漁業(yè)水體中撲草凈殘留量的測定

1DB!FORMTEXT21/T丄!FORMTEXTXXXX丄—!FORMTEXTXXXX丄漁業(yè)水體中撲草凈殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法本文件規(guī)定了液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定漁業(yè)水體中撲草凈殘留量的原理、試劑和材料、儀器和設(shè)備、測定步驟、空白試驗、定量限、準確度和精密度。本文件適用于漁業(yè)水體中撲草凈殘留量的測定。本文件的定量限為5.0ng/L。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法HJ493水質(zhì)樣品的保存和管理技術(shù)規(guī)定3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4原理水樣中的撲草凈用固相萃取柱富集、凈化、洗脫，用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測，內(nèi)標法定量。5試劑和材料除非另作說明，本方法所用試劑均為分析純，試驗用水為符合GB/T6682規(guī)定的一級水。5.1乙腈：色譜純。5.2甲醇：色譜純。5.3水-乙腈混合溶液：水+乙腈（95+5，體積比）。5.4微孔濾膜：孔徑0.22μm，水系。5.5撲草凈標準品(Prometryn,C10H19N5S,CAS號,7287-19-6)：純度≥98%。5.6氘代撲草凈(d6-撲草凈）內(nèi)標標準溶液：濃度100μg/mL。2DB!FORMTEXT21/T丄!FORMTEXTXXXX丄—!FORMTEXTXXXX丄5.7撲草凈標準儲備液（100μg/mL）：準確稱取10mg（精確至0.1mg）撲草凈標準品（5.5），用甲醇（5.2）溶解并定容至100mL，配置成100μg/mL的撲草凈標準儲備液，-18℃避光保存，有效期6個月。5.8標準中間液5.8.1撲草凈標準中間液（1.0μg/mL準確量取1.0mL室溫下的撲草凈標準儲備液（5.7）于100mL容量瓶中，用甲醇（5.2）定容至刻度，配制成1.0μg/mL的撲草凈標準中間液，4℃避光保存，有效期3周。5.8.2氘代撲草凈(d6-撲草凈）標準中間液（1.0μg/mL準確量取1.0mL室溫下的氘代撲草凈標準儲備液（5.6）于100mL容量瓶中，用甲醇（5.2）定容至刻度，配制成1.0μg/mL的氘代撲草凈(d6-撲草凈）標準中間液，4℃避光保存，有效期3周。5.9標準工作液5.9.1撲草凈標準工作液（0.05μg/mL準確量取0.5mL室溫下的撲草凈標準中間液（5.8.1）于10mL容量瓶中，用水-乙腈混合液（5.3）定容至刻度，配制成0.05μg/mL的撲草凈標準工作液，現(xiàn)配現(xiàn)用。5.9.2氘代撲草凈(d6-撲草凈）標準工作液（0.05μg/mL準確量取0.5mL室溫下的氘代撲草凈(d6-撲草凈）標準中間液（5.8.2）于10mL容量瓶中，用水-乙腈混合液（5.3）定容至刻度，配制成0.05μg/mL的氘代撲草凈(d6-撲草凈）標準工作液，現(xiàn)配現(xiàn)用。5.10固相萃取柱：HLB，3mL/60mg，或相當?shù)膬艋?儀器和設(shè)備6.1高效液相色譜-三重四級桿串聯(lián)質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源（ESI）。6.2電子天平：感量0.01mg。6.3氮氣吹干儀：可控溫。6.4高速冷凍離心機：最高轉(zhuǎn)速不低于12000r/min。6.5固相萃取裝置。6.6漩渦振蕩器。6.7超聲波清洗器。7測定步驟7.1試樣的采集與保存將現(xiàn)場采集水樣裝入潔凈的棕色具塞玻璃瓶中，按HJ493規(guī)定條件保存。7.2樣品前處理3DB!FORMTEXT21/T丄!FORMTEXTXXXX丄—!FORMTEXTXXXX丄先后用5mL甲醇和5mL一級水對HLB固相萃取柱進行活化，流速均為6mL/min。