枸杞子提取物技術(shù)要求

PAGE4枸杞子提取物技術(shù)要求本技術(shù)要求的編寫格式是按GB/T1.1-2009《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則》的有關(guān)規(guī)定編輯。本技術(shù)要求檢驗(yàn)方法引用了《中華人民共和國藥典》2010年版一部；GB/T5009.11；GB5009.12；GB/T5009.13；GB/T5009.15；GB/T5009.17；GB/T5009.19等國家標(biāo)準(zhǔn)，以保證檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。本技術(shù)要求的附錄A、附錄B均為規(guī)范性附錄。1范圍本技術(shù)要求適用于以茄科植物寧夏枸杞LyciumbarbarumL.的干燥成熟果實(shí)為原料經(jīng)加工制成的提取物。2規(guī)范性引用文件本技術(shù)要求中引用的文件對(duì)于本技術(shù)要求的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本技術(shù)要求。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本技術(shù)要求。GB/T5009.11食品中總砷及無機(jī)砷的測(cè)定GB5009.12食品中鉛的測(cè)定GB/T5009.13食品中銅的測(cè)定GB/T5009.15食品中鎘的測(cè)定GB/T5009.17食品中總汞及有機(jī)汞的測(cè)定GB/T5009.19食品中有機(jī)氯農(nóng)藥多組分殘留量的測(cè)定GB4789.2食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測(cè)定GB4789.3食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群測(cè)定GB4789.4食品衛(wèi)生徽生物學(xué)檢驗(yàn)沙門氏菌檢驗(yàn)GB4789.5食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)志賀氏菌檢驗(yàn)GB4789.10食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)GB4789.11食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)溶血性鏈球菌檢驗(yàn)GB4789.15食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)《中華人民共和國藥典》2010年版一部3技術(shù)要求3.1制法取枸杞子，粉碎成粗粉，加15倍量的80%乙醇為提取溶劑，加熱回流提取2小時(shí)，濾過；再以水為提取溶劑，加熱回流提取兩次，每次2小時(shí)，第一次加10倍量，第二次加8倍量，濾過，合并三次濾液，濾液于50℃減壓濃縮至稠膏狀，50℃3.2感官要求：應(yīng)符合表1規(guī)定。表1感官要求項(xiàng)目要求色澤棕黃色至棕黑色、色澤均勻。滋味及氣味具有本品應(yīng)有的氣味、味甜。性狀干燥均勻的粉末。雜質(zhì)無肉眼可見雜質(zhì)。3.3功效成分：應(yīng)符合表2規(guī)定。表2功效成分項(xiàng)目指標(biāo)枸杞多糖（以葡萄糖（C6H12O6）計(jì)）（以干燥品計(jì)）/%≥3.6總黃酮（以蘆?。–27H30O16）計(jì)）（以干燥品計(jì)）/%≥3.03.4理化指標(biāo)：應(yīng)符合表3規(guī)定。表3理化指標(biāo)項(xiàng)目指標(biāo)薄層鑒別應(yīng)符合規(guī)定干燥失重/%≤5.0熾灼殘?jiān)?%≤5.0鉛（以Pb計(jì)）/(mg/kg)≤2.0鎘（以Cd計(jì)）/(mg/kg)≤0.3砷（以As計(jì)）/(mg/kg)≤2.04.4.2大腸菌群：按GB4789.3《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群測(cè)定》規(guī)定的方法測(cè)定。4.4.3霉菌和酵母菌：按GB4789.15《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)》規(guī)定的方法測(cè)定。4.4.4沙門氏菌：按GB4789.4《食品衛(wèi)生徽生物學(xué)檢驗(yàn)沙門氏菌檢驗(yàn)》規(guī)定的方法測(cè)定。4.4.5志賀氏菌：按GB4789.5《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)志賀氏菌檢驗(yàn)》規(guī)定的方法測(cè)定。4.4.6金黃色葡萄球菌：按GB4789.10《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)》規(guī)定的方法測(cè)定。4.4.7溶血性鏈球菌：按GB4789.11《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)溶血性鏈球菌檢驗(yàn)》規(guī)定的方法測(cè)定。5貯藏密封，置涼暗干燥處。附錄A(規(guī)范性附錄)功效成分-枸杞多糖的檢驗(yàn)A.1原理用80%乙醇作溶劑，超聲溶解除去單糖、低聚糖等雜質(zhì)，得枸杞多糖沉淀物。