2025年滬教版選擇性必修3生物下冊(cè)月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線(xiàn)…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線(xiàn)※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線(xiàn)…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年滬教版選擇性必修3生物下冊(cè)月考試卷909考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、下列有關(guān)基因工程、細(xì)胞工程、胚胎工程的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.植物基因工程主要用于提高農(nóng)作物的抗逆能力，改良農(nóng)作物品質(zhì)等B.植物組織培養(yǎng)過(guò)程中將愈傷組織包埋在人工種皮中，就形成了人工種子C.牛胚胎移植時(shí)可用囊胚期滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行性別鑒定D.制備單克隆抗體時(shí)，常用滅活的病毒和聚乙二醇等進(jìn)行細(xì)胞融合2、有關(guān)單克隆抗體的描述，不正確的是（）A.單克隆抗體最廣泛的用途是作為體外診斷試劑，具有準(zhǔn)確、高效等優(yōu)點(diǎn)B.利用同位素標(biāo)記的單克隆抗體，在特定組織中成像的技術(shù)，可定位診斷腫瘤C.單克隆抗體可以用于治療疾病和運(yùn)載藥物，例如用于治療癌癥D.單克隆抗體的制備涉及動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植等技術(shù)3、某些國(guó)家已經(jīng)立法允許醫(yī)學(xué)手段培育“三親嬰兒”；三親嬰兒的培育過(guò)程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.該技術(shù)可避免母親的線(xiàn)粒體遺傳病基因傳遞給后代B.捐獻(xiàn)者攜帶的紅綠色盲基因不能遺傳給三親嬰兒C.三親嬰兒的核遺傳物質(zhì)分別來(lái)自捐獻(xiàn)者等三個(gè)親本D.三親嬰兒的培育還需要早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)4、某興趣小組開(kāi)展小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其培養(yǎng)的原代神經(jīng)元生長(zhǎng)緩慢，其原因不可能的是（）A.實(shí)驗(yàn)材料取自小鼠胚胎的腦組織B.為了防止污染將培養(yǎng)瓶瓶口密封C.血清經(jīng)過(guò)高溫處理后加入培養(yǎng)基D.所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性5、2020年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予發(fā)現(xiàn)丙肝病毒的三位科學(xué)家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化，部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。下圖為利用小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料研制丙肝病毒的單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)流程。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中除營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外還要添加一定量的血清、血漿B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，并將其置于含有95%O2加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)C.圖中篩選1的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞D.若B淋巴細(xì)胞的基因型為HH，骨髓癌細(xì)胞的基因型為SS，在兩兩融合后基因型可能有HHSS、HHHH、SSSS6、DNA指紋是利用特定的人源小衛(wèi)星DNA作探針，與樣本DNA的酶切片段進(jìn)行雜交獲得的DNA片段長(zhǎng)度不等的雜交帶圖紋。這些圖紋具有高度的變異性和穩(wěn)定的遺傳性。DNA指紋技術(shù)應(yīng)用廣泛，下圖是某機(jī)構(gòu)采用該技術(shù)為某家庭進(jìn)行親子鑒定的結(jié)果，以下分析不正確的說(shuō)法是（）

A.DNA在親子代之間傳遞時(shí)，因發(fā)生突變或重組產(chǎn)生遺傳多樣性B.樣本DNA片段通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則與探針結(jié)合形成雜交帶C.雜交帶的不同顯示出家庭成員之間DNA分子中堿基排列順序的差異D.由各家庭成員的檢測(cè)結(jié)果分析，女兒1和兒子1為該夫婦的親生孩子評(píng)卷人得分二、多選題(共7題，共14分)7、如表為不同動(dòng)物受精卵發(fā)育成胚胎進(jìn)入子宮的時(shí)間（小時(shí)）；依據(jù)題表分析正確的是（）

。動(dòng)物種類(lèi)2細(xì)胞4細(xì)胞8細(xì)胞16細(xì)胞桑葚胚進(jìn)入子宮時(shí)受精卵的發(fā)育天數(shù)和發(fā)育階段小鼠24～3838～5050～6060～7068～803牛27～4244～6546～9096～120120～1444～5馬2430～3650～607298～1066A.小鼠胚胎進(jìn)入子宮時(shí)的發(fā)育程度比牛的高B.體外馬胚胎移植到子宮時(shí)選擇16細(xì)胞階段C.受精卵發(fā)育的階段順序?yàn)?-4-8-16-桑葚胚D.2-4-8-16細(xì)胞發(fā)育階段進(jìn)行的是有絲分裂8、我國(guó)科學(xué)家提出的異種克隆大熊貓實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線(xiàn)如下圖。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.科學(xué)家通過(guò)對(duì)母兔注射孕激素，進(jìn)行超數(shù)排卵處理以獲得更多的卵母細(xì)胞B.異種重構(gòu)囊胚在體外培養(yǎng)時(shí)，為保證無(wú)毒無(wú)菌環(huán)境，往往需要在培養(yǎng)液中加入維生素C.囊胚由滋養(yǎng)層細(xì)胞和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)構(gòu)成，后者將來(lái)可發(fā)育成胎兒的各種組織D.兔子宮提供的生理環(huán)境與大熊貓差異大，異種重構(gòu)囊胚可能不能正常發(fā)育出大熊貓幼仔9、下列實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，出現(xiàn)的正?，F(xiàn)象有（）A.制作果酒時(shí)，發(fā)酵瓶中溶液產(chǎn)生較多泡沫B.用果酒制作果醋過(guò)程中，液面出現(xiàn)一層褐色菌膜C.制作腐乳過(guò)程中，豆腐表面發(fā)黏且長(zhǎng)有白色菌絲D.用固定化酵母進(jìn)行酒精發(fā)酵，凝膠珠浮在液面10、地球上的植物每年產(chǎn)生的纖維素超過(guò)70億噸，其中40%~60%能被土壤中的某些微生物分解利用，這是因?yàn)樗麄兡軌虍a(chǎn)生纖維素酶。研究者從牛的瘤胃中篩選產(chǎn)生纖維酶的纖維素分解菌，其篩選過(guò)程如圖1所示。將丙中的菌懸液轉(zhuǎn)接于含有稻草作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用剛果紅處理，看到如圖2所示情況，下列有關(guān)敘述，錯(cuò)誤的是（）

