結(jié)核分枝桿菌最新檢測技術(shù).ppt

1、a,1,結(jié)核分歧桿菌檢測新技術(shù) 結(jié)核菌分泌蛋白抗原快速檢測,a,2,我國流行概況,是全球22結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國家之一 活動性肺結(jié)核病人數(shù)居世界第二，僅次于印度 是我國重點(diǎn)控制疾病之一 目前估算全國活動性肺結(jié)核病人450多萬，每年新發(fā)傳染性肺結(jié)核患者150多萬 全國約45%的人受過結(jié)核菌的感染，明顯高于全球水平,a,3,2014年全國法定法定傳染病發(fā)病率,a,4,煤礦行業(yè)結(jié)核比率,據(jù)北京京煤集團(tuán)總醫(yī)院結(jié)核病科孔冬青主任調(diào)查，肺結(jié)核科住院治療的611例煤工塵肺合并肺結(jié)核患者，經(jīng)篩查，檢出痰菌陽性223例。即三分之一的人均患有肺結(jié)核。該數(shù)據(jù)逐年遞增。,a,5,危害,a,6,WHO對結(jié)核個案定義,疑似結(jié)核

2、個案 有呈現(xiàn)結(jié)核病征與癥狀（低燒、全身乏力或消瘦、夜間盜汗、女性可導(dǎo)致月經(jīng)不調(diào)或停經(jīng)） 長期咳嗽超過2周 確診結(jié)核個案 結(jié)核菌培養(yǎng)陽性的病人 不能有例行培養(yǎng)結(jié)核菌的國家，痰涂片耐酸染色結(jié)果兩次都呈陽性,亦可考慮為確診病人,a,7,一般臨床結(jié)核檢測方法,1.結(jié)核的常規(guī)檢測 2.Y-干擾素 檢測技術(shù) 3.T-SPOT.TB檢測技術(shù) 4.GeneXpert檢測技術(shù),a,8,1.常規(guī)檢測檢測,a,9,2.Y-干擾素,原理：利用T細(xì)胞對結(jié)核菌的記憶,加入結(jié)核菌抗原,產(chǎn)生干擾素的多寡.判定是否為潛伏感染者.,缺 點(diǎn),檢測標(biāo)本：血液（目前WTO已禁止使用血液標(biāo)本檢測）,收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：500-800元,適用于高危

3、險(xiǎn)人群檢測. 不宜用于普查.,操作復(fù)雜.需要專業(yè)人員及設(shè)備.,a,10,3.T-SPOT.TB（體外酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)）,缺點(diǎn),操作復(fù)雜繁瑣,收費(fèi)價(jià)格：500-800元,三甲大型實(shí)驗(yàn)室操作,a,11,4.GeneXpert檢測技術(shù),原理：分子生物檢測技術(shù),缺點(diǎn),目前普及范圍小,收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：約500元,配合儀器使用，儀器需約100萬元,a,12,檢出率低、費(fèi)用低,檢出率高、費(fèi)用高,費(fèi)用低、檢出率高,a,13,結(jié)核檢測新技術(shù),結(jié)核菌分泌蛋白抗原快速檢測試劑,a,14,結(jié)核菌分泌蛋白抗原快速檢測試劑（膠體金法）,是利用重組基因的技術(shù)制造結(jié)核菌的特異性蛋 白（抗體），純 化后包被吸附于膠體金上，檢測時(shí)，當(dāng)

4、樣品有結(jié)核菌分泌性蛋白時(shí)，先和包被的膠體金標(biāo)記物結(jié)合，產(chǎn)生反應(yīng)。由于層析作用，其反應(yīng)復(fù)合物會沿著硝酸纖維膜向前移動。,原 理,81%,敏感性,85.9%,特異性,a,15,痰液檢測結(jié)核桿菌 染色與TB抗原快速檢測試劑之比較,痰液耐酸性染色,結(jié)核分枝桿菌 +,非結(jié)核分枝桿菌 +,培養(yǎng)確認(rèn),固態(tài)觀看 PCR 全自動化培養(yǎng)儀,結(jié)核分枝桿菌 +,非結(jié)核分枝桿菌 -,痰液(未經(jīng)處理),結(jié)核分枝桿菌+,非結(jié)核分枝桿菌 -,培養(yǎng)確認(rèn),樣品緩衝液,結(jié)核分枝桿菌 +,非結(jié)核分枝桿菌 -,濟(jì)南杏恩 結(jié)核菌檢測試劑盒,濟(jì)南杏恩 結(jié)核菌檢測試劑盒,a,16,結(jié)核菌快速金標(biāo)檢測試劑盒 簡易操作步驟,a,17,a,18,

5、優(yōu)勢,檢測結(jié)核菌分枝桿菌之特異性分泌性抗原 (Secreted specific protein ) 可取代耐酸染色無法區(qū)別分枝(MTB)或非分枝結(jié)核(NTM)桿菌之困擾. 取代現(xiàn)行的非特異性純化蛋白抗原 (PPD, purified protein derivative). 無交叉反應(yīng) ，故也適用于BCG接種的病人或感染非結(jié)核之病人. 高特異性及敏感度.(80%),a,19,可做非肺部結(jié)核病檢驗(yàn) 建立一個快速且精確的檢驗(yàn)方法（5-15分鐘判讀結(jié)果） 廣泛用于一般人群普查（早期診斷，早期治療） 可做為培養(yǎng)確認(rèn)試劑是否為結(jié)核分枝桿菌(MTB)或非結(jié)核分枝桿菌(NTM)之區(qū)別 評價(jià)結(jié)核臨床療效及治療方案 定位：篩查,優(yōu)勢,a,20,注意事項(xiàng),服藥治療的結(jié)核病人, 可能會因?yàn)樗幬镆种频鞍追置? 所以成陰性結(jié)果. 若是藥物治療的結(jié)核病人,進(jìn)行療程中追蹤檢測,成陽性反應(yīng). 應(yīng)考慮可能為抗藥性病患. 對于痰液的檢測, 必須使用未處理的原痰, 加入試劑盒中的樣品緩沖液后方可檢測. 若是使用高濃度及高堿性的 NaOH 軟化痰液, 則將破壞試紙條中的包被抗體和膠體金, 導(dǎo)致錯誤結(jié)果. 試劑盒中的樣品緩沖液可以破壞菌體的蛋白酶, 使菌體失活, 但是不影響試驗(yàn)結(jié)果及檢測.,a,21,膠體金免疫數(shù)字測試卡,a,22,HR201全自動金標(biāo)分析儀,特點(diǎn)