自身免疫性疾病及其免疫檢測檢驗系

2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院1

自身免疫性疾病及其免疫檢測第二十三章2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院2第一節(jié)常見自身免疫性疾病簡介第二節(jié)常用自身抗體檢驗項目及臨床意義第三節(jié)自身抗體檢測的常用方法及檢測流程第四節(jié)自身免疫性疾病相關(guān)的其它檢驗項目及其臨床意義2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院3患者郝××，女，18歲，學(xué)生，海灘上太陽光暴曬4天后，臉頰及鼻梁處出現(xiàn)大片紅斑。一月來晨起時雙側(cè)指關(guān)節(jié)及髖關(guān)節(jié)有僵硬感，但隨白天時間而有所減輕。體檢：體溫36.8℃，脈搏80次/分，呼吸18次/分，BP100/70mmHg。一般狀況良好。臉頰及鼻梁處見大片紅斑，表面有鱗屑。指、趾關(guān)節(jié)輕度腫脹。

2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院4實驗室檢查：血液一般檢查：RBC4.2×1012/L，Hgb130g/L，HCT0.41；WBC6.8×109/L；PLT220×109/L，血沉46mm/1小時末。

免疫學(xué)檢查：血清ANA1﹕1280陽性，抗dsDNA抗體1﹕320陽性，抗心磷指抗體（-），C30.73g/L，直接或間接Coombs試驗（-）。尿液檢查：陰性。

2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院5

經(jīng)抗瘧藥物治療和避免陽光照射后，病情好轉(zhuǎn)，但一個月后，指關(guān)節(jié)及髖關(guān)節(jié)疼痛加劇，寒顫并連續(xù)2晚發(fā)燒39℃。耳后、頸部淋巴結(jié)腫大，體重也逐漸下降。檢查：臉部紅斑已消退，但手指、腳趾關(guān)節(jié)近端腫大。

實驗室檢查：dsDNA抗體1﹕2560陽性，C3水平進一步下降。經(jīng)用強的松及非固醇類消炎藥治療后好轉(zhuǎn)，此后一個月復(fù)查C3水平恢復(fù)正常。

2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院6思考題：1．該病初步診斷是什么？2．為何經(jīng)常檢測血清C3水平？3．尿液常規(guī)檢查陰性，說明什么？4．如果患者血清IgG水平高達18.2g/L，如何解釋？5．如果對耳后和頸部腫大的淋巴結(jié)進行活檢，結(jié)果又會怎樣？2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院7概述自身免疫耐受（autoimmune-tolerance）:正常情況下，機體免疫系統(tǒng)能識別“自我”，對自身組織成分不發(fā)生免疫應(yīng)答反應(yīng)，或僅產(chǎn)生微弱的免疫應(yīng)答，此為自身免疫耐受。自身免疫(autoimmunity):是指機體免疫系統(tǒng)針對自身成分發(fā)生免疫應(yīng)答反應(yīng)，出現(xiàn)自身抗體或致敏淋巴細胞的現(xiàn)象。自身抗體(autoantibody):針對自身組織器官、細胞及細胞內(nèi)成分的抗體。自身免疫性疾病(autoimmunedisease，AID)因自身免疫反應(yīng)導(dǎo)致組織器官損傷或功能障礙所致疾病。2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院8系統(tǒng)性自身免疫病(systemicautoimmunedisease)或器官非特異性或全身性自身免疫病器官特異性自身免疫病(organ-specificautoimmunedisease)或局限性自身免疫病按疾病累及的系統(tǒng)區(qū)分按器官特異性分為兩類

結(jié)締組織疾病神經(jīng)肌肉疾病內(nèi)分泌性疾病消化系統(tǒng)疾病泌尿系統(tǒng)疾病血液系統(tǒng)疾病生殖系統(tǒng)疾病皮膚組織疾病循環(huán)系統(tǒng)疾病一、自身免疫性疾病的概念與分類2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院9器官特異性非器官特異性橋本甲狀腺炎擴張性心肌炎自身免疫性溶血性貧血系統(tǒng)性紅斑狼瘡原發(fā)性粘液水腫惡性貧血特發(fā)性血小板減少性紫癜干燥綜合征甲狀腺機能亢進自身免疫性胃炎特發(fā)性粒細胞減少癥類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎Addisino病自身免疫性肝炎絕經(jīng)過早（少數(shù)病例）硬皮病1型糖尿病原發(fā)性膽汁性肝硬化男性不育（少數(shù)病例）多發(fā)性肌炎/皮肌炎重癥肌無力原發(fā)性硬化性膽管炎交感性眼炎混合性結(jié)締組織病多發(fā)性硬化癥潰瘍性結(jié)腸炎晶狀體源性葡萄膜炎系統(tǒng)性血管炎脫髓鞘疾病克羅恩病抗磷脂綜合征尋常型天皰瘡自身免疫性腎小球腎炎肺腎出血綜合征自身免疫病的“病譜”2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院10