A.②過(guò)程是涂布器取乙中的菌液均勻的涂布在Ⅰ號(hào)培養(yǎng)表面B.甲、乙試管中的液體都屬于液體培養(yǎng)基，主要作用是稀釋菌種C.Ⅰ號(hào)、Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基都屬于固體培養(yǎng)基，配置時(shí)先滅菌后調(diào)節(jié)pHD.可挑取圖2中周?chē)霈F(xiàn)透明圈的菌落，用平板劃線(xiàn)法繼續(xù)純化11、常乳是母牛泌乳期一周后直到泌乳停止前一周這個(gè)時(shí)間段內(nèi)分泌的乳汁。奶牛自身乳房和乳頭中可能含有的細(xì)菌，加上擠乳過(guò)程中產(chǎn)生的少量污染，常乳中會(huì)有一定量的細(xì)菌存在。研究小組要檢測(cè)一份常乳樣品中細(xì)菌的總量（不考慮菌種），檢測(cè)流程如下圖，每個(gè)平板上接種菌液量為0.1mL。下列說(shuō)法正確的是（）

A.倒平板時(shí)將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條細(xì)縫，不要完全打開(kāi)，防止雜菌污染B.上述方法是稀釋涂布平板法，培養(yǎng)基要營(yíng)養(yǎng)全面，適合各種細(xì)菌生長(zhǎng)C.也可以通過(guò)連續(xù)劃線(xiàn)的方法接種，通過(guò)菌落數(shù)計(jì)算樣品中的細(xì)菌總數(shù)D.若三個(gè)平板上的菌落平均數(shù)為59，則所每毫升樣品中細(xì)菌總數(shù)為5.9×10712、下列關(guān)于植物基因工程應(yīng)用的說(shuō)法，正確的是（）A.將某種含必需氨基酸多的蛋白質(zhì)導(dǎo)入植物體中以提高該植物體內(nèi)氨基酸的含量B.植物基因工程可用來(lái)培育高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、品質(zhì)優(yōu)良和抗逆性強(qiáng)的作物C.利用基因工程可以改造植物細(xì)胞的基因，使其能夠生產(chǎn)人類(lèi)所需要的藥物D.通過(guò)植物基因工程培育的抗蟲(chóng)植物必然可以抗病毒13、為探究原生質(zhì)體制備的最佳溶壁酶反應(yīng)時(shí)間，研究人員在高滲溶液中進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下圖所示。下列敘述正確的有（）

A.與雜交育種相比，原生質(zhì)體融合育種能擴(kuò)大親本的選擇范圍B.可用光學(xué)顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞形態(tài)變化，檢測(cè)原生質(zhì)體的形成情況C.每隔一段時(shí)間，可取反應(yīng)液直接滴加到血細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù)D.據(jù)圖中數(shù)據(jù)推測(cè)，在高滲溶液中有原生質(zhì)體的裂解評(píng)卷人得分三、填空題(共9題，共18分)14、在課題1中，我們學(xué)習(xí)了稀釋涂布平板法。這一方法常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中_________________的數(shù)目。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，____________________。15、微生物________________的方法很多，最常用的是_____________和__________________。16、酶是細(xì)胞合成的生物催化劑。隨著生物科學(xué)技術(shù)的發(fā)展；酶已經(jīng)走出實(shí)驗(yàn)室，走進(jìn)人們的生產(chǎn)和生活。請(qǐng)回答下面有關(guān)酶的問(wèn)題：

（1）在腐乳制作的過(guò)程中；利用毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成________，____________將脂肪水解為甘油和脂肪酸。加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應(yīng)用最廣泛；效果最明顯的是____________。

（2）果膠酶包括_____________________________；生產(chǎn)中如果要固定果膠酶；最好采用______________________________________法固定化。

（3）酶提取和分離原理：需要用__________法去除相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白，以純化酶；利用_________________________法對(duì)酶進(jìn)行純度鑒定。17、本課題對(duì)分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步的篩選。但是，這只是分離純化的第一步。為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵方法有___________和___________發(fā)酵兩種。纖維素酶的測(cè)定方法，一般是采用對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的__________進(jìn)行________的測(cè)定。18、通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的________________，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在_________________________的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。19、______——“分子手術(shù)刀”20、第三步：將目的基因?qū)隷_____21、動(dòng)物基因工程：______。22、基因工程是蛋白質(zhì)工程的關(guān)鍵技術(shù)；蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸。有人對(duì)基因工程和蛋白質(zhì)工程的關(guān)系進(jìn)行了比較，并歸納為下表。

