2025年浙科版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷

…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年浙科版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷614考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、下圖表示核移植與克隆動物的相關圖解；有關敘述錯誤的是（）

A.用于核移植的供體細胞①一般都選用傳代10代以內的細胞B.圖示過程說明高度分化的動物細胞仍具有發(fā)育的全能性C.采集的卵母細胞培養(yǎng)到的②時期表示減數(shù)第二次分裂中期D.動物細胞培養(yǎng)過程中添加5%C02的目的是維持培養(yǎng)液的pH2、下列關于哺乳動物胚胎發(fā)育和細胞工程的敘述，正確的是（）A.卵裂期胚胎中細胞數(shù)目和有機物總量在不斷增加B.胚胎分割時需將原腸胚的細胞團均等分割C.胚胎干細胞具有細胞核大、核仁小和蛋白質合成旺盛等特點D.胚胎干細胞是一類未分化細胞，可從早期胚胎中分離獲取3、限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的識別序列及其切割位點分別如下：-C↓AATTC-和-G↓AATTC-，下圖表示某一目的基因片段與質粒拼接形成重組質粒的過程，下列相關敘述錯誤的是（）

A.限制酶在特定位點切割磷酸二酯鍵B.兩種限制酶切割后形成的黏性末端的堿基可以互補配對C.每一種限制性核酸內切酶只能識別特定的核苷酸序列D.將重組質粒同時用以上2種限制酶切割則會再形成2種DNA片段4、科學家采用體細胞雜交技術得到了“番茄—馬鈴薯”雜種植株，但該植株并沒有地上結番茄、地下長馬鈴薯。下列有關敘述錯誤的是（）A.體細胞雜交之前用胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理分散成單個細胞B.番茄和馬鈴薯的原生質體可采用聚乙二醇融合法得到雜種細胞C.雜種細胞需經(jīng)過誘導形成愈傷組織后再發(fā)育成完整的雜種植株D.“番茄—馬鈴薯”雜種植株沒達預期目標與基因無法有序表達有關5、如下圖所示，a表示現(xiàn)代生物工程技術，b表示其結果；下面說法正確的是（）

A.如果a是核移植技術，b的產(chǎn)生說明了動物細胞具有全能性B.如果a是體外受精技術，則形成的b屬于克隆動物C.如果a是胚胎分割技術，b中個體的基因型和表型一定相同D.如果a是基因工程，b是乳腺生物反應器，則需對移植的胚胎進行性別選擇評卷人得分二、多選題(共8題，共16分)6、傳統(tǒng)發(fā)酵技術是我國文化中的精髓，是我國人們利用勤勞的雙手、機智的頭腦所探究出來的智慧結晶。下列有關說法錯誤的是（）A.利用發(fā)酵技術，在鮮奶中加入乳酸菌可制成乳酸制品B.制作泡菜的壇子加水密封隔絕空氣是為了抑制乳酸菌繁殖C.白酒的釀造過程中利用了霉菌和酵母菌兩種微生物的發(fā)酵作用D.將做好的發(fā)酵食品冷藏于地窖中，其目的是促進微生物代謝產(chǎn)物的累積7、如圖為“土壤中分解尿素的細菌的分離和計數(shù)”實驗中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析正確的是（）

A.某一稀釋度下至少涂3個平板，該實驗方法統(tǒng)計得到的結果常會比實際活菌數(shù)目少B.3號試管中的樣品溶液稀釋倍數(shù)為104倍C.5號試管的結果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7×108個D.該實驗需設置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作對照，用以判斷選擇培養(yǎng)基是否有選擇作用8、進行土壤中尿素分解菌的選擇培養(yǎng)時，利用的培養(yǎng)基組分及含量如表所示。下列分析錯誤的是（）。組分含量KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4?7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g瓊脂15.0gH2O定容至1000mL

A.KH2PO4和Na2HPO4既可為菌體提供無機鹽，又可調節(jié)培養(yǎng)基的pHB.尿素既可為尿素分解菌提供氮源，又可對培養(yǎng)基中的微生物起選擇作用C.瓊脂既可為尿素分解菌提供碳源，又起到凝固劑的作用D.蒸餾水既可進行定容，又可對培養(yǎng)液進行稀釋以便于計數(shù)9、生活中常見的果酒、果醋和泡菜的制作離不開傳統(tǒng)發(fā)酵技術。下列相關敘述正確的是（）A.家庭釀酒、制果醋和酸奶均需要選純種菌進行發(fā)酵B.果醋制作的溫度一般控制在30～35℃，果酒發(fā)酵的溫度一般控制在18～25℃C.制作泡菜壇口密封的目的是保證壇內乳酸菌發(fā)酵時所需的無氧環(huán)境D.果醋制作中期通入氮氣，有利于醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?0、通過設計引物，運用PCR技術可以實現(xiàn)目的基因的定點誘變。下圖為基因工程中獲取突變基因的過程，其中引物1序列中含有一個堿基T不能與目的基因片段配對，但不影響引物與模板鏈的整體配對，反應體系中引物1和引物2的5′端分別設計增加限制酶a和限制酶b的識別位點。下列敘述正確的是（）

A.引物中設計兩種限制酶識別位點有利于目的基因定向插入載體B.PCR的過程主要包括變性→延伸→復性（退火），溫度逐漸降低C.第3輪PCR，引物1能與圖中②結合并且形成兩條鏈等長的突變基因D.每一輪PCR都消耗引物和原料，需要在操作中及時補充11、自生固氮菌是土壤中能獨立固定空氣中N2的細菌，將玉米種子用自身固氮菌拌種后播種，可顯著提高產(chǎn)量并降低化肥的使用量?？蒲腥藛T進行了土壤中自生固氮菌的分離和固氮能力測定的研究，部分實驗流程如圖。以下敘述正確的是（）