表1常見自身免疫病分類_________________________________________________類別病名自身抗原_________________________________________________器官特異性

慢性甲狀腺炎甲狀腺球蛋白,微粒體甲亢甲狀腺細胞表面TSH受體

阿狄森氏病腎上腺皮質(zhì)細胞

青少年型胰島素依賴性糖尿病胰島細胞

萎縮性胃炎胃壁細胞

潰瘍性結(jié)腸炎結(jié)腸上皮細胞

原發(fā)性膽汁性肝硬化膽小管細胞,線粒體

重癥肌無力乙酰膽堿受體_________________________________________________2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院11

自身免疫性溶血性貧血RBC

特發(fā)性血小板減少性紫癜血小板非器官特異性類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)變性IgG,RANA

干躁綜合征(SS)SSA,SSB,唾液腺管系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)胞核成分

(DNA,DNP,RNP,SM)

胞漿成分(線粒體,微粒體)RBC,血小板混合結(jié)締組織病(MCTD)細胞核(RNP)________________________________________________2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院12二、常見的自身免疫性疾病2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院13特點：

體內(nèi)出現(xiàn)抗紅細胞自身抗體抗人球蛋白試驗陽性；紅細胞壽命縮短；

AIHA發(fā)病率10/10萬，多見于中年女性；

繼發(fā)性者多繼發(fā)于淋巴系統(tǒng)惡性病、結(jié)締組織病、感染和藥物應(yīng)用后；引起AIHA的藥物有青霉素、奎尼丁、異煙肼、對氨基水楊酸、磺胺類、甲基多巴等1.

自身免疫性溶血性貧血(autoimmunehemolyticanemia,

AIHA）2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院14

抗紅細胞抗體：

溫抗體

IgG，

37℃可與RBC結(jié)合;不聚集RBC

冷凝集素

IgG，低溫時與RBC結(jié)合使其凝集;引起冷凝集素綜合征（coldagglutinninsyndrome,CAS）

2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院15

2、免疫性血小板減少性紫癜（immunologicthrombocytopenicpurpura,ITP）主要表現(xiàn)為皮膚粘膜紫癜，pt↓

骨髓中巨核細胞可增多女性多發(fā)，發(fā)病率1/萬患者有抗血小板抗體使pt壽命縮短2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院163、重癥肌無力（

myastheniagravis,MG）患者體內(nèi)存在神經(jīng)肌肉接頭乙酰膽堿受體的自身抗體該抗體結(jié)合到橫紋肌細胞的乙酰膽堿受體上使之內(nèi)化并降解使肌細胞對運動神經(jīng)元釋放的乙酰膽堿的反應(yīng)降低引起骨骼肌運動無力4.毒性彌漫性甲狀腺腫(Gravesdisease)血清中有抗促甲狀腺激素受體（TSHR）抗體。刺激甲狀腺激素持續(xù)分泌，造成甲狀腺功能亢進。2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院175.抗腎小球基底膜腎炎（anti-glomerularbasementmembranenephritis，anti-GBMnephritis）大部分為肺出血腎炎綜合癥(Goodpasture綜合癥)；可檢測到抗腎小球基底膜Ⅳ型膠原抗體。2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院182025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院196.系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemiclupuserythromatosus，SLE）

累及多系統(tǒng)多器官的小血管及結(jié)締組織病年輕女性多發(fā)，漸進患者體內(nèi)有多種自身抗體→自身抗原結(jié)合→IC→激活補體→造成炎性損傷

ANA（+）、IgG↑、CIC↑、補體↓

2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院207.類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoidarthritis，RA）

