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文檔簡介

1、實驗室純水系統(tǒng)的技術(shù)與發(fā)展,成立于1954年, 總部位于美國麻省 是一家以生物科學(xué)為主要目標(biāo)市場的的高科技專業(yè)公司 第一家將精密膜過濾技術(shù)投入商業(yè)化應(yīng)用,也是世界上第一臺實驗室超純水系統(tǒng)的制造商 其業(yè)務(wù)分三大塊:實驗室純水、生命科學(xué)、生物制藥 1973: Millipore 推出Milli-Q 超純水系統(tǒng),是世界上第一個實驗室標(biāo)準(zhǔn)水純化系統(tǒng)。 1987: Millipore 在美國紐約證券交易所上市。 1994: Millipore 出售了其 Waters 液相色譜部門,而將濾膜生產(chǎn)作為公司業(yè)務(wù)重點。 密理博公司是標(biāo)準(zhǔn)普爾500指數(shù)的成份股之一,MILLIPORE簡介,水: H2O . 其中還

2、有許多別的東西,雜質(zhì)包括: 顆粒物 氣體 微生物 離子 有機物,水中的雜質(zhì),水中五大污染物質(zhì),顆粒 離子 有機物 微生物 氣體,顆粒,阻塞過濾系統(tǒng) 損壞泵系統(tǒng) 吸附電荷影響離子濃度 折射光線影響判讀 提供細菌滋生載體,離子,水的硬度與結(jié)垢問題 影響溶液PH值 帶電基團與反應(yīng)物結(jié)合 對無機分析產(chǎn)生嚴(yán)重干擾 特殊實驗會產(chǎn)生影響,Na+,Ca2+,Al3+,Mn2+,Fe2+,Pb+,有機物,干擾有機分析的背景 微生物滋生的營養(yǎng)物質(zhì) 包住去離子用的樹脂 兩類特殊有機物 熱原、RNA酶,自然的和人造的,熱原與RNA酶,熱原也稱為內(nèi)毒素 革蘭氏陰性菌細胞壁分泌多糖 刺激免疫系統(tǒng)產(chǎn)生發(fā)熱 高壓滅菌180度

3、 4小時去除 RNA酶主要作用是裂解RNA RNA酶無處不在 對高溫酸堿都有耐受性 可保持活性數(shù)周,細胞培養(yǎng),分子生物學(xué)實驗非常容易受到影響,細菌,活的細胞并有生長繁殖能力 直徑0.27 m 到3.0 m (病毒 0.04 m 到0.1 m) 水源,空氣,人體都帶菌 細菌本身影響生物學(xué)實驗 裂解釋放熱原,酶等多種物質(zhì) 產(chǎn)生菌膜持續(xù)釋放污染物 堵塞儀器通道,Pseudomonas aeruginosa,Streptococcus pyogenes,氣體,影響水的離子濃度和PH值 直接參與反應(yīng) 影響水有效體積 影響光學(xué)測定結(jié)果 損耗儀器,氧氣,氯氣,二氧化碳,氡,純化技術(shù)純化效率,2311BD10

4、,無機物,有機物,細菌,顆粒,反滲透,反滲透技術(shù) (膜孔徑為埃級 10-10m) 可以去除大部分的雜質(zhì) (離子, 有機物, 顆粒物, 膠體, ),離子交換樹脂,固定陰離子 陽離子 聚苯乙烯骨架 交聯(lián)劑 水,Ion-Exchange Resin Bead,Bead diameter: 300 to 1200 m Beads pores: 1 to 100 nm Bead dry weight 40 to 60% T: -40 to + 40C,SEM* of Ion-Exchange Resin Bead,* Scanning Electronic Microscopy,Resin Bead S

5、tructure,Fixed Anion Counter Cation Polystyrene Crosslinking Agent (DiVinylBenzene) Hydrating Water,+,Example: the cation-exchange model,Polystyrene-DVB,DVB,Polystyrene Cross-Linked DivinylBenzene,Ion-Exchange Processes: Mixed Bed,Na+ + Cl-,Ions Removal 99.9 %,Mixed Bed = the anionic and cationic re

