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文檔簡介
1、基因工程原理和技術(shù),DNA重組的基本工具,1 .用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)胰島素的優(yōu)點是什么?2 .為什么人類的基因能嫁接到大腸桿菌?3 .牙齒基因“嫁接”牙齒如何實現(xiàn),“分子手術(shù)刀”,“縫合針”,“分子運鈔車”,原核生物細胞內(nèi)的什么物質(zhì)能破壞外源DNA,不會損傷自己的DNA嗎?識別限制酶(限制性核酸內(nèi)切酶)、雙鏈DNA特定核苷酸序列,在特定位置切斷磷酸二酯鍵,閱讀方向核苷酸鏈5段- 3段,教材5頁相關(guān)內(nèi)容,并編寫EcoRI和SmaI識別的DNA分子序列。EcoR I,EcoR I,Sma I,Sma I,粘性末端,扁平末端,具有相同粘性末端的兩個DNA片段能直接形成一個DNA分子嗎?Ecoli DNA
2、連接酶連接粘性末端,T4DNA連接酶連接粘性末端和末端,案例中P3 3 -2中4茄子其他限制酶切割形成的DNA片段,你能連接DNA鏈接酶嗎?電子顯微鏡質(zhì)粒,宿主無害,在一個或多個限制酶接點上,自我復(fù)制,標記基因,階段(1)根據(jù)以下限制酶信息和胰島素,質(zhì)?;蚪Y(jié)構(gòu)選擇,在相應(yīng)的限制酶,胰島素基因結(jié)構(gòu)和質(zhì)?;蚪Y(jié)構(gòu)的相應(yīng)位置繪制切割部位。組活動:構(gòu)建了含有胰島素基因的重組質(zhì)粒模型。A鏈5 3g A t g A t g A t g A t c t A t c t A g t A g t A g t A g c t A g c t A g t A g t A g t A g t A g t A c g
3、 t A g 3 5 b鏈,BamH I,BamH I,BamH I,Hind III,A鏈,b鏈在準備好的質(zhì)?;蚪Y(jié)構(gòu)紙張模型中,A鏈為綠色熒光筆,B鏈為空。根據(jù)在步驟(1)中選擇的限制酶觸點的位置,在紙張模型上繪制限制酶觸點和氫鍵折斷部分,沿著繪制的線剪切胰島素基因和質(zhì)粒紙張模型。剪切塊的相應(yīng)位置有5段和3段,切口質(zhì)粒,切口胰島素基因,組討論后階段(3):問題1。透明的膠帶連接部位應(yīng)該在哪個位置,所有剪刀切口可以用透明的膠帶連接嗎?問題2。DNA連接酶連接這些DNA片段的末端時,可能會發(fā)生多少茄子連接情況?步驟(3)透明膠帶模擬DNA連接酶拼接。通過分析多段連接狀態(tài),可以連接每個案例。環(huán)連接有多少種?比較一下哪個符合我們的需要。限制酶接觸應(yīng)避免在目的基因中編碼蛋白質(zhì)部分,同時也應(yīng)避免矢量復(fù)制部分和標記基因的結(jié)構(gòu)部分。選擇限制酶:相同的限制酶切
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