GB 15983-1995 麻疹診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)麻疹診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則5983一1995of of 華人民共和國(guó)傳染病防治法及中華人民共和國(guó)傳染病防治法實(shí)施辦法制定本標(biāo)準(zhǔn)。主題內(nèi)容與適用范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了麻疹的診斷標(biāo)準(zhǔn)和處理的原則。本標(biāo)準(zhǔn)適用于各級(jí)、各類醫(yī)療、衛(wèi)生、保健機(jī)構(gòu)和人員對(duì)麻疹病人的診斷、報(bào)告和處理的應(yīng)用。2診斷原則麻疹是由麻疹病毒引起的呼吸道傳染病，傳染性強(qiáng)，在麻疹減毒活疫苗普遍應(yīng)用后，不但存在癥狀典型的麻疹，而且存在癥狀不典型的病人，前者可根據(jù)臨床表現(xiàn)結(jié)合流行病學(xué)作出診斷，后者需根據(jù)血清麻疹抗體的檢測(cè)或麻疹病毒的分離陽(yáng)性作出診斷。，38或更高)。結(jié)合膜炎。般于病程第2口腔頰粘膜見(jiàn)到麻疹粘膜斑(續(xù)3天以上呈典型經(jīng)過(guò)。3,2流行病學(xué)史與確診麻疹的病人有接觸史，潛伏期6.，一個(gè)月內(nèi)未接種過(guò)麻疹減毒活疫苗而在血清中查到麻疹恢復(fù)期病人血清中麻疹急性期抗體陰性而恢復(fù)期抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)。錄A)，或檢測(cè)到麻疹病毒核酸。2條。3. 3條。國(guó)家技術(shù)監(jiān)督局1995一12一15批準(zhǔn)1996一07一01實(shí)施5983一19954處理原則病人的隔離與治療發(fā)現(xiàn)疑似或診斷病例，應(yīng)立即隔離，隔離期直至出疹后5天。并發(fā)肺炎者延長(zhǎng)隔離期至出疹后10本天對(duì)病人進(jìn)行對(duì)癥治療和防治并發(fā)癥。對(duì)病人周圍未發(fā)病的易感人群可實(shí)施麻疹減毒活疫苗的應(yīng)急接種，應(yīng)急接種覆蓋面宜廣，實(shí)施時(shí)間要盡早，應(yīng)在接觸病人的3日內(nèi)接種。弱或具有麻疹減毒活疫苗接種禁忌癥者的易感人群，可注射含有高價(jià)麻疹抗體的人丙種(血漿或胎盤)球蛋白制劑作被動(dòng)免疫(附錄B),預(yù)防本病的首要措施。常規(guī)免疫(初免)定為8月齡進(jìn)行，根據(jù)人群對(duì)麻疹免疫力的監(jiān)測(cè)，接種足夠的劑量。5983一1995附錄充件)l. 滅菌棉棒稍蘸液體(2%牛血清反復(fù)涂抹患者咽部數(shù)次，然后將棉棒浸于上述標(biāo)本液(15反復(fù)擠壓，標(biāo)本液中加入10倍常規(guī)用量的青、鏈霉毒(各1 000u/制霉菌素50pg/肝素抗凝的血液白細(xì)胞中也可分離病毒。2接種取0. 12其他原代細(xì)胞如人羊膜、人胚肺、猴腎等或人二倍體細(xì)胞或傳代細(xì)胞如，37C 加人含雙倍常規(guī)抗生素量的細(xì)胞維持液137培養(yǎng)。并設(shè)未接種標(biāo)本的空白對(duì)照培養(yǎng)。3觀察細(xì)胞病變一般7天左右出現(xiàn)融合巨細(xì)胞病變，待細(xì)胞病變占全部細(xì)胞75%以上時(shí)(+)，冰凍融化三次，低速沉淀后取上清液留作毒種。