流感病毒在體內(nèi)的免疫反應過程[22頁]

1、流感病毒在體內(nèi)的免疫反應過程,Outline,一、非特異性免疫應答 二、特異性免疫應答 三、小結 四、免疫反應的驗證,流感病毒的結構,根據(jù)核蛋白和基質(zhì)蛋白的抗原性,流感病毒可以分成甲(A)、乙(B)、丙(C)三種類型,其中甲型流感病毒根據(jù)其表面血凝素(HA)和神經(jīng)氨酸酶(NA)分成許多亞型。,Outline,Company Logo,一、非特異性免疫應答,流感病毒感染的早期，首先引起 防御屏障 吞噬細胞 干擾素 NK細胞 等為主的非特異性免疫,Company Logo,一、非特異性免疫應答,Company Logo,一、非特異性免疫應答,Company Logo,二、特異性免疫應答,細胞免疫應

2、答,Company Logo,二、特異性免疫應答,細胞免疫應答,Company Logo,二、特異性免疫應答,Company Logo,病毒中和抗體: 該抗體能與細胞外游離的病毒結合，封閉其細胞受體結合的病毒抗原表位或改變病毒表面抗原構型，阻止病毒吸附、侵入易感細胞，但不能直接殺滅病毒。 血凝抑制抗體:表面含有血凝素的流感病毒可刺激機體產(chǎn)生血凝抑制抗體，該抗體能中和病毒的感染性。 補體結合抗體: 此類抗體不能中和病毒感染性，但可通過調(diào)理作用增強巨噬細胞的吞噬作用。,二、特異性免疫應答,體液免疫中的抗體：,Company Logo,總之，機體抗流感病毒免疫應答由非特異性免疫應答和特異性免疫應答共

3、同來完成。非特異性免疫先于特異性免疫發(fā)生，主要通過屏障結構、非特異性免疫細胞(吞噬細胞、NK細胞)和體液免疫分子(補體、干擾素)等發(fā)揮抗病毒作用。特異性免疫是建立在非特異性免疫的基礎上，受流感病毒抗原的誘導而發(fā)生。但特異性免疫的作用更強烈、更有效、更具有針對性。主要通過細胞免疫和體液免疫發(fā)揮特異性抗流感病毒作用。,三、小結,Company Logo,流感病毒多種多樣，但只要感染過同一種病毒發(fā)生了感冒，之后再感染同一類病毒時就不會感冒了。這是因為免疫記憶。用同一抗原再次免疫時，可引起比初次更強的抗體產(chǎn)生，稱之為再次免疫應答或免疫記憶，無論在體液免疫或細胞免疫均可發(fā)生免疫記憶現(xiàn)象。在體液免疫時，對

4、TD抗原的再次應答可表現(xiàn)為抗體滴度明顯上升，免疫球蛋白類別可由IgM轉(zhuǎn)換為IgG，而且抗體親和力增強。提示再次應答不僅發(fā)生抗體量的變化，而且也發(fā)生了質(zhì)的變化。實驗證明，免疫記憶的基礎是免疫記憶細胞的產(chǎn)生。,三、小結,Company Logo,（1）IgA的檢測 原理：病毒首先侵襲呼吸道黏膜， 而黏膜表面的分泌性 IgA 可以有選擇的轉(zhuǎn)移到黏膜表面， 能夠結合病毒防止其粘附和進入。因此，只需檢測IgA 的變化即可證實是否為免疫反應。,四、免疫反應的驗證,Company Logo,方法： 將小鼠隨機分 2 組，設病毒組和正常組。 在乙醚輕度麻醉下， 滴鼻感染 15 滴LD 50 流感病毒液，感染后

5、 5 天， 殺剖小鼠， 稱體重和肺重測定肺指數(shù)。采血分離血清， 收集鼻咽沖洗液、 支氣管肺泡灌洗液、 腸道沖洗液進行 ELISA法檢測 IgA 含量。,四、免疫反應的驗證,四、免疫反應的驗證,（2）外周血IL-12水平的檢測 原理：白細胞介素12又稱NK細胞刺激因子(NKSF)。IL-12主要由單核巨唾細胞、NK細胞和B細胞分泌,主要生物學活性有:促進激活的T細胞和NK細胞的增殖;增強Th細胞、NK細胞、LAK細胞及CTL的生物學活性。誘導Tn向Th1分化,并促進Th1的增殖和發(fā)育,與IL - 4共同調(diào)節(jié)Th1/Th2平衡,調(diào)節(jié)機體的免疫應答。,Company Logo,實驗對象： 1、健康對

6、照組：收集XX醫(yī)院健康體檢者20名 2、流感癥狀組：收集XX醫(yī)院明確診斷的流感癥狀患者26名；經(jīng)rRT-PCR方法確定為非甲型HlNl流感病毒感染 3、輕癥甲流組：收集XX醫(yī)院診斷明確甲型H1N1流感病毒感染住院患者29名;經(jīng)rRT-PCR方法確診為甲型 H1N1病毒感染，癥狀較輕 4、重癥甲流組：收集XX醫(yī)院明確診斷甲型H1N1病毒感染住院患者名13名;經(jīng)rRT-PCR方法確定為甲型H1N1病毒感染,并且癥狀較重,四、免疫反應的驗證,實驗過程： 實驗前準備:板條包被 ELASA法測定檢測物濃度,四、免疫反應的驗證,結論：流感病毒感染呼吸道后,通過呼吸器官上皮細胞感染其下方樹突狀細胞和巨唾細胞并且在這些細胞中傳播,樹突狀細胞和巨嗟細胞可以分秘抗病毒的細胞因子例如TNF-、IL-12、IL-18等來協(xié)調(diào)有效的先天免疫反應來對抗病毒。,四、免疫反應的驗證,Company Logo,（3）外周血T淋巴細胞亞群及B、NK細胞百分率的測定 步驟：1. 標本采集及制備 2. 染色及固定細胞 3. 流式細胞儀上T淋巴細胞亞群及B、NK的檢測及分析,四、免疫反應的驗證,結論：正常情況下CD4+T/CD8+T比值維持動態(tài)平衡,保持機體免疫機能穩(wěn)定,是細胞免疫功能