2025屆人教版高考生物一輪復習：生物技術與工程大單元回顧

大單元回顧?新視角體驗

單元網(wǎng)絡構建

發(fā)酵與傳統(tǒng)發(fā)酵技術

代傳統(tǒng)發(fā)酵技術H泡菜制作、果酒和果醋的制作

培養(yǎng)基「固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、鑒定培養(yǎng)基等

I營養(yǎng)成分:水、無機鹽、碳源、氮源等

無菌技術「消毒:紫外線、化學藥物、煮沸、巴氏消毒等

~滅菌：濕熱滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌等

「［發(fā)酵工程卜感生物的培養(yǎng)頡）微生物的純用養(yǎng)槎種方法:平板劃線法、稀釋涂布平板法

-----------微生物的選擇培養(yǎng)P選擇培養(yǎng)基

r培養(yǎng)過程及方法

微生物數(shù).測定「稀釋涂布平板法（間接法）

—顯微直接計數(shù)法（直接法）

r——r^包芭■選育菌種T擴大培養(yǎng)T配制培養(yǎng)基T滅菌T接種T發(fā)酵罐內發(fā)酵T分離、提純產(chǎn)物

I友醉！:桂_

I與其應用又應用食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)、農(nóng)牧業(yè)、其他方面

植物組織培養(yǎng)「原理:植物細胞全能性

―—如程：外植體一愈傷組織-胚狀體->個體

植物體細胞雜交「原理:細胞膜的流動性、植物細胞全能性

（植物細胞I:程卜

r一程：去除細胞壁一原生質體融合一雜種細胞-愈傷組織一雜種植株

?應用-快繁、脫毒、單倍體育種、突變體研究、細胞產(chǎn)物工廠化生產(chǎn)等

動物細胞培養(yǎng)「條件:營養(yǎng)、無菌無毒環(huán)境、溫度和氣體環(huán)境等

~［過程:原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)

干細胞

----------胚胎干細胞、成體干細胞、iPS細胞

I動物細胞核移植與克隆

細胞融合與單克隆抗體「細胞融合方法:電融合、PEG、滅活的病毒等

r?單克隆抗體的制備及應用

受精與早期胚胎發(fā)育「受精過程：準備階段-?受精階段

r早期胚胎發(fā)育過程:受精卵T卵裂T桑燕胚T囊胚市原腸胚

生

物

q胚胎I：叫-體外受精與試管動物

技卵母細胞的采集和成熟、精子的獲取和獲能、體外受精

術胚胎分割與胚胎移植

與

限制酶「來源:,：主要來H原核生物

工-I作用:

:在特定核甘酸序列位點切割磷酸：酯鍵

程

r-）DNA連接酶「種類:E.COJ7DNA連接酶、T4DNA連接酶

ft?1?JT^I作用：在特定核昔酸序列位點形成磷酸二酯鍵

種類：質粒、噬菌體、.動植物病毒

條件：能自我復制、具限制酶切割位點、具標記基因、對受體無害等

目的基因的篩選與獲取「篩選合適的目的基因

利用PCR獲取和擴增目的基因

構建基因衣達載體

目的基因、標記基因、啟動子、終止子等

［其因工產(chǎn)卜廄本程閆-將目的基因導入受體細胞??植物細胞：農(nóng)桿菌轉化法、花粉管通道法等

?動物細胞：顯微注射法

?微生物細胞：感受態(tài)細胞法（Ca,■處理）

目的基因的檢測與鑒定「分子水平:DNA雜交、DNA-RNA雜交、抗原f體雜交

一I個體水平

?原理：體外DNA復制

<DNA粗提取與鑒定）~~（PCR反應原理與技術卜1

PCR反應過程：變性-?退火-?延伸

低目一農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生、食品工業(yè)等

基本原理

，一一、（----------中心法則逆推

1｛蛋白質工程卜［應用

醫(yī)藥I：業(yè)、其他「業(yè)、農(nóng)業(yè)等

.轉基因成果、對轉基因產(chǎn)品安全性的爭論

，轉基因產(chǎn)品的安全性）■（理性不待轉基因技術

我國禁止生殖性克隆人

-｛關注生殖性克警惕用新技術研究生殖性克隆人

q禁止生物武器）

教材核心默寫

【基礎填空】

一、發(fā)酵工程

1.果酒、果醋的制作原理與發(fā)酵條件

項目果酒制作果醋制作

菌種酵母菌醋酸菌

菌種附著在葡萄皮上的①野生型的

空氣中的醋酸菌

來源酵母菌_

氧氣、糖源充足時：

有氧條件下，酵母菌通過有氧呼

④C6Hl2。6+202—--—>

吸大量繁殖；無氧條件下，酵母菌

發(fā)酵2cH3coOH+2co2+2H2O+能量；

通過無氧呼吸產(chǎn)生酒精：

過程缺少糖源、氧氣充足時：

C6Hl2。6------>②2c2H50H

C2H50H+O2------>⑤CH3coOH

+2CO2十能量

+H2O+能量

一般酒精發(fā)酵溫度為③18?

溫度⑥30?35℃

30℃

氣體前期：需氧；后期：無氧需要充足的氧氣

時間10?12d7-8d

2.果酒、果醋發(fā)酵過程中，除了要控制溫度，還要控制通氣情況。酒精發(fā)酵為無氧發(fā)

酵，需.封閉一充氣口;醋酸發(fā)酵為有氧發(fā)酵，需適時通過充氣口充入、無菌空氣.。

3.微生物培養(yǎng)基類型

(1)按功能分：選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。培養(yǎng)基中以尿素為唯一的氮源篩選分

解尿素的細菌，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基;培養(yǎng)基中加入伊紅一亞甲藍，鑒別大腸

桿菌，該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基。

(2)按物理性質，分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基要加入凝固劑——

.瓊脂一。

4.巴氏消毒法可用于一些不耐高溫的液體，如牛奶。在63?65℃消毒30min或72?

76℃處理15s或80?85℃處理10?15s(2023版人教)，可以殺死牛奶中的,絕大多數(shù)

微生物并且基本不破壞牛奶的營養(yǎng)成分。

5.滅菌常用的三種方法有：灼燒滅菌法、干熱滅菌法、濕熱滅菌法。

⑴高壓蒸汽滅菌是以水蒸氣為介質，在壓力為100kPa、溫度為121℃的條件下,

維持15~30min來滅菌的。

(2)耐高溫的和需要保持干燥的物品,如玻璃器皿(如吸管、.培養(yǎng)皿一等)、金屬用具等，

可以在干熱滅菌箱中滅菌,在160?170℃的熱空氣中維持1?2h。

(3)微生物的接種工具，如涂布器、接種環(huán)、接種針或其他金屬用具，直接在酒精

燈火焰的充分燃燒層.灼燒,可以迅速徹底地滅菌。

6.由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物,獲得純培養(yǎng)物的過程就是

純培養(yǎng)。單菌落一般是由單個微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。

7.常用的兩種微生物接種方法

(1)平板劃線法：通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作,將聚集的菌種逐步

稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。

(2)稀釋涂布平板法：將菌液進行一系列的等比(梯度)稀釋，然后將不同稀釋度的菌

液分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面,待涂布的菌液被培養(yǎng)基吸收后,將平板倒置，

放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。稀釋涂布平板法用到的儀器(工具)：微量移液器(移液管)、_

涂布器。

8.微生物的數(shù)量測定

(1)為了保證結果準確，一般選擇菌落數(shù)為30?300的平板進行計數(shù)。

(2)在同一稀釋度下，應至少對3個平板進行重復計數(shù),然后求出一平均值一。

⑶稀釋涂布平板法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少，這是因為當兩個或多個

—細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個_菌落一。

(4)利用顯微鏡進行—直接—計數(shù)，也是一種常用的、快速直觀的測定微生物數(shù)量的方法。

該方法利用特定的細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板一，在顯微鏡下觀察、計數(shù)，然后再計