基因工程與蛋白質(zhì)工程的比較。比較項(xiàng)目蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程原理中心法則中心法則區(qū)別過(guò)程獲取目的基因→構(gòu)建表達(dá)載體→導(dǎo)入受體細(xì)胞→目的基因的檢測(cè)與鑒定預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)氨基酸序列→合成DNA→表達(dá)出蛋白質(zhì)實(shí)質(zhì)定向改造生物的遺傳特性，以獲得人類(lèi)所需要的生物類(lèi)型或生物產(chǎn)品（基因的異體表達(dá)）定向改造蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)以生產(chǎn)人類(lèi)所需要的蛋白質(zhì)定向改造蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)以生產(chǎn)人類(lèi)所需要的蛋白質(zhì)結(jié)果生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)聯(lián)系蛋白質(zhì)工程是第二代基因工程

上表的比較是否正確？如果有不妥之處，嘗試進(jìn)行修改。_________評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題，共10分)23、“設(shè)計(jì)試管嬰兒”與“試管嬰兒”相比在植入前需要對(duì)胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷。()A.正確B.錯(cuò)誤24、中國(guó)政府禁止生殖性克隆，但不反對(duì)治療性克隆。()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共16分)25、Hela細(xì)胞系是人工培養(yǎng)具有無(wú)限增殖能力的水生瘤細(xì)胞系；在世界各地的相關(guān)實(shí)驗(yàn)室中為研究者提供了相同的研究對(duì)象。回答下列問(wèn)題：

（1）Hela細(xì)胞源自一位美國(guó)婦女的宮頸癌細(xì)胞，目前實(shí)驗(yàn)室中為了進(jìn)步研究Hela細(xì)胞，需進(jìn)行___________(填“原代”或“傳代”)培養(yǎng)。在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，需要用胰蛋白酶，而不用胃蛋白酶的原因是________________________________________________。

（2）某小組為研究葡萄糖饑餓對(duì)Hela細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制情況，其他營(yíng)養(yǎng)條件適宜，用不同葡萄糖濃度的培養(yǎng)基，培養(yǎng)Hela細(xì)胞24h，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示：。葡萄糖濃度（mmol:L-1）Hela細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率%056．161．036．301．525．002．016．44

該實(shí)驗(yàn)_____________(填“需要”或“不需要”)另設(shè)對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：葡萄糖濃度與Hela細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率的關(guān)系是____________________。

（3）體內(nèi)低濃度葡萄糖可_________________癌細(xì)胞的增殖，為腫瘤的限食療法提供理論依據(jù)。Hela細(xì)胞在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，例如，它幫助科學(xué)家首次實(shí)現(xiàn)了人源細(xì)胞與小鼠細(xì)胞融合。細(xì)胞融合技術(shù)的意義是__________________________________________。26、干燥綜合征（SS）是臨床常見(jiàn)的一種自身免疫病；患者血清中存在多種抗體，其中以SSB抗體特異性最強(qiáng)。下圖表示科研人員利用基因工程技術(shù)獲得SSB蛋白及利用SSB蛋白對(duì)小鼠進(jìn)行免疫的過(guò)程。回答下列問(wèn)題：

(1)利用RNA通過(guò)①過(guò)程獲得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保護(hù)尾部不被降解。為了針對(duì)性獲得cDNA，應(yīng)如何設(shè)計(jì)逆轉(zhuǎn)錄第一步時(shí)的DNA引物______，設(shè)計(jì)引物的目的是______。

(2)為確保與pET41a質(zhì)粒定向連接，對(duì)逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴(kuò)增時(shí)，應(yīng)在相應(yīng)引物的_______（填“5'”或“3'”）端加上______酶切位點(diǎn)。

(3)③過(guò)程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時(shí)，需要用Ca2+處理大腸桿菌，目的是______，然后將處理后的大腸桿菌先接種在添加_______的培養(yǎng)基（A）上培養(yǎng)，待長(zhǎng)出菌落后再利用無(wú)菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加______的培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)，收集_______菌落進(jìn)一步純化后將菌體破碎處理；篩選得到SSB蛋白。

(4)將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測(cè)該蛋白是否具有抗原性，則后續(xù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容應(yīng)為抽取小鼠血液_______。評(píng)卷人得分六、綜合題(共3題，共21分)27、如圖是利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)治療遺傳性糖尿病（基因缺陷導(dǎo)致胰島B細(xì)胞不能正常合成胰島素的過(guò)程設(shè)計(jì)圖解；請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）圖中①所示的結(jié)構(gòu)是_________；②所示的結(jié)構(gòu)是________。

（2）圖中③所示的生物工程技術(shù)是________；④所示的生物工程技術(shù)是________。

（3）在圖中④所示的生物工程技術(shù)中，健康胰島B細(xì)胞基因在進(jìn)入②之前要構(gòu)建________，這是基因工程的核心，除含目的基因外，還必須含有啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因。28、人乳鐵蛋白（hLF）廣泛分布于乳汁和外分泌液中，初乳中含量較高，對(duì)細(xì)菌、真菌和病毒等都有抑制作用。研究人員開(kāi)展人乳鐵蛋白基因乳腺特異性表達(dá)載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)染研究，主要流程如下圖，圖中AseⅠ、NheⅠ、SalⅠ、BamHⅠ代表相關(guān)限制酶切點(diǎn)，neor為新霉素抗性基因；BLG基因?yàn)锽乳球蛋白基因，GFP基因?yàn)榫G色熒光蛋白基因。請(qǐng)回答：

