實驗一 顯微鏡構(gòu)造和使用及組織切片的觀察

1、,普 通 動 物 學(xué) 實 驗 （無脊椎動物學(xué)）,一、實驗課的目的要求 通過實驗課教學(xué)驗證、加深理解和鞏固課堂講授所學(xué)知識，熟悉動物學(xué)的基本操作技術(shù)，提高動手能力及觀察分析問題的能力，培養(yǎng)科學(xué)的、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)?、實事求是的學(xué)風(fēng)。 二、實驗室規(guī)則 (一)學(xué)生應(yīng)按規(guī)定時間進入實驗室。保持實驗室安靜，不得進行與實驗無關(guān)的活動。 (二)實驗用的一切工具，在使用前應(yīng)核對清楚，實驗后清洗干凈，查點清楚，原樣放回。 (三)觀察及繪圖務(wù)求精細(xì)準(zhǔn)確，獨立思考，獨立完成。 (四)每次的實驗報告應(yīng)在教師指定時間內(nèi)完成。 (五)實驗結(jié)束，于離開實驗室前，應(yīng)清理好自己的實驗桌，要輪流打掃實驗室，保持整潔。 (六)愛護實驗室的一切

2、物品，避免損壞或浪費。損壞物品時，應(yīng)主動向教師報告。,三、學(xué)生如何進行實驗 (一)每次實驗前應(yīng)仔細(xì)閱讀實驗指導(dǎo)，明確實驗?zāi)康摹嶒瀮?nèi)容和操作步驟。把必需的實驗用品帶到實驗室。 (二)實驗開始時應(yīng)認(rèn)真聽教師的講解。 (三)準(zhǔn)備好實驗用的材料和工具。 (四)嚴(yán)格根據(jù)實驗指導(dǎo)進行工作。實驗的主要目的之一在于培養(yǎng)學(xué)生的獨立工作能力，因此每個學(xué)生在實驗工作中要做到盡量不依賴別人。 (五)在生物學(xué)實驗中繪圖是一項很重要的工作，每個學(xué)生應(yīng)認(rèn)真對待。但繪圖并不是實驗的唯一目的，它只是觀察的記錄。觀察若不精確，繪圖也不可能精確。一般繪圖的時間應(yīng)占實驗時間的一小半左右。大部分時間應(yīng)當(dāng)用于實驗觀察和解剖。,四、繪圖

3、注意事項 (一)繪制科學(xué)的圖應(yīng)以精確為主，因此要求學(xué)生首先要認(rèn)真地觀察標(biāo)本。 (二)只在紙的一面繪圖，鉛筆應(yīng)經(jīng)常保持尖銳，紙面力求整潔。 (三)繪圖的大小應(yīng)適宜，圖的各部分結(jié)構(gòu)必須按要求表示清楚。一般較大的圖每頁繪一個，同一類的小圖可以在一張紙上繪數(shù)個，但應(yīng)在紙上適當(dāng)安排，預(yù)留注解的空地。 (四)繪圖時先把標(biāo)本放在一個適宜的位置，能方便展現(xiàn)出圖中要求表示的各部分。先測量或估量一下標(biāo)本的大小、長短，按照應(yīng)放大或縮小的倍數(shù)用鉛筆先輕輕描在紙上。 (五)先用軟鉛筆(HB)把整體輪廓及主要部分輕輕畫出，如標(biāo)本是兩側(cè)對稱，則應(yīng)先畫一條線垂直經(jīng)過圖的正中，這樣就很容易把兩部分畫得相稱。,(六)根據(jù)草圖添繪

4、各部分的詳細(xì)結(jié)構(gòu)，最后用硬鉛筆(2H或3H)以清晰的筆畫繪出全圖，點線不要重復(fù)描繪。 (七)繪圖紙上所有的字都必須用硬鉛筆以楷書寫出。圖上的注字應(yīng)橫寫，并且最好在兩側(cè)排成豎行，上下盡可能平齊。注字引線盡量水平拉出。圖的標(biāo)題應(yīng)寫在該圖的下面中央。在紙的上面當(dāng)中寫出本實驗的題目，并在紙的右上角寫學(xué)生姓名、座號及實驗日期。 (八)所有的圖都要注釋完全。,五、實驗報告 (一）除繪圖外，實驗報告還包括解答實驗指導(dǎo)中提出的問題和必要的記錄等，并應(yīng)把它寫在筆記本上。實驗指導(dǎo)中的問題是為了啟發(fā)學(xué)生進行思考 (二)實驗報告須用鋼筆或圓珠筆書寫，不宜太密，兩行之間應(yīng)留適當(dāng)空隙，以便教師修改。每次實驗報告及筆記均另