算一定體積的樣品中微生物的數(shù)量。

⑸細菌計數(shù)板和血細胞計數(shù)板的計數(shù)原理—相同_(選填“相同”或“不同”)。

9.發(fā)酵工程所用的菌種大多是.單一菌種一，中心環(huán)節(jié)是、發(fā)酵罐內發(fā)酵一，產(chǎn)品主

要包括微生物的代謝產(chǎn)物、酶及微生物的.菌體。

二、細胞工程

10.細胞的全能性指細胞經(jīng)過分裂和分化后，仍然具有產(chǎn)生—完整生物體—或分化成其

他、各種細胞一的潛能。

11.植物組織培養(yǎng)技術的原理是植物細胞具有全能性。在培養(yǎng)的過程中，外植體消

毒用體積分數(shù)為70%的酒精和次氯酸鈉溶液。脫分化一般不需要光照。脫分化時，

生長素和細胞分裂素比例—適生有利于愈傷組織的形成。再分化需要光照.，因

為.葉綠素的形成需要光照一。生長素和細胞分裂素比例—高有利于生根。生長素

和細胞分裂素比例—低有利于生芽。

12.植物體細胞雜交技術中的兩個原理是細胞膜的流動性和細胞的全能性，用到的

兩種酶是一纖維素酶和果膠酶.，誘導原生質體融合的兩類方法是.物理法.(離心法

和電融合法等)和化學法(包括聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法)o

雜種細胞的形成標志是.新細胞壁形成.。

13.利用植物組織培養(yǎng)技術生產(chǎn)次生代謝物等，實現(xiàn)細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，培養(yǎng)到

.愈傷組織一階段就可以了。

14.動物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，將分瓶后的細胞培養(yǎng)稱為傳代

培養(yǎng)；區(qū)分原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的關鍵是是否分瓶培養(yǎng)。

15.動物細胞培養(yǎng)的條件

(1)無菌、無毒的環(huán)境：對.培養(yǎng)液一和所有培養(yǎng)用具進行滅菌處理以及在無菌環(huán)境下進

行操作，培養(yǎng)液還需要定期—更換—以便清除代謝產(chǎn)物，防止細胞代謝物積累對細胞自

身造成危害。

(2)營養(yǎng)：在使用合成培養(yǎng)基時，通常需加入血清等一些天然成分。

(3)適宜的溫度、pH和滲透壓：溫度為36.5±0.5℃(哺乳動物)，pH為7.2?7.4,一滲透

壓—也是動物細胞培養(yǎng)過程中需要考慮的一個重要環(huán)境參數(shù)。

(4)氣體環(huán)境：在動物細胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，并將它們置于含

95%空氣和5%CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng),02是細胞代謝所必需的一。

CO2的作用是.維持培養(yǎng)液的pH一。

16.胚胎干細胞(簡稱ES細胞)存在于早期胚胎中,具有發(fā)育成年個體的潛能。成

體干細胞是一成體一組織或器官內的干細胞。一般認為，成體干細胞具有一組織特異性

_,只能分化成特定的細胞或組織。誘導多能干細胞(iPS細胞)理論上可以避免免疫

排斥反應。

17.動物細胞融合的原理是.細胞膜的流動性.。融合方法有聚乙二醇(PEG)融合法、

電融合法、—滅活病毒誘導法

18.動物體細胞核移植技術的原理是.動物體細胞核具有全能性一，從而得到克隆動物。

19.雌、雄原核的形成：精子入卵后，尾部脫離，原有的核膜破裂并形成一個

新的.核膜.，最后形成一個.比原來精子的核還大.的核,叫作雄原核。精子入卵后，

被.激活.的卵子完成.減數(shù)分裂H.,排出一第二極體一后,形成雌原核。

20.體外受精技術

(1)主要包括卵母細胞的采集、精子的獲取和受精等步驟。

(2)當采集到卵母細胞和精子后，要分別對它們進行成熟培養(yǎng)(培養(yǎng)到」11L期)和_<

能—處理，然后才能用于體外受精。

⑶一般情況下，可以將獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵子置于適當?shù)呐囵B(yǎng)液中共同培