（1）過(guò)程①中，不能從人肌肉細(xì)胞中提取RNA用于RT-PCR，是因?yàn)開(kāi)___________。在RT-PCR過(guò)程中，加入的引物需在5'端添加____________兩種限制酶的識(shí)別序列；以便于hLF基因插入pEB中。

（2）過(guò)程②中，hLF基因插入到BLG基因之后的目的是_________________。

（3）將轉(zhuǎn)染后的山羊乳腺上皮細(xì)胞先置于含新霉素的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，能夠存活的細(xì)胞應(yīng)該是導(dǎo)入_______________的細(xì)胞，再利用___________（填以下選項(xiàng)）以篩選出成功表達(dá)hLF基因的山羊乳腺上皮細(xì)胞。

A．DNA分子雜交B．分子雜交。

C．熒光顯微鏡觀(guān)察D．抗原-抗體雜交。

（4）要獲得轉(zhuǎn)基因山羊，還需要將成功表達(dá)hLF的乳腺上皮細(xì)胞的細(xì)胞核移植到山羊去核卵母細(xì)胞中，再借助________________技術(shù)孕育出羊羔。29、現(xiàn)有純合油菜優(yōu)良品系甲和乙，均為圓葉雄性可育植株，控制圓葉與花葉的基因位于10號(hào)染色體上?？蒲腥藛T在圓葉油菜（野生型）中新發(fā)現(xiàn)一株純合花葉雄性不育株（植株丙），油菜育性相關(guān)基因M/m在9號(hào)染色體上，R/r在7號(hào)染色體上；在R基因存在時(shí)，m基因純合，可導(dǎo)致植株雄性不育?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）將圓葉和花葉植株進(jìn)行雜交，實(shí)驗(yàn)所得F1表現(xiàn)為介于圓葉與花葉之間的半花葉，判斷控制圓葉的基因與控制花葉的基因間顯隱性關(guān)系為_(kāi)_______。

（2）利用甲；丙進(jìn)行下圖所示雜交實(shí)驗(yàn)。

①過(guò)程I產(chǎn)生的F1均為半花葉，若F1自交，則子代中雄性不育株所占比例約為_(kāi)_______，過(guò)程II產(chǎn)生的子代中，基因型為MmRr的半花葉植株所占比例約為_(kāi)_______。

②提取半花葉植株的DNA，可用________技術(shù)進(jìn)行高精度的檢測(cè)，將基因型為MmRr的植株篩選出來(lái)，該技術(shù)所需材料包括引物、DNA聚合酶、________等。

③過(guò)程III連續(xù)多代與植株甲雜交、篩選的目的是________。

（3）純合圓葉品系乙（Mrr）具有其他一些優(yōu)良性狀，請(qǐng)?jiān)谏鲜鲭s交、篩選結(jié)果的基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)育種方案，完成下列育種目標(biāo)：獲得兼具品系甲和乙優(yōu)良性狀的雜種一代植株，并能以葉形性狀作為標(biāo)記性狀區(qū)分雜交種。請(qǐng)寫(xiě)出育種方案：________。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、B【分析】【分析】

1；植物細(xì)胞工程的應(yīng)用：

（1）植物繁殖的新途徑微型繁殖：保持優(yōu)良品種的遺傳特性；高效快速地實(shí)現(xiàn)大量繁殖：

①作物脫毒：利用分生區(qū)附近（如莖尖）組織培養(yǎng)獲得脫毒苗；

②人工種子：胚狀體；不定芽、頂芽和腋芽等包上人工種皮制成；

（2）作物新品種的培育：?jiǎn)伪扼w育種；突變體的利用；

（3）細(xì)胞產(chǎn)物的工廠(chǎng)化生產(chǎn)：培養(yǎng)到愈傷組織階段；

2；誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的常用方法有聚乙二醇（PEG）融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等。

【詳解】

A；植物基因工程主要用于提高農(nóng)作物的抗逆能力；改良農(nóng)作物品質(zhì)等，A正確；

B；人工種子中包埋的是頂芽、腋芽、不定芽或胚狀體；而不是愈傷組織，B錯(cuò)誤；

C；囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞與內(nèi)細(xì)胞團(tuán)具有相同的遺傳物質(zhì)；因此可用來(lái)進(jìn)行性別鑒定，C正確；

D；制備單克隆抗體需要制備雜交瘤細(xì)胞；誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的過(guò)程常用滅活的病毒和聚乙二醇（PEG）等，D正確。

故選B。2、D【分析】【分析】

單克隆抗體的最主要優(yōu)點(diǎn)就是特異性強(qiáng)；靈敏度高，能夠大量制備。單克隆抗體的作用：①作為診斷試劑（最廣泛的用途）：具有準(zhǔn)確；高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)；②用于治療疾病和運(yùn)載藥物：主要用于治療癌癥，可制成“生物導(dǎo)彈”。

【詳解】

A；單克隆抗體可以作為診斷試劑；準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì)，與抗原的特異性結(jié)合具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的特點(diǎn)，A正確；

