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文檔簡介
1、/淋巴瘤免疫分型,1,學(xué)習(xí)交流PPT,應(yīng)用目的: 確定淋巴系病變的起源和分化程度; 鑒別反應(yīng)性與克隆性淋巴細(xì)胞增生性疾??; 確定髓系白血病各亞型; 對形態(tài)學(xué)分類不明細(xì)胞進(jìn)行定性; 診斷急性未分化型白血?。?診斷急性混合細(xì)胞白血??; 診斷微小殘留白血病或白血病浸潤; 判斷白血病/淋巴瘤預(yù)后。,2,學(xué)習(xí)交流PPT,流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cytometry): 對高速流過檢測區(qū)的單個細(xì)胞或生物顆粒進(jìn)行多參數(shù)、快速分析(或分選)的一種技術(shù)。,3,學(xué)習(xí)交流PPT,4,學(xué)習(xí)交流PPT,數(shù)據(jù)顯示方式: 單參數(shù)直方圖 雙參數(shù)二維點圖 等高圖 二維密度圖 三維圖,5,學(xué)習(xí)交流PPT,單參數(shù)直方圖,雙參數(shù)點圖,6
2、,學(xué)習(xí)交流PPT,熒光素,FITC(異硫氰酸熒光素):530nm(綠) PE(藻紅蛋白):575nm(橙黃) PI(碘化丙啶): 620nm(橙紅) PerCP(多甲藻黃素葉綠素蛋白):675nm(深紅) APC(別藻蘭蛋白): 660nm(紅),7,學(xué)習(xí)交流PPT,檢測物: 細(xì)胞表面、胞漿或胞核抗原性物質(zhì),8,學(xué)習(xí)交流PPT,CD(cluster of differentiation):1982年起將識別同一分化抗原的來自不同實驗室的單克隆抗體歸為一個分化群,并進(jìn)行流水編號。一個CD相關(guān)抗體可包含多個克隆號。 其他非CD系列抗原:如TCR、HLA等,9,學(xué)習(xí)交流PPT,正常血細(xì)胞中的抗原表達(dá)
3、特點,1. 系列保守性 2. 時序性 3. 抗原表達(dá)量的模式化,10,學(xué)習(xí)交流PPT,干細(xì)胞,嗜堿性細(xì)胞,嗜酸性細(xì)胞,定向髓系干細(xì)胞,紅系,巨核系,粒單核系,粒系,單核系,CD36 CD71 CD235a,CD41 CD42a/b CD61,CD4 CD11b CD14 CD64 HLA-DR CD36,CD15 CD71 CD16,(TDT CD7) CD34 CD117 CD13 CD33 CD38 MPO,CD34 CD13 CD33 CD117 MPO,11,學(xué)習(xí)交流PPT,抗原刺激,干細(xì)胞,早前B,前B,靜止期B,Pro-B ALL,Pre-B ALL,Common-B ALL,CL
4、L/SLL,免疫母細(xì)胞,漿細(xì)胞樣淋巴細(xì)胞,大B細(xì)胞淋巴瘤,淋巴漿細(xì)胞淋巴瘤,外套細(xì)胞,濾泡區(qū)母細(xì)胞,中心母細(xì)胞,中心細(xì)胞,邊緣帶細(xì)胞,漿細(xì)胞,套細(xì)胞淋巴瘤,伯基特淋巴瘤,大B細(xì)胞淋巴瘤,濾泡淋巴瘤,邊緣帶淋巴瘤,骨髓瘤,TDT+ CD34+ cCD79a+CD19+ CD10 c-,TDT+ CD34+ cCD79a+ CD19+ CD20 CD10+ c-,TDT+ CD34 cCD79a+CD19+ CD20+ CD10 c+,CD5+ CD19+ CD20 CD22+ CD23 + sIg+ FMC7-,CD38 CD138 CD56 cIg CD19- CD45-,CD22+ CD5-
5、CD10- CD23-,CD22+ CD10+ FMC7+ CD23 bcl-2+ CD5-,CD19+ CD20+ CD22+ CD38+ IgM+ sIg+,CD22+ CD10+ sIg+ CD34-TDT-,CD5+ CD22+ sIg+ FMC7+ Cyclin D1+ CD23-,CD22+ bcl-6+ CD10 CD5 CD30 ,12,學(xué)習(xí)交流PPT,干細(xì)胞,胸腺期,胸腺期,TDT+ CD34+ CD2 cCD3 CD7 CD71,TDT+ CD34 CD1a CD2 cCD3 CD7 CD4 CD8,胸腺期,TDT+ CD2 CD3 CD5 CD7 CD4/CD8 TCR,