養(yǎng)一段時間，來促使它們完成受精。

21.早期胚胎包括受精卵一桑―胚—囊胚幾個階段。早期胚胎發(fā)育的場所是—

輸卵管。囊胚由滋養(yǎng)層和內細胞團組成，滋養(yǎng)層細胞發(fā)育成胎膜和胎盤，內細胞

團發(fā)育成胎兒的各種組織。囊胚」后發(fā)育成原腸胚。

22.胚胎移植用到的兩種激素：①同期發(fā)情注射孕激素；②超數(shù)排卵注射促性腺

激素一。

23.胚胎分割

⑴材料：發(fā)育良好，形態(tài)正常的桑甚胚或囊胚。

(2)實質：胚胎分割可增加動物后代，其實質是動物的無性生殖，即克隆。

(3)分割要求：對囊胚分割時，要注意將內細胞團均等分割,否則會影響分割后胚胎

的復—和進一步發(fā)育。

(4)性別鑒定是取滋養(yǎng)層。

三、基因工程

24.基因工程的原理是一基因重組一，優(yōu)點是定向改造生物的一遺傳性狀一。

25.重組DNA技術的基本工具

(1)限制性內切核酸酶(簡稱：限制酶)，主要是從原核生物中分離純化出來的?？梢?/p>

識別、特定一的核昔酸序列并切開特定部位的兩個核甘酸之間的.磷酸二酯.鍵，產(chǎn)生

、黏性一末端或.生.末端。不同的限制酶也能切出一相同一的黏性末端。如果切出不

同的黏性末端，則目的基因和載體能定向連接，避免自身環(huán)化和反向連接，提高連

接的有效性。

(2)DNA連接酶連接兩個DNA片段，恢復被限制酶切開的兩個核昔酸之間的—磷酸

二酯.鍵。按來源可分為E.coliDNA連接酶和T4DNA連接酶，前者只能連接黏

性末端，后者能連接黏性末端和平末端，但是連接平末端效率低。

⑶載體

①種類：.質粒.、九噬菌體的衍生物或噬菌體、動植物病毒等。

②特點：具有一個或多個限制酶的切割位點；在受體細胞中能進行自我復制,

或整合.到受體DNA上，隨受體DNA同步復制。

③載體上的—標記—基因一般是一些抗生素的抗性基因。作用是便于重組DNA分子

的篩選或供重組DNA的鑒定和選擇.。天然的質粒必須經(jīng)過.人工改造.才能作為載

體。

26.基因工程中獲取目的基因的方法有：構建基因文庫獲取.、利用PCR獲取和

擴增目的基因、人工合成等。

27.利用PCR獲取和擴增目的基因

第一步：變性.，加熱至90℃以上，DNA解鏈為單鏈；

第二步：復性，冷卻至50℃左右，引物結合到互補DNA鏈；

第三步：延伸.，加熱至72℃左右，耐高溫的DNA聚合酶（Kzq酶）從引物起始進行

互補鏈的合成。如此重復循環(huán)多次。

28.基因表達載體的組成：啟動子、目的基因、終止子、標記基因、復制原點。啟

動子是RNA聚合酶識別和結合的部位,驅動轉錄。

29.將目的基因導入植物細胞的方法：.農(nóng)桿菌轉化法一等。將目的基因導入動物細胞

的方法：顯微注射法。將目的基因導入微生物細胞的方法：一般先用Ca?+處理

細胞使其處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài),然后再將重組的基因

表達載體導入其中。

30.檢查轉基因抗蟲棉是否培育成功

（1）分子水平的檢測，包括通過，等技術檢測棉花的染色體DNA上是否插入了Bt

基因①NA分子雜交技術）或檢測Bt基因是否轉錄出了mRNA（分子雜交技術）；從轉基

因棉花中提取蛋白質，用相應的抗體進行抗原一抗體雜交,檢測及基因是否翻譯

成Bt抗蟲蛋白等。

（2）需要進行.個體生物學.水平的鑒定。例如，通過采摘抗蟲棉的葉片飼喂棉鈴蟲來確

定Bt基因是否賦予了棉花抗蟲特性以及抗性的程度。

【長句表達】

1.葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時，要留約1/3的空間，目的是一先讓酵母菌進行有氧呼吸一，快

