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1、電解質(zhì)與藥物 對(duì)離體蛙心活動(dòng)的影響,授課教師:林海英,【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?掌握Straub離體蛙心的灌流方法 觀察高鉀、低鈣、高鈣、腎上腺素、乙酰膽堿與酸、堿等對(duì)離體心臟活動(dòng)的影響,蛙心起搏點(diǎn):靜脈竇 蛙心的正常節(jié)律活動(dòng)的維持需要一個(gè)適宜的理化性質(zhì):任氏液 心臟的正?;顒?dòng)有賴于內(nèi)環(huán)境的相對(duì)穩(wěn)定,改變灌流液的成分可引起其活動(dòng)的改變。 心肌生理特性:興奮性、自律性、傳導(dǎo)性、收縮性,【實(shí)驗(yàn)原理】,影響心肌生理特性的主要因素 1. 興奮性:靜息電位與閾電位的差距;Na+通道的性狀 2. 自律性:最大復(fù)極電位與閾電位的差距;4期自動(dòng)去極的速度 3. 傳導(dǎo)性:動(dòng)作電位0期去極的速度和幅度 4. 收縮性:細(xì)胞外鈣
2、離子濃度,對(duì)心肌活動(dòng)的影響: (1)離子:K+、Ca2+ (2)腎上腺素(adr)和乙酰膽堿(ACh) (3)酸和堿:,1.離體蛙心的制備 2.離體蛙心固定 3.加樣及觀察記錄,【實(shí)驗(yàn)方法與步驟】,(1)記錄正常蛙心波動(dòng)曲線(幅度、頻率) (2)更換為無(wú)鈣任氏液(0.65%NaCl ) (3)加2%CaCl2 12滴 (4)加1%KCl 12滴 (5)加1:10000的adr 12滴 (6)加1:100000的ACh 12滴 (7)加2.5%的NaHCO312滴,有變化后加3%的乳酸半滴,待效應(yīng)明顯后,再加12滴2.5NaHCO3,,【注意事項(xiàng)】,1.蛙心插管一定要插入心室,勿用力過(guò)大損傷心肌
3、 2.結(jié)扎靜脈時(shí),要遠(yuǎn)離靜脈竇 3.換能器頭端應(yīng)向下傾斜以免液體進(jìn)入換能器 4. 實(shí)驗(yàn)各項(xiàng)目,一旦出現(xiàn)變化就應(yīng)立即用任氏液換洗(沖洗3次);必須待心功能恢復(fù)正常后方能進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn) 5.蛙心插管液面應(yīng)保持恒定以保證心臟固定的負(fù)荷,6.隨時(shí)滴加任氏液在心臟表面使之保持濕潤(rùn) 7.滴加藥品和換取任氏液須及時(shí)標(biāo)記,以便觀察分析 8.吸任氏液和吸蛙心插管內(nèi)廢液的滴管應(yīng)區(qū)分專用,不可混淆使用,以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果 9.藥物作用不明顯時(shí),可適量增加,密切觀察藥物劑量添加后的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,【注意事項(xiàng)】,【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】,【討論】,1.無(wú)鈣 任氏液,無(wú)鈣任氏液灌流,細(xì)胞外液Ca2+ ,心肌細(xì)胞動(dòng)作電位期間 Ca2+ 內(nèi)流,
4、心肌細(xì)胞胞漿Ca2+ ,心肌收縮力收縮 ,細(xì)胞外液Ca2濃度升高,工作細(xì)胞動(dòng)作電位期間Ca2內(nèi)流增加,肌漿Ca2濃度增加,興奮收縮耦聯(lián)增強(qiáng),心肌收縮力增強(qiáng),2. 3%CaCl2,細(xì)胞外液K濃度升高,3. 1%KCl,如果任氏液中鉀離子濃度明顯增高,蛙心會(huì)處于什么狀態(tài)?,當(dāng)細(xì)胞外顯著高鉀時(shí),細(xì)胞膜內(nèi)外鉀濃度梯度減小,使得靜息電位絕對(duì)值減小至55mv,使得鈉通道失活,從而使心肌細(xì)胞興奮性喪失,心臟可停搏在舒張狀態(tài),(當(dāng)細(xì)胞外輕度高鉀時(shí),膜內(nèi)外K濃度梯度,靜息電位, RP與TP的差,興奮性),心肌細(xì)胞膜1受體結(jié)合,adr,肌漿網(wǎng)對(duì)Ca2通透性,動(dòng)作電位期間 Ca2內(nèi)流性,收縮力,4.腎上腺素(adr),心肌細(xì)胞膜M受體結(jié)合,細(xì)胞膜對(duì)K 通透性增加,自律性降低 心率減慢,細(xì)胞膜對(duì)Ca2通透性下降,動(dòng)作電位期間Ca2內(nèi)流減少,心肌收縮力降低,竇房結(jié)細(xì)胞最大復(fù)極電位絕對(duì)值增大 4期K+外流增加,ACh,抑制鈣通道,5. 乙酰膽堿 (Ach),6.酸和堿,乳酸和2.5%NaHCO3:H+進(jìn)入心肌內(nèi)膜后,可降低鈣離子與肌鈣蛋白的親和力,促使鈣離子的解離,收縮力。 NaHCO3中和了乳酸,解除了鈣離子與肌鈣蛋白親和力的抑制,收
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