A.步驟①土樣應取自當?shù)乇韺油寥?；步驟③將土壤懸浮液稀釋了1000倍B.自生固氮菌是自養(yǎng)型生物，不可用血細胞計數(shù)板來計數(shù)土壤懸浮液中的菌體數(shù)C.步驟②需充分振蕩20min，主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無菌水中D.步驟④所用的接種工具是涂布器，該選擇培養(yǎng)基的特點是不添加氮源12、CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯是一種對靶向基因進行特定DNA修飾的技術；其原理是由一個向導RNA(sgRNA)分子引導Cas9蛋白到一個特定的基因位點進行切割。受此機制啟發(fā)，科學家們通過設計sgRNA中堿基的識別序列，即可人為選擇DNA上的任一目標位點進行切割（如圖所示）。CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯技術有時存在編輯對象出錯而造成脫靶。下列相關錯誤的是（）

A.Cas9蛋白通過破壞目標DNA的氫鍵實現(xiàn)對DNA的切割，與解旋酶的作用類似B.若脫靶率與sgRNA序列的長度有關，則sgRNA的序列越短脫靶率越高C.利用此技術對目標基因部分DNA片段進行切除可能導致染色體變異D.sgRNA的雙鏈區(qū)域的堿基互補配對原則與目標基因的雙鏈區(qū)域不同13、治療性克隆的做法是先從需要救治的患者身上提取細胞，然后將該細胞的遺傳物質植入一個去除了細胞核的卵細胞中，該卵細胞開始自行分裂，直至形成一個早期胚胎，從早期胚胎中提取胚胎干細胞后將其培養(yǎng)成人們所需要的各種人體器官。下列有關說法正確的是（）A.可采用開放式培養(yǎng)的方式，置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)胚胎干細胞B.該早期胚胎發(fā)育始于受精卵，胚胎是由囊胚內部的細胞團不斷增殖分化而來C.治療性克隆中運用胚胎移植技術，一般不選擇原腸胚進行胚胎移植D.我國不贊成、不允許、不支持、不接受任何克隆性實驗評卷人得分三、填空題(共7題，共14分)14、下圖表示哺乳動物精子和卵細胞發(fā)生和成熟的示意圖。請據(jù)圖回答下列問題：

（1）③過程中精子頭部的頂體是由__________發(fā)育來的；④過程在__________內完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應；釋放頂體酶，溶解卵丘細胞之間的物質和透明帶。為了阻止多精入卵，會發(fā)生__________反應和__________反應。

（3）精子的發(fā)生開始的時期是__________；雌性動物卵泡的形成的時期是__________。

（4）初級卵母細胞進行Ⅰ過程是在__________時期完成的，Ⅱ過程是在__________過程中完成的。15、目的基因是指：______16、將DNA粗提取液在____________℃的恒溫水浴箱中保溫10—15分鐘。17、動物細胞培養(yǎng)的流程：

取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用______處理分散成______→制成______→轉入培養(yǎng)瓶中進行______培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)_____培養(yǎng)。18、今年年初；爆發(fā)了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠狀病毒通過其表面的S-蛋白與人細胞膜上的ACE2相互識別，感染人的呼吸道上皮細胞。請分析回答問題：

（1）新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為_________剌激淋巴細胞，使機體產(chǎn)生_________性免疫反應，人細胞膜上的ACE2的化學本質是_________。

（2）感染病毒后，免疫系統(tǒng)對肺細胞強烈攻擊引發(fā)肺炎，此時可通過適度使用_________對病人進行治療；使其免疫功能下降，以避免肺部嚴重受損。

（3）科學家采集了感染新型冠狀病毒并已康復的甲、乙兩人的血液，檢測相關抗體的水平，結果如圖1。據(jù)此分析，應選取_________的B淋巴細胞用以制備單克隆抗體（單抗）。

（4）將制備的多種單抗分別與病毒混合，然后檢測病毒對宿主細胞的感染率，結果如圖2。據(jù)此分析，對病毒抑制效果最好的單抗是__________號。

（5）患者康復后一段時間，若再次受到該病毒的攻擊，機體內相應的__________細胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細胞和細胞毒性T細胞。19、生物武器的致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內，造成大規(guī)模傷亡，但對植物無害。（選擇性必修3P111）()20、基因表達載體的組成及其作用。

一個基因表達載體的組成，除了______________、_______________外，還必須有__________、______________等(如圖所示)。

①______________②______________③______________

④______________⑤______________⑥______________

⑦______________評卷人得分四、判斷題(共2題，共8分)21、培養(yǎng)動物細胞一般使用液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基通常需要加入血清等一些天然成分。()A.正確B.錯誤22、從牛卵巢中采集的卵母細胞可直接用于體細胞核移植。（選擇性必修3P53）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共40分)23、為生產(chǎn)具有特定性能的α-淀粉酶；研究人員從某種海洋細菌中克隆了α-淀粉酶基因（1656個堿基對），利用基因工程大量制備琢α-淀粉酶，實驗流程見下圖。請回答下列問題：

（1）利用PCR技術擴增α-淀粉酶基因前；需先獲得細菌的_________。

（2）為了便于擴增的DNA片段與表達載體連接；需在引物的____端加上限制性酶切位點，且常在兩條引物上設計加入不同的限制性酶切位點，主要目的是________________。

（3）進行擴增時；反應的溫度和時間需根據(jù)具體情況進行設定，下列選項中_______的設定與引物有關，________的設定與擴增片段的長度有關。（填序號）

①變性溫度②退火溫度③延伸溫度④變性時間⑤退火時間⑥延伸時間。

（4）下圖表示篩選獲得的工程菌中編碼α-淀粉酶的mRNA的部分堿基序列：

圖中虛線框內mRNA片段包含___個密碼子；如虛線框后的序列未知，預測虛線框后的第一個密碼子最多有__種。

（5）獲得工程菌表達的α-淀粉酶后；為探究影響酶活性的因素，以濃度為1%的可溶性淀粉為底物測定酶活性，結果如下：

。緩沖液。

50mmol/LNa2HPO4-KH2PO4

50mmol/LTris-HCl

50mmol/LGly-NaOH

pH

6．0

6．5

7．0

7．5

7．5

8．0

8．5

9．0

9．0

9．5

10．0

10．5

酶相對活性%

25．4

40．2

49．8

63．2

70．1

95．5

99．5

85．3

68．1

63．7

41．5

20．8

根據(jù)上述實驗結果，初步判斷該α-淀粉酶活性最高的條件為______。24、如圖是從土壤中篩選纖維素分解菌的流程圖；回答下列問題：

（1）土壤取樣時，一般選擇__________________豐富的環(huán)境。選擇培養(yǎng)的目的是________________________。

