GBT 29674-2013 化妝品中氯胺T的測定 高效液相色譜法.pdf

I C S7 1. 1 0 0. 7 0Y4 2中 華 人 民 共 和 國 國 家 標 準G B/T2 9 6 7 42 0 1 3化妝品中氯胺T的測定高效液相色譜法D e t e r m i n a t i o no f c h l o r a m i n eTi nc o s m e t i c sH i g hp e r f o r m a n c e l i q u i dc h r o m a t o g r a p h y2 0 1 3 - 0 9 - 0 6發(fā)布2 0 1 4 - 0 2 - 1 5實施中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局中 國 國 家 標 準 化 管 理 委 員 會發(fā) 布前 言 本標準按照G B/T1. 12 0 0 9給出的規(guī)則起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別這些專利的責(zé)任。本標準由中國輕工業(yè)聯(lián)合會提出。本標準由全國香料香精化妝品標準化技術(shù)委員會(S A C/T C2 5 7) 歸口。本標準起草單位: 中國檢驗檢疫科學(xué)研究院、 上海市日用化學(xué)工業(yè)研究所。本標準主要起草人: 王超、 馬強、 王星、 張慶、 席廣成、 席海為、 于紅梅、 丁嵐、 武曉劍、 沈敏。G B/T2 9 6 7 42 0 1 3化妝品中氯胺T的測定高效液相色譜法1 范圍本標準規(guī)定了化妝品中氯胺T的高效液相色譜測定方法。本標準適用于膏霜、 水劑、 散粉、 香波、 牙膏類化妝品中氯胺T的測定。本標準不適用于添加了對甲苯磺酰胺的產(chǎn)品。本標準對于氯胺T的檢出限為8. 0m g/k g, 定量限為1 6. 5m g/k g。2 規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件, 僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件, 其最新版本( 包括所有的修改單) 適用于本文件。G B/T6 6 8 2 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3 原理用鹽酸水溶液超聲提取并水解化妝品中的氯胺T為對甲苯磺酰胺, 提取液經(jīng)乙醚液-液萃取, 用高效液相色譜法測定對甲苯磺酰, 外標法定量, 液相色譜-質(zhì)譜確認。4 試劑和材料除非另有規(guī)定, 所用試劑均為分析純。水為G B/T6 6 8 2規(guī)定的一級水。4. 1 乙腈: 色譜級。4. 2 甲醇: 色譜級。4. 3 氯胺T標準物質(zhì): 分子式C7H7C l NN a O2S,C A S號1 2 7 - 6 5 - 1, 純度不小于9 9%, 結(jié)構(gòu)式參見附錄A的圖A. 1。4. 4 對甲苯磺酰胺標準物質(zhì): 分子式C7H9NO2S,C A S號7 0 - 5 5 - 3, 純度不小于9 9%, 結(jié)構(gòu)式參見圖A. 2。4. 5 氯胺T標準儲備溶液: 準確稱取適量氯胺T標準物質(zhì)( 精確至0. 1m g) , 以甲醇(4. 2) 配制成濃度為10 0 0g/m L的標準儲備溶液, 于4避光保存, 可使用三個月。4. 6 對甲苯磺酰胺標準儲備溶液: 準確稱取適量對甲苯磺酰胺標準物質(zhì)( 精確至0. 1m g) , 以甲醇(4. 2) 配制成濃度為10 0 0m g/L的儲備溶液, 于4避光保存, 可使用三個月。4. 7 乙醚。4. 8 鹽酸。5 儀器和設(shè)備5. 1 高效液相色譜(H P L C) 儀: 配有紫外檢測器或二極管陣列檢測器。1G B/T2 9 6 7 42 0 1 35. 2 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜(L C - M S/M S) 儀: 配有電噴霧離子源(E S I) 。5. 3 超聲波水浴: 具備溫度控制功能。5. 4 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。5. 5 氮吹儀。5. 6 分析天平: 感量為0. 0 0 01g和0. 0 0 1g。5. 7 微孔濾膜:0. 4 5m, 有機相。6 測定步驟6. 1 樣品處理稱取1g( 精確至0. 0 0 1g) 試樣于5 0m L具塞塑料離心管中, 加入1 0m L鹽酸水混合溶液(4+6, 體積比) , 在5 0下, 超聲提取2 5m i n, 提取液轉(zhuǎn)移至分液漏斗中, 用2 0m L乙醚萃取, 重復(fù)萃取3次, 合并乙醚萃取液減壓濃縮至5m L, 再用氮氣緩慢吹至近干, 用1 0m L乙腈水混合溶液(3+7, 體積比) 渦旋溶解, 經(jīng)0. 4 5m微孔濾膜過濾, 濾液作為待測樣液。6. 2 測定條件高效液相色譜測定的參考條件如下:a) 色譜柱:E x t e n dC1 8,5m,2 5 0mm4. 6mm( 內(nèi)徑) , 或相當(dāng)者;b) 流動相: 乙腈水混合溶液(3 1+6 9, 體積比) , 等度洗脫;c) 流速:1. 0m L/m i n;d) 柱溫:3 0;e) 檢測波長:2 2 4n m;f) 進樣量:1 0L。