《衛(wèi)生微生物學檢驗》課件-22.衛(wèi)生微生物學檢驗方法-定量測定

衛(wèi)生微生物學檢驗厚德勵志篤學尚能衛(wèi)生微生物學檢驗方法NO.1定性檢驗定量檢驗NO.2分型檢測NO.3目錄Part2定量檢驗厚德勵志篤學尚能定量檢測采用實驗手段，對樣品中的微生物或特定類型的微生物數(shù)量進行測定，是微生物學研究的重要內(nèi)容。01平板計數(shù)法02最可能數(shù)法03生物活性測定方法04核酸定量檢測法05病毒的定量測定06其他方法厚德勵志篤學尚能一、平板計數(shù)法傾注平板計數(shù)法：10倍梯度準確稀釋待測樣品，準確將稀釋物定量均勻地傾注到瓊脂培養(yǎng)基中，培養(yǎng)后計數(shù)菌落；樣品處理：混勻10倍梯度稀釋樣品檢驗：1mL結果報告厚德勵志篤學尚能傾注平板計數(shù)法：樣品處理：混勻10倍梯度稀釋樣品檢驗：1mL結果報告一、平板計數(shù)法厚德勵志篤學尚能傾注平板計數(shù)法：傾注平板計數(shù)法是衛(wèi)生微生物學檢驗的基本技術之一，也是定量測定樣品中微生物數(shù)量的最常用方法；傾注培養(yǎng)基的溫度對計數(shù)結果又較大影響，溫度太低，培養(yǎng)基極易凝固，影響菌落分布的均勻性；溫度太高，可導致樣品中的微生物死亡，使計數(shù)結果偏低傾注時合適的溫度范圍是45-50℃一、平板計數(shù)法厚德勵志篤學尚能表面涂布法：將樣品定量涂布在瓊脂培養(yǎng)基的表面，培養(yǎng)后，計數(shù)表面生長的菌落數(shù)。樣品處理：混勻10倍梯度稀釋樣品檢驗：0.1mL結果報告一、平板計數(shù)法厚德勵志篤學尚能表面涂布法：使用不透明培養(yǎng)基對細菌進行計數(shù)的實驗，如培養(yǎng)基中加入血液或?qū)е屡囵B(yǎng)基不透明的抑菌物質(zhì)；對已經(jīng)計數(shù)的菌落進行證實的實驗，便于菌落挑??；用于不耐熱的微生物的計數(shù)實驗一、平板計數(shù)法厚德勵志篤學尚能二、MPN法最可能數(shù)法（mostprobablenumber，MPN）Poisson分布大腸菌群測定的多管發(fā)酵法初發(fā)酵、分離培養(yǎng)和正式試驗厚德勵志篤學尚能二、MPN法大腸菌群計數(shù)檢驗厚德勵志篤學尚能二、MPN法大腸菌群計數(shù)檢驗厚德勵志篤學尚能三、生物活性測定方法目前應用最廣的一種方法是ATP生物熒光法測定菌落總數(shù)厚德勵志篤學尚能四、核酸定量檢測法最常采用的方法為實時熒光定量PCR法厚德勵志篤學尚能五、病毒的定量測定蝕斑法厚德勵志篤學尚能五、病毒的定量測定半數(shù)細胞感染量(TCID50)測定法厚德勵志篤學尚能五、病毒的定量測定紅細胞凝集試驗厚德勵志篤學尚能六、其他方法顯微鏡直接計數(shù)法也稱為Breed計數(shù)法使用有分格（分格面積1cm2）的Breed載玻片，將0.01mL被檢菌液置于方格中，干燥固定后，采用