（2）若測得稀釋一定倍數(shù)的0.1mL稀釋液中纖維素分解菌的菌落數(shù)平均值為51，通過計算得知每毫升樣品中有5.1×107個纖維素分解菌，則該稀釋液的稀釋倍數(shù)為_________。

（3）鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中應加入CR染料，它可以與纖維素形成_________色復合物。若在鑒別培養(yǎng)基上得到部分有透明圈的菌落（如圖），則降解纖維素能力最強的是菌落__________。

25、下圖是某同學設計的傳統(tǒng)發(fā)酵裝置示意圖。比較傳統(tǒng)發(fā)酵技術與現(xiàn)代發(fā)酵工程；回答下列問題：

(1)傳統(tǒng)發(fā)酵釀酒與現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀酒的原理是______。請設計簡單的實驗驗證發(fā)酵過程中產(chǎn)生了酒精（不考慮發(fā)酵液中葡萄糖的影響），寫出實驗思路并預期實驗結果與結論______。

(2)傳統(tǒng)發(fā)酵技術一般以天然存在的______發(fā)酵，品質不一，現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵一般為單一菌種發(fā)酵，品質較高。自制的果酒并非商品意義上的產(chǎn)品，在實際生產(chǎn)中還需要經(jīng)過______裝瓶等過程才能獲得成品酒。

(3)若要測定發(fā)酵罐中酵母菌的種群密度，取10mL發(fā)酵液稀釋1000倍，利用25×16的血細胞計數(shù)板，觀察并統(tǒng)計到中方格中的酵母菌平均數(shù)為9個，則每毫升發(fā)酵液中酵母菌數(shù)量約是______個。

(4)利用上圖中裝置釀酒與釀醋時，操作上的最主要的區(qū)別是______。26、科研人員以病毒表面S蛋白作為主要的病毒抗原；利用基因工程研制疫苗用于接種預防，簡要過程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

(1)新冠病毒是一種RNA病毒，一般先通過_____________________得到cDNA，再經(jīng)PCR技術獲取大量S蛋白基因，PCR的中文全稱是_____________________。

(2)PCR技術還需用到_____________________酶，該酶能夠使脫氧核苷酸從引物的_____________________端開始連接，據(jù)下圖分析，可選擇的引物是_____________________。

(3)為了驗證表達的S蛋白與病毒S蛋白有相同的免疫反應特性；請設計簡單的檢測方案并預期檢測結果。

方案:_________________________________。

結果:_________________________________。評卷人得分六、綜合題(共4題，共16分)27、科學家利用單克隆抗體技術；分別獲得鼠抗體與人抗體，再將抗體進行改造，生產(chǎn)出效果更好的鼠—人嵌合抗體，用于癌癥治療。下圖表示形成鼠—人嵌合抗體的過程。請據(jù)圖回答：

（1）培養(yǎng)骨髓瘤細胞時；需用___________________處理一段時間，這樣組織就會分散成單個細胞，此外還應定期更換____________，以清除代謝產(chǎn)物。

（2）制備單克隆抗體時；先用特定的選擇性培養(yǎng)基進行篩選，獲得________________；然后對上述細胞進行抗體檢測，選取___________________________的細胞進行克隆化培養(yǎng)；最終獲得單克隆抗體，其優(yōu)點是____________________________________________。

（3）有人提出：將經(jīng)特定抗原刺激產(chǎn)生的B淋巴細胞的細胞核移植到去核骨髓瘤細胞中來產(chǎn)生單克隆抗體；該技術稱為________________。

（4）改造鼠源雜交瘤抗體，生產(chǎn)鼠—人嵌合抗體，屬于_______________（生物工程）的范疇。該過程要根據(jù)________________________，設計嵌合抗體的結構，最終對基因進行操作。28、鴨梨醋飲屬綠色健康飲品；既保存了鴨梨中的多種氨基酸；維生素、礦物質、有機酸等營養(yǎng)成分又兼具果醋醒酒護肝、助消化、降低血脂、軟化血管等養(yǎng)生保健功能，深受廣大消費者青睞。如圖為鴨梨醋飲的制作流程圖，請據(jù)圖回答下列問題：

（1）若得到的鴨梨汁非常渾濁，解決的方法是__________________。

（2）為了提高過程①所用微生物的利用率，最好用________法對其進行固定，而固定化酶一般不采用此法，理由是______________________________。

（3）過程②所用的微生物是__________________，其新陳代謝類型為______________。

（4）果酒制作過程中，在不滅菌的情況下，酵母菌是如何成為優(yōu)勢菌種的？_______________________________________________________________。

（5）在氧氣充足，糖源匱乏時，果醋制作原理的反應式：____________________________。29、科研人員培育了一種能夠降解餐廚廢棄物并生成乳酸的轉基因畢赤酵母?；舅悸肥窃谌樗崦摎涿富颍↙DH）的單基因表達載體中逐個接入糖化酶基因（Ga）表達盒與α-淀粉酶基因（Amy）表達盒；構建出AGL-三基因表達載體，如下圖1所示。

(1)快速獲得大量目的基因的技術是___________，獲得的產(chǎn)物通常采用___________技術來鑒定。

(2)培育轉基因畢赤酵母的關鍵步驟是___________，將圖1所示結構“導入”畢赤酵母后，將畢赤酵母轉移至含___________的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)；篩選出能夠生存的菌落。

(3)構建三基因表達載體的難點在于構建目的基因的表達盒，下圖2為Amy表達盒的構建過程。（pro為啟動子；AOXTT為終止子；Bsp119Ⅰ、XbaⅠ；BglⅡ、BamHⅠ為不同限制酶；①②為操作過程。）

