《土壤 三氯殺螨醇的測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜法》（征求意見稿）

1T/CQEEMA10-2025土壤三氯殺螨醇的測(cè)定氣相色譜-質(zhì)譜法警告：試驗(yàn)中所用有機(jī)溶劑和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)為有毒有害物質(zhì)，標(biāo)準(zhǔn)溶液配制及樣品前處理過程應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行；操作時(shí)應(yīng)按規(guī)定佩戴防護(hù)器具，避免直接接觸皮膚和衣物。1適用范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測(cè)定土壤中三氯殺螨醇的氣相色譜-質(zhì)譜法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于土壤中2種三氯殺螨醇的測(cè)定，目標(biāo)物包括：2,4’-三氯殺螨醇和4,4’-三氯殺螨醇。取樣量為10.0g，試樣定容體積為1.0ml，進(jìn)樣體積為1.0μl時(shí)，采用選擇離子掃描方式測(cè)定，2,4’-三氯殺螨醇和4,4’-三氯殺螨醇的方法檢出限均為0.02mg/kg，測(cè)定下限均為0.08mg/kg。詳見附錄A。當(dāng)通過前期環(huán)境信息調(diào)查，生產(chǎn)或使用過2,4’-二氯二苯甲酮和4,4’-二氯二苯甲酮的污染土壤地塊不適用于本標(biāo)準(zhǔn)。2規(guī)范性引用文件本標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容引用了下列文件或其中的條款。凡是不注明日期的引用標(biāo)準(zhǔn)，僅注日期的版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。凡是未注日期的引用標(biāo)準(zhǔn)，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標(biāo)準(zhǔn)。其他文件被新文件廢止、修改、修訂的，新文件適用于本標(biāo)準(zhǔn)。HJ/T166土壤環(huán)境監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范HJ613土壤干物質(zhì)和水分的測(cè)定重量法HJ783土壤和沉積物有機(jī)物的提取加壓流體萃取法3方法原理土壤中的三氯殺螨醇采用加壓流體萃取方式提取，濃縮后提取液經(jīng)氫氧化鉀溶液堿解將三氯殺螨醇轉(zhuǎn)化為二氯二苯甲酮，再凈化、濃縮、定容后經(jīng)氣相色譜分離、質(zhì)譜檢測(cè)。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)質(zhì)譜圖、保留時(shí)間、碎片離子質(zhì)荷比及其豐度定性。內(nèi)標(biāo)法定量。4試劑和材料除非另有說明，分析時(shí)均使用符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的分析純?cè)噭?shí)驗(yàn)用水為新制備的超純水或蒸餾水。4.1丙酮（C3H6O）：農(nóng)殘級(jí)。4.2正己烷（C6H14）：農(nóng)殘級(jí)。4.3無水乙醇（C2H5OH）：優(yōu)級(jí)純。4.4氫氧化鉀（KOH）：優(yōu)級(jí)純。4.5二氯甲烷（CH2Cl2）：農(nóng)殘級(jí)。T/CQEEMA10-202524.6硝酸：ρ（HNO3）=1.42g/ml，優(yōu)級(jí)純。4.7硝酸溶液：1+1。