精液檢驗講解

精液檢驗精液的組成精液的組成組成含量（%）成分作用精囊液50～80果糖、凝固酶供給精子能量，和蛋白質(zhì)使精液呈膠凍狀前列腺液尿道球腺液尿道旁腺液15～302～32～3ACP、纖溶酶使精液液化潤滑、清潔尿道潤滑、清潔尿道精漿的組成及作用精液檢驗的主要目的1.評估男性生育功能，提供不育癥診斷和療效觀察的依據(jù)；2.輔助診斷男性生殖系統(tǒng)疾病；3.輸精管結(jié)扎術(shù)療效觀察；4.婚前檢查；5.體外授精和精子庫篩選優(yōu)質(zhì)精子；6.法醫(yī)學(xué)鑒定。精液檢驗的內(nèi)容精液：一般性狀（理化）精子：形態(tài)、數(shù)量、功能精漿：生化、免疫學(xué)、微生物學(xué)等精液標(biāo)本的采集與處理【采集方法】推薦手淫法?！举|(zhì)量控制】1、采集時機(jī)

采集標(biāo)本前須禁欲2～7天,采集前排尿。2、采集次數(shù)

一般應(yīng)間隔1～2周檢查1次，連續(xù)檢查2～3次。每次應(yīng)收集排出的全部精液。3、標(biāo)本轉(zhuǎn)運

裝在潔凈、消毒、加蓋的塑料試管內(nèi)。采集后立即送檢(1小時內(nèi))并保溫。精液一般性狀檢驗一、外觀和透明度參考區(qū)間：一般有股腥味，灰白色或乳白色，不透明。自行液化后呈半透明或稍有混濁。臨床意義久未排精者→呈淺黃色。精囊炎和前列腺炎→黃色膿性精液。精囊腺和前列腺炎癥、結(jié)核、結(jié)石和腫瘤→鮮紅或暗紅色伴大量紅細(xì)胞的血精。精液一般性狀檢驗二、精液量：直接測量法正常人：一次排精量（1.5～6.8）ml，平均3.5ml。精液量↓→不利于精子通過陰道進(jìn)入子宮、輸卵管→影響受精。精液量↑→精子被稀釋→不育。精液一般性狀檢驗二、精液量：直接測量法精液一般性狀檢驗三、凝固與液化定義：新排出的精液從膠凍狀轉(zhuǎn)變?yōu)樽杂闪鲃訝顟B(tài)所需的時間。檢測方法：吸管法，將全部精液置于37℃水浴中，每5～10分鐘用口徑較細(xì)的滴管吸取精液，待精液完全液化且很容易被吸取記錄時間。參考區(qū)間：精液離體后5~10分鐘開始液化。射精后精液立即凝固，液化時間＜60min。精液一般性狀檢驗三、凝固與液化臨床意義凝固障礙：精囊腺炎→凝固蛋白分泌↓。液化不全：前列腺炎→分泌纖溶酶↓。精液遲緩液化癥：超過1小時未液化或液化不完全→抑制精子活力→受孕機(jī)會↓。精液一般性狀檢驗四、黏稠度定義：指完全液化后的黏度。檢測方法直接玻棒法：將玻棒插入完全液化的精液，提拉玻棒，觀察拉起的黏絲及其長度。精液黏稠度分為3級。參考區(qū)間：玻棒法：黏絲長度＜2cm。臨床意義增加：常伴有不液化，影響精子活力，致使精子穿透障礙。下降：見于先天性無精囊腺及精子濃度太低或無精子癥。精液一般性狀檢驗四、黏稠度精液一般性狀檢驗五、酸堿度檢測方法：用精密pH試帶或酸度計在射精后1小時內(nèi)測定。參考區(qū)間：7.2～7.8質(zhì)量控制：一般選用pH范圍在6.0～10.0的試紙。