操作①的處理是：將質粒1與α-淀粉酶基因均用Bsp119Ⅰ與XbaⅠ兩種不同的限制酶處理，然后拼接。與用一種限制酶處理相比，優(yōu)點是___________（答出兩點）；操作②中必須用___________酶對質粒2處理，才能獲得能正常表達的α-淀粉酶基因表達盒。30、目前，新型冠狀病毒（屬于RNA病毒）仍在全球肆虐橫行，S蛋白是新冠病毒感染機體的關鍵組分，也是研制新冠疫苗的關鍵起點。我國目前獲批使用的新冠病毒疫苗主要有：滅活疫苗、重組蛋白疫苗、腺病毒載體疫苗。這三種疫苗的生產(chǎn)技術路線如下表，回答下列問題：。疫苗種類研制思路滅活疫苗活病毒→培養(yǎng)擴增→物理或化學方法滅活→純化→滅活病毒顆?！梭w腺病毒載體疫苗S蛋白基因→腺病毒基因表達載體→人體重組蛋白疫苗S蛋白基因→基因表達載體→重組工程化細胞→S蛋白→人體

(1)新冠病毒滅活疫苗能激活人體產(chǎn)生體液免疫反應是由于所注射的疫苗保留了____________________。

(2)腺病毒載體疫苗是利用復制缺陷型腺病毒作為載體，即將腺病毒中負責__________________________的基因片段用限制酶剪切掉。若制備腺病毒載體新冠病毒疫苗，首先需要在逆轉錄酶的作用下，以__________________為模板經(jīng)過逆轉錄獲得含有S蛋白基因的DNA。對獲得的重組腺病毒除用PCR檢測S蛋白基因外，還需用________________________的方法檢測S蛋白。

(3)生產(chǎn)重組蛋白疫苗，首先需要將編碼S蛋白關鍵序列的基因克隆出來，插入到一個表達載體里面，該步驟在基因工程中被稱為_________________________________________，最終將目的基因導入受體細胞的方法是_______________________________________________________________________。

(4)新冠疫苗也可能通過蛋白質工程來生產(chǎn)。蛋白質工程是在基因工程的基礎上發(fā)展起來的，通過_______________________對現(xiàn)有蛋白質進行改造或制造一種新的蛋白質，以滿足人類的需求。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、B【分析】用于核移植的供體細胞一般都選用傳代10代以內的細胞，原因是10代以內的細胞能保持正常的二倍體核型，A正確；供體細胞核移入去核卵母細胞中，能發(fā)育成克隆動物，這只能說明分化動物細胞的細胞核具有全能性，B錯誤；采集的卵母細胞培養(yǎng)到的②時期表示減數(shù)第二次分裂中期，才能使融合細胞更容易表達其全能性，C正確；動物細胞培養(yǎng)過程中需要在95%空氣+5%C02環(huán)境中培養(yǎng)，其中添加5%C02的目的就是維持培養(yǎng)液的pH，D正確。2、D【分析】【分析】

動物胚胎發(fā)育過程為：受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原腸胚→幼體。

【詳解】

A；卵裂期細胞進行有絲分裂增殖；且需要進行呼吸作用消耗有機物，故胚胎中細胞數(shù)目在不斷增加，有機物總量在不斷減少，A錯誤；

B；胚胎分割時需將發(fā)育良好、形態(tài)正常的囊胚的內細胞團均等分割；B錯誤；

C；胚胎干細胞體積小；細胞核大，核仁大且明顯，蛋白質合成旺盛，C錯誤；

D；胚胎干細胞是一類未分化的細胞；來源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來，D正確。

故選D。

【點睛】

本題考查動物胚胎發(fā)育和胚胎工程的相關知識，要求學生熟記并辨識各時期的特點。3、D【分析】【分析】

據(jù)圖分析：圖示過程表示基因表達載體的構建；圖中質粒上存在兩個限制酶的切割位點，而限制酶EcoRⅠ的識別序列存在于標記基因中，使用該種限制酶會導致標記基因失活，因此應選擇限制酶MunⅠ切割質粒。

【詳解】

A；限制酶的作用是使特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開；并具有專一性，A正確；

B；由題干信息給出的兩種酶的識別序列可知；兩種限制酶切割后形成的黏性末端的堿基可以互補配對，B正確；

C；每一種限制性核酸內切酶只能識別特定的核苷酸序列；并在特定位點進行切割，C正確；

D；將重組質粒同時用2種限制酶切割；標記基因和目的基因中的EcoRⅠ酶切割位點能被斷開，則會形成3種DNA片段，D錯誤。

故選D。4、A【分析】【分析】

植物的體細胞雜交是將不同植物的細胞通過細胞融合技術形成雜種細胞；進而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細胞培育成多倍體的雜種植株。植物體細胞雜交依據(jù)的原理是細胞膜的流動性和植物細胞的全能性。

【詳解】

A；植物細胞壁的成分主要是纖維素果膠；根據(jù)酶的專一性可知，植物細胞使用纖維素酶和果膠酶處理細胞壁獲得原生質體，A錯誤；

B；番茄和馬鈴薯的原生質體可采用聚乙二醇融合法得到雜種細胞；此外還可通過物理方法等誘導其融合，B正確；

C；雜種細胞需經(jīng)過誘導經(jīng)脫分化形成愈傷組織后再經(jīng)再分化過程發(fā)育成完整的雜種植株；C正確；

D；生物體中基因的作用是相互的；且基因控制相關性狀，“番茄—馬鈴薯”雜種植株沒達預期目標與基因無法有序表達有關，D正確。

故選A。5、D【分析】【分析】

體細胞核移植的大致過程是：將供體體細胞核導入受體去核卵母細胞；形成重組細胞，用電脈沖刺激形成早期胚胎，導入代孕母羊的子宮，妊娠；出生后即克隆動物。胚胎移植概念：是指將雌性動物的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物的體內，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術。其中提供胚胎的個體叫供體（遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀），接受胚胎的個體叫受體（有健康的體質和正常繁殖能力）。

