《微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)》第2課時 導(dǎo)學(xué)案2

學(xué)而優(yōu)·教有方PAGEPAGE11.2微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用二、微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)學(xué)案學(xué)習(xí)目標(biāo)解釋選擇培養(yǎng)基篩選微生物的原理土壤中分解尿素的細菌的分離和計數(shù)運用無菌操作技術(shù)和微生物分離、培養(yǎng)的方法初步分離出目標(biāo)菌嘗試解決生產(chǎn)、生活中與微生物選擇培養(yǎng)、計數(shù)等有關(guān)的實際問題一、選擇培養(yǎng)基實驗室中微生物篩選的基本原理：人為提供有利于，同時抑制或阻止其他微生物的生長選擇培養(yǎng)基的概念：在微生物學(xué)中，將特定種類的微生物生長，同時或其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，叫選擇培養(yǎng)基尿素分解菌分解尿素的原理：微生物的選擇培養(yǎng)稀釋涂布平板法的操作步驟：①②③④⑤⑥2.微生物的培養(yǎng)條件：三、微生物的數(shù)量測定1.稀釋涂布平板法計數(shù)的原理：當(dāng)樣品的稀釋足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個單菌落，來源于2.稀釋涂布平板計數(shù)法統(tǒng)計的平板菌落數(shù)范圍：3.稀釋涂布平板法的統(tǒng)計方法：在同一稀釋度下，應(yīng)至少對個平板進行重復(fù)計數(shù)，然后求出平均值4.稀釋涂布平板計數(shù)的特點及原因分析：統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目，這是因為兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是。因此。統(tǒng)計結(jié)果一般用而不是用來表示課堂檢測一、單選題1.尿素分解菌是生活在土壤中能分泌脲酶的一種細菌，脲酶能將尿素分解成NH3。玉米根細胞從土壤中吸收用于植物生長。下列敘述正確的是()A.玉米根細胞和尿素分解菌的DNA分子均與蛋白質(zhì)結(jié)合形成染色體B.玉米根細胞從土壤中吸收需要載體蛋白的參與C.中的N可作為玉米根細胞中蛋白質(zhì)、糖類等的構(gòu)成元素D.細胞中大多數(shù)無機鹽以化合物的形式存在，對維持生命活動有重要作用2.下列有關(guān)血細胞計數(shù)板的敘述中，錯誤的是()A.利用血細胞計數(shù)板計數(shù)的方法屬于顯微鏡直接計數(shù)法B.血細胞計數(shù)板的一個方格網(wǎng)中有九個大方格C.血細胞計數(shù)板上的雙線用于區(qū)分大方格，單線用于區(qū)分中方格D.用酒精清洗后的血細胞計數(shù)板可用綢布輕輕拭干3.下面關(guān)于土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)的敘述中，正確的是()A.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素

B.篩選分解尿素的細菌時，應(yīng)以尿素為培養(yǎng)基中唯一的營養(yǎng)物質(zhì)

C.統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)目一般用平板劃線法

D.在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,若指示劑變藍，則表明篩選到了分解尿素的細菌4.某些土壤細菌可將尿素(CH4N2O)分解為CO2和NH3供植物吸收和利用,但分解產(chǎn)物CO2不能為該菌提供營養(yǎng)。下列關(guān)于配置分離這一菌種的選擇培養(yǎng)基的成分符合要求的是(

)A.僅尿素

B.尿素+葡萄糖 C.僅葡萄糖

D.牛肉膏蛋白胨5.某同學(xué)利用稀釋涂布平板法進行菌落數(shù)目的統(tǒng)計，在101、102、103倍稀釋液的平均菌落數(shù)為2760個/mL、295個/mL和46個/mL，則菌落總數(shù)（個/mL）為()A.3.76×104 B.3.95×104 C.3.6×104 D.3.775×104二、填空題6.植物秸桿中的纖維素可被某些微生物分解。回答下列問題：（1）分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，其中可將纖維素分解為纖維二糖的是_________，可將纖維二糖分解成葡萄糖的是_________。（2）在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅（CR）時，CR可與纖維素形成_________色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的__________________。（3）為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計了甲、乙兩種培養(yǎng)基（成分見下表）。酵母膏無機鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水培養(yǎng)基甲++++-++培養(yǎng)基乙+++-+++注：“+”表示有，“-”表示無。據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲_________（填“能”或“不能”）用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是__________________；培養(yǎng)基乙_________（填“能”或“不能”）用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是__________________。

參考答案1.答案：B解析：2.答案：C解析：顯微鏡直接計數(shù)是測定細菌數(shù)量的常用方法，利用血細胞計數(shù)板計數(shù)的方法屬于顯微鏡直接計數(shù)法；血細胞計數(shù)板的一個方格網(wǎng)中有九個大方格，其中只有中間的一個大方格為計數(shù)室，供計數(shù)微生物用；血細胞計數(shù)板上的雙線用于區(qū)分中方格，單線用于區(qū)分小方格；用酒精清洗后的血細胞計數(shù)板可用綢布輕輕拭干。3.答案：A解析：篩選分解尿素的細菌的實驗中，采用的是以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，B錯誤；統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)目一般用稀釋涂布平板法，C錯誤；在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種細菌后，如果pH升高，指示劑變紅，這樣就能初步鑒定該種細菌能夠分解尿素，D錯誤。4.答案：B解析：根據(jù)題意：“某些土壤細菌可將尿素（

CH4N2O）

分解為

CO2和

NH3供植物吸收和利用，但分解產(chǎn)物

CO2不能為該菌提供營養(yǎng)”說明該土壤細菌是異養(yǎng)型，需要含碳有機物作為碳源，以尿素作為氮源。

故選：B。5.答案：D解析：選擇平均菌落數(shù)在30~300的組別，取二者平均數(shù)即（46×103+295×102）÷2=3.775×104。6.答案：（1）C1酶和Cx酶；葡萄糖苷酶（2）紅；透明圈（3）不能；液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落；不能；培養(yǎng)基中沒有纖維素，不能形成CR-纖維素紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌解析：（1）分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，包括Cx酶、C1酶和葡萄糖苷酶，其中C1酶和Cx酶可將纖維素分解成纖維二糖，葡萄糖苷酶可將纖維二糖分解成葡萄糖。（2）在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅（CR）時，CR可與纖維素形成紅色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維