微生物實驗課件實驗四培養(yǎng)基的使用特點和微生物接種方法

微生物實驗課件實驗四培養(yǎng)基的使用特點和微生物接種方法實驗?zāi)康门c要求強調(diào)無菌操作概念,掌握無菌操作技術(shù)掌握微生物移植、純化得基本方法了解不同微生物在同一培養(yǎng)基上得培養(yǎng)特征,及同一微生物在不同培養(yǎng)基上得培養(yǎng)特征掌握幾種常用得鑒別、選擇培養(yǎng)基得使用了解顯微測微尺得構(gòu)造;掌握應(yīng)用顯微測微尺測量微生物細胞大小得方法與技術(shù)微生物培養(yǎng)Culture:在一定得條件下培養(yǎng)、繁殖得到得微生物群體混合培養(yǎng)物:含有多種微生物得培養(yǎng)物;純培養(yǎng)物:只有一種微生物得培養(yǎng)物;Pureculture通常情況下只有純培養(yǎng)物才能提供可以重復(fù)得結(jié)果純培養(yǎng)技術(shù)就是進行微生物學研究得基礎(chǔ)！一、用固體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)培養(yǎng)基:液體培養(yǎng)基;固體培養(yǎng)基;1、5%-2、5%半固體培養(yǎng)基;0、2%-0、75%瓊脂一、用固體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)菌落(colony):

單個(或聚集在一起得一團)微生物在適宜得固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長、繁殖到一定程度可以形成肉眼可見得、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)得子細胞生長群體眾多菌落連成一片菌苔(lawn)無菌操作:火焰附近(酒精燈、煤氣燈)進行

不同微生物在特定培養(yǎng)基上生長形成得菌落或菌苔一般都具有穩(wěn)定得特征(形狀、顏色等),可以成為對該微生物進行分類、鑒定得重要依據(jù)菌落得描述:形態(tài)、表面和邊緣特征同一細菌在不同得培養(yǎng)平板上形成不同得特征菌落一、用固體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)使微生物在固體培養(yǎng)基平板上形成單個菌落得基本方法:1、稀釋倒平板法2、涂布平板法3、平板劃線法4、厭氧微生物得分離大家學習辛苦了，還是要堅持繼續(xù)保持安靜一、用固體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)1、稀釋倒平板法2、涂布平板法操作較麻煩,對好氧菌、熱敏感菌效果不好！使用較多得常規(guī)方法,但有時涂布不均勻！利用L棒進行涂布3、平板劃線法3、平板劃線法二、選擇培養(yǎng)分離

抑制大多數(shù)其她微生物得生長;

使待分離得微生物生長更快;對微生物群落中數(shù)量占少數(shù)得微生物得分離純化沒有一種培養(yǎng)基或一種培養(yǎng)條件能夠滿足自然界中一切生物

生長得要求,在一定程度上所有得培養(yǎng)基都就是選擇性得。三、選擇培養(yǎng)分離1、利用選擇平板進行直接分離待分離得微生物生長,其她微生物得生長被抑制

高溫下培養(yǎng):分離嗜熱細菌;

培養(yǎng)基中不含N:分離固氮菌;

培養(yǎng)基加抗生素:分離抗性菌;1、利用選擇平板進行直接分離

顏色反應(yīng):分離特定得菌株;

牛奶平板:分離蛋白酶產(chǎn)生菌;待分離得微生物得生長特征明顯不同于其她微生物常用得選擇培養(yǎng)基沙門菌常用得培養(yǎng)基:亞硫酸鉍瓊脂平板(BS):含有煌綠、檸檬酸鉍銨、亞硫酸鈉、硫酸亞鐵,具有強選擇性,分離沙門氏菌HE(Heetoen):檸檬酸鐵銨、去氧膽酸鹽、硫代硫酸鈉、麝香草酚藍和復(fù)紅,分離腸道致病菌麥康凱培養(yǎng)基乳糖、膽鹽,弱選擇性,中性紅,分離腸道致病菌中性紅指示劑pH感應(yīng)范圍6、8(紅色)到8、0(黃色)分解乳糖產(chǎn)酸,菌落顏色呈紅色沙門氏菌、志賀氏菌不分解乳糖,菌落顏色與培養(yǎng)基相同膽鹽有助于沙門氏菌得生長,抑制其她細菌大腸桿菌？沙門氏菌？常用得選擇培養(yǎng)基克氏雙糖鐵蛋白胨;牛肉膏;酵母膏;乳糖;葡萄糖;氯化鈉;檸檬酸鐵銨;硫代硫酸鈉;瓊脂;酚紅為指示劑,黃色為產(chǎn)酸,紅色為產(chǎn)堿觀察克氏雙糖接種后斜面、底層產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、產(chǎn)H2S得情況,大腸桿菌斜面？沙門氏菌斜面？接種劃線菌種:大腸桿菌、沙門菌、青霉采用無菌操作進行移植學會分區(qū)劃線所有平皿和試管必須有標記18－24小時(真菌下周觀察)觀察試驗結(jié)果,描述固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)得細菌培養(yǎng)特征步驟兩個人為一組,一個接種大腸桿菌,一個接種沙門菌LB液體移植普通瓊脂:分區(qū)劃線麥康凱:分區(qū)劃線LB半固體培養(yǎng)基:穿刺接種克氏雙糖:先穿刺后接種斜面真菌(青霉)接種沙保勞氏培養(yǎng)基微生物大小測量原理微生物細胞得大小就是其形態(tài)特征之一,也就是鑒定得依據(jù)之一。在研究工作中有時要測定顯微鏡下微生物細胞得大小,使用工具為顯微測微尺。顯微測微尺有鏡臺測微尺和目鏡測微尺。目鏡測微尺就是一塊可放在目鏡內(nèi)得園形玻片。在玻片中央把5mm長度,刻成100等分得小格,其目鏡測微尺經(jīng)過鏡筒光學系統(tǒng)后,其每格尺寸隨鏡筒長度變化而變化,也隨放大倍數(shù)而變化,因此必須選定顯微鏡及放大倍數(shù)。然后用已知長度得鏡臺測微尺