用優(yōu)級(jí)純硝酸（4.6）與實(shí)驗(yàn)用水按1:1體積比混合配置。4.8無水硫酸鈉（Na2SO4）：優(yōu)級(jí)純。在馬弗爐中400℃下灼燒4h，待冷卻至室溫后裝入磨口玻璃瓶中，置于干燥器中保存。。4.9氫氧化鉀溶液（10mol/L）：稱取56.1g氫氧化鉀，溶于100ml蒸餾水中。4.10硫酸鈉溶液（20g/L）：20g無水硫酸鈉（4.8）溶于1000ml蒸餾水中。4.11正己烷-丙酮混合溶劑I：1+1。用正己烷（4.2）和丙酮（4.1）按1:1體積比混合。4.12正己烷-丙酮混合溶劑II：9+1。用正己烷（4.2）和丙酮（4.1）按9:1體積比混合。4.13二氯甲烷-丙酮混合溶劑：1+1。用二氯甲烷（4.5）和丙酮（4.1）按1:1體積比混合。4.14三氯殺螨醇標(biāo)準(zhǔn)貯備液：ρ=1000mg/L~5000mg/L，市售有證標(biāo)準(zhǔn)溶液。4.15三氯殺螨醇標(biāo)準(zhǔn)中間液：ρ=50mg/L。用正己烷-丙酮混合溶劑I（4.11）對(duì)三氯殺螨醇標(biāo)準(zhǔn)貯備液（4.14）稀釋配置，并混勻。4.16內(nèi)標(biāo)貯備液：ρ=1000mg/L。選用五氯硝基苯作內(nèi)標(biāo)。市售有證標(biāo)準(zhǔn)溶液。亦可選用其他化合物做內(nèi)標(biāo)。4.17內(nèi)標(biāo)中間液：ρ=50mg/L。量取1.0ml內(nèi)標(biāo)貯備液（4.16）于10ml容量瓶中，用正己烷-丙酮混合溶劑I（4.11）稀釋至標(biāo)線，混勻。4.18替代物貯備液：ρ=1000mg/L，市售有證標(biāo)準(zhǔn)溶液。宜選用2,4,5,6-四氯間二甲苯。4.19替代物中間液：ρ=50mg/L。用正己烷-丙酮混合溶劑I（4.11）對(duì)替代物標(biāo)準(zhǔn)貯備液（4.18）稀釋配置，并混勻。4.20十氟三苯基膦（DFTPP）溶液：ρ=50mg/L，市售標(biāo)準(zhǔn)溶液。4.21弗羅里硅土凈化小柱：1000mg，柱體積為6~10ml。4.22石英砂：150μm~830μm（20目~100目）。在馬弗爐中400℃下灼燒4h，冷卻至室溫后密封保存。4.23硅藻土：150μm~250μm（20目~100目）。在馬弗爐中400℃下灼燒4h，待冷卻至室溫后裝入磨口玻璃瓶中，置于干燥器中保存。4.24玻璃棉或玻璃纖維濾膜：使用前用二氯甲烷-丙酮混合溶劑（4.13）浸洗，待溶劑揮發(fā)干后，貯于具塞磨口玻璃瓶中密封保存。4.25銅粉（Cu）：純度為99.5%。使用前用硝酸溶液（4.7）去除銅粉表面的氧化物，用實(shí)驗(yàn)室用水沖洗除酸，再用丙酮（4.1）清洗，然后用高純氮?dú)猓?.26）吹干待用，每次臨用前處理，保持銅粉表面光亮。4.26高純氮?dú)猓杭兌葹?9.999%。4.27載氣：高純氦氣，純度為99.999%。T/CQEEMA10-202535儀器和設(shè)備5.1采樣容器：具塞磨口棕色玻璃瓶。5.2氣相色譜/質(zhì)譜儀：電子轟擊（EI）電離源。5.3色譜柱：石英毛細(xì)管柱，長(zhǎng)30m，內(nèi)徑0.25mm，膜厚0.25μm，固定相為5%-苯基-甲基聚硅氧烷，或其他等效的毛細(xì)管色譜柱。5.4提取裝置：加壓流體萃取儀或其他性能相當(dāng)?shù)脑O(shè)備。5.5濃縮裝置：氮吹儀或其他同等性能的設(shè)備。5.6真空冷凍干燥儀：空載真空度達(dá)13Pa以下。5.7固相萃取裝置。5.8離心機(jī)：轉(zhuǎn)速3000r/min以上。5.9渦旋混勻器。5.10樣品篩：不銹鋼材質(zhì)，孔徑為250μm（60目）。5.11一般實(shí)驗(yàn)室常用儀器和設(shè)備。6樣品6.1樣品的采集與保存按照HJ/T166的相關(guān)要求采集和保存土壤樣品。