小關(guān)節(jié)發(fā)病向心對稱性發(fā)展畸形常見多發(fā)于青壯年，女多于男炎癥、感染→IgG變性→抗變性IgG抗體（即RF）→與變性IgG結(jié)合→IC沉積→激活補體→免疫損傷

可產(chǎn)生類風(fēng)濕因子（rheumatoidfactor,RF）、抗環(huán)瓜氨酸肽抗體、抗角蛋白抗體等多種自身抗體2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院218.干燥綜合征(Sj?grensyndrome,SS)SS是一種明顯侵犯外分泌腺的慢性自身免疫性炎癥性疾病。唾液腺和淚腺最常被侵犯，從而產(chǎn)生口干和眼干，另外，皮膚、鼻、氣管、支氣管均可發(fā)生干燥；其他系統(tǒng)損害可表現(xiàn)為關(guān)節(jié)炎、腎結(jié)石、腎小管酸中毒、肺部炎癥及纖維化、外周神經(jīng)功能紊亂、精神異常、淋巴瘤等。干燥綜合征分為原發(fā)性和繼發(fā)性兩類，繼發(fā)性Ss常并發(fā)于RA和SLE。主要免疫學(xué)特征是：

(1)CD4+T細胞核B細胞浸潤唾液腺和淚腺。(2)血清中存在抗核蛋白SSA和SSB抗體。(3)呈HLA基因連鎖遺傳。9.多發(fā)性肌炎及皮肌炎多發(fā)性肌炎（polymyositis,PM）以損害肌肉為主要表現(xiàn)；皮肌炎（dermatomyositis,DM）PM同時有皮膚損害，則稱為DM。PM及DM患者有多種自身抗體，其中Jo-1、Mi主要見于PM，Ku多見于PM與硬皮病的重疊。2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院2210.硬化癥（scleroderma，Scl）局限性硬化癥：病變僅累及皮膚而不伴有內(nèi)臟損害，其特異性抗體為抗著絲點抗體；系統(tǒng)性硬化癥：病變累及內(nèi)臟器官，其特異性抗體為抗Scl-70抗體。2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院232025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院2411、1型糖尿?。╰ype1diabetesmellitus,T1DM）患者體內(nèi)產(chǎn)生了針對胰島β細胞的CD8+CTL

產(chǎn)生免疫應(yīng)答損傷胰島β細胞使胰島素分泌不足，引起糖尿病12.自身免疫性肝病原發(fā)性膽汁性肝硬化（primarybiliarycirrhosis,PBC）以肝內(nèi)中小膽管損傷為主，實驗室常檢測到堿性磷酸酶升高和抗線粒體抗體或其M2亞型陽性。自身免疫性肝炎（autoimmunehepatitis,AIH）是一種不明原因的慢性肝臟炎癥損傷，由于治療方法不同，須與病毒性肝炎等其他肝炎相鑒別，血清可檢測到多種自身抗體陽性。原發(fā)性硬化性膽管炎（primarysclerosingcholangitis,PSC）以肝內(nèi)大膽管或肝外膽管損傷為主，實驗室缺乏特異性的自身抗體，血清中有時會出現(xiàn)不典型的抗中性粒細胞胞漿抗體。2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院25第二節(jié)常用自身抗體檢驗項目及

臨床意義2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院262025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院27一、抗核抗體的檢測與應(yīng)用

二、抗雙鏈DNA抗體的檢測及應(yīng)用

三、抗核小體抗體的檢測和應(yīng)用

四、抗ENA抗體譜的檢測與應(yīng)用

五、血管炎相關(guān)的自身抗體檢測與應(yīng)用

六、心磷脂抗體的檢測與應(yīng)用

七、RA相關(guān)自身抗體的檢測與應(yīng)用

八、自身免疫性肝病相關(guān)自身抗體的檢測與應(yīng)用

九、內(nèi)分泌疾病相關(guān)自身抗體的檢測與應(yīng)用

十、神經(jīng)系統(tǒng)自身免疫性疾病相關(guān)自身抗體的檢測與應(yīng)用

十一、胃腸道疾病相關(guān)自身抗體的檢測與應(yīng)用2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院28自身免疫性疾病的重要標(biāo)志高滴度存在于自身免疫性疾病患者與疾病的活動性相關(guān)參與免疫病理性損傷自身抗體的一般特點和臨床價值2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院29