5、起一頁，并寫上實驗指導(dǎo)的號數(shù)及題目。,實驗一顯微鏡構(gòu)造和使用及組織切片的觀察, 顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用 一、 實驗?zāi)康?了解顯微鏡的基本構(gòu)造，初步掌握顯微鏡的使用方法。 二、實驗內(nèi)容: (一)觀察顯微鏡的各部分結(jié)構(gòu)，理解其基本性能。 (二)通過字母片和粉蝶鱗片的觀察，學(xué)習(xí)使用顯微鏡的方法。 (三)初步認(rèn)識幾種類型的顯微鏡。,三、實驗材料和用具:學(xué)生用顯微鏡 載玻片、蓋玻片、字母片、50酒精、粉蝶、毛筆。 顯微鏡是觀察研究細(xì)胞、組織以及原生動物等必需的儀器，由于顯微鏡的發(fā)展日新月異，我們在此仍以簡單的單筒目鏡和雙筒目鏡進行講解。,四、實驗操作及觀察 必須按實驗指導(dǎo)了解顯微鏡的各部分結(jié)構(gòu)、性能及使用方

6、法。切不可脫離實驗指導(dǎo)，擅自扭動各部件，以免損壞儀器。使用顯微鏡作一般觀察主要是學(xué)會調(diào)光線、調(diào)焦點。作顯微照相時，還必須調(diào)中心(調(diào)聚光器中心)。使用高倍鏡時，一定要從低倍鏡開始。用油鏡時要從40X的物鏡開始。將要觀察的標(biāo)本某部分移至視野正中央。在高倍鏡下只能用細(xì)調(diào)焦器調(diào)焦點，不能用粗調(diào)焦器。要開大光闌。 (一)顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)：顯微鏡的中部有一彎曲的柄，稱鏡臂，基部為鏡座。用右手握緊鏡臂，將其自鏡箱(或鏡柜)中取出，左手托住鏡座，保持鏡體直立，輕放于桌上，觀察各部分構(gòu)造。鏡座上的短柱叫鏡柱。鏡座與鏡柱之間有一傾斜關(guān)節(jié)(在較新的顯微鏡無此傾斜關(guān)節(jié))，可使顯微鏡在90角范圍內(nèi)隨意傾斜成任何角度。,

7、在鏡臂基部有一個方形或圓形的平臺，是載物臺(或稱鏡臺)。臺的中央有一圓孔，可通過光線。兩側(cè)有壓片夾，用以固定玻片標(biāo)本?，F(xiàn)代的顯微鏡具鏡臺X-Y驅(qū)動器，用以固定和移動玻片標(biāo)本。在圓孔的下面，有由一片或數(shù)片透鏡所組成的聚光器，有集射光線于物體的作用。聚光器附有一組由金屬片組成的可變光闌，其側(cè)面伸出一杠桿，可前后移動使光闌開閉。光闌開大則光線較強，適于觀察色深的物體；光闌縮小則光線較弱，適于觀察透明(或無色)的物體。在聚光器下方有反光鏡，可將光線反射至聚光器。此鏡一面平，一面凹。凹面具有較強的互光性，多用于光線較暗的情況下；光線較強時用平面鏡即可。內(nèi)光源顯微鏡的光源位于鏡座靠后方，在鏡座右側(cè)有光源按

8、鈕，此按鈕可前后移動，使光闌開閉，用以調(diào)節(jié)光線的強弱。,在載物臺的圓孔上方，有一附于鏡柄上端的圓筒稱為鏡筒，其上下兩端附有鏡頭。兩目鏡筒之間的距離，可按觀察者雙目的距離調(diào)節(jié)。鏡筒上端有接目鏡(或稱目鏡)，可從鏡筒內(nèi)抽出。接目鏡有低倍和高倍之分。在鏡筒下端有可旋轉(zhuǎn)的圓盤叫旋轉(zhuǎn)器，下面附有24個接物鏡(或稱物鏡)以螺旋旋入旋轉(zhuǎn)器內(nèi)。轉(zhuǎn)動旋轉(zhuǎn)器可換用接物鏡。在鏡臂上有兩組螺旋。大的叫粗調(diào)焦器，小的叫細(xì)調(diào)焦器。粗調(diào)焦器升降鏡筒較快，用于低倍鏡調(diào)焦；細(xì)調(diào)焦器升降鏡筒較慢，用于高倍鏡調(diào)焦：接物鏡有低倍和高倍之分。較短的是低倍，一般放大10倍(10X)；較長的是高倍，一般放大40倍(40X)。、油物鏡放大1

