shí)是一種原始物質(zhì) (可作為一種有用的腫瘤標(biāo)志物),hCG Epitopes,Intact hCG,Free ,Free ,Free -hCG Assay,Catching Antibody,Detecting Antibody,HCG,臨床應(yīng)用： HCG上升：幾乎所有絨毛膜上皮細(xì)胞 癌、70%的非精原細(xì)胞性睪丸癌，胃 腸道、肺、 乳腺腫瘤時(shí)亦可見(jiàn) HCG水平與腫瘤大小、疾病預(yù)后有關(guān) 腦脊液中HCG上升提示腫瘤有腦轉(zhuǎn)移 可用于監(jiān)測(cè)治療,第四節(jié) 常見(jiàn)腫瘤的免疫診斷及應(yīng)用原則,二、常見(jiàn)腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的免疫方法,標(biāo)記免疫方法,HAPATITIS,CANCER,FERTILITY,PROTEINS,TDMs/DRUGS,TYROID, ANEMIA,HBV HCV,M 107,10,10-15,10-4 g/L,AFP FER CEA CA199,PRL HCG LH FSH GH Myoglobin,RHF IgG C3 ASO CER TRF AAG,QUI GEN AMI PHY,FT3 FT4 Dig T3 T4 TSH Prog,Immunoassay Analyte Map,待測(cè)物質(zhì)濃度與檢測(cè)手段,臨床化學(xué)分析,pg/mL,ng/mL,mg/mL,mg/mL,g/L,免疫分析,Therapeutic Drugs,Thyroid Hormone,Fertility Hormone,Allergy,Cancer Markers,Infectious Disease,Vitamins,Serum Proteins,第四節(jié) 常見(jiàn)腫瘤的免疫診斷及應(yīng)用原則,三、腫瘤標(biāo)志物的應(yīng)用價(jià)值,腫瘤標(biāo)志物的應(yīng)用價(jià)值,普查 定位 輔助診斷 分期 療效監(jiān)測(cè) 預(yù)后 預(yù)測(cè),普查,一般不適宜對(duì)無(wú)癥狀人群進(jìn)行普查 CEA查結(jié)腸癌 普查 在消化病房使用,發(fā)病率 370/10萬(wàn) 10000/10萬(wàn) 靈敏度 95% 95% 特異性 70% 70% 真陽(yáng)性數(shù) 370*95%=351.5 10000*95%=9500 假陰性數(shù) 370-351.5=18.5 10000-9500=500 真陰性數(shù) 99648.5*70%=69753.95 90000*70%=63000 假陽(yáng)性數(shù) 99648.5-69753.95=29894.55 90000-63000=27000 陽(yáng)性預(yù)示值 0.15% 26.03% 陰性預(yù)示值 99.97% 99.22%,腫瘤標(biāo)志物普查五項(xiàng)原則,應(yīng)十分清楚該腫瘤的發(fā)病率 該腫瘤標(biāo)志物應(yīng)能檢測(cè)早期腫瘤 該腫瘤的早期治療比晚期治療更經(jīng)濟(jì)有效 測(cè)定方法的靈敏度、特異性和重復(fù)性良好 普查所需費(fèi)用能被接受,定 位,腫瘤標(biāo)志物基本上不能對(duì)腫瘤定位。 極少數(shù)腫瘤標(biāo)志物如PSA，PAP，甲狀腺球蛋白具器官特異性，但不具腫瘤特異性。,確 診,通常不能進(jìn)行確診。 因?yàn)槟[瘤標(biāo)志物無(wú)足夠的靈敏度，不能 排除假陰性結(jié)果。 本周蛋白(多發(fā)性骨髓瘤）、AFP（肝 癌）、-HCG（絨毛膜癌）和降鈣素 （甲狀腺C-細(xì)胞癌）等有助確診。,分 期,大多數(shù)腫瘤標(biāo)志物與疾病分期有關(guān)，且濃度與腫瘤大小通常存在關(guān)聯(lián)。 