速繁殖，耗盡02后再進行酒精發(fā)酵；還能防止.發(fā)酵過程中產(chǎn)生的CO2造成發(fā)酵液的

溢出一。

2.泡菜裝至八成滿的生物學原因：在泡菜發(fā)酵初期，由蔬菜表面帶入的大腸桿菌、酵

母菌等較為活躍，它們可進行發(fā)酵，發(fā)酵產(chǎn)物中有較多的C02,如果泡菜壇裝得太

滿，發(fā)酵液可能會溢出壇外。另外，泡菜壇裝得太滿，會使鹽水不太容易完全淹沒

菜料，從而導致壇內菜料變質腐爛。

3.消毒和滅菌在效果上的差別在于：消毒僅殺死.物體表面或內部一部分微生物一；

滅菌可以殺死物體內外全部的微生物,包括芽抱和抱子。

4.統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目小，這是因為當兩個或多個細胞連在一起時，

平板上觀察到的只是一個菌落一。因此，統(tǒng)計結果一般用菌落數(shù)而不是用.活菌數(shù).來

表示o

5.顯微鏡進行直接計數(shù)法統(tǒng)計的結果一般是活菌數(shù)和死菌數(shù)的總和,因為此法無

法區(qū)分細胞的死活。

6.植物組織培養(yǎng)中添加蔗糖的目的是.提供營養(yǎng)和調節(jié)滲透壓一。

7.動物細胞需要傳代培養(yǎng)的原因是、營養(yǎng)物質缺乏、有害代謝產(chǎn)物的積累等導致細胞

分裂受阻，大多數(shù)動物細胞的貼壁生長相互接觸時，細胞分裂也會停止一。

8.動物細胞培養(yǎng)中兩次使用胰蛋白酶的作用不同：第一次：處理剪碎的組織，使其—

分散成單個細胞一。第二次：使貼壁生長的細胞從瓶壁上脫落下來一。

9.快速（微型）繁殖的優(yōu)點：不僅可以高效、快速地實現(xiàn)種苗的大量繁殖，還可以.保持

優(yōu)良品種的遺傳特性。

10.植物頂端分生區(qū)附近的病毒極少，甚至無病毒，所以可以通過植物組織培養(yǎng)

—實現(xiàn)作物脫毒。

11.培養(yǎng)動物細胞時選胚胎或幼齡動物的組織和器官的原因是.其分化程度低，增殖能

力強。

12.動物細胞核移植的過程中，對受體卵母細胞去核的原因是.使核移植的動物的遺傳

物質全部來自供體的體細胞_。

13.選擇去核卵母細胞作為受體細胞的原因：①營養(yǎng)豐富；②體積大，易操作；③含

有激發(fā)細胞核全能性表達的物質。

14.體細胞核移植技術難度明顯高于胚胎細胞核移植，原因是一體細胞分化程度高，恢

復其全能性較難

15.胚胎移植的優(yōu)勢：充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力。

16.如要利用基因工程獲取糖蛋白、有生物活性的胰島素，應采用真核生物酵母菌，而

不能用大腸桿菌作為受體細胞，理由是.糖蛋白、有生物活性的胰島素的合成需內質網(wǎng)

和高爾基體的加工、運輸?shù)?，而大腸桿菌只有核糖體這一種細胞器，沒有內質網(wǎng)、高爾

基體等一。

高考真題體驗

題組一發(fā)酵工程

1.（2023?山東卷）以下是以泡菜壇為容器制作泡菜時的4個處理：①沸鹽水冷卻后再倒

入壇中；②鹽水需要浸沒全部菜料；③蓋好壇蓋后，向壇蓋邊沿的水槽中注滿水；④檢

測泡菜中亞硝酸鹽的含量。下列說法正確的是（C）

A.①主要是為了防止菜料表面的醋酸菌被殺死

B.②的主要目的是用鹽水殺死菜料表面的雜菌

C.③是為了使氣體只能從泡菜壇排出而不能進入

D.④可檢測到完整發(fā)酵過程中亞硝酸鹽含量逐漸降低

解析：沸鹽水冷卻后再倒入壇中主要是為了防止乳酸菌被殺死，A錯誤；鹽水需要浸沒

全部菜料，主要目的是創(chuàng)造一個無氧的環(huán)境，有利于乳酸菌的發(fā)酵，B錯誤；蓋好壇蓋

后，向壇蓋邊沿的水槽中注滿水，目的是使氣體只能從泡菜壇排出而不能進入，保證壇

內處于無氧環(huán)境，C正確；泡菜腌制過程中，亞硝酸鹽含量先升高，后降低，D錯誤。

2.（2023?重慶卷）垃圾分類有利于變廢為寶，減少環(huán)境污染。如圖為分類后餐廚垃圾資

源化處理的流程設計。下列敘述錯誤的是（D）

添加木屑雄肥體（好氧）.

