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集訓基因工程相關(guān)試題一、單項選擇題1利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)羧酸酯酶(CarE)制劑的流程如下圖所示,下列敘述正確的是()A過程所需的逆轉(zhuǎn)錄酶可取自于抗農(nóng)藥馬拉硫磷小菜蛾的任一細胞B過程利用PCR技術(shù)擴增目的基因需使用耐高溫的解旋酶和引物對C過程常用Ca2處理大腸桿菌使其成為易于吸收DNA的感受態(tài)細胞D過程可利用抗原抗體雜交技術(shù)鑒定目的基因是否已導入受體細胞2基因工程是DNA分子水平的操作,下列有關(guān)基因工程的敘述中,錯誤的是()A限制酶只用于切割獲取目的基因B載體與目的基因通常用同一種限制酶處理C基因工程所用的工具酶是限制酶、DNA連接酶D帶有目的基因的載體是否進入受體細胞需檢測3下列關(guān)于基因工程的敘述中,正確的是()ADNA連接酶和RNA聚合酶催化生成的化學鍵相同BDNA連接酶對“縫合”序列不進行特異性識別,無專一性催化特點C受體細菌若能表達質(zhì)粒載體上抗性基因,即表明重組質(zhì)粒成功導入D培育轉(zhuǎn)基因油菜,需對受體細胞進行氯化鈣處理4限制酶是一種核酸切割酶,可辨識并切割DNA分子上特定的核苷酸堿基序列。下圖為四種限制酶BamH、EcoR、Hind以及Bgl的辨識序列。箭頭表示每一種限制酶的特定切割部位,其中哪兩種限制酶所切割出來的DNA片段末端可以互補黏合?其正確的末端互補序列為()ABamH和EcoR;末端互補序列AATTBBamH和Hind;末端互補序列GATCCEcoR和Hind;末端互補序列AATTDBamH和Bgl;末端互補序列GATC5有關(guān)基因工程與蛋白質(zhì)工程的說法正確是()A基因工程需對基因進行分子水平操作,蛋白質(zhì)工程不需要對基因進行操作B基因工程合成的是天然蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)工程合成的可以不是天然存在的蛋白質(zhì)C基因工程是分子水平操作,蛋白質(zhì)工程是細胞水平(或性狀水平)D蛋白質(zhì)工程是基因工程的基礎(chǔ)6鹽害是全球水稻減產(chǎn)的重要原因之一,中國水稻研究所等單位的專家通過農(nóng)桿菌中的質(zhì)粒將CMO基因、BADH基因、mtld基因、gutD基因和SAMDC基因5個耐鹽基因?qū)胨?,獲得了一批耐鹽轉(zhuǎn)基因植株。有關(guān)耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻培育的分析正確的是()A該基因工程涉及多個目的基因,多種載體B該基因工程所需的限制性核酸內(nèi)切酶可能有多種C只要目的基因進入水稻細胞,水稻就會表現(xiàn)出抗鹽性狀D可通過將水稻種植到有農(nóng)桿菌的土壤中觀察目的基因是否表達7如圖是利用基因工程技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因植物,生產(chǎn)可食用疫苗的部分過程示意圖,其中Pst 、Sma 、EcoR 、Apa 為四種限制性核酸內(nèi)切酶。下列說法錯誤的是()A圖示過程是基因工程的核心步驟B表達載體構(gòu)建時需要用到限制酶SmaC抗卡那霉素基因的存在有利于將含有抗原基因的細胞篩選出來D除圖示組成外,表達載體中還應(yīng)該含有啟動子和終止子等結(jié)構(gòu)8下表為常用的限制性核酸內(nèi)切酶及其識別序列和切割位點(注:表中Y為C或T,R為A或G)。