6. 3 標準曲線的繪制用甲醇(4. 2) 將對甲苯磺酰胺標準儲備溶液(4. 6) 逐級稀釋得到的濃度為1g/m L、5g/m L、1 0g/m L、5 0g/m L、1 0 0g/m L、3 0 0g/m L、5 0 0g/m L的標準工作溶液, 按6. 2的測定條件濃度由低到高進樣測定, 以峰面積-濃度作圖, 得到標準曲線回歸方程。對甲苯磺酰胺標準品色譜圖參見附錄B中的圖B. 1, 標準品紫外吸收光譜圖參見圖B. 2。注:可用氯胺T標準物質(zhì)(4. 3) 依照6. 1樣品處理的步驟進行水解代替對甲苯磺酰胺, 繪制標準曲線。6. 4 測定按6. 2的測定條件對待測樣液進行測定, 如果檢出對甲苯磺酰胺的色譜峰的保留時間與標準品相一致, 并且在扣除背景后的樣品色譜圖中, 該物質(zhì)的紫外吸收光譜圖與標準品一致, 則可初步認定樣品中存在對甲苯磺酰胺, 用外標法定量。待測樣液中對甲苯磺酰胺的響應(yīng)值應(yīng)在標準曲線的線性范圍內(nèi),超過線性范圍則應(yīng)稀釋后再進樣分析。如采用紫外檢測器, 陽性樣品需用液相色譜-質(zhì)譜進行確認試驗( 參見附錄C) 。6. 5 空白試驗除不稱取樣品外, 均按上述測定條件和步驟進行。7 結(jié)果計算結(jié)果按式(1) 計算, 計算結(jié)果保留兩位小數(shù), 計算結(jié)果應(yīng)扣除空白值:2G B/T2 9 6 7 42 0 1 3wi=ciV2 2 7. 6 4m1 7 1. 2 2(1) 式中:wi 試樣中被測氯胺T的含量, 單位為毫克每千克(m g/k g) ;ci 從標準工作曲線上查出的樣液中對甲苯磺酰胺的濃度, 單位為微克每毫升(g/m L) ;V 樣液最終定容體積, 單位為毫升(m L) ;m 試樣的質(zhì)量, 單位為克(g) ;2 2 7. 6 4 氯胺T的相對分子質(zhì)量;1 7 1. 2 2 對甲苯磺酰胺的相對分子質(zhì)量。8 檢出限和定量限氯胺T的檢出限為8. 0m g/k g, 定量限為1 6. 5m g/k g。9 回收率和精密度在添加濃度8 0m g/k g 20 0 0m g/k g的范圍內(nèi), 回收率在8 3. 1%1 0 3. 0%之間, 相對標準偏差在1. 0%5. 7%。1 0 允許差在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不應(yīng)超過算術(shù)平均值的1 0%。3G B/T2 9 6 7 42 0 1 3附 錄 A( 資料性附錄)氯胺T和對甲苯磺酰胺標準品的結(jié)構(gòu)式圖A. 1 氯胺T 標準品的結(jié)構(gòu)式SOONHHCH3圖A. 2 對甲苯磺酰胺標準品的結(jié)構(gòu)式4G B/T2 9 6 7 42 0 1 3附 錄 B( 資料性附錄)對甲苯磺酰胺標準品的高效液相色譜圖和紫外吸收光譜圖圖B. 1 對甲苯磺酰胺標準品的高效液相色譜圖圖B. 2 對甲苯磺酰胺標準品的紫外吸收光譜圖5G B/T2 9 6 7 42 0 1 3附 錄 C( 資料性附錄)確認試驗C. 1 液相色譜條件液相色譜測定的參考條件如下:a) 色譜柱:P o r o s h e l lC1 8柱,1 0 0mm4. 6mm( 內(nèi)徑) ,2. 7m( 粒徑) , 或相當(dāng)者;b) 流動相: 甲醇(A) 和水溶液(B) ;07m i n,3 0% A9 0% A;79m i n,3 0% A;c) 流速:0. 5m L/m i n;d) 柱溫:3 0;e) 進樣量:5L。C. 2 質(zhì)譜條件質(zhì)譜測定的參考條件如下:a) 電離方式: 電噴霧電離, 正離子;b) 毛細管電壓:3. 0k V;c) 萃取電壓:1. 0V;d) 射頻透鏡電壓:0. 5V;e) 離子源溫度:1 5 0;f) 脫溶劑氣: 氮氣, 流速8 0 0L/h, 溫度4 0 0;g) 錐孔氣: 氮氣, 流速5 0L/h;h) 碰撞氣: 氬氣;i)掃描模式: 多反應(yīng)監(jiān)測(MRM) , 定性離子對、 定量離子對、 錐孔電壓和碰撞氣能量、 相對豐度和允許偏差見表C. 1。表C. 1 對甲苯磺酰胺的定性離子對、 定量離子對、 錐孔電壓、 碰撞氣能量、 相對豐度和允許偏差中文名稱英文名稱定性離子對(m/z)定量離子對(m/z)錐孔電壓/V碰撞氣能量/e V相對豐度/%允許偏差/%對甲苯磺酰胺p- t o l u e n e s u l f o n a m i d e1 7 2. 0/9 1. 11 7 2. 0/1 5 5. 01 7 2. 0/9 1. 12 61 681 0 03 22 5C. 3 定性判定按照上述條件測定試樣和標準工作溶液, 如果試樣中質(zhì)量色譜峰保留時間與標準工作溶液一致( 變化范圍在2. 5%之內(nèi)) ; 樣品中目標化合物的兩個子離子的相對豐度與濃度相當(dāng)標準溶液的相對豐度一致, 相對豐度偏差不超過表C. 1的規(guī)定, 則可判斷樣品中存在對氯胺T。對甲苯磺酰胺的選擇離子質(zhì)量色譜圖見圖C. 1。6G B/T2 9 6 7 42 0 1 3圖C. 1 對甲苯磺酰胺的選擇離子質(zhì)量色譜圖G B/T2 9 6 7 42 0 1 3310247692T/BG中華人民共和國國家標準化妝品中氯胺T的測定高效液相色譜法G B/T2 9 6