大多數(shù)自身免疫患者血清中可測到高效價的自身抗體，特別是有些自身抗體的檢測已納入某些自身免疫性疾病的診斷標(biāo)準中，如：抗SM抗體SLE;抗CCP抗體RA等。自身抗體檢測已是臨床免疫檢測的一項重要的實驗室指標(biāo)。自身抗體的一般特點和臨床價值2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院30標(biāo)志抗體相關(guān)疾病dsDNASLESmSLESSBSS著絲點抗體PSS（局限型）Scl-70抗體PSS（彌漫型）AKA、抗CCP抗體RAJo-1抗體PM/DM（進行性系統(tǒng)性硬皮?。└叩味萊NP抗體MCTD肝腎微粒體抗體（LKM-1）Ⅱ型自身免疫性肝炎平滑肌抗體（SMA）Ⅰ型自身免疫性肝炎AMA（M2）PBC常見自身免疫性疾病的標(biāo)志抗體2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院31抗核抗體（ANA）抗可提取性核抗原抗體（ENA）抗中性粒細胞胞漿抗體（ANCA）類風(fēng)濕因子（RF）抗角蛋白抗體（AKA）抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（抗CCP抗體）抗心磷脂抗體（ACLA）經(jīng)常檢測的自身抗體2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院32

抗核抗體::以真核細胞（如HEp-2細胞、肝細胞）的各種細胞核成分為靶抗原所檢測的自身抗體的總稱。一、抗核抗體的檢測與應(yīng)用2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院33抗核抗體譜2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院34以首先檢出該抗體的患者名字命名，如抗Sm、抗Sa抗體等；以相關(guān)疾病命名，如抗Scl-70、抗SS-A、抗SS-B抗體等；以抗原的部位命名，如抗核仁抗體、抗線粒體抗體、抗核膜抗體、抗細胞漿抗體等；以抗原的化學(xué)名稱分類命名，如抗DNA、抗RNP、抗組蛋白抗體,抗核小體抗體等。抗核抗體譜的分類和命名2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院35間接免疫熒光法（indirectimmunofluorescence,IIF）酶免疫斑點法ELISA免疫印跡法

抗核抗體檢測方法2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院36間接免疫熒光法示意圖HEp-2細胞肝組織切片熒光標(biāo)記抗體病人血清（待檢抗體）2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院37

細胞核細胞漿細胞骨架細胞周期

均質(zhì)型核糖體型肌蛋白型中心體型斑點型線粒體型波形纖維蛋白型紡綞體型核仁型高爾基體型細胞角蛋白型紡綞絲型著絲點型溶酶體型原肌球蛋白型中間體型周邊型顆粒型紐帶蛋白型PCNA型核點型(dots)IIF檢測ANA熒光染色模型2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院38斑點型（nRNP/Sm）

高滴度的抗U1-nRNP為MCTD的特征?？筍m抗體對SLE具有高度特異性。斑點型（SSA/SSB）抗SSA最常出現(xiàn)于SS及新生兒紅斑狼瘡（100%）?？筍SB抗體幾乎僅見于女性，可出現(xiàn)于SS和SLE。2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院39ANA：核顆粒型2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院40均質(zhì)型

抗dsDNA抗體抗組蛋白抗體(histone)抗ssDNA抗體抗核小體抗體(nucleosome)2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院41ANA：核均質(zhì)型ANA：核均質(zhì)型

2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院42周邊型

可見于膠原病、PBC、CAH等患者

2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院43ANA：核膜型2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院44核點型（DOTS）

見于SLE、SS、PBC、風(fēng)濕病

抗著絲點型

PSS局限型標(biāo)志抗體2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院45ANA：核點型2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院46ANA：著絲點型2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院47ANA：核仁型2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院48ANA：胞漿顆粒型抗Jo-1抗體抗核糖體P蛋白抗體AMA2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院49抗原纖維蛋白型

僅見于5%～10%的PSS，男性高于女性

抗RNA多聚酶Ⅰ型抗體

僅見于硬皮病患者，陽性率為4%2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院50抗PM-Scl（PM-1）抗體

見于重疊綜合征（多發(fā)性肌炎PM/皮肌炎DM/彌漫性PSS）

2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院51抗Scl-70型

PSS彌漫型的標(biāo)志抗體2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院52增殖細胞核抗原Ⅰ型（PCNA）