【詳解】

A、如果a是核移植技術，b的產(chǎn)生說明了動物細胞的細胞核具有全能性；A錯誤；

B、如果a是體外受精技術，則形成的b屬于有性生殖產(chǎn)生的動物；B錯誤；

C、如果a是胚胎分割技術，b中個體的基因型一定相同；表型由于受到環(huán)境影響不一定相同，C錯誤；

D、如果a是基因工程，b是乳腺生物反應器；目的基因表達的產(chǎn)物在雌性動物的乳汁中提取，則需對移植的胚胎進行性別選擇，D正確。

故選D。二、多選題(共8題，共16分)6、B:D【分析】【分析】

（1）微生物的發(fā)酵在食品的制作中具有重要意義；如制饅頭；面包、釀酒要用到酵母菌，制酸奶要用到乳酸菌。

（2）低溫能抑制細菌；真菌的生長和繁殖。

（3）制作泡菜的原理就是利用乳酸菌使蔬菜中的有機物生成乳酸。

【詳解】

A；制酸奶要用到乳酸菌；乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生乳酸，使得酸奶有一種特殊的酸味，所以在鮮奶中加入乳酸菌可制成乳酸制品，A正確；

B；制作泡菜的壇子加水密封隔絕空氣是為了抑制需氧型微生物繁殖；B錯誤；

C；白酒的釀造過程中利用了酵母菌的發(fā)酵作用；同時利用霉菌產(chǎn)生的淀粉酶將淀粉糖化，C正確；

D；地窖中溫度低；能抑制細菌、真菌等微生物的生長和繁殖，使其繁殖速度慢，數(shù)量少，不能充分分解食物，達到保鮮的目的，所以將做好的發(fā)酵食品冷藏于地窖中是為了抑制微生物的生長，D錯誤。

故選BD。7、A:B:D【分析】【分析】

分析題圖：圖中5支試管為梯度稀釋；最后經(jīng)稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后進行計數(shù)。統(tǒng)計菌落數(shù)在30~300的平板，取其平均值，進行計數(shù)。計數(shù)公式為（C÷V）×M。（C為平均菌落數(shù)，V為涂布液體積，M為稀釋倍數(shù)）。

【詳解】

A；設置重復組；增強實驗的說服力與準確性，故某一稀釋度下至少涂3個平板。稀釋涂布平板得到的菌落可能存在兩個或多個細菌細胞長成一個菌落，使該實驗方法統(tǒng)計得到的結果往往會比實際活菌數(shù)目要低，A正確；

B、據(jù)圖可知，將10g土樣加入到90mL無菌水中定容至100mL后，此時土樣稀釋倍數(shù)為10倍，再經(jīng)3次10倍稀釋得到3號試管中的樣品，故3號試管中樣品的稀釋倍數(shù)是104倍；B正確；

C、5號試管進行稀釋涂布平板法計數(shù)的結果表明每克土壤中的菌株數(shù)為（168+175+167）÷3×106÷0.1≈1.7×109個；C錯誤；

D；要判斷選擇培養(yǎng)基是否起到選擇作用；需設置接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作對照，若牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基培養(yǎng)基上的菌落種類數(shù)目多于選擇培養(yǎng)基上的菌落類型，則說明起到了選擇作用，D正確。

故選ABD。8、C:D【分析】【分析】

實驗室的培養(yǎng)基按照功能劃分；可以分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。

【詳解】

A、KH2PO4和Na2HPO4可為尿素分解菌提供無機鹽，H2PO4-和HPO42-又是一種調節(jié)pH的緩沖對；A正確；

B；培養(yǎng)基中除了尿素無其他含氮物質；只有尿素分解菌能通過分解尿素進行生長繁殖，故尿素既能為尿素分解菌提供氮源，又可對培養(yǎng)基中的微生物起選擇作用，B正確；

C；瓊脂不能被微生物利用；只能充當凝固劑，C錯誤；

D、表中的H2O為蒸餾水；起定容作用，蒸餾水不能對培養(yǎng)液進行稀釋，稀釋所用的溶劑應該是無菌水，D錯誤。

故選CD。9、B:C【分析】【分析】

制作果醋的菌種為原核生物中的醋酸菌。醋酸菌是一種好氧菌。當氧氣；糖源都充足時；醋酸菌將果汁中的糖分分解成醋酸；當氧氣充足、糖源缺乏時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

A；家庭制作果酒、果醋和酸奶過程中有多種微生物參與發(fā)酵過程；因此均不是純種發(fā)酵，A錯誤；

B；果醋制作的溫度一般控制在30～35℃；果酒發(fā)酵的溫度一般控制在18～25℃，B正確；

C；泡菜腌制時需要乳酸菌發(fā)酵；乳酸菌是厭氧細菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成乳酸，因此壇子加水密封的目的是營造缺氧環(huán)境，利于乳酸菌發(fā)酵，C正確；

D；當氧氣充足、糖源缺乏時；醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?，D錯誤。

故選BC。

【點睛】

本題考查考生運用所學知識解決問題的能力。10、A:C【分析】【分析】

PCR的原理是DNA雙鏈復制；步驟包括高溫變性；復性、延伸。該過程需要耐高溫的DNA聚合酶催化，需要四種游離的脫氧核苷酸做原料。根據(jù)圖中可得，由于引物的一個堿基在不影響與模板鏈整體配對的前提下不與目的基因配對，再利用PCR技術實現(xiàn)了目的基因的定點誘變。其技術原理是堿基互補配對原則。

【詳解】

A；引物中設計兩種限制酶識別位點；可以配合載體的限制酶識別位點，幫助目的基因定向定點插入運載體，避免發(fā)生自身環(huán)化，A正確；

B；在PCR反應過程中變性大約94℃→復性大約55℃→延伸大約72℃；B錯誤；

C；第3輪PCR中；物質②是引物2以引物1拓展得到的DNA鏈為模板進行復制得到的，故引物1能與圖中②結合并且形成兩條鏈等長的突變基因，C正確；

D；PCR一次大概有30個循環(huán)；每一輪PCR都消耗引物和原料，是在最初加入，不是后期補充，D錯誤。

故選AC。11、A:C:D【分析】【分析】

微生物常見的接種的方法。

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

A；自生固氮菌是需氧型生物；步驟①土樣應取自表層的土壤，步驟③中的稀釋梯度分別為10，100，1000倍，所以土壤懸浮液稀釋了1000倍，A正確；

B；自生固氮菌是異養(yǎng)型生物；可用血細胞計數(shù)板或稀釋涂布平板法來計數(shù)土壤懸浮液中的菌體數(shù)，B錯誤；

C；步驟②需充分振蕩20min；主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無菌水中，C正確；

D；步驟④為稀釋涂布平板法接種；所用的接種工具是涂布器，該選擇培養(yǎng)基的特點是不添加氮源，利用的是空氣中的氮氣，D正確。

故選ACD。12、A:C【分析】【分析】

1；基因工程的工具：①限制酶；能識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；②DNA連接酶，連接兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵；③運載體，質粒是最常用的運載體，除此之外，還有λ噬菌體衍生物、動植物病毒。