6、Precursor-T ALL,成熟T細(xì)胞各分化群,13,學(xué)習(xí)交流PPT,造血細(xì)胞在其分化、發(fā)育過程中,細(xì)胞膜、細(xì)胞漿或胞核抗原的有無、表達(dá)強(qiáng)弱與血細(xì)胞的分化發(fā)育階段密切相關(guān),表現(xiàn)出與細(xì)胞系列及其分化程度相關(guān)的特性。,14,學(xué)習(xí)交流PPT,白血病細(xì)胞中的抗原表達(dá)特點,表達(dá)模式基本與相應(yīng)階段正常細(xì)胞相似,還具有以下特點: 1. 跨系表達(dá) 2. 時相混亂 3. 抗原表達(dá)量的改變,15,學(xué)習(xí)交流PPT,免疫分型四種急性白血病,單表型急性白血病 表達(dá)某一個系列抗原為主的急性白血病 雙表型/雙克隆急性白血病 未分化型急性白血病,16,學(xué)習(xí)交流PPT,各系急性白血病重要抗原指標(biāo),1. 急性淋巴細(xì)胞白血病
7、(AL) 敏感性 特異性 B-ALL: CD19 100% 非特異 cCD79a 99% 特異 T-ALL: CD7 100% 非特異 cCD3 100% 特異,17,學(xué)習(xí)交流PPT,2. 急性髓細(xì)胞白血病 (AML) 表達(dá)率 特異性 CD13 70% 非特異 CD33 70% 非特異 CD117 70% 特異 cMPO 70% 特異,18,學(xué)習(xí)交流PPT,錯譯表達(dá)(Ly+AML ,My+ALL ): 白血病細(xì)胞表達(dá)非本系細(xì)胞抗原標(biāo)志物,具有預(yù)后意義。,19,學(xué)習(xí)交流PPT,ALL CD13, CD33t(9;22) AML CD2+, DR-M3 t(15;17),或RAR+,t(11;17
8、) CD2+, DR+M4Eo inv(16)或 t(16;16) CD19+M0t(9:22)多見 M2t(8;21) TdT+, CD7+見于M0 CD56+ M5/M4,20,學(xué)習(xí)交流PPT,雙表型急性白血病記分系統(tǒng),分值 B系 T系 髓系 2 cCD79a cCD3 cMPO CD22 TCR cIgM TCR 1 CD19 CD2 CD117 CD10 CD5 CD13 CD20 CD8 CD33 0.5 TdT TdT CD14 CD24 CD7 CD15 CD64,21,學(xué)習(xí)交流PPT,部分慢性B淋巴細(xì)胞增殖性疾病的免疫表型,注:HCL CD103+ CD25+,22,學(xué)習(xí)交流P
9、PT,部分慢性T淋巴細(xì)胞增殖性疾病的免疫表型,肝脾T細(xì)胞淋巴瘤:CD2+ CD3+ CD7+ TCR+ CD16+/- CD56+/- CD8-/+ CD4- TCR-,23,學(xué)習(xí)交流PPT,標(biāo)本種類:懷疑含有病變細(xì)胞的組織或體液,如外周血、骨髓、胸腹水、腦脊液、淋巴結(jié)等。 標(biāo)本要求:細(xì)胞有活性,最好不要超過48h。,24,學(xué)習(xí)交流PPT,光散射特征與細(xì)胞形態(tài)的關(guān)系,25,學(xué)習(xí)交流PPT,淋巴,單核,粒細(xì)胞,CD45,CD45,M4/M5,M 3,正常,白血病,L13, M02 M6, M7,T,SSC,SSC,MM 非造血 來源細(xì)胞,CD45在免疫分型中的應(yīng)用意義,原始,嗜堿,嗜酸,26,學(xué)習(xí)交流PPT,正常骨髓,27,學(xué)習(xí)交流PPT,AML-M1,AML-M2,AML-M3,AML-M4/M5,28,學(xué)習(xí)交流PPT
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