SLE特異性抗體，與發(fā)生彌漫性增殖性腎小球腎炎相關(guān)2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院53抗線粒體抗體（AMA）SLE標(biāo)志抗體原發(fā)性膽汁性肝硬化標(biāo)志抗體抗核糖體P蛋白（rib-P）抗體2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院54抗Jo-1抗體抗高爾基體抗體多發(fā)性肌炎（PM）標(biāo)志抗體偶見于SLE和SS2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院55抗肌動蛋白抗體見于自身免疫性慢性活動型肝炎

2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院56自身免疫性疾病ANA陽性率（%）SLE80~100MCTD95~100RA20~40PSS85~95PM/DM30~50SS70~80潰瘍性結(jié)腸炎26慢性活動性肝炎30~40其它風(fēng)濕病20~50ANA在自身免疫性疾病中的檢出率

2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院57抗雙鏈DNA抗體

抗dsDNA抗體與細胞核DNA（外圍區(qū)）脫氧核糖磷酸框架結(jié)合。

抗dsDNA抗體是SLE患者的特征性標(biāo)志抗體。其抗體滴度與疾病的活動程度有相關(guān)性，抗體滴度的動態(tài)測定為監(jiān)控治療提供了有效的實驗室手段。二、抗雙鏈DNA抗體2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院58檢測方法及應(yīng)用間接免疫熒光檢測，是目前國內(nèi)外臨床常規(guī)檢測抗dsDNA抗體最常用的方法?？筪sDNA抗體診斷SLE的特異性可達95%～100%，但其敏感性僅為30%～50%，因此抗dsDNA抗體陰性不能排除SLE的診斷。檢測方法及應(yīng)用2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院59

抗dsDNA抗體SLE特異性抗體，與病情活動度相關(guān)。2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院60抗dsDNA抗體

金標(biāo)準：IIF（綠蠅短膜蟲）2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院61三、抗核小體抗體

核小體（nucleosome）是真核生物細胞核染色質(zhì)的基本單位。凋亡細胞是核小體的重要來源，當(dāng)SLE患者的吞噬細胞對凋亡細胞的清除能力受損或降低，導(dǎo)致核小體在患者體內(nèi)大量存積，激活B細胞產(chǎn)生抗核小體抗體（Antinucleosomeantibody,AnuA）。

2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院62檢測及應(yīng)用AnuA的檢測通常采用ELISA檢測法。AnuA具有同抗ds-DNA抗體相同的診斷特異性，可達到95%，在系統(tǒng)性硬化（SSc）病中可有20%～50%低濃度陽性率，其他自身免疫性疾病中該抗體均為陰性。AnuA的表達與SLE病情活動分數(shù)相關(guān)。檢測及應(yīng)用2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院63

抗ENA抗體譜:可提取核抗原抗體的總稱

臨床常檢測的抗ENA抗體譜主要包括：

抗Sm抗U1-RNP抗SSA抗SSB抗Jo-1抗Scl-70抗rib-P蛋白四、抗ENA抗體譜的檢測與應(yīng)用2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院64抗可提取性核抗原（ENA）抗體2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院65

雙向免疫擴散（ID）對流免疫電泳（CIE）免疫印跡法（Western-blot）

ELISA酶免疫斑點法ENA檢測方法2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院66免疫印跡法

SDS電泳轉(zhuǎn)移電泳酶免疫檢測免疫印跡法2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院672025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院68抗可提取性核抗原（ENA）抗體

抗Sm抗體：SLE標(biāo)記性抗體（20%~30%）

抗nRNP抗體：MCTD95%~100%（高滴度）

抗SSA抗體：PSS60%~75%，其它CTD

抗SSB抗體：

PSS10%~40%，其它CTD

抗Scl-70抗體：SSc25%~75%,標(biāo)記性抗體

抗Jo-1抗體：PM/DM25%，標(biāo)記性抗體

抗rRNP抗體：

SLE特異性抗體（10%~30%）2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院69抗中性粒細胞胞漿抗體（anti-neutrophilcytoplasmicautoantibodies,ANCA）是一組以人中性粒細胞胞漿成分為靶抗原，與臨床多種小血管炎性疾病密切相關(guān)的自身抗體，對系統(tǒng)性血管炎、炎癥性腸病等疾病的診斷與鑒別診斷具有重要意義。