細(xì)菌污染可使精液pH升高。臨床意義：pH＜7.0，伴少精癥，常反映輸精管道阻塞、先天性精囊缺如或附睪病變。pH＞8.0，常見于急性前列腺炎或附睪炎。精液顯微鏡檢驗一、精子存活率測定檢測方法：取液化精液和伊紅Y染液各1滴于載玻片上，混勻，加蓋玻片，放置30秒。高倍鏡下觀察200個精子，計數(shù)不著色精子，計算其百分率。參考值：有生育力男性精子存活率應(yīng)≥58%（伊紅染色法）。臨床意義：精子存活率減低是導(dǎo)致男性不育的重要原因，當(dāng)精子存活率低于40%可致不育。見于精索靜脈曲張、生殖系統(tǒng)感染或物理化學(xué)因素等。精液顯微鏡檢驗二、精子活動力檢查定義：指精子向前運動的能力，是直接反映精子質(zhì)量的一項指標(biāo)。檢測方法：取液化均勻精液1滴置載玻片上，蓋上蓋玻片，放置片刻，在高倍鏡下觀察5～10個視野，計數(shù)200個精子并進(jìn)行活動力分級，以百分率表示。結(jié)果判斷精液顯微鏡檢驗二、精子活動力檢查精液顯微鏡檢驗二、精子活動力檢查參考值：總活動力（PR+NP）≥40%，前向運動（PR）≥32%臨床意義：精子活動力減弱是導(dǎo)致不育的主要原因，見于精索靜脈曲張、泌尿生殖系感染如前列腺炎等及使用某些藥物如抗瘧藥、雌激素等。精液顯微鏡檢驗三、精子計數(shù)定義：指單位體積中精子數(shù)，即精子濃度。精子計數(shù)乘以1次射精量，即1次射精精子總數(shù)。檢測方法：取精液20μl于0.38ml稀釋液中混勻充池靜置5分鐘，高倍鏡下計數(shù)中央中方格內(nèi)精子數(shù)（N）。若每個中央中方格內(nèi)精子數(shù)為＜10個、10～40個、＞40個，應(yīng)分別計數(shù)25個、10個、5個中方格內(nèi)的精子數(shù)。參考值：WHO：＞20×109/L精液顯微鏡檢驗三、精子計數(shù)精液顯微鏡檢驗四、精子凝集定義：精子凝集指活動的精子以不同方式相互黏附在一起的現(xiàn)象。檢測方法：將精液制成濕片于顯微鏡下觀察精子凝集類型和分級參考值：無凝集。WHO將精子凝集分為4級：1級：多數(shù)精子是游離的，＜10%的精子發(fā)生凝集。2級：10%～50%的精子發(fā)生凝集。3級：＞50%的精子發(fā)生凝集。4級：所有精子發(fā)生了凝集。臨床意義：可提示抗精子抗體的存在。精液顯微鏡檢驗五、精子形態(tài)檢查檢測方法濕片法：精子計數(shù)后，用高倍鏡直接檢查精子形態(tài)。染色法：將液化精液涂成薄片，經(jīng)干燥和固定后進(jìn)行改良巴氏染色法等。油鏡下觀察計數(shù)200個精子，報告形態(tài)正常和異常精子百分率。若有預(yù)先固定染料的商品化載玻片，可直接滴加上5～10μl液化精液，加蓋玻片，數(shù)分鐘后精子即著色并清楚顯示精子形態(tài)結(jié)構(gòu)。精液顯微鏡檢驗五、精子形態(tài)檢驗正常精子形態(tài)特點