B；運(yùn)用同位素標(biāo)記的單克隆抗體在特定組織中成像的技術(shù)；可定位診斷腫瘤、心血管畸形等疾病，B正確；

C；根據(jù)抗體和抗原發(fā)生特異性結(jié)合的原理；利用單克隆抗體用于治療疾病和運(yùn)載藥物，例如用于治療癌癥，C正確；

D；單克隆抗體的制備過(guò)程涉及動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)；但不涉及胚胎移植技術(shù)，D錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】3、C【分析】【分析】

分析題圖：圖示表示“三親嬰兒”的培育過(guò)程；該過(guò)程中采用了核移植技術(shù)；體外受精技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)及胚胎移植技術(shù)。

【詳解】

A；母親為三親嬰兒提供的是卵母細(xì)胞的細(xì)胞核；該技術(shù)可避免母親的線(xiàn)粒體遺傳病基因傳遞給后代，A正確；

B；捐獻(xiàn)者攜帶的紅綠色盲基因位于其細(xì)胞核內(nèi)；而捐獻(xiàn)者給三親嬰兒提供的是卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，故捐獻(xiàn)者攜帶的紅綠色盲基因不能遺傳給三親嬰兒，B正確；

C；圖中“三親嬰兒”是經(jīng)過(guò)核移植和體外受精產(chǎn)生的；其核遺傳物質(zhì)來(lái)自母親和父親提供的細(xì)胞核，C錯(cuò)誤；

D；根分析可知；三親嬰兒的培育還需要早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)，D正確。

故選C。4、A【分析】【分析】

小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)屬于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)；需要在無(wú)菌無(wú)毒和培養(yǎng)液提供類(lèi)似內(nèi)環(huán)境的條件下進(jìn)行。

【詳解】

A；小鼠胚胎腦組織中含有豐富的原代神經(jīng)元；細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，不會(huì)造成生長(zhǎng)緩慢，A符合題意；

B；培養(yǎng)瓶瓶口密封會(huì)使培養(yǎng)液中缺氧；影響細(xì)胞有氧呼吸，造成供能不足，可能使細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，B不符合題意；

C；血清經(jīng)過(guò)高溫處理后；其中活性成分變性，失去原有功能，細(xì)胞生存環(huán)境嚴(yán)重惡化，可能使細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，C不符合題意；

D；小鼠內(nèi)環(huán)境為弱堿性；所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性，使細(xì)胞生存環(huán)境惡劣，可能造成細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，D不符合題意。

故選A。5、B【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞，誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，注入小鼠腹腔中培養(yǎng)或者體外培養(yǎng)，最后從小鼠腹水或者培養(yǎng)液中獲取單克隆抗體。單克隆抗體制備過(guò)程中至少涉及兩次篩選，第一次是利用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行初步篩選出雜交瘤細(xì)胞，第二次是利用克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)的方法篩選出既能大量增殖，又能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。

【詳解】

A；為了更好地促進(jìn)動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)；盡可能模擬細(xì)胞在體內(nèi)的生活環(huán)境，培養(yǎng)液中除營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外還要添加一定量的血清、血漿，A正確；

B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，并將其置于含有95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH；B錯(cuò)誤；

C；融合后的體系中含有多種細(xì)胞；未融合的同種細(xì)胞，融合的具有同種核的細(xì)胞，還有雜交瘤細(xì)胞，篩選1的目的是為了獲得雜交瘤細(xì)胞，C正確；

D；二者的融合細(xì)胞的種類(lèi)可能有B淋巴細(xì)胞+B淋巴細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞+骨髓瘤細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞+B淋巴細(xì)胞；基因型可能是HHHH、SSSS、HHSS，D正確。

故選B。6、C【分析】【分析】

DNA指紋技術(shù)利用了DNA分子的特異性和堿基互補(bǔ)配對(duì)原則。每個(gè)人的DNA攜帶的遺傳信息是不同的；其中的堿基排列順序也不完全相同，利用相關(guān)的酶將DNA分子切割成不同的片段，然后利用特定的人源小衛(wèi)星DNA作探針，進(jìn)行雜交獲得不同的雜交帶圖紋，根據(jù)圖紋進(jìn)行對(duì)比，從而確定不同個(gè)體的親緣關(guān)系。

【詳解】

A；突變或重組可導(dǎo)致DNA分子的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變；隨配子遺傳后代，導(dǎo)致遺傳的多樣性，A正確；

B；樣本DNA的堿基與探針DNA的堿基通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)形成堿基對(duì)產(chǎn)生雜交帶；B正確；

C；DNA指紋技術(shù)通過(guò)對(duì)比不同個(gè)體DNA之間的相似性來(lái)確定親緣關(guān)系；因此雜交帶的不同顯示出家庭成員之間DNA分子中堿基排列順序的多樣性和特異性，C錯(cuò)誤；

D；根據(jù)各家庭成員的檢測(cè)結(jié)果分析；女兒1、兒子1與母親和父親雜交帶相似，女兒2、兒子2與母親和父親的差異較大，故女兒1和兒子1為該夫婦的親生孩子，D正確。

故選C。

【點(diǎn)睛】二、多選題(共7題，共14分)7、A:C:D【分析】【分析】

分析表格：不同動(dòng)物胚胎發(fā)育的時(shí)間及進(jìn)入子宮的時(shí)間不同；小鼠在胚胎發(fā)育3天進(jìn)入子宮，牛在胚胎發(fā)育4-5天進(jìn)入子宮，馬在胚胎發(fā)育6天進(jìn)入子宮。