若未見(jiàn)病變需連續(xù)盲傳三代，每次培養(yǎng)觀察二周，如仍不出現(xiàn)病變則為陰性。4毒株鑒定用已知麻疹病毒免疫血清觀察能否與新毒株起作用，傳統(tǒng)采用中和試驗(yàn)法。術(shù)測(cè)定病毒核酸。附錄充件)球”，是一種人工被動(dòng)免疫制劑。目前供應(yīng)的“丙球”有人血漿丙種球蛋白(胎盤丙種球蛋白(種，前者是從健康人的血漿中提取，后者是從健康產(chǎn)婦胎盤血提取。含有高價(jià)麻疹抗體的丙球可用于麻疹被動(dòng)免疫。弱或具有麻疹減毒活疫苗接種禁忌癥者的易感人群。調(diào)接觸后立即注射，注射越早預(yù)防效果越好。接觸后5天內(nèi)采用足量丙球，可達(dá)到不發(fā)病目的;5天后注射只能起到減輕癥狀作用。常用10%人血丙種球蛋白，劑量為。. 2mL/人胎盤血丙種球蛋白，劑量為。. 5mL/5983一1995重，采用肌肉注射其免疫作用一般只能維持24周。附錄考件)麻疹病毒可產(chǎn)生凝集現(xiàn)象。若將抗體與病毒(血凝素)預(yù)先溫育后再加入紅細(xì)胞則不產(chǎn)生凝集，稱為血凝抑制。定量血凝素與不同稀釋度抗體(血清)作用后能完全抑制血凝的最高血清稀釋度，即為抗體效價(jià)。2主要材料底光滑的1. 端分?jǐn)?shù)瓣，瓣間容量應(yīng)精確為。. 025釋棒應(yīng)標(biāo)化后使用。于血清的吸取。3麻疹血凝素的制備態(tài)良好的原代細(xì)胞(人羊膜、猴腎等)、人二倍體細(xì)胞或傳代細(xì)胞(接種病毒劑量根據(jù)病毒滴度而定。原代人羊膜細(xì)胞接種病毒后培育于370C，約在2以新鮮的維持液培養(yǎng)。如此反復(fù)培養(yǎng)數(shù)次收獲上清液，最后一次將細(xì)胞連同培養(yǎng)液置下凍化后，沉淀去細(xì)胞殘?jiān)?，?shù)次收獲的上清液即為血凝素。原代猴腎細(xì)胞、二倍體細(xì)胞及傳代細(xì)胞接種麻疹病毒后，病變發(fā)展較快，待病變達(dá)“+”并有50%病變細(xì)胞脫落時(shí)，將細(xì)胞連同培養(yǎng)液置下反復(fù)凍融三次，低速沉淀后取上清液即為血凝素。血凝素效價(jià)應(yīng)在1:32以上，置一30保存?zhèn)溆谩?1. 入5%吐溫使其最終濃度為。溫振蕩5加入與粗血凝素等量的乙醚(分析純)，用力充分振蕩12后，移入沉淀管內(nèi)以2 心吸出下部水層，將乙醚排盡至無(wú)乙醚味時(shí)為止，即為本試驗(yàn)用之血凝素。加青霉素100u、鏈霉素1004保存。4猴紅細(xì)胞懸液的配制選擇與麻疹血凝素凝集效價(jià)高的猴子，靜脈采血置阿氏(中(阿氏液量為猴紅細(xì)胞的4倍),4般可用二周。用前以生理鹽水洗三次，最后一次經(jīng)2 上清，壓積的猴紅細(xì)胞用生理鹽水配成1%濃度用于試驗(yàn)。5血清處理5983一1995血清分離后取。等量生理鹽水于56水浴30管加入0. 10or/分搖勻后，4過(guò)夜，次日吸取上清液測(cè)定(此時(shí)血清稀釋度為1，2),6. 1效價(jià)滴定血凝板1一10孔各加生理鹽水。. 025第1孔加血凝素。. 025混勻后從第1孔移1滴(0. 025第2孔，如此倍比稀釋至第9孔(1:2512)，第10孔不加血凝素作為紅細(xì)胞對(duì)照。每孔各加1滴(0. 0251猴紅細(xì)胞，振勻后靜置370C 凝達(dá)+十時(shí)的血凝素最高稀釋度為其效價(jià)，即1個(gè)血凝單位。正式試驗(yàn)時(shí)采用2個(gè)單位血凝素。6. 