2；基因治療：把正常的基因導入病人體內有缺陷的細胞中；使該基因的表達產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達到治療疾病的目的?；蛑委煼譃轶w外基因治療和體內基因治療兩種類型。

【詳解】

A；根據(jù)題干信息“由一個向導RNA（sgRNA）分子引導Cas9蛋白到一個特定的基因位點進行切割”；再結合圖解可知能夠行使特異性識別DNA序列并切割特定位點功能的分子是向導RNA（sgRNA）分子和Cas9蛋白，其類似于基因工程中限制酶，作用的化學鍵是磷酸二酯鍵，A錯誤；

B；非基因編輯對象也可能含有與sgRNA配對的堿基序列；造成sgRNA選錯對象與之錯誤結合而脫靶，sgRNA的序列長短影響成功率，序列越短，脫靶率越高，B正確；

C；染色體變異會引起基因的數(shù)目或排列順序改變；利用此技術對目標基因部分DNA片段進行切除屬于基因內部堿基對的改變，不改變基因的數(shù)目和排列順序，故不屬于染色體變異，C錯誤；

D；sgRNA的雙鏈區(qū)域的堿基互補配對原則遵循的是DNA與RNA之間的配對關系；而目標基因的雙鏈區(qū)域遵循的是DNA之間的配對方式，故兩者不同，D正確。

故選AC。13、C【分析】【分析】

治療性克隆是指利用克隆技術產(chǎn)生特定細胞和組織（皮膚；神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植。中國政府的態(tài)度是禁止生殖性克隆人；不反對治療性克隆。

【詳解】

A；開放式組織培養(yǎng)一般是指使組織培養(yǎng)脫離嚴格無菌的操作環(huán)境；在自然、開放的有菌環(huán)境中進行操作。，動物細胞一般不能采用這種方式，A錯誤；

B；胚胎是由整個受精卵發(fā)育而來的；囊胚內部的細胞不能發(fā)育為完整的胚胎，B錯誤；

C；胚胎移植技術；一般采用桑椹胚或囊胚進行移植，C正確；

D；我國不贊成、不允許、不支持、不接受任何形式的生殖性克?。坏遣环磳χ委熜钥寺?，D錯誤。

故選C。三、填空題(共7題，共14分)14、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：①表示染色體復制；②是減數(shù)分裂，③是精細胞變形為精子過程，④是受精作用；

2；哺乳動物精子和卵子發(fā)生的不同點：（1）精子的減數(shù)兩次分裂是連續(xù)的；場所唯一（MⅠ和MⅡ的場所都是睪丸）；而卵子的兩次分裂是不連續(xù)的，場所不唯一，（MⅠ場所在卵巢，MⅡ場所在輸卵管中）；（2）精子和卵子發(fā)生的時間不同：精子的發(fā)生是從初情期一直到生殖機能衰退；多數(shù)哺乳動物卵子的形成和在卵巢內的貯備是胎兒出生前完成的；MⅠ是在雌性動物排卵前后完成的，MⅡ是在受精過程中完成的。

【詳解】

（1）精子變形③過程中精子頭部的頂體是由高爾基體發(fā)育來的；④過程是受精過程，在輸卵管內完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應；釋放頂體酶，溶解卵丘細胞之間的物質和透明帶，透明帶反應和卵細胞膜反應是阻止多精入卵的兩道防線。

（3）雄性動物精子產(chǎn)生的時期是初情期；雌性動物卵泡細胞的形成是在胚胎期性別分化以后完成的，這是精子和卵子在發(fā)生上的重要區(qū)別。

（4）初級卵母細胞進行減數(shù)第一次分裂是在排卵前后時期完成的；減數(shù)第二次分裂是在受精作用過程中完成的。

【點睛】

本題考查卵細胞的形成過程和受精作用等相關知識，意在考查學生識記相關細節(jié)和解決問題的能力?！窘馕觥扛郀柣w輸卵管透明帶反應卵細胞膜反應初情期胚胎期性別分化以后排卵前后受精作用15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】是人們所需要轉移或改造的基因16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】60—7517、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】胰蛋白酶單個細胞細胞懸液原代傳代18、略

【分析】【分析】

分析圖1：表示多年前感染EV并已康復的甲；乙兩人的血液中抗EV-GP抗體的水平。根據(jù)曲線圖可知；多年前感染EV并已康復的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組。

分析圖2：表示單抗與病毒混合后病毒對宿主細胞的感染率。根據(jù)柱形圖可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒對宿主細胞的感染率明顯低于其他組別。

【詳解】

（1）由題意可知；新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為抗原刺激淋巴細胞，使機體產(chǎn)生特異性免疫反應，人細胞膜上的ACE2的化學本質是蛋白質。

（2）免疫系統(tǒng)對被新冠病毒感染后肺細胞強烈攻擊引發(fā)肺炎；此時可通過適度使用免疫抑制劑對病人進行治療，使其免疫功能下降，以避免肺部嚴重受損。

（3）由圖1可知；多年前感染EV并已康復的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組，故應選取甲的B細胞用以制備單克隆抗體。

（4）由圖2可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ后，病毒對宿主細胞的感染率較低。因此抑制效果最好的單抗是Ⅲ。

（5）患者康復后一段時間；若再次受到該病毒的攻擊，機體內相應的記憶細胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細胞和細胞毒性T細胞。

【點睛】

本題結合圖解，考查病毒、單克隆抗體的制備等，要求考生識記病毒的結構，明確病毒沒有細胞結構；識記單克隆抗體的制備過程，掌握其優(yōu)點及相關應用，能結合圖中信息準確答題【解析】①.抗原②.特異③.糖蛋白（或蛋白質）④.免疫抑制劑⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.記憶19、略