據(jù)表分析,可以得到的結(jié)論是()限制酶名稱識別序列和切割位點限制酶名稱識別序列和切割位點BamHGGATCCKpnGGTACCEcoRGAATTCSau3AGATCHindGTYRACSmaCCCGGGA.限制酶的切割位點在識別序列的中間B限制酶切割后都形成黏性末端C不同限制酶切割后形成的黏性末端都相同D一種限制酶可能識別多種核苷酸序列二、多項選擇題9金茶花是中國特有的觀賞品種,但易得枯萎病。科學家在某植物中找到了抗枯萎病的基因,下圖所示的方法培育出了抗枯萎病的金茶花新品種。相關(guān)敘述正確的是()A圖中在基因工程中依次叫做載體、目的基因B形成的操作中使用的酶有限制酶、DNA聚合酶和DNA連接酶C由培育至過程中,依次經(jīng)歷了脫分化、再分化過程D在幼苗中檢測到抗枯萎病基因標志著成功培育出新品種10研究人員將生長激素基因通過質(zhì)粒導入大腸桿菌細胞,使其表達,產(chǎn)生生長激素。已知質(zhì)粒中存在兩個抗性基因:A是抗鏈霉素基因,B是抗氨芐青霉素基因,且目的基因要插入到基因B中,而大腸桿菌不帶有任何抗性基因。下列敘述正確的是()A導入大腸桿菌的質(zhì)粒不一定為重組質(zhì)粒BRNA聚合酶是構(gòu)建該重組質(zhì)粒必需的工具酶C可用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基檢測大腸桿菌中是否導入了重組質(zhì)粒D在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中不能生長,但在含鏈霉素的培養(yǎng)基中能生長的可能是符合生產(chǎn)要求的大腸桿菌三、非選擇題11科學家將擬南芥的抗寒基因(CBFl),轉(zhuǎn)入香蕉以獲得抗寒的香蕉品種。下圖是某質(zhì)粒載體上的Sac、Xba、EcoR、Hind四種限制酶的切割位點示意圖。據(jù)圖回答問題:(1)在該實驗中為構(gòu)建基因表達載體,用Sac、Xba切下CBF1基因后,對質(zhì)粒載體進行切割的限制酶是_,理由是_。(2)連接CBF1基因到該質(zhì)粒載體后,作為基因表達載體的組成還必須有_。將重組質(zhì)粒導入香蕉細胞最常用的方法是_。(3)為了鑒別受體細胞中是否含有CBF1基因,可用含_的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。(4)科學家將生長健壯、苗齡一次的轉(zhuǎn)基因香蕉(實驗組)與非轉(zhuǎn)基因香蕉(對照組)進行_處理,鑒定兩組之間的抗寒性差異,如果_,則說明獲得了抗寒的香蕉優(yōu)質(zhì)品種。12科學家利用基因工程(DNA重組技術(shù))成功培育出一種能夠表達人類乳汁中常見蛋白的轉(zhuǎn)基因水稻,使大米及其制品具有一定的抗菌作用。請回答下列相關(guān)問題:(1)在基因工程中,常用到的工具酶是_、_。(2)利用水稻的成熟葉片為材料,同時構(gòu)建cDNA文庫和基因組文庫,兩個文庫相比,cDNA文庫中含有的基因數(shù)目比基因組文庫中的少,其原因是_。(3)在基因表達載體中,啟動子是_識別并結(jié)合的部位,導入該水稻中的基因表達載體除啟動子和目的基因外,還應(yīng)含有_。若采用原核生物作為基因表達載體的受體細胞,常用的原核生物是_。(4)將目的基因通過基因槍法導入植物細胞時,常用的攜帶目的基因的金屬顆粒有_和_粒子。(5)由轉(zhuǎn)基因水稻生產(chǎn)的相關(guān)大米制品有一定的抗菌作用,是因為制品中含有_。13苦蕎是一種有名的經(jīng)濟植物,其含有的黃酮類化合物具有降血糖、血脂等功效。CHS是合成黃酮類化合物的關(guān)鍵酶。有人把經(jīng)修飾的CHS基因?qū)肟嗍w細胞中,培育高產(chǎn)黃酮苦蕎品系。