采樣量不少于500g。樣品采集后，置于采樣容器（5.1）中，密封、避光、4℃以下冷藏保存，10d內(nèi)完成提取。若堿解后提取液不能及時(shí)分析，可在4℃以下避光保存40d。6.2樣品的制備除去樣品中的異物（枝棒、葉片、石子等自然陰干或冷凍干燥后，研磨、均質(zhì)、過樣品篩（5.10）。6.3干物質(zhì)的測(cè)定按照HJ613測(cè)定土壤樣品干物質(zhì)含量。6.4試樣的制備6.4.1提取提取方法選擇加壓流體萃取，按照HJ783執(zhí)行。以正己烷-丙酮混合溶劑（1:1）為提取溶劑，參考以下參考條件或加壓流體萃取提取一般方法進(jìn)行。循環(huán)次數(shù)：2次。提取壓力：1500psi。靜態(tài)提取時(shí)間：5min。池體積：60%。氮?dú)獯祾邥r(shí)間：60s。4注1：如果上述提取液存在明顯水分，需要進(jìn)一步過濾和脫水。在玻璃漏斗上墊一層玻璃棉或玻璃纖維濾膜（4.24），加入約5g無水硫酸鈉（4.8），將提取液過濾至濃縮器皿中。再用少量正己烷-丙酮混合溶劑I（4.11）洗滌提取容器3次，洗滌液并入漏斗中過濾，最后再用少量正己烷-丙酮混合溶劑I（4.11）沖洗漏斗，全部收集至濃縮器皿中，待濃縮。注2：若通過驗(yàn)證并達(dá)到本標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量控制要求，亦可采用其他提取方式。6.4.2濃縮濃縮方法使用氮吹濃縮。在室溫條件下，開啟氮?dú)庵寥軇┍砻嬗袣饬鞑▌?dòng)（避免形成氣渦），用正己烷（4.2）多次洗滌氮吹過程中已露出的濃縮器管壁，濃縮至約2ml，待堿解。6.4.3堿解在上述試管中依次加入0.5ml無水乙醇（4.3）和1ml的氫氧化鉀溶液（4.9），渦旋混勻5min，在3000r/min下離心5min。移取正己烷相于試管中，用1ml硫酸鈉溶液（4.10）洗滌一次，棄去水相。6.4.4凈化堿解后的提取液（6.4.3）采用弗羅里硅土凈化小柱（4.21）凈化。操作步驟如下：將弗羅里硅土凈化小柱（4.21）固定在固相萃取裝置（5.5）上，添加適量無水硫酸鈉（4.8），用4ml正己烷（4.2）淋洗凈化小柱，再加入5ml正己烷（4.2）待柱充滿后關(guān)閉流速控制閥浸潤(rùn)5min，緩慢打開控制閥，繼續(xù)加入5ml正己烷（4.2），在填料暴露于空氣之前，關(guān)閉控制閥，棄去流出液。將濃縮液（6.4.3）轉(zhuǎn)移至小柱中，用2ml正己烷-丙酮混合溶劑II（4.12）分次洗滌濃縮器皿，洗液全部轉(zhuǎn)入小柱中（若需脫硫，需將此溶液浸沒在銅粉（4.25）中約5min）。加入3ml正己烷-丙酮混合溶劑II（4.12）進(jìn)行洗脫，緩慢打開控制閥待洗脫液浸滿凈化柱后關(guān)閉控制閥，浸潤(rùn)2min，緩緩打開控制閥，繼續(xù)加入3ml正己烷-丙酮混合溶劑II（4.12），并收集全部洗脫液，待濃縮。6.4.5濃縮、加內(nèi)標(biāo)凈化后的試液（6.4.4）再次按照氮吹濃縮的步驟進(jìn)行濃縮，加入適量?jī)?nèi)標(biāo)中間液（4.17），并用正己烷-丙酮混合溶劑I（4.11）定容至1.0ml，混勻后，待測(cè)。6.5空白試樣的制備用石英砂（4.22）代替樣品，按照與試樣的制備（6.4）相同的步驟制備實(shí)驗(yàn)室空白試樣。57分析步驟7.1儀器參考條件7.1.1氣相色譜參考條件進(jìn)樣口溫度：280℃,不分流。進(jìn)樣量：1.0μl，柱流量：1.0ml/min（恒流）。柱溫：初始溫度40℃,保持2min；以10℃/min速率升至90℃,保持2min；以25℃/min速率升至180℃；以5℃/min速率升至280℃,保持5min；以5℃/min速率升至290℃,保持5min。7.1.2質(zhì)譜參考條件電子轟擊源：EI。離子源溫度：300℃。離子化能量：70eV。