但并不能根據(jù)個(gè)體測(cè)得值來(lái)判斷腫瘤大小， 也不能以腫瘤標(biāo)志物濃度精確指示各期腫 瘤，因?yàn)楦髌谀[瘤的腫瘤標(biāo)志物濃度范圍 極廣，且互相重疊。,腫瘤標(biāo)志物評(píng)價(jià)治療有效性方案(Beastall,1991),無(wú)效：濃度與治療前相比下降50% 有效：濃度與治療前相比下降90%,預(yù) 后,術(shù)前濃度增高，術(shù)后降低，表示這些腫瘤標(biāo)志物對(duì)此腫瘤有預(yù)后價(jià)值。 在病程監(jiān)測(cè)過(guò)程中，腫瘤標(biāo)志物的濃度增高或降低與疾病的預(yù)后密切相關(guān)。,術(shù)后腫瘤標(biāo)志物水平的變化,73,腫瘤標(biāo)志物水平,跟 蹤 復(fù) 發(fā),預(yù) 測(cè),利用ROC曲線進(jìn)行 PPV：陽(yáng)性時(shí)患腫瘤的可能性 NPV：陰性時(shí)不患腫瘤的可能性 PPV和NPV與靈敏度、特異性和患病率有關(guān) 腫瘤標(biāo)志物的靈敏度、特異性、PPV、NPV 不是固定不變的，而是依賴(lài)于選定的臨界值。,腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用,1. 預(yù)后：病員分群 ( - )非保護(hù)人群 ( + )保護(hù)人群-預(yù)后好、壞,2. 療效觀察：外科：手術(shù)切除/殘留/姑息 保守：藥效、放療效果 3. 隨訪： 術(shù)后6周 三年 五年 七年 4. 良/惡鑒別：輔助指標(biāo),標(biāo)志物,三月一次,半年一次,一年一次,腫瘤標(biāo)志物的應(yīng)用原則,1. 有關(guān)標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè) - 提高靈敏度 2. 陽(yáng)性標(biāo)志物動(dòng)態(tài)觀察 - 提高準(zhǔn)確性 不應(yīng)以單項(xiàng)、單次檢測(cè)下診斷,腫瘤標(biāo)志物的其它幾個(gè)問(wèn)題,正常參考范圍的界定 方法學(xué)不同而導(dǎo)致的結(jié)果的不統(tǒng)一,腫瘤標(biāo)志物的正常參考范圍,目前通常以正常人群的95%的可信區(qū)間為正常參考范圍，對(duì)于腫瘤標(biāo)志物，由于雙側(cè)通常是無(wú)意義的，因此一般取右單側(cè) 95%為正常參考范圍。即有5%的正常人在檢測(cè)時(shí)其值會(huì)超過(guò)正常參考范圍，引起臨床的假陽(yáng)性結(jié)果。,正常參考范圍的建立 正常人群的平均值2SD,2.5,97.5,腫瘤標(biāo)志物的正常參考范圍,研究表明，正常參考范圍對(duì)于腫瘤標(biāo)志物來(lái)講是毫無(wú)意義的，我們希望通過(guò)檢測(cè)值來(lái)了解： （1）陽(yáng)性結(jié)果提示該病人罹患腫瘤的概率 （2）陰性結(jié)果提示該病人不罹患腫瘤的概率,最后通過(guò)概率的大小來(lái)指導(dǎo)臨床應(yīng)該 進(jìn)行的檢查和處理措施，因此應(yīng)用ROC曲 線（receiver operator characteristic curve)來(lái) 確定最佳界定值（cutoff value）。,臨 界 值 的 確定,根據(jù)金標(biāo)準(zhǔn)確定病人和對(duì)照兩組例數(shù)相似的人群，并測(cè)出各組的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。 用該實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的不同域值區(qū)分陽(yáng)性和陰性的不同分界點(diǎn)，分別計(jì)算靈敏度和特異性。