【詳解】

A；小鼠胚胎在發(fā)育3天進(jìn)入子宮；此時(shí)處于桑椹胚時(shí)期，牛在胚胎發(fā)育4-5天進(jìn)入子宮，此時(shí)處于16細(xì)胞時(shí)期，故小鼠胚胎進(jìn)入子宮時(shí)的發(fā)育程度比牛的高，A正確；

B；馬在胚胎發(fā)育6天進(jìn)入子宮；此時(shí)大概處于囊胚期，故體外馬胚胎移植到子宮時(shí)選擇囊胚期，B錯(cuò)誤；

C；由表格信息可知；受精卵發(fā)育的階段順序?yàn)?-4-8-16-桑椹胚-囊胚期，C正確；

D；2-4-8-16細(xì)胞發(fā)育階段進(jìn)行的是有絲分裂；不改變遺傳物質(zhì)，D正確。

故選ACD。8、A:B【分析】【分析】

分析圖解：異種克隆大熊貓的培育首先通過(guò)核移植技術(shù)獲得重組細(xì)胞；然后經(jīng)過(guò)早期胚胎培養(yǎng)獲得異種重構(gòu)囊胚，再利用胚胎移植技術(shù)將重構(gòu)囊胚移植如代孕兔體內(nèi)。

【詳解】

A；科學(xué)家通過(guò)對(duì)母兔注射促性腺激素；進(jìn)行超數(shù)排卵處理以獲得更多的卵母細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；異種重構(gòu)囊胚在體外培養(yǎng)時(shí)；往往需要在培養(yǎng)液中加入抗生素，從而保證無(wú)毒無(wú)菌環(huán)境，B錯(cuò)誤；

C；囊胚由滋養(yǎng)層細(xì)胞和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)構(gòu)成；其中滋養(yǎng)層細(xì)胞將來(lái)發(fā)育為胎盤(pán)和胎膜，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育成胚胎的各種組織，C正確；

D；目前；異種重構(gòu)囊胚在代孕兔的子宮內(nèi)能正常著床，但是不能正常發(fā)育生產(chǎn)出大熊貓幼仔，很可能是代孕兔提供的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不能讓異種重構(gòu)囊胚正常發(fā)育，D正確。

故選AB。

【點(diǎn)睛】9、A:C:D【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類(lèi)型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧條件下，進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖；（2）在無(wú)氧條件下，產(chǎn)生酒精和二氧化碳。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類(lèi)型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

3；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陳代謝類(lèi)型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【詳解】

A；果酒制作時(shí)；除了產(chǎn)生酒精，還會(huì)產(chǎn)生大量二氧化碳，因此發(fā)酵瓶中容易產(chǎn)生較多泡沫，A正確；

B；用果酒制作果醋過(guò)程中；液面出現(xiàn)一層白色菌膜，而不是褐色菌膜，B錯(cuò)誤；

C；制作腐乳過(guò)程中；豆腐表面發(fā)黏且長(zhǎng)有白色菌絲，C正確；

D；用固定化酵母進(jìn)行酒精發(fā)酵；酒精濃度越來(lái)越高，因此凝膠珠逐漸浮上液面，D正確。

故選ACD。

【點(diǎn)睛】10、A:B:C【分析】分解纖維素的微生物的分離實(shí)驗(yàn)的原理：①土壤中存在著大量纖維素分解酶；包括真菌；細(xì)菌和放線(xiàn)菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長(zhǎng)，其他微生物則不能生長(zhǎng)。②在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

【詳解】

A；根據(jù)Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基上菌落分布均勻可知；②過(guò)程是用涂布器取乙中的樣品稀釋液均勻的涂布在Ⅰ號(hào)培養(yǎng)表面，即乙中是分解纖維素菌的樣品稀釋液，不是菌液，A錯(cuò)誤；

B；液體培養(yǎng)基的作用是讓菌體增殖；而不是稀釋菌種，甲、乙試管中的液體都是樣品稀釋液，捕食液體培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；

C；配置固體培養(yǎng)基的基本步驟是計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板；故需要先調(diào)pH，再滅菌，C錯(cuò)誤；

D；剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物；若菌落周?chē)霈F(xiàn)透明圈，說(shuō)明纖維素分解菌將纖維素進(jìn)行了分解，可挑取該菌落用平板劃線(xiàn)法繼續(xù)純化該菌體，D正確。

故選ABC。11、A:B:D【分析】【分析】

分析題文描述和題圖：圖示為采用稀釋涂布平板法分離常乳樣品中細(xì)菌總量的流程圖。首先將常乳樣品進(jìn)行一系列梯度稀釋?zhuān)缓笕?×105倍稀釋的稀釋液0.1mL分別涂布到3個(gè)平板上進(jìn)行培養(yǎng)。為了防止雜菌污染；稀釋涂布平板的所有操作都應(yīng)控制無(wú)菌條件。

【詳解】

A；為了防止雜菌污染；倒平板時(shí)應(yīng)將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條細(xì)縫，不要完全打開(kāi)，A正確；