【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內，造成大規(guī)模傷亡，同時可毀壞植物，該說法錯誤?！窘馕觥垮e誤20、略

【分析】略【解析】目的基因標記基因啟動子終止子啟動子上游RNA聚合酶終止子下游轉錄標記四、判斷題(共2題，共8分)21、A【分析】【分析】

液體培養(yǎng)基主要是模擬動物體內環(huán)境；動物體細胞是生活在組織液當中，而且細胞要直接從組織液里獲得營養(yǎng)和排出廢物。所以液體培養(yǎng)基相當于組織液的液體環(huán)境。

【詳解】

為了保證細胞培養(yǎng)時營養(yǎng)物質和生長因子的供給，培養(yǎng)基中需添加一定量的動物血清等天然成分，可以補充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質，故該表述正確。22、B【分析】【詳解】

從牛卵巢中采集到卵母細胞后；接著對其進行的操作是先在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期，再通過顯微操作去除卵母細胞中的細胞核，獲得去核的卵母細胞，再經(jīng)核移植獲得重組的受體細胞。

故該表述錯誤。五、實驗題(共4題，共40分)23、略

【分析】【分析】據(jù)圖分析；圖示為利用基因工程大量制備α-淀粉酶的過程，目的基因是α-淀粉酶基因，與體構建基因表達載體，然后將目的基因導入大腸桿菌，接著對目的基因進行檢測與鑒定，最后利用工程菌培養(yǎng)獲得大量的α-淀粉酶產(chǎn)品。

【詳解】（1）α-淀粉酶基因來自于海洋細菌；因此為了利用PCR技術擴增α-淀粉酶基因，必須先獲得細菌的基因組DNA。

（2）目的基因與運載體結合前需要用限制酶對兩者進行切割；延伸是在引物的3’端延伸，為了保證目的基因的完整性，因此需在引物的5’端加上限制性酶切位點，且為了使DNA片段能定向插入表達載體，減少自連，常在兩條引物上設計加入不同的限制性酶切位點。

（3）進行擴增時；退火溫度的設定與引物有關，延伸時間的設定與擴增片段的長度有關。

（4）根據(jù)題意分析；虛線框內mRNA片段內含有24個堿基，每3個堿基構成一個密碼子，因此包含24÷3=8個密碼子；構成mRNA的堿基有4種，若虛線框后的序列未知，預測虛線框后的第一個密碼子最多有4×4-3=13種。

（5）根據(jù)表格數(shù)據(jù)分析可知，在pH為8.5，緩沖液為50mmol/LTris-HCl的條件下；α-淀粉酶相對活性為99.5%，活性最高。

【點睛】解答本題的關鍵是基因工程的四個基本步驟以及PCR技術的過程、條件，回憶相關知識點和注意事項，結合提示分析答題?！窘馕觥炕蚪MDNA5’使DNA片段能定向插入表達載體，減少自連②⑥813pH為8．5，緩沖液為50mmol/LTris-HCl24、略

【分析】【分析】

1；選擇培養(yǎng)基是指通過培養(yǎng)混合的微生物；僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的。

2；分解纖維素的微生物的分離的實驗原理：

（1）土壤中存在著大量纖維素分解酶；包括真菌；細菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進一步分解為葡萄糖能被微生物利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長。

（2）在培養(yǎng)基中加入剛果紅；可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物，當纖維素被分解后，紅色復合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

3；統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法：

（1）顯微鏡直接計數(shù)法：

①原理：利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板；在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；

②方法：用計數(shù)板計數(shù)；

③缺點：不能區(qū)分死菌與活菌。

（2）間接計數(shù)法（活菌計數(shù)法）：

①原理：當樣品的稀釋度足夠高時；培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。

②操作：

a；設置重復組；增強實驗的說服力與準確性。

b；為了保證結果準確；一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)。

③計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M；其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)。

【詳解】

（1）土壤取樣時；一般選擇纖維素豐富的環(huán)境。選擇培養(yǎng)的目的是增加纖維素分解菌的數(shù)量。

（2）若測得稀釋一定倍數(shù)的0.1mL稀釋液中纖維素分解菌的菌落數(shù)平均值為51，通過計算得知每毫升樣品中有5.1×107個纖維素分解菌，則由每mL樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M可得，該稀釋液的稀釋倍數(shù)＝5.1×107÷51×0.1=105。

（3）鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中應加入CR染料；它可以與纖維素形成紅色復合物。若在鑒別培養(yǎng)基上得到部分有透明圈的菌落，透明圈越大說明降解纖維素能力越強，所以圖中降解纖維素能力最強的是菌落1。

【點睛】

本題結合流程圖，考查微生物的分離和培養(yǎng)，解題關鍵是識記土壤微生物分離的原理及方法；識記培養(yǎng)基的種類及作用，能結合圖中信息準確答題。【解析】纖維素增加纖維素分解菌的數(shù)量105紅①25、略

【分析】【分析】

參與果酒的制作的微生物主要是酵母菌；其新陳代謝的類型為異養(yǎng)兼性厭氧型，較適宜的發(fā)酵溫度為18~30℃。在無氧的環(huán)境中酵母菌把糖類分解為酒精和二氧化碳。在果酒制作過程中檢測發(fā)酵液是否含有酒精，取樣后滴加適量酸性重鉻酸鉀溶液并振蕩，若觀察到溶液顏色的變化是橙色變成灰綠色，則說明發(fā)酵液中含有酒精。

【詳解】

（1）傳統(tǒng)發(fā)酵釀酒與現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀酒都是利用了酵母菌的無氧呼吸。酵母菌屬于真核生物；其代謝類型是兼性厭氧型，在有氧條件下進行大量增殖，在無氧條件下將葡萄糖分解為酒精。