按圖示回答:(1)過程中將修飾后的CHS基因與Ti質(zhì)粒連接成重組Ti質(zhì)粒的酶稱為_,這種酶主要有兩類,一類是從T4噬菌體中分離得到的,另一類是從大腸桿菌中分離得到的,稱為_。這兩類酶都能恢復被限制酶切開的兩個核苷酸之間的_鍵。(2)圖中將修飾后的CHS基因?qū)肟嗍w體細胞的方法稱為_,除此外還可以利用的方法有_。對過程操作前,需先用Ca2處理農(nóng)桿菌,使其成為_細胞。(3)檢測轉(zhuǎn)基因苦蕎培育是否成功,不能用抗原抗體雜交技術(shù)進行檢測的原因是_,可以比較轉(zhuǎn)基因苦蕎與普通苦蕎的_含量或測定細胞中CHS含量進行鑒定。答案精析1C過程表示通過反轉(zhuǎn)錄法合成目的基因,該過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶,但逆轉(zhuǎn)錄酶不是抗農(nóng)藥馬拉硫磷小菜蛾提供的,A錯誤;過程表示利用PCR技術(shù)對目的基因進行擴增,該過程中解旋是通過高溫解鏈實現(xiàn)的,不需要用解旋酶,B錯誤;過程常用Ca2處理大腸桿菌使其成為易于吸收DNA的感受態(tài)細胞,C正確;過程可利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否已導入受體細胞,D錯誤。2A限制酶用于切割獲取目的基因和運載體,A錯誤;一般用同一種限制酶處理載體與目的基因,形成相同的黏性末端,B正確;基因工程所用的工具酶是限制酶、DNA連接酶,C正確;采用DNA分子雜交的方法檢測帶有目的基因的載體是否進入受體細胞,D正確。3A4D限制酶所識別的是特定的堿基序列,并在特定部位進行切割,不同的限制酶識別不同的核苷酸序列并識別不同的切點,黏性末端不同。但不同的黏性末端有時是可以進行拼接的,只要切下的游離堿基互補即可互補黏合,由圖示可知BamH和Bgl都可切下序列GATC,故末端互補序列GATC,故D正確。5B蛋白質(zhì)工程最終也是通過修飾或改造基因來完成的,A錯誤?;蚬こ毯铣傻氖翘烊坏牡鞍踪|(zhì),而蛋白質(zhì)工程可以合成新的蛋白質(zhì),B正確。基因工程和蛋白質(zhì)工程都是分子水平操作,C錯誤?;蚬こ淌堑鞍踪|(zhì)工程的基礎(chǔ),蛋白質(zhì)工程又稱為第二代基因工程,D錯誤。6B7B圖示過程為基因表達載體的構(gòu)建過程,是基因工程的核心步驟,A項正確;限制酶Sma的識別序列位于目的基因上,因此基因表達載體構(gòu)建時不能用限制酶Sma,而是應(yīng)用限制酶Pst、EcoR,B項錯誤;抗卡那霉素基因?qū)儆跇擞浕?,該基因的存在,有利于將含有抗原基因的細胞篩選出來,C項正確;基因表達載體一般包括目的基因(抗原基因)、標記基因(抗卡那霉素基因)、啟動子和終止子,D項正確。8D表中信息顯示:Hind和Sma這兩種酶的切割位點在識別序列的中間,酶切后形成平末端,其余限制酶的切割位點在識別序列的兩邊,酶切后形成黏性末端,A、B項錯誤;酶具有專一性,不同限制酶切割后形成的黏性末端不同,C項錯誤;由題意“表中Y為C或T,R為A或G”可知,一種限制酶可能識別多種核苷酸序列,D項正確。9AC10AD基因操作過程中,用同一種限制酶分別切割含有生長激素基因的外源DNA分子和質(zhì)粒后會產(chǎn)生相同的黏性末端,黏性末端連接時,目的基因和目的基因、目的基因和質(zhì)粒、質(zhì)粒和質(zhì)粒都可能發(fā)生連接,所以,導入大腸桿菌的質(zhì)粒不一定為重組質(zhì)粒,A項正確;構(gòu)建該重組質(zhì)粒必需的工具酶是限制酶和DNA連接酶,B項錯誤;目的基因插入到基因B中后形成重組質(zhì)粒,其抗氨芐青霉素基因遭到破壞,導入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌對氨芐青霉素不具有抗性,但對鏈霉素仍具有抗性,因此不能用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基檢測大腸桿菌中是否導入了重組質(zhì)粒,C項錯誤;綜上分析,在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中不能生長,但在含鏈霉素的培養(yǎng)基中能生長的可能是符合生產(chǎn)要求的大腸桿菌,D項正確。