餐廚破碎、匡榨

區(qū)j一沼氣

油水混合物

A.壓榨出的油水混合物可再加工，生產(chǎn)出多種產(chǎn)品

B.添加的木屑有利于堆肥體通氣，還可作為某些微生物的碳源

C.X中需要添加合適的菌種，才能產(chǎn)生沼氣

D.為保證堆肥體中微生物的活性，不宜對堆肥體進行翻動

解析：壓榨出的油水混合物可再加工，生產(chǎn)出多種產(chǎn)品，有利于實現(xiàn)物質的循環(huán)再生和

能量的多級利用，A正確；添加的木屑有利于堆肥體通氣，木屑也可作為某些微生物的

碳源，B正確；X中需要添加合適的菌種，通過分解有機物才能產(chǎn)生沼氣，C正確；為

保證堆肥體中好氧微生物的活性，可以對堆肥體進行翻動，D錯誤。

3.（2023?北京卷）自然界中不同微生物之間存在著復雜的相互作用。有些細菌具有溶菌

特性，能夠破壞其他細菌的結構使細胞內容物釋出。科學家試圖從某湖泊水樣中分離出

有溶菌特性的細菌。

⑴用于分離細菌的固體培養(yǎng)基包含水、葡萄糖、蛋白膝和瓊脂等成分，其中蛋白腺主要

為細菌提供_氮源、碳源一和維生素等。

（2）A菌通常被用做溶菌對象，研究者將含有一定濃度A菌的少量培養(yǎng)基傾倒在固體培

養(yǎng)平板上，凝固形成薄層。培養(yǎng)一段時間后，薄層變渾濁（如圖），表明A菌能在培養(yǎng)

平板中生長繁殖。

（3）為分離出具有溶菌作用的細菌，需要合適的菌落密度，因此應將含菌量較高的湖泊水

樣稀釋后,依次分別涂布于不同的渾濁薄層上。培養(yǎng)一段時間后，能溶解A菌的菌

落周圍會出現(xiàn).透明圈（溶菌圈）。采用這種方法，研究者分離、培養(yǎng)并鑒定出P菌。

（4）為探究P菌溶解破壞A菌的方式，請?zhí)岢鲆粋€假設，該假設能用以下材料和設備加

以驗證：假設P菌通過分泌某種化學物質使A菌溶解破裂。

主要實驗材料和設備：P菌、A菌、培養(yǎng)基、圓形濾紙小片、離心機和細菌培養(yǎng)箱。

解析：（1）用于分離細菌的固體培養(yǎng)基包含水、葡萄糖、蛋白月東和瓊脂等成分，其中蛋白

陳主要來源于動物原料，蛋白腺主要為細菌提供碳源、氮源和維生素等。（2）將含有一定

濃度A菌的少量培養(yǎng)基傾倒在固體培養(yǎng)平板上，凝固形成薄層。培養(yǎng)一段時間后，薄層

若變渾濁，則說明菌體數(shù)量增加，表明A菌能在培養(yǎng)平板中生長繁殖。（3）因為湖泊水

樣中含菌量較高，所以若從其中分離具有溶菌作用的細菌，需要合適的菌落密度，應將

含菌量較高的湖泊水樣稀釋后依次分別涂布于不同的渾濁薄層上。培養(yǎng)一段時間后，能

溶解A菌的菌落周圍不會出現(xiàn)菌體（菌體被破壞），則其周圍會出現(xiàn)透明圈（溶菌圈）。因

此研究者可采用這種方法分離和培養(yǎng)并鑒定出P菌。（4）為探究P菌溶解破壞A菌的方

式，可假設P菌通過分泌某種化學物質使A菌溶解破裂。若培養(yǎng)過P菌的培養(yǎng)液可使

A菌溶解破裂，即可得到證明。

題組二細胞工程

4.（2023?海南卷）某團隊通過多代細胞培養(yǎng)，將小鼠胚胎干細胞的Y染色體去除，獲得

XO胚胎干細胞，再經(jīng)過一系列處理，使之轉變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣毎Ｏ铝杏嘘P敘述錯

誤的是（A）

A.營養(yǎng)供應充足時，傳代培養(yǎng)的胚胎干細胞不會發(fā)生接觸抑制

B.獲得X0胚胎干細胞的過程發(fā)生了染色體數(shù)目變異

C.X0胚胎干細胞轉變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣毎倪^程發(fā)生了細胞分化

D.若某瀕危哺乳動物僅存雄性個體，可用該法獲得有功能的卵母細胞用于繁育

解析：營養(yǎng)供應充足時，傳代培養(yǎng)的胚胎干細胞也會發(fā)生接觸抑制，A錯誤；X0胚胎

干細胞中丟失了Y染色體，因而該細胞的獲得過程發(fā)生了染色體數(shù)目變異，B正確；

X0胚胎干細胞轉變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣毎倪^程中細胞的功能發(fā)生了特化，因而發(fā)生了