B；為了檢測(cè)一份常乳樣品中細(xì)菌的總量；圖示對(duì)常乳樣品進(jìn)行了一系列梯度稀釋?zhuān)纱丝梢?jiàn)，上述方法是稀釋涂布平板法，培養(yǎng)基要營(yíng)養(yǎng)全面，適合各種細(xì)菌生長(zhǎng)，B正確；

C；通過(guò)連續(xù)劃線(xiàn)的方法接種；不易分離出單個(gè)菌落，不能用于微生物的計(jì)數(shù)，C錯(cuò)誤；

D、取1×105倍稀釋的稀釋液0.1mL分別涂布到3個(gè)平板上進(jìn)行培養(yǎng)，若三個(gè)平板上的菌落平均數(shù)為59，則所每毫升樣品中細(xì)菌總數(shù)為59÷0.1×105＝5.9×107；D正確。

故選ABD。12、B:C【分析】【分析】

基因工程是指按人們的意愿；進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過(guò)體外重組DNA分子和轉(zhuǎn)基因技術(shù)，獲得人們需要的新的生物類(lèi)型和生物產(chǎn)品。其基因改變的方向是認(rèn)為決定的。

【詳解】

A；科學(xué)家將必需氨基酸含量多的的蛋白質(zhì)相關(guān)基因?qū)胫参镏?；或者改變這些氨基酸合成途徑中某種關(guān)鍵酶的活性，以提高氨基酸的含量，A錯(cuò)誤；

B；可以將某些比如抗逆性、高產(chǎn)等基因?qū)胫参矬w內(nèi)；培育出高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、品質(zhì)優(yōu)良和抗逆性強(qiáng)的作物，B正確；

C；利用基因工程可以改造植物細(xì)胞的基因；使其能夠生產(chǎn)人類(lèi)所需要的藥物，比如紫草寧等藥品，C正確；

D；用基因工程培育的抗蟲(chóng)植物只含有抗蟲(chóng)特性；但不能抗病毒，D錯(cuò)誤。

故選BC。13、A:B:D【分析】【分析】

植物體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞；能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。

【詳解】

A；與傳統(tǒng)的雜交育種相比；植物體細(xì)胞的雜交能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，因此，與雜交育種相比，原生質(zhì)體融合育種能擴(kuò)大親本的選擇范圍，A正確；

B；原生質(zhì)體為顯微結(jié)構(gòu)；可用光學(xué)顯微鏡來(lái)檢測(cè)原生質(zhì)體的形成情況，B正確；

C；每隔一段時(shí)間；從試管中吸出反應(yīng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)前，需將試管輕輕振蕩數(shù)次，目的是使培養(yǎng)液中的原生質(zhì)體均勻分布，減少誤差，C錯(cuò)誤；

D；據(jù)圖中數(shù)據(jù)推測(cè)；隨著溶壁酶反應(yīng)時(shí)間的延長(zhǎng)，原生質(zhì)體濃度先升高后降低，可推測(cè)在高滲溶液中有原生質(zhì)體的裂解，導(dǎo)致原生質(zhì)體的濃度降低，D正確。

故選ABD。三、填空題(共9題，共18分)14、略

【解析】①.活菌②.培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌15、略

【解析】①.接種②.平板劃線(xiàn)法③.稀釋涂布平板法16、略

【分析】【分析】

1；腐乳制作過(guò)程中多種微生物參與了發(fā)酵；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物產(chǎn)生蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪轉(zhuǎn)化成甘油和脂肪酸。

2；果膠酶能夠分解果膠；瓦解植物的細(xì)胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易，而果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得渾濁的果汁變得澄清。果膠酶并不特指某一種酶，而是分解果膠的一類(lèi)酶的總稱(chēng)，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶。

【詳解】

（1）在腐乳制作的過(guò)程中；利用毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪水解為甘油和脂肪酸；加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應(yīng)用最廣泛；效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。

（2）果膠酶并不特指某一種酶；而是分解果膠的一類(lèi)酶的總稱(chēng)，包括多聚半乳糖醛酸酶；果膠分解酶和果膠酯酶；在果汁生產(chǎn)過(guò)程中如果要固定果膠酶，最好采用化學(xué)結(jié)合和物理吸附法固定化，這是因?yàn)槊阜肿有。w積小的酶容易從包埋材料中漏出。

（3）酶提取和分離原理：需要用凝膠色譜法去除相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白；以純化酶；利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法對(duì)酶進(jìn)行純度鑒定。

【點(diǎn)睛】

本題考查腐乳制作和酶提取等知識(shí)，對(duì)于此類(lèi)試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)采用的試劑及試劑的作用等，需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過(guò)程中注意積累?！窘馕觥啃》肿与暮桶被嶂久笁A性蛋白酶和堿性脂肪酶半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶化學(xué)結(jié)合法和物理吸附凝膠色譜（分配色譜）聚丙烯酰胺凝膠電泳17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】液體發(fā)酵固體發(fā)酵葡萄糖定量18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】菌落數(shù)30～30019、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】受體細(xì)胞21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物22、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，其結(jié)果是生產(chǎn)自然界沒(méi)有的蛋白質(zhì)?！窘馕觥康鞍踪|(zhì)工程的結(jié)果是生產(chǎn)自然界沒(méi)有的蛋白質(zhì)四、判斷題(共2題，共10分)23、A【分析】【分析】

“設(shè)計(jì)試管嬰兒”在植入前需要對(duì)胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷；而“試管嬰兒”是解決不孕不育等問(wèn)題，不需要進(jìn)行遺傳學(xué)診斷。

