DB51T 1192-2011 油菜根腫病抗性鑒定技術(shù)規(guī)程.docVIP

65.020.01 B 16DB51四川省地方標(biāo)準(zhǔn)DB 51/T 11922011油菜根腫病抗性鑒定技術(shù)規(guī)程2011 - 01-25發(fā)布2011 - 03-01實(shí)施四川省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布DB51/T 11922011目次前言II1范圍12規(guī)范性引用文件13術(shù)語(yǔ)和定義14田間抗性鑒定方法25抗病性評(píng)價(jià)3附錄A（資料性附錄）油菜根腫病基本信息4附錄B（規(guī)范性附錄）油菜根腫病病級(jí)調(diào)查方法、病情指數(shù)、校正系數(shù)、相對(duì)病情指數(shù)計(jì)算方法5前言本標(biāo)準(zhǔn)分為范圍、規(guī)范性引用文件、術(shù)語(yǔ)和定義、田間抗性鑒定方法、抗性評(píng)價(jià)方法等部分。本標(biāo)準(zhǔn)由四川省農(nóng)業(yè)廳提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)由四川省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局批準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：劉勇、黃小琴、張蕾、楊曉蓉、周西全6油菜根腫病抗性鑒定技術(shù)規(guī)程1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了油菜根腫病抗性田間鑒定的技術(shù)規(guī)程，即抗性鑒定圃設(shè)置、接種、病情調(diào)查、抗病性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)適用于四川省油菜品種（系）對(duì)根腫病的田間抗性鑒定。2 規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB4285-1989 農(nóng)藥安全使用標(biāo)準(zhǔn)GB5084-1992 農(nóng)田灌溉水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)QBT/T89-2003 無(wú)公害油菜生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程ISBN/S1676 農(nóng)作物抗病蟲(chóng)性鑒定方法3 術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。3.1人工接種鑒定 artificial inoculation identification按一定量接種收集的病原物，仿照自然情況，創(chuàng)造發(fā)病條件，根據(jù)接種對(duì)象的抗性表現(xiàn)和發(fā)病程度確定供試品種抗性級(jí)別的一種方法。3.2自然發(fā)病鑒定 non-inoculation identification田間自然感染誘發(fā)，根據(jù)供試品種抗性表現(xiàn)和發(fā)病程度確定供試品種抗性級(jí)別的一種方法。3.3田間鑒定 field identification油菜品種（系）種植在病區(qū)的試驗(yàn)地，在油菜苗期、初花期分別進(jìn)行各個(gè)參試品種（系）發(fā)病程度調(diào)查，經(jīng)結(jié)果分析確定各個(gè)油菜品種（系）的抗性水平。3.4對(duì)照品種 control variety為了保證抗性鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性，減少年份間和環(huán)境條件的差異，選擇抗性水平較穩(wěn)定的品種作為抗性鑒定試驗(yàn)的對(duì)照品種。4 田間抗性鑒定方法采用田間自然發(fā)病田塊輔以人工接種鑒定的方式進(jìn)行鑒定。4.1 抗性鑒定圃設(shè)置按ISBN/S1676農(nóng)作物抗病蟲(chóng)性鑒定方法進(jìn)行抗性鑒定圃設(shè)置，選擇四川省近年連年油菜根腫病常發(fā)病區(qū)?？剐澡b定圃要求平坦方正、土質(zhì)肥力均勻、土壤弱酸性，地勢(shì)低濕、排灌方便，利于根腫病發(fā)病的田塊。4.1.1 對(duì)照品種的選擇以四川省常規(guī)栽培油菜品種川油23作為田間抗病性鑒定的對(duì)照品種，以各參鑒品種與對(duì)照相比的相對(duì)抗性來(lái)判定各參鑒材料的相對(duì)抗性。4.1.2 油菜品種（系）的田間排布參試品種（系）與對(duì)照品種（系）采用隨機(jī)區(qū)組排列，每個(gè)品種（系）種植2行，每行種植10穴，每穴三株，重復(fù)3次。4.1.3 栽培技術(shù)及管理按GB4285-1989、QBT/T89-2003及GB5084-1992的要求進(jìn)行。油菜采用直播方式，播期比當(dāng)?shù)卮筇镒钸m播種期提前10 d20 d；油菜整個(gè)生長(zhǎng)期不使用殺菌劑，并保持抗性鑒定圃土壤濕潤(rùn)。 4.2 接種方法油菜子葉期用背負(fù)式手動(dòng)噴霧器進(jìn)行植株根部土壤噴霧接菌。4.3 接種量供試菌種為前一年田間采集的發(fā)病植株病根經(jīng)自來(lái)水洗凈后于-20 冰箱保存?zhèn)溆?。