細胞分化，c正確；若某瀕危哺乳動物僅存雄性個體，可用該法，即獲得有功能的卵母

細胞，進而用于繁育，實現(xiàn)瀕危物種的保護，D正確。

5.（2023?北京卷）甲狀旁腺激素（PTH）水平是人類多種疾病的重要診斷指標。研究者制備

單克隆抗體用于快速檢測PTH,有關制備過程的敘述不正確的是（D）

A.需要使用動物細胞培養(yǎng)技術

B.需要制備用PTH免疫的小鼠

C.利用抗原一抗體結合的原理篩選雜交瘤細胞

D.篩選能分泌多種抗體的單個雜交瘤細胞

解析：單克隆抗體的制備過程中需要用到動物細胞培養(yǎng)技術，如骨髓瘤細胞的培養(yǎng)等,

A正確；本操作的目的是制備單克隆抗體用于快速檢測PTH,為獲得能產(chǎn)生抗PTH抗

體的B淋巴細胞，可用PTH對小鼠進行免疫，B正確；抗原與抗體的結合具有特異性，

故可利用抗原一抗體結合的原理篩選雜交瘤細胞，C正確；雜交瘤細胞是B細胞與骨髓

瘤細胞融合之后經(jīng)篩選而得到的，由于一種B細胞經(jīng)免疫后只能產(chǎn)生一種抗體，故理

論上講，單個雜交瘤細胞只能產(chǎn)生一種抗體，D錯誤。

題組三胚胎工程

6.（2023?廣東卷）科學家采用體外受精技術獲得紫羚羊胚胎，并將其移植到長角羚羊體

內，使后者成功妊娠并產(chǎn)仔，該工作有助于恢復瀕危紫羚羊的種群數(shù)量。此過程不涉及

的操作是（C）

A.超數(shù)排卵B.精子獲能處理

C.細胞核移植D.胚胎培養(yǎng)

解析：體外受精技術獲得紫羚羊胚胎涉及卵母細胞的采集和培養(yǎng)（用促性腺激素處理，

使其超數(shù)排卵，然后從輸卵管中沖取卵子）、精子的采集和獲能、體外受精、早期胚胎培

養(yǎng)；將紫羚羊胚胎移植到長角羚羊體內，使后者成功妊娠并產(chǎn)仔，涉及胚胎移植。整個

過程沒有涉及細胞核移植。

7.（2023?浙江1月卷）在家畜優(yōu)良品種培育過程中常涉及胚胎工程的相關技術。下列敘

述錯誤的是（C）

A.經(jīng)獲能處理的精子才能用于體外受精

B.受精卵經(jīng)體外培養(yǎng)可獲得早期胚胎

C.胚胎分割技術提高了移植胚胎的成活率

D.胚胎移植前需對受體進行選擇和處理

解析：胚胎分割不會提高移植胚胎的成活率，C錯誤；胚胎移植前，需選擇體質健康和

繁殖能力正常的受體且對其進行同期發(fā)情處理，D正確。

題組四基因工程

8.（2023?湖北卷）用氨平青霉素抗性基因（A在松、四環(huán)素抗性基因（意嚴）作為標記基因構

建的質粒如圖所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的質粒，構建

基因表達載體（重組質粒），并轉化到受體菌中。下列敘述錯誤的是（D）

A.若用小〃din酶切，目的基因轉錄的產(chǎn)物可能不同

B.若用尸川1酶切，在含Tet（四環(huán)素）培養(yǎng)基中的菌落，不一定含有目的基因

C.若用SR/I酶切，可通過DNA凝膠電泳技術鑒定重組質粒構建成功與否

D.若用用力1酶切，攜帶目的基因的受體菌在含Amp（氨平青霉素）和Tet的培養(yǎng)基中

能形成菌落

解析：若只用H沅din一種酶切質粒和目的基因，則產(chǎn)生相同的黏性末端，可能導致目的

基因正向連接或反向連接，故目的基因轉錄的產(chǎn)物可能不同，A正確；若用PvuI酶切，

則會破壞氨葦青霉素抗性基因（A在R）,而重組質粒和空質粒中都有四環(huán)素抗性基因

（亮昌，因此在含Tet（四環(huán)素）培養(yǎng)基中的菌落，不一定含有目的基因，B正確；若用SphI

酶切，則目的基因插入四環(huán)素抗性基因（嶷力中，重組質粒的大小與空質粒不同，故可通

過DNA凝膠電泳技術鑒定重組質粒構建成功與否，C正確；若用前人1