6、sins are mixed together in a single cylinder. Ion-exchange process :,紫外光氧化有機分子,有機碳變?yōu)闊o機碳,- 低壓蒸汽汞燈 - 31 cm 長 - 36 V直流電 電子鎮(zhèn)流器,紫外燈對TOC(有機物)的降低效果,UV185/254nm,反滲透水,人工合成活性碳: 去除TOC(有機物),來源:高溫裂解苯乙烯微球 孔徑小,相對均一( 150 ) 表面積 : 1100 m2/g對小分子量的有機物能夠快速吸收 礦物離子溶出極低,建立一個水純化鏈,自來水,各種純化技術(shù)組合 電阻率 18.2 MW.cm TOC 5 ppb,水箱,超純水

7、,純水設(shè)備的水質(zhì)監(jiān)測,水溫、水壓 電阻率、TOC RO膜截留率,兩個重要概念補充,電導(dǎo)率值與電阻率值 -水中的離子含量 總有機碳值(TOC: total organic carbon) -水中可氧化有機物含量,水的電導(dǎo)率值與電阻率值(Conductivity 30/70 methanol/water; pH 4.8,Higher TOC Water Lower TOC Water,對基線的影響,TOC的大小直接影響到液相檢測時的基線水平,LC-MS TIC profile of reagent water sources,Bottled HPLC-grade reagent water ver

8、sus polished water,TOC of bottled and polished reagent waters,Using a Sievers 800 TOC analyzer: off-line sample aspiration,在低檢測波長處容易形成鬼峰,Bottled HPLC-grade reagent water versus newly polished water,對色譜柱的影響,流動相TOC的重要性,最常用的色譜柱 4.6mm200mm C18 進樣量20ul 假設(shè)樣品中TOC為10000ppb 流動相流速通常為1ml/min, 假設(shè)平均50為水相,即流速為500

9、ul/min 假設(shè)我們以TOC為30ppb的水相做流動相 201000050030X X40/3 min 13.3 min,色譜柱使用壽命和TOC的關(guān)系,DNASep,色譜柱,1,2,3,4,5,6,7,用瓶裝HPLC水進樣1950次后,DNASep 色譜柱效,Initial run,用Milli-Q 水進樣 6400 次后,DNASep 色譜柱效,Initial run,總結(jié):TOC值高的水質(zhì)對色譜的影響,溶劑導(dǎo)致的雜峰 峰面積影響 TOC值和LC基線的關(guān)系 包覆色譜介質(zhì),降低柱子使用壽命 分離和檢測精度降低,其他污染物對HPLC的影響,離子:鹽類:損壞泵 細菌:形成菌膜,損壞分離柱 顆粒:

10、損壞泵頭,堵塞系統(tǒng),超純水,“Type I” 一級水 離子含量: 1 ppb (1 g/L) 離子存在于水中 電導(dǎo)率18.2 MW.cm 25 C 有機物: TOC 5 ppb 細菌 1 cfu/mL 顆粒 0.2 m: 1/mL,HPLC我們需要什么水質(zhì)?,Milli-Q Advantage A10,Elix + Tank + Milli-Q Advantage A10,超純水的精細再分級,Regular Lab Applications,Chromatography Applications,Cell Culture Applications,Molecular Biology Appli

11、cations,EDS free water,Milli-pak,Bio-pak,EDS-pak,Type II Water Rinsing & regular application,適應(yīng)現(xiàn)代實驗室多樣化趨勢,VOC-Pak,VOC free water,超純水使用注意事項,1要監(jiān)測超純水的所有指標(biāo)的含量,電阻率指標(biāo)代表了水中的離子含量,需要密切關(guān)注 TOC指標(biāo)代表了水中的有機物指標(biāo),而TOC值和電阻率指標(biāo)的好壞基本關(guān)系不大。,2水即取即用,隨時間變化,超純水水質(zhì)迅速下降 電阻率指標(biāo)下降如圖所示,resistivity (M .cm),10-,20-,4-,0-,20,40,60,80,100,Time (min),3盛水容器(清潔,材質(zhì)好),在玻璃容器中儲存,PE容器,4排掉初期產(chǎn)水的0.5-1L,停止運作24H的初期與排水1L后的HPLC比較,5取水口的管理 (避免添加軟管),添加軟管與直接取水的HPLC比較,6取水環(huán)境(灰塵,顆粒性物質(zhì)),單位: ppt,7避免產(chǎn)生氣泡,超純水使用應(yīng)注意事項,要監(jiān)

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