五、血管炎相關(guān)的自身抗體

檢測與應(yīng)用2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院70

熒光染色型

靶抗原

胞漿型(cANCA)

蛋白酶3（PR3）殺菌/通透性增高蛋白（BPI）

核周型(pANCA)髓過氧化物酶（MPO）組織蛋白酶G（Cath-G）乳鐵蛋白（LF）白細胞彈性蛋白酶（HLE）

非典型型(aANCA)兼有兩種特性ANCA熒光染色型與靶抗原2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院71ANCA

ANCA=Anti-NeutrophilCytoplasmAutoantibodies中性粒細胞cANCA（胞漿型）pANCA（核周型）2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院72周邊型抗中性粒細胞胞漿抗體主要見于炎癥性腸?。冃越Y(jié)腸炎和克羅恩?。?025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院73胞漿型抗中性粒細胞胞漿抗體主要見于Wegener’s肉芽腫及微小多動脈炎2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院74

ANCA臨床應(yīng)用

髓過氧化物酶（MPO）與顯微鏡下多血管炎、壞死性新月體型腎小球腎炎、過敏性肉芽腫性血管炎相關(guān)殺菌/通透性增高蛋白（BPI）主要見于肺部炎癥性疾病并與長期慢性綠膿桿菌感染有一定關(guān)系

蛋白酶3（PR3）與Wegener’s肉芽腫（WG）密切相關(guān)。僅cANCA診斷WG的特異性大于90%，聯(lián)合PR3可超過95%，活動期幾乎100%陽性。

組織蛋白酶G(Cath-G)白細胞彈性蛋白酶(HLE)乳鐵蛋白(LF)可見于SLE、IBD、PBC、PSC等2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院75抗內(nèi)皮細胞抗體（AECA）檢測方法：主要采用IIF，一般以人臍靜脈內(nèi)皮細胞作為檢測基質(zhì)，也可采用RIA、ELISA、免疫印跡法、免疫沉淀實驗進行檢查。2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院76AECA陽性主要見于以下疾?。涸l(fā)性血管炎，如WG、顯微鏡下多動脈炎（MPA）、Churg-Strauss綜合征（CSS）、特發(fā)性視網(wǎng)膜血管炎、白塞?。˙D）、Takayasu動脈炎（TA）、巨細胞動脈炎（GCA）和Henoch-Shoenleinpurpura(HSP)；繼發(fā)于全身性AID的血管炎（SLE、RA、APS、SSc、PM-DM和MCTD）；器官移植；其他疾?。篐uremicEmolyticsyndrome、HIT、多發(fā)性硬化癥、先兆子癇、慢性哮喘、DM1、炎癥性腸病、突發(fā)性感覺神經(jīng)性聽力損傷和某些傳染病。AECA臨床意義2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院77六、心磷脂抗體的檢測與應(yīng)用抗心磷脂抗體(anticardiolipinantibodies,ACLA)

ACLA能夠干擾磷脂依賴性凝血過程,對抗凝作用的蛋白有抑制作用;抑制內(nèi)皮細胞釋放前列腺素;通過多種免疫損傷機制破壞內(nèi)皮細胞與血小板。

ACLA與多種疾病的發(fā)生有密切關(guān)系。2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院78與ACLA相關(guān)的疾病主要有:

1)血栓形成,7)一過性腦缺血2)血小板減少癥;8)心肌壞死3)習(xí)慣性流產(chǎn);9)特發(fā)性血栓栓塞性肺靜脈高壓4)溶血性貧血;10)SLE及各種結(jié)締組織病5)肢端頑固性潰瘍6)中風(fēng)

檢測方法:ELISA2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院79RA早期診斷相關(guān)自身抗體

抗角質(zhì)層蛋白抗體（AKA）：1979年Young等報告靶抗原：filaggrin（40KD）

抗核周因子（APF):1964年Nienhuis等報告靶抗原：profilaggrin（37-41KD）及其降解產(chǎn)物

抗聚角蛋白微絲蛋白抗體（AFA）：1993年Simon等報告靶抗原：filaggrin（40KD）

抗Sa抗體：1994年Despres等報告靶抗原:50/55KD非?；嚯?，半抗原-瓜氨酸

抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（抗CCP抗體）：1998Schellekens七、RA相關(guān)自身抗體的檢測與應(yīng)用2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院80（一）類風(fēng)濕因子（rheumatoidfactor,RF）為抗變性IgGFc的自身抗體，主要是IgM型。

