項(xiàng)目血漿脂蛋白的測(cè)定魏碧娜講解

項(xiàng)目血漿脂蛋白的測(cè)定主講人魏碧娜實(shí)訓(xùn)血清脂蛋白電泳【操作步驟】：1.血清預(yù)染取血清0.18ml于小試管中，加飽和蘇丹黑B染液0.02ml，混勻，置室溫1小時(shí)后。2.制版取普通玻璃將已融化的5g/L瓊脂糖溶液均勻涂布在載玻上，室溫下靜置待凝固。然后距玻片1.5cm處打一小槽。3.加樣洗凈槽內(nèi)水分，取預(yù)染血清加于樣品槽中。4.電泳將已加樣的瓊脂糖玻片放入電泳槽中，加樣品端接負(fù)極，用濾紙搭橋。通電，調(diào)電壓100-120V，電泳20-30分鐘。5.結(jié)果分析脂類(lèi)脂肪類(lèi)脂磷脂(PL)膽固醇(Ch)糖脂膽固醇酯(CE)(甘油三酯、三脂酰甘油、TG)都是雙親性分子:有親水性（極性）末端和疏水性（非極性）末端

血漿中所含的脂類(lèi)物質(zhì)總稱(chēng)為血脂。問(wèn)題一、什么是血清脂蛋白？組成：甘油三酯、磷脂、膽固醇、膽固醇酯和游離脂肪酸。脂蛋白是血中脂類(lèi)的主要運(yùn)輸形式。

脂類(lèi)不溶于水，在水中往往呈乳濁液。正常人的血漿雖含有較多的脂類(lèi)，但卻能保持透明清澈的外觀，原因是血漿中的脂類(lèi)并非以自由狀態(tài)存在，而是與水溶性強(qiáng)的蛋白質(zhì)結(jié)合形成脂蛋白。脂蛋白結(jié)構(gòu)示意圖蛋白質(zhì)磷脂蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)膽固醇酯TG膽固醇外周載脂蛋白（如ApoC）磷脂TG膽固醇酯整合載脂蛋白（如ApoB）游離膽固醇血漿脂蛋白的平面結(jié)構(gòu)小結(jié)脂蛋白結(jié)構(gòu)：

脂蛋白大致為球形顆粒，由兩大部分組成，即疏水性的內(nèi)核和親水性的外殼。內(nèi)核由不同量的CE與TG組成，表層由載脂蛋白、PL及FC組成，F(xiàn)C及PL的極性基團(tuán)向外露在血漿中。血脂與血漿脂蛋白

血脂：是血漿中的中性脂肪（甘油三酯）和類(lèi)脂（磷脂、糖脂、膽固醇、膽固醇酯）的總稱(chēng)

脂蛋白：脂類(lèi)難溶于水，正常血漿脂類(lèi)物質(zhì)與蛋白質(zhì)結(jié)合成脂蛋白的形式存在。血漿脂蛋白的組成蛋白質(zhì)三脂酰甘油磷脂膽固醇膽固醇酯不同血漿脂蛋白組成的比例不同問(wèn)題二、血清脂蛋白電泳的原理？電泳分離法原理：

由于各種脂蛋白中載脂蛋白的含量和種類(lèi)不同，故其表面電荷不同，在電場(chǎng)中具有不同的遷移率。血漿脂蛋白的分類(lèi)超速離心法：根據(jù)脂蛋白在一定密度的介質(zhì)中漂浮速率不同而進(jìn)行分離的方法。

電泳法：根據(jù)不同密度的脂蛋白所含蛋白質(zhì)的表面電荷不同，利用電泳將其分離，并與血漿蛋白質(zhì)的遷移率比較以判斷其部位。

分離方法密度分類(lèi)法超速離心VLDLCMLDLHDL血漿密度為1.063NaCl溶液

脂蛋白電泳分析可分為預(yù)染法和電泳后染色法兩大類(lèi)。

預(yù)染法的操作比較簡(jiǎn)單，分離效果直觀。其操作過(guò)程是先將待測(cè)血清和蘇丹黑染料按一定比例混合進(jìn)行預(yù)染處理，離心后取上清液進(jìn)行電泳分析。

電泳后染色法為用電泳方法先將血漿脂蛋白各成份分開(kāi)，再用蘇丹黑或油紅O進(jìn)行染色。臨床上比較常用的是預(yù)染法電泳。問(wèn)題三、什么是預(yù)染？問(wèn)題四、血清脂蛋白電泳的結(jié)果為什么只有兩條？血清脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳：α-脂蛋白：0.30-