傳輸線溫度：280℃。四級(jí)桿溫度：150℃。掃描模式：選擇離子模式（SIM）。7.2校準(zhǔn)7.2.1質(zhì)譜性能檢查每次分析前，應(yīng)進(jìn)行質(zhì)譜自動(dòng)調(diào)諧，再將氣相色譜和質(zhì)譜儀設(shè)定至分析方法要求的儀器條件，并處于待機(jī)狀態(tài)，通過氣相色譜進(jìn)樣口直接注入1.0μl十氟三苯基膦（DFTPP）（4.20），得到十氟三苯基膦質(zhì)譜圖，其質(zhì)量碎片的離子豐度應(yīng)全部符合表1中的要求。否則須清洗質(zhì)譜儀離子源。表1十氟三苯基膦（DFTPP）關(guān)鍵離子及離子豐度評(píng)價(jià)7.2.2校準(zhǔn)系列的配制取5個(gè)10ml試管，預(yù)先加入1.0ml正己烷溶劑（4.2），分別量取適量的三氯殺螨醇標(biāo)準(zhǔn)中間液（4.15）、內(nèi)標(biāo)中間液（4.17）、替代物中間液（4.19），配制成至少5個(gè)濃度點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)系列，三氯殺螨醇和替代物的質(zhì)量濃度均分別為0.5μg/ml、1.0μg/ml、2.0μg/ml、4.0μg/ml、8.0μg/ml，內(nèi)標(biāo)質(zhì)量濃度均為2.0μg/ml。按照6.4.3的步驟進(jìn)行堿解，堿解后使用適T/CQEEMA10-20256量無水硫酸鈉（4.8）脫水，最后用正己烷-丙酮混合溶劑I（4.11）定容至1.0ml。也可根據(jù)儀器靈敏度或樣品中目標(biāo)物濃度配制成其他氣相色譜-質(zhì)譜儀適合濃度水平的標(biāo)準(zhǔn)系列。7.2.3標(biāo)準(zhǔn)系列的測(cè)定按照儀器參考條件（7.1），由低濃度到高濃度依次進(jìn)樣分析。目標(biāo)化合物、內(nèi)標(biāo)物和替代物的總離子色譜圖見圖1。1.2,4,5,6-四氯間二甲苯（替代物）；2.五氯）；酮圖1三氯殺螨醇標(biāo)準(zhǔn)樣品堿解物、內(nèi)標(biāo)物和替代物的總離子色譜圖7.3試樣的測(cè)定按照與校準(zhǔn)曲線繪制相同的儀器分析條件（7.1）測(cè)定待測(cè)的試樣（6.4.5）。7.4空白試驗(yàn)按照與試樣測(cè)定相同的儀器分析條件（7.1）測(cè)定空白試樣（6.5）。8結(jié)果計(jì)算與表示8.1定性分析以選擇離子掃描方式采集數(shù)據(jù)，以目標(biāo)化合物相對(duì)保留時(shí)間（RRT）、輔助離子和目標(biāo)離子豐度比（Q）定性。樣品中目標(biāo)化合物的相對(duì)保留時(shí)間與最新標(biāo)準(zhǔn)曲線該化合物的平均相對(duì)保留時(shí)間（-R--）的差值應(yīng)≤±0.06。目標(biāo)化合物的輔助定性離子應(yīng)在樣品中存在。樣品中目標(biāo)化合物的輔助離子和目標(biāo)離子豐度比（Q樣品）與標(biāo)準(zhǔn)曲線目標(biāo)化合物的輔助離子和目標(biāo)離子豐度比（Q標(biāo)準(zhǔn)）的相對(duì)偏差應(yīng)在-30%～30%之間。目標(biāo)化合物的相對(duì)保留時(shí)間（RRT）按公式（1）計(jì)算T/CQEEMA10-20257（1）式中：RRT——目標(biāo)化合物的相對(duì)保留時(shí)間；RTC——目標(biāo)化合物的保留時(shí)間，min；RTIS——該化合物對(duì)應(yīng)內(nèi)標(biāo)物的保留時(shí)間，min。標(biāo)準(zhǔn)曲線中該目標(biāo)化合物所有濃度點(diǎn)相對(duì)保留時(shí)間的平均值（-R--）按公式（2）計(jì)算。