植物組織培養(yǎng)基本操作圖解

植物組織培養(yǎng)的內(nèi)容植物組織培養(yǎng)包括以植物和它的離體器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體為外植體的離體無菌培養(yǎng)，擁有幾種不同水平的培養(yǎng)技術(shù)，即整體的、器官的、組織的、細(xì)胞和原生質(zhì)的培養(yǎng)技術(shù)。（植株培養(yǎng)、胚胎培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、組織培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)、原生質(zhì)體培養(yǎng)）第一頁，共45頁。植物組織培養(yǎng)中的重要概念愈傷組織：指由植物的一種組織或器官經(jīng)歷脫分化形成的原始胚樣組織，它具有再分化成為完整植物體的潛能；外植體：植物組織培養(yǎng)中用來進(jìn)行無菌培養(yǎng)的離體材料，可以是器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體等；第二頁，共45頁。無菌和消毒：無菌操作要注意：每次操作前，將雙手用酒精棉球擦拭消毒；解剖針、解剖刀等金屬工具用火焰燒過滅菌，在酒精中冷卻，再將酒精燒去方可使用；盡量減少無菌三角瓶和培養(yǎng)皿在空氣中的暴露時間；所有無菌操作盡量快速完成，并請在酒精燈附近進(jìn)行。第三頁，共45頁。組培實驗用品第四頁，共45頁。

一、無菌苗的快速切繁1、點(diǎn)著酒精燈，雙手擦拭消毒，打開長有無菌苗的三角瓶，三角瓶瓶口使用前后需在酒精燈外焰上燒過滅菌。2、用滅菌的鑷子輕輕捏出幼苗，放在無菌的培養(yǎng)皿中，用滅菌的剪刀將主莖剪成若干0.5-1cm的小段，要求每段至少包含一個生長點(diǎn)，接入盛有MS培養(yǎng)基的三角瓶中，每一個切段必須直接接觸培養(yǎng)基，三角瓶口重新燒過滅菌，并重新封好。3、在光照培養(yǎng)箱中，25℃，16小時光照條件下培養(yǎng)4周，可長成完整植株。第五頁，共45頁。1、點(diǎn)著酒精燈第六頁，共45頁。2、雙手擦拭消毒第七頁，共45頁。3、剪刀滅菌外焰第八頁，共45頁。4、酒精中冷卻第九頁，共45頁。5、把酒精燒去第十頁，共45頁。6、打開三角瓶——鋁箔紙的拿法a第十一頁，共45頁。8、瓶口在火焰上燒過第十二頁，共45頁。9、鋁箔紙的放法第十三頁，共45頁。11、鑷出苗第十四頁，共45頁。12、放入培養(yǎng)皿中第十五頁，共45頁。13、幼苗形態(tài)——生長點(diǎn)第十六頁，共45頁。14、剪取莖段第十七頁，共45頁。15、剪好的苗第十八頁，共45頁。培養(yǎng)皿的拿法第十九頁，共45頁。16、莖段接種a第二十頁，共45頁。17、莖段接種b第二十一頁，共45頁。18、接種好的苗a第二十二頁，共45頁。19、接種好的苗b第二十三頁，共45頁。20、重新封好瓶口a第二十四頁，共45頁。21、重新封好瓶口b第二十五頁，共45頁。22、重新封好瓶口c第二十六頁，共45頁。

二愈傷組織的培養(yǎng)１、挑選生長健康的無菌葉或莖，在滅菌的培養(yǎng)皿中→剪成0.5-1cm2的小塊或相當(dāng)大小的莖段(造成傷口),→接種在盛有MS培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中→將培養(yǎng)皿用封口膜封住。２、在光照培養(yǎng)箱中，25℃下,16小時光照，培養(yǎng)兩周，可形成愈傷組織。第二十七頁，共45頁。1、將苗剪出傷口第二十八頁，共45頁。2、剪好的葉片和莖段第二十九頁，共45頁。3、打開培養(yǎng)皿第三十頁，共45頁。5、愈傷組織接種第三十一頁，共45頁。6、培養(yǎng)皿封口第三十二頁，共45頁。

三、苗的莖尖培養(yǎng)１、取幼苗10株，剪取1cm左右的莖尖→浸入70%的酒精1分鐘→消毒液中15分鐘→無菌水沖洗5次→滅菌的濾紙上吸干→放入滅菌的培養(yǎng)皿。２、在雙目解剖鏡下，用滅菌的解剖針剝?nèi)ビ兹~露出生長錐，挑取帶著兩至三個葉原基的生長錐。移到盛有B5培養(yǎng)基的培育皿中，誘導(dǎo)愈傷組織形成，用封口膜將培養(yǎng)皿封好。３、在恒溫培養(yǎng)箱中，26℃下,培養(yǎng)六周，可形成簇生芽叢。

第三十三頁，共45頁。1、幼苗形態(tài)第三十四頁，共45頁。2、剪取莖尖莖尖第三十五頁，共45頁。3、剪好的莖尖第三十六頁，共45頁。4、倒入70%酒精處理1分鐘第三十七頁，共45頁。5、倒去酒精第三十八頁，共45頁。6、倒入消毒液(一般為升汞）處理15分鐘第三十九頁，共45頁。7、倒去消毒液第四十頁，共45頁。8、無菌水沖洗5次第四十一頁，共45頁。9、取出莖尖第四十二頁，共45頁。10、在濾紙上吸干水分第四十三頁，共45