致病機理：RF與體內(nèi)變性IgG結(jié)合形成免疫復(fù)合物，激活補體或被吞噬細胞吞噬，產(chǎn)生炎性介質(zhì)導(dǎo)致組織炎性損傷，使患者發(fā)生骨關(guān)節(jié)炎及血管炎。2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院811.膠乳顆粒凝集實驗定性、半定量，敏感性和特異性不高，測定IgM-RF

2.速率散射比濁法（ARRAY、IMAGE）定量、準確、快速，測定IgM-RF

3.ELISA定量、準確，可測定不同類型的RF檢測方法2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院82

（1）RF在RA、SLE、PSS等多種自身免疫性疾病患者中均可被檢出。疾病陽性率（%）RA79SLE30SS95Sclerosis80PM80MCTD25臨床應(yīng)用2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院83（2）RF滴度與RA患者臨床表現(xiàn)呈正相關(guān)，

IgM-RF效價>80IU/ml并伴有嚴重關(guān)節(jié)功能障礙時通常提示患者預(yù)后不良。

（3）IgG-RF與RA患者的滑膜炎、血管炎和關(guān)節(jié)

癥狀密切相關(guān)，常伴隨IgM-RF同時出現(xiàn)，在正常人及非RA患者中很難檢出。

（4）IgA-RF與RA患者關(guān)節(jié)癥狀的嚴重程度及骨質(zhì)破壞有顯著相關(guān)性。2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院84AKA主要見于RA，陽性率36%~59%，特異性95%~99%，其出現(xiàn)可以先于臨床表現(xiàn)；高滴度可預(yù)示較嚴重的RA類型。（二）抗角蛋白抗體（AKA）2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院85常用方法：ELISA臨床意義：RA特異性自身抗體，敏感性65%~85%，特異性為94%~98%；高濃度抗CCP抗體是RA發(fā)生關(guān)節(jié)侵蝕的危險因子之一，定量檢測有助于判斷預(yù)后。（三）抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（抗CCP抗體）2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院86自身免疫性肝病是與自身免疫密切相關(guān)的特殊類型的肝病，其診斷和治療完全不同于一般的慢性病毒性肝炎

自身免疫性肝炎(AIH)

原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBC)

原發(fā)性硬化性膽管炎(PSC)

重疊綜合征八、自身免疫性肝病相關(guān)自身抗體的檢測與應(yīng)用2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院87

在多種累及肝膽疾患的自身免疫疾病中，自身抗體在發(fā)病機制中起重要作用

自身免疫性肝病具有相對特異性自身抗體譜

自身抗體檢測對自身免疫性肝病的診斷及鑒別診斷具有重要意義自身免疫性肝病與自身抗體抗平滑肌抗體(anti-smoothmuscleantibody,ASMA)抗肝腎微粒體（anti-LKM-1antibody，LKM-1）抗肝細胞胞漿抗體1型（LC-1）抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗體（anti-solubleliverantigen/liverpancreaticantibody,SLA/LP）抗線粒體抗體（anti-mitochondriaantibodies,AMA）及其M2型抗sp100抗體；抗PML抗體抗gp210抗體抗p62抗體抗著絲粒蛋白B抗體抗Lamin蛋白抗體2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院882025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院89自身免疫性肝病及其自身抗體譜疾病類型相關(guān)自身抗體

自身免疫性肝炎（AIH）

Ⅰ型AIHANA/ASMAⅡ型AIHanti-LKM-1anti-LC-1Ⅲ型AIHanti-SLA(可溶性肝抗原)

原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）

AMA(M2/M4/M8/M9)anti-gp210，sp100ACA

原發(fā)性硬化性膽管炎（PSC）pANCA

自身免疫性肝病及其自身抗體譜2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院90抗線粒體抗體2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院91抗平滑肌抗體抗LKM-1抗體2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院92（一）橋本甲狀腺炎相關(guān)自身抗體