（2）式中：-R--——標(biāo)準(zhǔn)曲線中該目標(biāo)化合物所有濃度點(diǎn)相對(duì)保留時(shí)間的平均值；RRTi——標(biāo)準(zhǔn)曲線中第i個(gè)濃度點(diǎn)該目標(biāo)化合物的相對(duì)保留時(shí)間；n——標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度點(diǎn)個(gè)數(shù)。輔助離子和目標(biāo)離子豐度比（Q）按公式（3）計(jì)算（3）式中：Q——輔助離子和目標(biāo)離子豐度比，%；Aa——輔助離子峰面積；At——目標(biāo)離子峰面積。8.2定量分析在對(duì)目標(biāo)物定性判斷的基礎(chǔ)上，根據(jù)三氯殺螨醇?jí)A解產(chǎn)物定量離子的峰面積，采用內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量。當(dāng)樣品中目標(biāo)化合物堿解產(chǎn)物的定量離子有干擾時(shí)，可使用輔助離子定量。定量離子、輔助離子參見附錄B。8.3結(jié)果計(jì)算8.3.1平均相對(duì)響應(yīng)因子（RRF）的計(jì)算校準(zhǔn)系列第i點(diǎn)中目標(biāo)化合物的相對(duì)響應(yīng)因子（RRFi按照公式（4）計(jì)算。RRFi=（4）式中：RRFi——校準(zhǔn)曲線系列中第i點(diǎn)目標(biāo)化合物的相對(duì)響應(yīng)因子；Ai——校準(zhǔn)曲線系列中第i點(diǎn)目標(biāo)化合物定量離子的峰面積；AISi——校準(zhǔn)曲線系列中第i點(diǎn)與目標(biāo)化合物相對(duì)應(yīng)內(nèi)標(biāo)定量離子的峰面積；ρISi——校準(zhǔn)曲線系列中內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量濃度，μg/ml；ρi——校準(zhǔn)曲線系列中第i點(diǎn)目標(biāo)化合物的質(zhì)量濃度，μg/ml。T/CQEEMA10-20258校準(zhǔn)曲線系列中目標(biāo)化合物的平均相對(duì)響應(yīng)因子-R--，按照公式（5）計(jì)算。（5）式中：-R--——校準(zhǔn)曲線系列中目標(biāo)化合物的平均相對(duì)響應(yīng)因子，無量綱；RRFi——校準(zhǔn)曲線準(zhǔn)系列中第i點(diǎn)目標(biāo)化合物的相對(duì)響應(yīng)因子，無量綱；n——校準(zhǔn)曲線系列點(diǎn)數(shù)。8.3.2土壤樣品的結(jié)果計(jì)算土壤樣品中的目標(biāo)化合物含量ω（mg/kg），按照公式（6）進(jìn)行計(jì)算。（6）式中：ω——樣品中的目標(biāo)物含量，mg/kg；Ax——試樣中目標(biāo)化合物堿解產(chǎn)物定量離子的峰面積；AIS——試樣中內(nèi)標(biāo)化合物定量離子的峰面積；ρIS——試樣中內(nèi)標(biāo)的濃度，μg/ml；-R--——校準(zhǔn)曲線系列中目標(biāo)化合物的平均相對(duì)響應(yīng)因子；Vx——試樣萃取液堿解后濃縮定容體積，ml；m——樣品的稱取量，g；Wdm——樣品干物質(zhì)含量，%。8.4結(jié)果表示測(cè)定結(jié)果小數(shù)點(diǎn)后位數(shù)與方法檢出限保持一致，最多保留3位有效數(shù)字。