正常精子形似蝌蚪狀，由頭、體（頸、中段）、尾三部分構(gòu)成。頭部正面呈卵圓形，側(cè)面呈扁平梨形；體部輪廓直而規(guī)則，長約5～7μm，寬1μm；尾部細(xì)長，一般長約50～60μm。精液顯微鏡檢驗五、精子形態(tài)檢驗正常精子形態(tài)特點精液顯微鏡檢查驗五、精子形態(tài)檢驗異常精子形態(tài)①頭部異常：包括大頭、小頭、錐形頭、梨形頭、無定形頭等；②體部異常：主要指腫脹和不規(guī)則；③尾部異常：包括短尾、多尾、發(fā)夾狀尾及斷尾等；④聯(lián)合缺陷體：精子頭、體、尾均有或其中兩者有不同程度異常。精液顯微鏡檢驗五、精子形態(tài)檢驗異常精子形態(tài)精液顯微鏡檢驗五、精子形態(tài)檢驗異常精子形態(tài)精液顯微鏡檢驗五、精子形態(tài)檢驗異常精子形態(tài)精液顯微鏡檢驗五、精子形態(tài)檢驗臨床意義正常精液中異常精子應(yīng)＜20%，超過40%，即影響精液質(zhì)量，超過50%常可導(dǎo)致不育。生殖系統(tǒng)非特異性感染→尖頭和不規(guī)則精子比例↑。精索靜脈曲張→精子頭、體部腫脹或缺陷。服用化學(xué)藥品→精液出現(xiàn)未成熟的精子。工業(yè)廢物與環(huán)境污染→精子畸形或精子數(shù)量↓。精液顯微鏡檢驗五、精子形態(tài)檢驗其他細(xì)胞1.未成熟生殖細(xì)胞參考值：未成熟生精細(xì)胞＜1%。臨床意義：正常人成熟精細(xì)胞＞99%，在病理狀況下，當(dāng)曲細(xì)精管受損（如藥物或其他因素），精液中可出現(xiàn)較多的未成熟生精細(xì)胞。精原細(xì)胞初級精母細(xì)胞次級精母細(xì)胞精子細(xì)胞精液顯微鏡檢驗五、精子形態(tài)檢驗其他細(xì)胞2.紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞（1）紅細(xì)胞（偶見）和白細(xì)胞：正常＜5/HP。在生殖道炎癥、結(jié)核、惡性腫瘤時，精液中紅、白細(xì)胞數(shù)可增高。（2）上皮細(xì)胞：正常偶爾可見前列腺上皮細(xì)胞，增多見于前列腺增生。3.癌細(xì)胞

精液中查見癌細(xì)胞對生殖系惡性腫瘤的診斷將提供重要依據(jù)。精液顯微鏡檢驗六、精子低滲腫脹試驗（HOS）【檢測原理】是觀察精子在低滲溶液中的變化，以檢測精子膜的完整性。精子在低滲溶液中，水分子通過精子細(xì)胞膜進(jìn)入精子以達(dá)到內(nèi)外滲透壓平衡，由于精子尾部的膜相對薄而疏松，在尾部可出現(xiàn)不同程度的腫脹現(xiàn)象，顯微鏡觀察計數(shù)出現(xiàn)各種腫脹精子的百分率。【步驟】加膨脹液：取1ml膨脹液于加蓋微量離心管中，37℃5分鐘。加精液：吸取100μl混勻精液加入膨脹液，用移液器抽吸混勻37℃30min涂片：取10μl置于載玻片上，加蓋玻片。重復(fù)制備一張。鏡檢：用200倍相差顯微鏡鏡檢涂片，計數(shù)尾部未膨脹（死）和膨脹（活）的精子數(shù)目，每張涂片計數(shù)200個精子。精液顯微鏡檢驗六、精子低滲腫脹試驗（HOS）【參考區(qū)間】在排精30～60分鐘，約有70%以上精子應(yīng)為活動精子。HOS試驗應(yīng)有60%以上精子出現(xiàn)尾部膨脹?！九R床意義】可作為精子膜功能及完整性的評估指標(biāo)，可預(yù)測精子潛在的受精能力。精子尾部腫脹現(xiàn)象是精子膜功能正常的表現(xiàn)，男性不育癥者精子低滲腫脹率明顯降低。精液化學(xué)與免疫學(xué)檢驗化學(xué)檢驗主要用來評價附屬腺的分泌功能前列腺：鋅、酸性磷酸酶、LD-X活性等精囊腺：果糖附睪：α-葡糖苷酶精液化學(xué)與免疫學(xué)檢驗一、化學(xué)檢驗

1、果糖①由精囊產(chǎn)生，它是精子活動的主要能源。②間苯二酚比色法（國內(nèi)常用），正常濃度9.11~17.67mmol/L。③臨床意義：先天性精囊腺缺如，果糖為陰性；精囊腺炎時，果糖含量減低；在無精癥和射精量少于1ml者，若精漿中無果糖為精囊阻塞；有果糖，則為射精管阻塞精液化學(xué)與免疫學(xué)檢驗一、化學(xué)檢驗