9、00倍(100X)。接目鏡也有高低倍之分，較長的是低倍，一般放大10倍。顯微鏡的總放大倍數(shù)是接目鏡的放大倍數(shù)與接物鏡放大倍數(shù)的乘積：例如使用5X接目鏡與10X接物鏡，則總放大倍數(shù)是50倍。使用10X接目鏡與40X接物鏡。則總放大倍數(shù)是400倍。,(二)顯微鏡的使用方法：使鏡臂向著自己(現(xiàn)代顯微鏡使鏡臂反向?qū)χ约?，擺好顯微鏡。轉(zhuǎn)動粗調(diào)焦器，把鏡筒向上提起。轉(zhuǎn)動旋轉(zhuǎn)器，使低倍接物鏡對準(zhǔn)載物臺的圓孔。二者相距約2cm左右，兩眼對著雙筒接目鏡觀察(如為單筒目鏡，則兩眼睜開用左眼看)。打開可變光闌，用手轉(zhuǎn)動反光鏡，使它正對著光源，但不可對直射的陽光：當(dāng)視野(即從鏡內(nèi)看到的圓形部分)呈現(xiàn)一片均勻的白色

10、時即可。如為內(nèi)光源顯微鏡打開光源按鈕，向前向后移動按鈕，調(diào)節(jié)光線的強弱至適宜強度，此為調(diào)光線。 取一拉丁字母裝片放載物臺上，使字母正對中央圓孔。用壓片夾（或XY驅(qū)動器)固定。轉(zhuǎn)動粗調(diào)焦器，使鏡筒下降至低倍接物鏡距裝片5mm左右為度。然后自目鏡觀察，同時轉(zhuǎn)動粗調(diào)焦器，提升鏡筒，至視野內(nèi)的字母清晰為止，此為調(diào)焦點：再以可變光闌調(diào)節(jié)光線至適宜強度。一般現(xiàn)代顯微鏡由粗、細(xì)調(diào)焦器提高或降低鏡臺一鏡臺下聚光器：注意視野內(nèi)看到的字母，上下左右輕輕移動裝片，物像的移動方向如何？思考一下原因。,低倍物鏡觀察畢可轉(zhuǎn)高倍物鏡。首先將要詳細(xì)看的部分移到視野正中央。提升鏡筒，轉(zhuǎn)動旋轉(zhuǎn)盤，換高倍物鏡。從側(cè)面觀察下降鏡筒，

11、使高倍物鏡幾乎接觸玻片1mm左右)為止。再從目鏡觀察，轉(zhuǎn)動細(xì)調(diào)焦器，提升鏡筒，一般旋轉(zhuǎn)半圈至一圈即可出現(xiàn)像(要小心操作，切勿壓破蓋玻片或載玻片)。可將光闌開大，上下調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)焦器，使物象達到最清晰為止?，F(xiàn)代顯微鏡一般在低倍物鏡下調(diào)好焦點后，可直接轉(zhuǎn)換高倍物鏡，注意在高倍物鏡下，視野內(nèi)的字母能看到多大部分?與低倍物鏡所見比較一下：使用高倍物鏡時，一定先從低倍物鏡開始(如上步驟)。準(zhǔn)備詳細(xì)觀察的標(biāo)本部分，要移到視野正中央。在高倍物鏡下調(diào)焦點只能用細(xì)調(diào)焦器，不能用粗調(diào)焦器。光闌要開大。由低倍物鏡轉(zhuǎn)高倍物鏡需多練習(xí)幾次，要初步掌握使用方法。,觀察完畢后，必須先把接物鏡頭轉(zhuǎn)開，然后取出玻片標(biāo)本。每次實驗完

12、畢后，都要把高、低倍接物鏡轉(zhuǎn)向前方，不可使接物鏡正對著聚光器，然后放回鏡箱(或鏡柜)內(nèi)。要注意經(jīng)常保持顯微鏡的清潔。如金屬部分有灰塵時，一定要用清潔的軟布擦干凈。如鏡頭有灰塵時，必須用特備的擦鏡紙輕輕地擦去。切勿用手或其他布、紙等擦拭，以免損壞透鏡。 油物鏡的使用：首先在高倍干物鏡(40X)下調(diào)準(zhǔn)焦點，將要觀察的標(biāo)本某部分移至視野的正中心。然后，轉(zhuǎn)動旋轉(zhuǎn)器移開物鏡，在蓋片上視野中央的位置加一滴鏡頭油(具一定折射率的)，再將油物鏡移至該處，使前透鏡與油滴接觸。開大光闌，即可看到物像，上下稍動細(xì)調(diào)焦器則可看到清晰的物像。用后，將油物鏡移至旁邊，將最低倍物鏡移至玻片標(biāo)本上方，不宜將高倍物鏡(40X)