11(1)Sac、Xba用相同限制酶切割來源不同的DNA后,可產(chǎn)生相同的末端(2)啟動子和終止子農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(3)氨芐青霉素(4)低溫實驗組的抗寒能力明顯高于對照組解析(1)在基因工程中,用相同限制酶切割來源不同的DNA后,可產(chǎn)生相同的末端,所以和目的基因一樣,質(zhì)粒也應(yīng)該用Sac、Xba進行切割。(2)基因表達載體的組成包括啟動子、終止子、標記基因、目的基因等。香蕉細胞是植物細胞,將目的基因?qū)胫参锛毎S棉r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。(3)據(jù)圖分析,質(zhì)粒上的標記基因是氨芐青霉素抗性基因,所以為了鑒別受體細胞中是否含有CBF1基因,可用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。(4)根據(jù)題干信息已知,目的基因是抗寒基因,所以科學家將生長健壯、苗齡一次的轉(zhuǎn)基因香蕉(實驗組)與非轉(zhuǎn)基因香蕉(對照組)進行低溫處理,鑒定兩組之間的抗寒性差異,如果實驗組的抗寒能力明顯高于對照組,則說明獲得了抗寒的香蕉優(yōu)質(zhì)品種。12(1)限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶 (2)cDNA文庫中只含有葉肉細胞已轉(zhuǎn)錄(或已表達)的基因,而基因組文庫中含有該植物的全部基因(3)RNA聚合酶標記基因和終止子大腸桿菌(4)金粉鎢粉(5)溶菌酶(或抗體)解析(1)基因工程中常用到限制酶和DNA連接酶,限制酶是用于切割目的基因和運載體,DNA連接酶是為了將目的基因和運載體連接。(2)cDNA文庫中含有的是部分基因,而基因組文庫含有的是該個體的全部基因,即cDNA文庫中只含有葉肉細胞已轉(zhuǎn)錄(或已表達)的基因,而基因組文庫中含有該植物的全部基因。(3)在基因表達載體中,啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點?;虮磉_載體中除了啟動子和目的基因外還需要有標記基因、終止子。如果采用原核生物作為基因表達載體的受體細胞,常用的原核生物是大腸桿菌。(4)將目的基因通過基因槍法導入植物細胞時,常用的攜帶目的基因的金屬顆粒有金粉和鎢粉粒子兩種。(5)由轉(zhuǎn)基因水稻生產(chǎn)的相關(guān)大米制品有一定的抗菌作用,是因為制品中含有抗菌的物質(zhì)溶菌酶或抗體。13(1)DNA連接酶EcoliDNA連接酶磷酸二酯(2)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法、花粉管通道法感受態(tài)(3)轉(zhuǎn)基因苦蕎植株與普通苦蕎植株都含有黃酮類化合物黃酮類化合物解析(1)過程中將修飾后的CHS基因與Ti質(zhì)粒連接成重組Ti質(zhì)粒需要DNA連接酶。這種酶主要有兩類,一類是從T4噬菌體中分離得到的,稱為T4DNA連接酶,另一類是從大腸桿菌中分離得到的,稱為E.co
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