橙色的重鉻酸鉀溶液在酸性條件下與乙醇（即酒精）發(fā)生化學反應；變成灰綠色，該實驗目的是驗證發(fā)酵過程中產(chǎn)生了酒精，因此實驗自變量是是否加入發(fā)酵液，因變量為溶液顏色變化。對照組中應加入酒精作為陽性對照。實驗過程中應遵循等量原則；單一變量原則等，因此實驗思路是：取兩支試管分別標號A、B，A試管中各加入2ml發(fā)酵液，作為實驗組，B試管中各加入2ml酒精，作為對照組，兩試管中都加入適量酸性重鉻酸鉀，振蕩后觀察試管中顏色變化，AB兩試管都變?yōu)榛揖G色，即可驗證發(fā)酵過程中產(chǎn)生了酒精。

（2）傳統(tǒng)發(fā)酵技術一般不進行嚴格滅菌操作；因此其發(fā)酵菌種為天然的混合菌種。現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀制果酒不同于自制果酒，需要經(jīng)過沉淀；過濾、滅菌、裝瓶等過程才能獲得成品酒。

（3）25×16型的血細胞計數(shù)板計算公式：酵母細胞個數(shù)/1mL=1個中方格中酵母菌數(shù)×25×10000×稀釋倍數(shù)，因此該實驗中每毫升發(fā)酵液中酵母菌數(shù)量=9×25×10000×1000=2.25×109。

（4）釀酒利用酵母菌的無氧呼吸，需要關閉充氣口，釀醋利用醋酸菌，醋酸菌是需氧型微生物，因此需向充氣孔中充入無菌空氣?！窘馕觥?1)酵母菌是兼性厭氧微生物；在無氧條件下將葡萄糖分解為酒精實驗思路：取兩支試管分別標號A；B，向A試管中各加入2ml發(fā)酵液，向B試管中各加入2ml酒精，向AB兩試管各滴加0．5ml溶有0．1g重鉻酸鉀的濃硫酸溶液（或酸性重鉻酸鉀），并輕輕震蕩，觀察試管中溶液顏色變化。

(2)混合菌種沉淀；過濾、滅菌。

(3)2.25×109

(4)釀酒時需關閉充氣口，釀醋時則需向充氣孔中充入無菌空氣26、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內DNA的復制過程。DNA的復制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3'端延伸DNA鏈。

【詳解】

（1）利用RNA得到相應DNA的方法為逆轉錄；起作用的酶為逆轉錄酶。在體外將DNA擴增的技術是PCR，中文名稱為多聚酶鏈式反應。

（2）PCR技術是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術；該過程需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶），熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)能夠使脫氧核苷酸從引物的3'端開始連接，使子代DNA從5'向3'延伸；進行擴增時，還應選擇一對方向相反的引物，且與模板的3'端結合，據(jù)圖可知，應選擇Ⅱ；Ⅲ。

（3）細胞內是否合成了由目的基因控制的蛋白質，使用抗原-抗體雜交法檢測，為了檢驗表達的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應特性，可用S蛋白與新冠病毒肺炎康復患者血清進行抗原-抗體雜交實驗來進行檢測，本實驗是驗證性實驗，實驗結果是唯一的，因此本實驗結果是出現(xiàn)雜交帶。【解析】(1)逆轉錄多聚酶鏈式反應。

(2)熱穩(wěn)定DNA聚合酶##Taq酶3'II；Ⅲ

(3)用表達的S蛋白與新冠病毒肺炎康復患者血清進行抗原-抗體雜交實驗出現(xiàn)雜交帶六、綜合題(共4題，共16分)27、略

【分析】【分析】

1.單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內；使其發(fā)生免疫，小鼠體內產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細胞。利用動物細胞融合技術將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，在經(jīng)過兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。兩次抗體檢測：專一抗體檢驗陽性，獲得能產(chǎn)生特異性抗體；又能大量增殖雜交瘤細胞，最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取單克隆抗體。

2.蛋白質工程指以蛋白質的結構規(guī)律及其與生物功能的關系作為基礎；通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質進行基因改造，或制造一種新的蛋白質，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要。

【詳解】

（1）培養(yǎng)骨髓瘤細胞時；需要將所選取的組織細胞分散開，以利于細胞融合，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理離體組織細胞使之分散開，此外還應定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝產(chǎn)物，有利于細胞的生長。

（2）根據(jù)分析可知；制備單克隆抗體時，因為細胞的融合過程是隨機的，因此融合后需要先用特定的選擇性培養(yǎng)基進行篩選，獲得雜交瘤細胞；然后對上述細胞進行抗體檢測，選取專一抗體檢驗陽性（或能產(chǎn)生專一抗體）的細胞進行克隆化培養(yǎng)；最終獲得單克隆抗體，單克隆抗體表現(xiàn)的優(yōu)點為特異性強；靈敏度高、可大量制備。

（3）有人設計用體細胞核移植技術將經(jīng)特定抗原刺激產(chǎn)生的B淋巴細胞的細胞核移植到去核骨髓瘤細胞中來產(chǎn)生單克隆抗體；這是獲得單克隆抗體的新舉措。

（4）從免疫的角度考慮；對人體來說鼠源抗體為抗原，若利用人的抗體與之嵌合，則排斥作用會減輕，對人體的副作用會減少，因此設計改造鼠源雜交瘤抗體，生產(chǎn)鼠—人嵌合抗體，這屬于蛋白質工程的技術范疇。該過程首先需要根據(jù)預期的嵌合抗體功能，設計嵌合抗體的結構，然后推測相應的基因片段，最終對基因進行操作，因此該工程又叫做第二代基因工程。

【點睛】

熟知單克隆抗體的制備過程及其原理是解答本題的關鍵，蛋白質工程的設計思路也是本題的考查點，掌握單克隆抗體的優(yōu)點是解答本題的另一關鍵?！窘馕觥恳鹊鞍酌福ɑ蚰z原蛋白酶）培養(yǎng)液雜交瘤細胞專一抗體檢驗陽性（或能產(chǎn)生專一抗體）特異性強、靈敏度高、可大量制備動物體細胞核移植技術蛋白質工程預期的嵌合抗體功能28、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：圖示表示鴨梨醋飲的制作流程圖；其中①表示果酒發(fā)酵，②表示果醋發(fā)酵。

2、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理：(1)在有氧條件下，反應式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量；(2)在無氧條件下，反應式如下：C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量。

3；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型，是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：若氧氣、糖源充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；若缺少糖源、氧氣充足，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

（1）

植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠；因此