生長(zhǎng)量測(cè)定法微生物基礎(chǔ)17課件VIP

生長(zhǎng)量測(cè)定法微生物基礎(chǔ)研究人員想到了用群體的變化量來間接反應(yīng)群體的生長(zhǎng)繁殖情況。血球計(jì)數(shù)板法平板菌落計(jì)數(shù)法染色計(jì)數(shù)法液體稀釋法測(cè)定微生物細(xì)胞數(shù)量的方法體積測(cè)量法稱干重法比濁法測(cè)定微生物菌體生長(zhǎng)量的方法微生物群體在生長(zhǎng)過程中伴隨著一系列生理指標(biāo)發(fā)生變化酸堿度發(fā)酵液含氮量、含糖量、產(chǎn)氣量測(cè)定含氮量、含糖量、還原糖、氨基氮、ATP、DNA、RNA等，與生長(zhǎng)量平行的生理指標(biāo)，反應(yīng)微生物的生長(zhǎng)情況。一、測(cè)定微生物

細(xì)胞數(shù)量的

方法（一）血球計(jì)數(shù)板法直接計(jì)數(shù)法總菌數(shù)計(jì)數(shù)法

適用于各種含單細(xì)胞菌體的純培養(yǎng)懸浮液，但對(duì)雜菌和雜質(zhì)不易分辯。（一）血球計(jì)數(shù)板法優(yōu)點(diǎn)簡(jiǎn)便直觀快捷缺點(diǎn)只適合個(gè)體較大的微生物，如酵母菌、霉菌的孢子，測(cè)定的結(jié)果是微生物個(gè)體的綜合，不能區(qū)別死活菌。（二）染色計(jì)數(shù)法利用染色劑，使死活細(xì)胞呈現(xiàn)不同顏色，計(jì)數(shù)活細(xì)胞即可（二）染色計(jì)數(shù)法查看酵母菌的活菌數(shù)用美蘭染色液對(duì)菌體進(jìn)行染色后，活細(xì)胞無(wú)色，死細(xì)胞藍(lán)色，在顯微鏡下進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)就可以了。優(yōu)點(diǎn)方便實(shí)用價(jià)格低廉操作簡(jiǎn)單缺點(diǎn)時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則部分活細(xì)胞也會(huì)著色，會(huì)干擾計(jì)數(shù)。（二）染色計(jì)數(shù)法（三）平板菌落計(jì)數(shù)法最常用的活菌計(jì)數(shù)法在高度稀釋條件下每一個(gè)活的單細(xì)胞均能繁殖成一個(gè)菌落，因而可以用培養(yǎng)的方法使每個(gè)活細(xì)胞生長(zhǎng)成一個(gè)單獨(dú)的菌落，并通過長(zhǎng)出的菌落數(shù)去推算菌懸液中的活菌數(shù)，因此菌落數(shù)就是待測(cè)樣品所含的活菌數(shù)。（三）平板菌落計(jì)數(shù)法涂布法傾注法（三）平板菌落計(jì)數(shù)法1.涂布平板法（三）平板菌落計(jì)數(shù)法2.傾注法混菌法混勻法二、測(cè)定微生物

菌體生長(zhǎng)量

的方法體積測(cè)量法菌絲長(zhǎng)度測(cè)量法稱干重法比濁法（一）稱干重法以干重直接衡量微生物群體的生物量；稱干重法往往利用離心或過濾法測(cè)定。（二）過濾法絲狀真菌用濾紙過濾，細(xì)菌用醋酸纖維膜等濾膜過濾，過濾后用少量水洗滌，在40℃下進(jìn)行真空干燥，干燥后稱重。（三）體積測(cè)量法測(cè)菌絲濃度法把待測(cè)培養(yǎng)液放在刻度離心管中作自然沉降或離心，然后觀察其體積取一定量的待測(cè)培養(yǎng)液(如10mL)放在有刻度的離心中，設(shè)定一定的離心時(shí)間(如5min)和轉(zhuǎn)速(如5000r/min),離心后，倒出菌液，測(cè)出上清液體積V，則菌絲濃度為(10-V)/10。（四）比濁法主要用于發(fā)酵工業(yè)菌體生長(zhǎng)監(jiān)測(cè)取一根據(jù)培養(yǎng)液中菌體細(xì)胞數(shù)與渾濁度成正比，與透光度成反比的關(guān)系，利用分光光度計(jì)測(cè)定菌懸液的光密度值（OD值），以O(shè)D值來代表培養(yǎng)液中的濁度即微生物量。（四）比濁法主要用于發(fā)酵工業(yè)菌體生長(zhǎng)監(jiān)測(cè)為了對(duì)某一培養(yǎng)物類的菌體生長(zhǎng)做定時(shí)跟蹤，可采用不必取樣的