抗甲狀腺球蛋白抗體(TGAb)抗甲狀腺過氧化物酶抗體（TPOAb）抗促甲狀腺素受體抗體（TSH-RAb）（二）糖尿病相關(guān)自身抗體胰島細胞抗體胰島素抗體谷氨酸脫羧酶抗體九、內(nèi)分泌疾病相關(guān)自身抗體的檢測與應(yīng)用2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院93抗甲狀腺抗原抗體（猴甲狀腺）抗TPO抗體抗TG抗體抗乙酰膽堿受體(anti-acetylchocinereceptor,AchR)抗體：常用ELISA進行檢測。該抗體是重癥肌無力的標(biāo)志性抗體，約90%MG患者陽性，其滴度與病情輕重?zé)o相關(guān)性?？构趋兰】贵w(anti-skeletalmuscleantidobies，StrAb)：多見于60歲以上及成年后發(fā)病的重癥肌無力患者，較少見于20歲以下的重癥肌無力患者。對成年重癥肌無力患者是否并發(fā)胸腺瘤有很好的鑒別診斷價值?？股窠?jīng)元核抗體1型(anti-neuronalnuclearantibodies,type1)：又稱Hu抗體，主要見于類瘤性感覺神經(jīng)病及類瘤性腦脊髓炎，多為小細胞肺癌，也可合并有成神經(jīng)細胞瘤、前列腺癌、肉瘤等，還可見于類瘤性斜視眼陣攣/肌陣攣。2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院94十、神經(jīng)系統(tǒng)自身免疫性疾病相關(guān)自身抗體

的檢測及其臨床意義抗神經(jīng)元核抗體2型(anti-neuronalnuclearantibodies,type2)：又稱Ri抗體，主要見于大腦、腦干、脊髓功能紊亂，較少見于感覺運動神經(jīng)??；也為乳腺癌或小細胞肺癌的標(biāo)志之一?？蛊湛弦毎贵w(anti-Purkinjecellantibodies,PCA-1)：又稱Yo抗體，多見于女性，通常為高滴度（1:1000以上），腦脊液滴度常高于血清；對診斷副瘤性小腦變性合并卵巢及乳腺癌高度特異；如已知為癌癥患者，又出現(xiàn)小腦功能紊亂癥狀，測到高滴度Yo抗體將證實為類瘤性小腦疾患，腫瘤去除后，抗體滴度會降低甚至消失。2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院952025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院96炎癥性腸病相關(guān)自身抗體抗胰腺腺泡抗體抗釀酒酵母抗體抗小腸杯狀細胞抗體

pANCA萎縮性胃炎及惡性貧血相關(guān)自身抗體

抗胃壁細胞抗體抗內(nèi)因子抗體

十一、胃腸道疾病相關(guān)自身抗體的檢測與應(yīng)用2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院97炎癥性腸病包括潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerativecolitis,UC）和克羅恩?。–rohn’sdisease,CD）。萎縮性胃炎及惡性貧血2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院98第三節(jié)自身抗體檢測的常用方法及檢測流程2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院99

95%～99%可排除SLE（－）SLE治療緩解病情特重（大量IC沉積消耗抗體）（＋）低滴度常見于RA等其它自身免疫性疾病高滴度可作為診斷SLE的依據(jù)ENA抗體譜檢測（－）不能排除抗dsDNA、Sm、rib抗體（＋）可幫助診斷ANA初篩（IIF）一、實驗室方法的選擇2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院100

篩查性試驗與確診性試驗項目的合理組合選擇相關(guān)的自身抗體檢測項目切忌盲目的全面檢測實驗中應(yīng)同步設(shè)置陽性和陰性對照二、自身抗體檢測的一般原則2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院101

三、自身抗體檢測結(jié)果的解釋1.掌握不同抗體檢測的靈敏度和特異性；聯(lián)合檢測2.ANA陽性不僅見于自身免疫病，也可以見于健康人、老年人、感染、腫瘤等患者。3.某些自身抗體出現(xiàn)于臨床癥狀之前，應(yīng)定期復(fù)查，監(jiān)測病情4.IIF檢測自身抗體，報告熒光模型要慎重、客觀5.不同方法有各自的靈敏度和特異性，同一項目用不同方法檢測，會有差異2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院102

在自身免疫病患者體內(nèi)，因有多種自身抗原的存在，自身抗體的種類也可有交叉重疊現(xiàn)象，故實驗中檢測出多種自身抗體陽性時還必須結(jié)合臨床癥狀進行綜合分析。第四節(jié)自身免疫性疾病相關(guān)的其它檢驗項目及其臨床意義2025/2/25北京大學(xué)人民醫(yī)院103自身