使用時(shí)，直接取出解凍，用組織搗碎機(jī)粉碎、兩層紗布過(guò)濾除掉根部纖維組織后，用水稀釋配制成懸浮液，于顯微鏡下采用血球計(jì)數(shù)板法進(jìn)行計(jì)數(shù)，調(diào)節(jié)孢子濃度為2106 孢子/ml，接種量為225 L/ha。4.4 病情調(diào)查4.4.1 調(diào)查時(shí)間 共調(diào)查兩次，油菜苗期（播種后45 d）和初花期分別進(jìn)行病情調(diào)查。4.4.2 調(diào)查方法及數(shù)據(jù)處理調(diào)查時(shí)每穴連根拔苗一株，逐株調(diào)查各品種（系）油菜根部的根腫病發(fā)病情況（癥狀識(shí)別見(jiàn)附錄A）。病級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)、病情指數(shù)和相對(duì)病情指數(shù)的計(jì)算方法依據(jù)附錄B進(jìn)行。5 抗病性評(píng)價(jià)5.1 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 兩次調(diào)查，綜合評(píng)價(jià)，以參試油菜品種（系）的平均相對(duì)病情指數(shù)作為抗病性等級(jí)劃分依據(jù)。 在油菜根腫病抗性鑒定中，以各參試品種與對(duì)照相比的相對(duì)病情指數(shù)來(lái)判定各參試材料的根腫病抗性。將對(duì)照品種的病情指數(shù)規(guī)定為50.00，實(shí)際調(diào)查后，進(jìn)行系數(shù)校正（計(jì)算方法見(jiàn)附錄B），改絕對(duì)標(biāo)準(zhǔn)為相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)。 在油菜根腫病抗性鑒定中，參鑒品種（系）應(yīng)進(jìn)行兩年重復(fù)鑒定試驗(yàn)，以對(duì)照苗期和花期的發(fā)病株率不低于50%作為根腫病人工接種鑒定結(jié)果有效性標(biāo)準(zhǔn)。5.2 抗性評(píng)價(jià) 根據(jù)品種苗期和花期的平均相對(duì)病情指數(shù)，按照表1評(píng)價(jià)油菜各品種（系）的抗病性。表1 油菜品種（系）根腫病抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)抗性型相對(duì)病情指數(shù)（X）范圍免疫（I）X =0.00高抗（HR）0.00X5.00抗（R）5.00X10.00中抗（MR）10.00X20.00中感（MS）20.00X30.00感（S）30.00X50.00AA附錄A （資料性附錄）油菜根腫病基本信息A.1 油菜根腫病的病原及癥狀A(yù).1.1 病原菌 油菜根腫病病原菌稱蕓薹根腫菌（Plasmodiophora brassicae Woronin），在分類上屬于根腫菌目、蕓薹根腫菌屬真菌。A.1.2 油菜根腫病癥狀油菜根腫菌主要危害油菜植株根部，通常苗期植株均可感病，以苗期侵染植株根毛組織為主。植株感病后，地上部分植株初期無(wú)明顯癥狀，根部感染根腫病后植株生長(zhǎng)會(huì)逐漸緩慢、矮小，并表現(xiàn)出缺水癥狀；早期感染植株的基部葉片常在中午時(shí)出現(xiàn)萎蔫，早晚恢復(fù)正常，染病后期植株從基部葉片開(kāi)始變黃、萎蔫呈失水狀，嚴(yán)重時(shí)全株枯死。植株地下部分感病后，感染植株根部形成腫瘤，腫瘤大小不等，根部一般主根腫瘤大而少，側(cè)根腫瘤小而多，腫瘤一般呈紡錘形、圓形、手指形等形狀。腫瘤初期表面光滑，后期常發(fā)生龜裂、粗糙，易被其它雜菌侵入而引起整個(gè)根部組織腐爛。BB附錄B （規(guī)范性附錄）油菜根腫病病級(jí)調(diào)查方法、病情指數(shù)、校正系數(shù)、相對(duì)病情指數(shù)計(jì)算方法B.1 病級(jí)調(diào)查方法B.1.1 病害嚴(yán)重度分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)（苗期，田間調(diào)查）0級(jí)：根系正常、無(wú)癥狀；1級(jí)：須根、側(cè)根上僅個(gè)別出現(xiàn)細(xì)小腫大，主根未見(jiàn)病害和腫瘤；3級(jí)：2個(gè)以上的須根或側(cè)根出現(xiàn)腫大，或腫瘤直徑或長(zhǎng)度超過(guò)0.5cm；或主根出現(xiàn)腫大但不明顯；5級(jí)：主根腫大明顯，腫瘤部分直徑為莖基的2-3倍；7級(jí)：主根腫大明顯，腫瘤部分直徑為莖基3倍以上。B.1.2 病害嚴(yán)重度分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)（初花期，田間調(diào)查）0級(jí)：根系正常、無(wú)癥狀；1級(jí)：須根、側(cè)根上出現(xiàn)12個(gè)細(xì)小根腫，主根未發(fā)生病害；3級(jí)：須根、側(cè)根上有多個(gè)腫瘤或個(gè)別腫瘤直徑或長(zhǎng)度超過(guò)0.5cm；或主根尖端出現(xiàn)病害癥狀但腫大不明顯5級(jí)：側(cè)根腫大部分直徑或長(zhǎng)度超過(guò)0.5cm且主根末梢有小的腫瘤；或主根腫大明顯，腫大部分直徑與莖基直徑相當(dāng)；7級(jí)：主根全部腫大，腫大部分直徑為莖基的1倍或以上，但植株生長(zhǎng)正常