取200mL水樣，加入40μL氘代撲草凈(d6-撲草凈）標準工作液（5.9.2搖勻，微孔濾膜抽濾備用。準確吸取100mL上述水樣，以6mL/min的流速通過活化好的HLB固相萃取柱，棄去流出液，用5mL一級水以6mL/min的流速潤洗固相萃取柱，再以25mL/min的流速注入20mL空氣對固相萃取柱進行干燥。干燥后用8mL甲醇以6mL/min的流速洗脫，收集洗脫液，氮氣吹干，用水-乙腈混合液（5.3）定容至1.0mL，經(jīng)高速冷凍離心機以12000r/min的速度離心15分鐘后，取上清液過微孔濾膜待測。7.3測定條件7.3.1液相色譜條件液相色譜條件如下：a)色譜柱：C18柱，50mm×2.1mm，1.7μm，或其他等效柱。b)柱溫：40℃。c)進樣量：0.5μL。梯度洗脫流動相參見表1。表1梯度洗脫流動相7.3.2質(zhì)譜條件質(zhì)譜條件如下：a)離子源：電噴霧離子源（ESI）。b)掃描方式：正離子模式。c)檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）。d)離子源溫度：150℃。e)脫溶劑氣溫度：550℃。f)脫溶劑氣流量：1000L/Hr。g)碰撞氣（氬氣）流量：0.15mL/min。h)毛細管電壓：1.00kV。監(jiān)測離子對及碰撞能量見表2。表2監(jiān)測離子對及碰撞能量4DB!FORMTEXT21/T丄!FORMTEXTXXXX丄—!FORMTEXTXXXX丄7.4定性測定樣品中撲草凈和氘代撲草凈（d6-撲草凈）的保留時間之比，與標準溶液中對應(yīng)的時間之比，偏差在±2.5%之內(nèi)；且樣品中定性離子和定量離子的相對豐度比，與濃度接近的標準溶液相比，若偏差不超過表3規(guī)定的范圍，則可判定為樣品中存在撲草凈。表3定性確證時相對離子豐度的最大允許偏差>50%>20%至50%>10%至20%±20%±25%±30%±50%7.5定量測定在儀器正常工作條件下，對標準工作溶液進樣，以標準溶液中撲草凈峰面積和氘代撲草凈（d6-撲草凈）峰面積的比值為縱坐標，標準溶液中撲草凈濃度與氘代撲草凈（d6-撲草凈）濃度的比值為橫坐標，繪制標準工作曲線，用標準工作曲線對樣品進行定量，樣品溶液中撲草凈的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器測定的線性范圍內(nèi)（0.25ng/mL～10ng/mL）。內(nèi)標法定量。撲草凈和氘代撲草凈（d6-撲草凈）的標準物質(zhì)的多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）色譜圖參見附錄A。7.6結(jié)果計算樣品中撲草凈的含量按式（1）計算，結(jié)果需扣除空白值。式中：X——樣品中撲草凈的含量，單位為納克每升（ng/L）；cs——標準上機液中撲草凈質(zhì)量濃度，單位為納克每毫升（ng/mLci——水樣中氘代撲草凈質(zhì)量濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）；csi——標準上機液中氘代撲草凈質(zhì)量濃度，單位為納克每毫升（ng/mLA——水樣中撲草凈峰面積；Asi——標準上機液中氘代撲草凈峰面積；As——標準上機液中撲草凈峰面積；Ai——水樣中氘代撲草凈峰面積；V2——最終定容體積，單位為毫升（mLV1——過柱水樣體積，單位為升（L）。7.7結(jié)果表示平行測定結(jié)果用算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。8空白試驗除不加試樣外，均按上述測定條件和步驟進行。9定量限、準確度和精密度5DB!FORMTEXT21/T丄!FORMTEX9.1定量限水樣中撲草凈的定量限為5.0ng/L。9.2準確度水樣中撲草凈的添加濃度為5.0ng/L～50ng/L時，加標回收率為70%～120%。9.3精密度本方法的批內(nèi)相對標準偏差小于10%，批間相對標準偏差小于15%。6DB!FORMTEXT21/T