13、放在此處，以免玷污透鏡。然后，用擦鏡頭紙沾鏡頭清洗液輕輕擦拭透鏡。不宜用二甲苯或相似溶劑擦拭，以免損壞透鏡中的膠合劑。,五、示范 顯微鏡有許多類型和型號，各有其不同的用途。 (一)實體顯微鏡或稱立體顯微鏡 ： (二)暗視野顯微鏡： (三)相差顯微鏡： (四)熒光顯微鏡： (五)倒置顯微鏡： (六)研究用大型的顯微鏡，, 動物的細(xì)胞和組織 一、實驗?zāi)康?(一)了解細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)及有絲分裂各期的特點。 (二)了解動物的4類基本組織的結(jié)構(gòu)和功能。 二、實驗內(nèi)容 (一)細(xì)胞：人口腔上皮細(xì)胞；馬蛔蟲或其他動物細(xì)胞的有絲分裂制片。 (二)上皮組織：復(fù)層扁平上皮。 (三)結(jié)締組織：疏松結(jié)締組織；透明軟骨、蛙

14、的血液裝片： (四)肌肉組織：橫紋肌、平滑肌。 (五)神經(jīng)組織：脊髓的前角細(xì)胞。 三、實驗材料和用具 人口腔上皮、疏松結(jié)締組織及血液組織(活蛙或蟾蜍)、有絲分裂制片、復(fù)層扁平上皮、透明軟骨、平滑肌及神經(jīng)組織4種組織裝片，：幻燈機、載玻片、蓋玻片、解剖器、吸管、吸水紙、牙鑒 、0.1的亞甲藍、07及09的NaCl溶液、蒸餾水。,四、實驗操作及觀察 (一)人口腔上皮細(xì)胞：用牙簽粗的一端，放在自己的口腔內(nèi)頰輕輕刮幾下(注意不要用力過猛，以免損傷頰部)。將刮下的白色粘性物薄而均勻地涂在載玻片上，加一滴09NaCI溶液，然后加蓋玻片，在低倍顯微鏡下觀察?？谇簧掀ぜ?xì)胞，常數(shù)個連在一起。由于口腔上皮細(xì)胞薄而

15、透明，因此光線需要暗些。找到口腔上皮細(xì)胞后將其放在視野中心，再轉(zhuǎn)高倍鏡觀察。口腔上皮細(xì)胞呈扁平多邊形。試辨認(rèn)細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜。若觀察不清楚時，可在蓋片一側(cè)加一滴01的亞甲藍，另一側(cè)放一小塊吸水紙， 如此可使染液流人蓋片下面，將細(xì)胞染成淺藍色。核染色較深。注意染液不可過多，以防礙觀察。 (二)疏松結(jié)締組織：取活蛙或蟾蜍經(jīng)麻醉或處死后。剪開腹部皮膚。用鑷子從皮膚與肌肉層之間取下一小片結(jié)締組織。放在干凈的載玻片上，加一滴07NaCl溶液。用解剖針將其展薄，加數(shù)滴1亞甲基藍。兩分鐘后用0.7NaCl溶液沖去多余染液。加蓋玻片在鏡下觀察?？梢娔z原纖維和彈性纖維均不著色。膠原纖維成束，彎曲成波浪狀；彈性纖維細(xì)而具分枝，不成束，無波浪狀彎曲。結(jié)締組織細(xì)胞不甚規(guī)則，核著色深而清楚，細(xì)胞質(zhì)色淺能辨認(rèn)出細(xì)胞界限。,(三)血液組織： 1解剖蛙或蟾蜍，以吸管從心臟(最好在動脈圓錐處)取出血液，放一小器皿中，加入少許07NaCl溶液稀釋。吸此液一滴，制成臨時裝片，在鏡下觀察。 2蛙的紅細(xì)胞呈扁橢圓形。單個紅細(xì)胞呈極淺的黃色，中央有一較大的橢圓形細(xì)胞核。血細(xì)胞間的五色液體稱為血漿。輕輕地敲擊載片，可看到血細(xì)胞在血漿中轉(zhuǎn)動，注意觀察紅細(xì)胞的側(cè)面是什么形狀。 (四)肌肉組織： 1從保