枸杞多糖成分在濃硫酸的作用下，水解成單糖，并迅速脫水生成糠醛衍生物，與苯酚縮合成有色化合物，采用分光光度法測(cè)定其含量。A.2試劑A.2.1水：純化水。A.2.2乙醇：分析純。A.2.3苯酚：分析純。A.2.4硫酸：分析純。A.2.5無水葡萄糖（C6H12O6）對(duì)照品：由中國藥品生物制品檢定所提供。A.3儀器紫外分光光度計(jì)。超聲波清洗器。A.4分析步驟A.4.1溶液的制備A.4.1.1對(duì)照品溶液的制備取無水葡萄糖對(duì)照品10mg，精密稱定，A.4.1.2供試品溶液的制備取本品約60mg，精密稱定，置250ml具塞錐形瓶中，加入80%乙醇100ml，超聲處理30分鐘，濾過，用80%乙醇30ml分次洗滌錐形瓶與濾渣、濾器，棄去濾液，濾渣連同濾紙置100ml錐形瓶中，加熱水約60ml，振搖，超聲處理30分鐘，濾過，并用適量水洗滌錐形瓶與濾器，合并濾液，濾液置100ml量瓶中，A.4.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密量取對(duì)照品溶液0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml，分別置具塞試管中，分別加水補(bǔ)至2.0ml（對(duì)照品濃度分別為10、20、30、40、50μg/ml），各精密加入5%苯酚溶液1ml，搖勻，迅速精密加入硫酸5ml，搖勻，放置10分鐘，置40℃水浴中保溫15分鐘，取出，迅速冷卻至室溫，以相應(yīng)的試劑為空白，照紫外-可見分光光度法（中國藥典2010年版一部附錄A.4.3樣品測(cè)定精密量取供試品溶液2ml，置具塞試管中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下的方法，自“各精密加入5%苯酚溶液1ml”起，依法測(cè)定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中含葡萄糖的濃度，計(jì)算，即得。本品按干燥品計(jì)算，含枸杞多糖以葡萄糖（C6H12O6）計(jì)，不得少于3.6%。A.4.4C×100×100X=W×（1-M）×1000式中：X－試樣中枸杞多糖的含量，%；C－從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得供試品溶液中葡萄糖的濃度，μg/ml；W－取樣量，mg；M－干燥失重，%。計(jì)算結(jié)果保留至小數(shù)點(diǎn)后一位。A.4.5同一樣品兩次測(cè)定，相對(duì)平均偏差不得超過5.0%。附錄B(規(guī)范性附錄)功效成分-總黃酮的檢驗(yàn)B.1原理在中性或弱堿性及亞硝酸鈉存在條件下,黃酮類化合物與鋁鹽生成螯合物,加入氫氧化鈉試液后顯紅橙色,在500nm波長處有吸收,以蘆丁為對(duì)照，進(jìn)行定量測(cè)定.B.2試劑B.2.1水：純化水。B.2.2乙醇：分析純。B.2.3亞硝酸鈉：分析純。B.2.4硝酸鋁：分析純。B.2.5氫氧化鈉：分析純。B.2.6氫氧化鈉試液：取氫氧化鈉4.3g，加水溶解成100ml，即得。B.2.7蘆丁由中國藥品生物制品檢定所提供。B.3儀器紫外分光光度計(jì)。超聲波清洗器。B.4分析步驟B.4.1溶液的制備對(duì)照品溶液的制備取蘆丁對(duì)照品20mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加60%乙醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取25ml，置50ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得（每1ml中含蘆丁0.2mg）。供試品溶液的制備取本品約0.25g，精密稱定，置25ml量瓶中，加水5ml,振搖使溶解，再加入60%乙醇至刻度，超聲處理30min，搖勻，過濾，即得。B.4.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密量取對(duì)照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml，分別置25ml量瓶中，各加30%乙醇至6ml，加5%亞硝酸鈉溶液1ml，混勻，放置6分鐘，再加10%硝酸鋁溶液1ml，搖勻，放置6分鐘，加氫氧化鈉試液10ml,再加30%乙醇至刻度，搖勻，放置15分鐘，以相應(yīng)試劑為空白，照紫外-可見分光光度法（中國藥典2010年版一部附錄ⅤA），在500nm的波長處測(cè)定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，對(duì)照品溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。B.4.3樣品測(cè)定精密量取供試品溶液2ml，置25ml量瓶中，加30%乙醇至6ml，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的方法，自“加5%亞硝酸鈉溶液1ml”起，依法測(cè)定吸光度，同時(shí)取供試品溶液2ml,除不加氫氧化鈉試液外，其余同上操作，作為空白，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中含蘆丁的濃度，計(jì)算，即得。本品按干燥品計(jì)算，含總黃酮以蘆丁（C27H30O16）計(jì)，不得少于3.0%。B.4.4計(jì)算