9準(zhǔn)確度9.1精密度6家實(shí)驗(yàn)室分別對(duì)加標(biāo)濃度為0.10mg/kg、0.40mg/kg和0.70mg/kg的空白樣品進(jìn)行了6次重復(fù)測(cè)定：實(shí)驗(yàn)室內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為2.9%~9.5%、1.3%~8.7%和1.8%~3.3%；實(shí)驗(yàn)室間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為9.0%~10.2%、10.9%~13.8%和8.3%~9.8%；重復(fù)性限分別為0.013mg/kg~0.014mg/kg、0.052mg/kg~0.060mg/kg和0.042mg/kg~0.057mg/kg；再現(xiàn)性限分別為0.026mg/kg~0.027mg/kg、0.12mg/kg~0.14mg/kg和0.16mg/kg~0.18mg/kg。6家實(shí)驗(yàn)室分別對(duì)加標(biāo)濃度為0.10mg/kg、0.40mg/kg和0.70mg/kg的土壤樣品進(jìn)行了6次重復(fù)測(cè)定：實(shí)驗(yàn)室內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為2.0%~6.0%、0.9%~3.5%和0.9%~4.5%；實(shí)驗(yàn)室間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為9.8%~12.3%、8.4%~13.1%和6.5%~6.8%；重復(fù)性限分別為0.0091mg/kg~0.010mg/kg、0.022mg/kg~0.025mg/kg和0.048mg/kg~0.050mg/kg；再現(xiàn)性限分別為0.024mg/kg~0.031mg/kg、0.093mg/kg~0.14mg/kg和0.14mg/kg。9精密度結(jié)果統(tǒng)計(jì)參見附錄C中的表C.1。9.2正確度6家實(shí)驗(yàn)室分別對(duì)加標(biāo)濃度為0.10mg/kg、0.40mg/kg和0.70mg/kg的空白樣品進(jìn)行了6次重復(fù)測(cè)定：加標(biāo)回收率范圍分別為74.1%~100%、71.8%~102%和81.3%~103%，加標(biāo)回收率最終值分別為83.8%±16%~86.3%±17%、85.4%±18%~92.5%±24%和95.2%±16%~103%±14%。6家實(shí)驗(yàn)室分別對(duì)加標(biāo)濃度為0.10mg/kg、0.40mg/kg和0.70mg/kg的土壤樣品進(jìn)行了6次重復(fù)測(cè)定：加標(biāo)回收率范圍分別為71.0%~97.8%、79.8%~113%和94.9%~113%，加標(biāo)回收率最終值分別為84.0%±21%~88.2%±16%、88.2%±24%~96.7%±16%和93.6%±18%~102%±13%。正確度結(jié)果統(tǒng)計(jì)參見附錄C中的表C.2。10質(zhì)量保證和質(zhì)量控制10.1空白實(shí)驗(yàn)每20個(gè)樣品或每批次(≤20個(gè)）應(yīng)至少分析1個(gè)實(shí)驗(yàn)室空白試樣，測(cè)試結(jié)果中的目標(biāo)化合物濃度應(yīng)低于方法檢出限。否則，應(yīng)檢查試劑空白、儀器系統(tǒng)以及前處理過程。10.2校準(zhǔn)曲線校準(zhǔn)曲線中目標(biāo)化合物相對(duì)響應(yīng)因子的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)小于或等于20%。否則，說明進(jìn)樣口或色譜柱存在干擾，應(yīng)進(jìn)行必要的維護(hù)。連續(xù)分析時(shí)，每24h分析一次校準(zhǔn)曲線中間濃度點(diǎn)，其測(cè)定結(jié)果與理論濃度值相對(duì)誤差應(yīng)在±20%內(nèi)。否則，須重新繪