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DB51/T1536—2012水稻抗白葉枯病性鑒定技術(shù)規(guī)程I 2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語和定義 4試劑和材料 5儀器用具與設(shè)施 26試驗(yàn)地選擇 2 9接種 2 11抗性分級標(biāo)準(zhǔn) 12殘留物處理 DB51/XXXXX—2012本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則進(jìn)行編寫。本標(biāo)準(zhǔn)由四川省農(nóng)業(yè)廳提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)由四川省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局批準(zhǔn)。本規(guī)范起草單位:四川省農(nóng)科院植保所四川省農(nóng)業(yè)廳植保站四川省農(nóng)業(yè)廳種子站四川省納溪植保植檢站本規(guī)范主要起草人:盧代華王勝何芳王劍葉慧麗胡容平姚琳龔學(xué)書柳光富1DB51/XXXXX-2012水稻抗白葉枯病性鑒定技術(shù)規(guī)程1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了水稻抗白葉枯病性鑒定技術(shù)規(guī)程。本規(guī)范適用于四川省水稻品種或材料對白葉枯病的抗性鑒定及抗性評價。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB6959植物保護(hù)機(jī)械名詞術(shù)語GB/T8321農(nóng)藥合理使用標(biāo)準(zhǔn)ISBN/S1676農(nóng)作物抗病蟲性鑒定方法3術(shù)語和定義本標(biāo)準(zhǔn)采用下列術(shù)語定義。用人工繁殖或收集的病原物,仿照自然情況,創(chuàng)造發(fā)病條件,按一定量接種,根據(jù)接種對象抗性表現(xiàn)和發(fā)病程度確定品種抗性強(qiáng)弱。本標(biāo)準(zhǔn)中特指用于人工接種鑒定用的白葉枯病菌(Xanthomonasoryzaepv.oryzae)細(xì)菌懸浮液,其濃度約為3×10?cfu/ml菌液。本標(biāo)準(zhǔn)中特指用手術(shù)剪刀蘸菌液剪去水稻植株葉片頂部大約2cm長的接種方法,剪刀每浸一次菌液可剪葉片5片。4試劑和材料試劑和材料:Ca(NO?)?—蛋白胨——蔗糖2DB51/XXXXX—2012——瓊脂——尿素——脅本哲氏馬鈴薯半合成培養(yǎng)基(每1000L培養(yǎng)基中含馬鈴薯200.0g、NaH?PO?2.0g、Ca(NO?)?0.5g、蛋白胨5.0g、蔗糖15.0g、瓊脂20.0g)5儀器用具與設(shè)施常用儀器及用具:試管———培養(yǎng)皿——超凈工作臺——冰箱——生化培養(yǎng)箱——干熱滅菌箱——接種針生物顯微鏡——手術(shù)剪刀專用抗性鑒定圃:隔離大棚溫室,其內(nèi)配50cm深、160cm寬的水泥池,。選擇符合檢疫性有害生物實(shí)驗(yàn)要求、隔離條件好的專用抗性鑒定圃作為試驗(yàn)地。于28℃下培養(yǎng)48~72h后,用無菌水洗下菌苔,并配制成3×10?cfu/ml的細(xì)菌懸浮液作為接種體。參鑒品種經(jīng)浸種、催芽,選取發(fā)芽良好的種子按照正常季節(jié)播種育秧,秧齡期25~30d。每個品種移栽1行,每行10叢,株行距16.2cm×20cm。采用隨機(jī)區(qū)組排列,重復(fù)3次。每隔10個品種種植抗病和感病品種各1行作為對照,供試品種周圍種植感病品種。鑒定圃施肥水平高于一般大田生產(chǎn),并及時防治蟲害和紋枯病,農(nóng)藥使用應(yīng)遵循GB/T8321農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則。9接種在水稻孕穗期,用剪葉法接種。每品種用手術(shù)剪刀蘸菌液剪去稻株葉片頂部約2cm,每株接劍葉,每叢剪接菌5張葉片,配好的菌液在2~3h內(nèi)用完。發(fā)病后用竹竿(前端系上60cm長粗棕繩)在早晨露水3DB51/XXXXX-2012未干時連續(xù)4~5d往返趕動稻株頂部。10調(diào)查接種21d后病情發(fā)展比較穩(wěn)定時對接種的葉片進(jìn)行調(diào)查。每個重復(fù)隨機(jī)調(diào)查接種葉30片,根據(jù)記載標(biāo)準(zhǔn)用直尺量取發(fā)病葉片的長度或葉片發(fā)病的面積。11抗性分級標(biāo)準(zhǔn)對每個品種調(diào)查30片葉的調(diào)查結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì),計(jì)算平均值,當(dāng)感病對照品種達(dá)到7-9級感病程度時,判定接種鑒定試驗(yàn)有效,然后根據(jù)表1對各品種進(jìn)行抗性定級。表1水稻對白葉枯病抗性評價標(biāo)準(zhǔn)病級抗性反應(yīng)抗性評價0級病斑面積小于5%,或病斑長度縱向擴(kuò)展小于1cm高抗(HR)1級病斑面積占葉面積5.1%~12%,或病斑長度1.1~3cm3級病斑面積占葉面積12.1%~25%,或病斑長度3.1~5cm中抗(MR)5級病斑面積占葉面積25.1%~50%,或病斑長度5.1~12cm中感(MS)7級病斑面積占葉
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