2、精漿α-葡糖苷酶測定①比色法可測定精漿中α-葡糖苷酶的活性。葡萄糖氧化酶法測定葡萄糖的生成量，反映α-葡糖苷酶的活性。國內(nèi)臨床上較為常用。②臨床意義：精漿α-葡糖苷酶活性在一定程度上可反映附睪的功能狀態(tài)。精液化學(xué)與免疫學(xué)檢驗一、化學(xué)檢驗

3、精漿乳酸脫氫酶同工酶-X（LD-X）測定①LD-X的電泳位置在LD3-LD4之間?；钚詼y定多采用聚丙烯酰胺凝膠電泳、酶聯(lián)染色及光度計掃描法，求得其相對百分率。國內(nèi)臨床上較為常用。②參考值LD-X相對活性≥42.6%。③精子發(fā)生缺陷時無LD-X形成。少精或無精者可致LD-X活性減低。精液化學(xué)與免疫學(xué)檢驗一、化學(xué)檢驗

4、精漿酸性磷酸酶測定（ACP）①比色法②臨床意義：前列腺炎時ACP活性減低；前列腺癌和前列腺肥大時，ACP活性增高。5、精子頂體酶：與不育指標(biāo)有關(guān)。6、精漿鋅

下降：生殖器官發(fā)育不良，生育力下降。精液化學(xué)與免疫學(xué)檢驗二、免疫學(xué)檢驗

1．抗精子抗體測定（AsAb)AsAb有IgG、IgA、IgM、IgE4種類型，其中IgE-AsAb只參與變態(tài)反應(yīng)，與免疫不孕、流產(chǎn)無關(guān)，IgM-AsAb是近期感染指標(biāo)?！鵄sAb分類：凝集性、制動性和結(jié)合性精液化學(xué)與免疫學(xué)檢驗二、免疫學(xué)檢驗

2.精漿免疫抑制物（SPIM）臨床意義：人類精液中含有30余種抗原，因其含有免疫抑制物質(zhì)，故當(dāng)精液進(jìn)人女性生殖道后通常不會引起免疫應(yīng)答。免疫抑制物質(zhì)減低可見于不育癥、習(xí)慣性流產(chǎn)、配偶對丈夫精液過敏等。近來研究發(fā)現(xiàn)SPIM與HIV及生殖道腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)。精液化學(xué)與免疫學(xué)檢驗二、免疫學(xué)檢驗

3.精漿免疫球蛋白精漿免疫球蛋白主要是IgA、IgG，相當(dāng)于血清中的１％～２％.【參考范圍】①IgG：28.6±16.7mg/L。②IgA：90.3±57.7mg/L。③IgM：2.3±1.9mg/L【臨床意義】AsAb陽性者，IgG、IgM增高；正常人精漿中分泌型IgA含量很低，生殖道炎癥時，分泌型IgA增高；生殖道感染早期IgM增高。精液計算機(jī)輔助精子分析計算機(jī)輔助精子分析（computeraidedofsemenanalysis，CASA）是將計算機(jī)技術(shù)和圖像處理技術(shù)相結(jié)合發(fā)展起來的一項新的精子分析技術(shù)。CASA系統(tǒng)由硬件系統(tǒng)和軟件系統(tǒng)組成，其中硬件系統(tǒng)一段主要有顯微攝像系統(tǒng)、圖像采集系統(tǒng)、微機(jī)處理系統(tǒng)、顯示系統(tǒng)和溫控系統(tǒng)等。精液計算機(jī)輔助精子分析精液計算機(jī)輔助精子分析精液計算機(jī)輔助精子分析優(yōu)點：具有高效客觀、高精度的特點，但價格較昂貴。影響因素：系統(tǒng)識別精子的準(zhǔn)確性受精液中細(xì)胞和非細(xì)胞成分的影響。檢測出的結(jié)果常低于實際結(jié)果。局限性：對檢測精子濃度有一定局限性，在（20～50）×109/L的范圍內(nèi)檢測結(jié)果較理想。目前，WHO仍推薦使用顯微鏡直接檢測精子濃度和精子活動率。練習(xí)1.下列哪個不