2單位滴定按上述效價(jià)將血凝素稀釋成2u(如血凝素效價(jià)為1:128,稀釋成1:64),lu,l/2u,1/4u，各孔中用生理鹽水倍比稀釋，再加1滴等量的1寫猴紅細(xì)胞，振勻后，置370C 1出現(xiàn)“十+、+、+、十、一”之凝集方能用于試驗(yàn)。2259孔為血清對(duì)照。第1,2及9孔各加1:2處理好的血清。025第2孔開(kāi)始稀釋使血清充分混勻后，再放入下一孔倍比稀釋至第8孔。第19紅細(xì)胞1滴，振勻后置370C 勻后置37 0C 30后每孔加1%猴判定結(jié)果時(shí)應(yīng)先將血凝板傾斜待血清對(duì)照孔內(nèi)的紅細(xì)胞自由下滑呈淚滴狀時(shí)即讀結(jié)果。紅細(xì)胞下滑與對(duì)照相同者為完全抑制。完全抑制的血清最高稀釋度即抗體的效價(jià)。血清對(duì)照不應(yīng)出現(xiàn)凝集否則判斷時(shí)應(yīng)慎重或再吸收。上抗原，根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理，用已知抗原檢測(cè)未知抗體的一種血清學(xué)方法。2試劑(保存于4C，在有效期內(nèi)使用)干制品，加入5%兔血清鹽水輕輕旋搖，使成均勻懸液后即可使用。干制品，加入2. %兔血清鹽水。2. 3麻疹陽(yáng)性參考血清:凍干制品，加人。. 2%兔血清鹽水溶解后為原倍血清。已經(jīng)56滅活，試驗(yàn)前，同待測(cè)血清相同方法經(jīng)醛化血球吸附。000醛化血球(5):用生理鹽水洗3次后，再用鹽水還原至52. 2. 5兔血清:凍干制品，用生理鹽水1為原倍血清。56 0C 3005等量10%醛化血球，370C 夜，上清為1:2倍稀釋血清。清在倍比稀釋，稀釋度從1:2到l:1024，每孔0. 0251%致敏血球0. 025分振搖后，置370C 定結(jié)果，以發(fā)生“+”凝集的最高稀釋度的倒數(shù)為血清的滴度。13設(shè)下列對(duì)照:致敏血球?qū)φ?1%兔血清鹽水+致敏血球，結(jié)果不凝集。5983一1995陽(yáng)性血清對(duì)照:方法同待測(cè)血清。其測(cè)定的效價(jià)，應(yīng)在已知濃度士1個(gè)滴度范圍內(nèi)。待測(cè)血清對(duì)照:1:2稀釋的待測(cè)血清+對(duì)照血球。結(jié)果不凝集。上待檢血清，再用酶標(biāo)抗抗體間接檢出特異性抗體。1聚苯乙烯酶標(biāo)板。2. 4抗人苯二胺及過(guò)氧化氫(1用6碳酸鹽緩沖液稀釋麻疹抗原與未感染麻疹病毒的細(xì)胞抗原(對(duì)照抗原)。1的麻疹抗原與對(duì)照抗原。右下最后一孔不加任何伉原作為空白對(duì)照，4過(guò)夜。05%吐溫板三次，倒去洗液。血清e(cuò) 200,1 : 800,1 e 3 200,1 : 12 800四個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度加麻疹抗原與對(duì)照抗原各1孔(0. 1同)，輕輕振搖后置37C 去洗液后每孔加入以2%牛血清. 1白對(duì)照不加)，置370C 13. 3. 6以N 去洗液后加鄰苯二胺及過(guò)氧化氫(xo,)底物液，每孔。括空白對(duì)照孔)，避光在37時(shí)觀察，待對(duì)照孔開(kāi)始顯淡黃色時(shí)即用2硫酸終止，3. 7用空白對(duì)照孔調(diào)零點(diǎn)，以酶標(biāo)儀(492定各孔光密度(。05計(jì)。凡同一稀釋度下麻疹抗原孔照抗原孔P/N)為陽(yáng)性。陽(yáng)性之最高稀釋