【詳解】

“設(shè)計(jì)試管嬰兒”與“試管嬰兒”相比在植入前需要通過(guò)多種技術(shù)手段對(duì)胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷；以便選擇合適的設(shè)計(jì)出來(lái)的試管嬰兒。

故正確24、A【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)；過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。治療性克?。褐咐每寺〖夹g(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞和組織（皮膚、神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植。生殖性克?。褐笇⒖寺〖夹g(shù)用于生育目的；即用于產(chǎn)生人類(lèi)個(gè)體。中國(guó)政府：禁止生殖性克隆人，堅(jiān)持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)），不反對(duì)治療性克隆人。

【詳解】

據(jù)分析可知；中國(guó)政府禁止生殖性克隆，但不反對(duì)治療性克隆。

故正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共16分)25、略

【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿(mǎn)瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。

2；培養(yǎng)條件：

（1）無(wú)菌無(wú)毒環(huán)境：無(wú)菌--對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理；在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；無(wú)毒--定期更換培養(yǎng)液；防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)自身造成危害。

（2）營(yíng)養(yǎng)：

成分：所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同；例如需要有糖；氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分。

培養(yǎng)基類(lèi)型：合成培養(yǎng)基（將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類(lèi)和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基）

（3）溫度和pH值：哺乳動(dòng)物多以36.5±0.5℃為宜；多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

（4）氣體環(huán)境：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。

【詳解】

（1）目前實(shí)驗(yàn)室中為了進(jìn)一步研究Hela細(xì)胞；需進(jìn)行傳代培養(yǎng)；由于是在多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液適宜的pH范圍內(nèi)，胃蛋白酶（最適pH是強(qiáng)酸性）已失去活性，所以在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，需要用胰蛋白酶處理制備細(xì)胞懸液。

（2）分析表格數(shù)據(jù)；該實(shí)驗(yàn)需要另設(shè)對(duì)照組，觀(guān)察在正常條件下細(xì)胞生長(zhǎng)情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：葡萄糖濃度與Hela細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率的關(guān)系是葡萄糖濃度越低，Hela細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率越高。

（3）體內(nèi)低濃度葡萄糖可抑制癌細(xì)胞的增殖；為腫瘤的限食療法提供理論依據(jù)。兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞融合形成的單核細(xì)胞叫做雜交細(xì)胞，細(xì)胞融合技術(shù)的意義是突破了有性雜交局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。

【點(diǎn)睛】

本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)內(nèi)容，重點(diǎn)考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程和條件，相關(guān)知識(shí)點(diǎn)只需考生識(shí)記即可正確作答，屬于考綱識(shí)記層次的考查。對(duì)于此類(lèi)試題，考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過(guò)程中，應(yīng)該注意構(gòu)建知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)?！窘馕觥總鞔诙鄶?shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH范圍內(nèi)，胃蛋白酶已失去活性需要葡萄糖濃度越低，Hela細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率越高抑制突破了有性雜交局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能26、略

【分析】【分析】

1；基因工程的四個(gè)步驟：目的基因的篩選與獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。

2、在基因工程操作中，常用原核生物作為受體細(xì)胞，其中以大腸桿菌應(yīng)用最為廣泛。研究人員一般先用Ca2＋處理大腸桿菌細(xì)胞；使細(xì)胞處于一種能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，然后再將重組的基因表達(dá)載體導(dǎo)入其中。

【詳解】

（1）利用RNA通過(guò)①過(guò)程（逆轉(zhuǎn)錄）獲得cDNA需要逆轉(zhuǎn)錄酶；已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保護(hù)尾部不被降解。逆轉(zhuǎn)錄第一步以mRMA為模板合成DNA單鏈；新鏈與模板鏈反向平行，由于新鏈只能由5'端向3'端延伸，所以逆轉(zhuǎn)錄第一步的引物應(yīng)與mRNA尾部的PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）互補(bǔ)配對(duì)，即用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物；設(shè)計(jì)引物的目的是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸。

（2）對(duì)逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴(kuò)增時(shí)；引物的5'端結(jié)合母鏈的3'端之后DNA聚合酶開(kāi)始擴(kuò)增DNA。為確保其與pET41a質(zhì)粒定向連接，應(yīng)使用不同種的限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，由圖可知，使用EcoRI酶會(huì)破環(huán)SSB基因，故應(yīng)在相應(yīng)引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位點(diǎn)。

（3）由題圖分析可知：質(zhì)粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因，由于XhoⅠ酶破壞了氯霉素抗性基因，所以成功組裝的重組質(zhì)粒不能在添加了氯霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，③過(guò)程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時(shí)，需要用Ca2+處理大腸桿菌；目的是使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)，然后分別將處理后的大腸桿菌先接種在添加卡那霉素的培養(yǎng)基（A）上培養(yǎng)，待長(zhǎng)出菌落后再利用無(wú)菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加氯霉素的培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)，收集能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)而不能在含氯霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落進(jìn)一步純化后將菌體破碎處理，經(jīng)篩選即可得到SSB蛋白。

（4）將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測(cè)該蛋白是否具有抗原性，如果該蛋白有抗原性，會(huì)引起機(jī)體的免疫反應(yīng)，產(chǎn)生相應(yīng)抗體。則后續(xù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容應(yīng)為抽取小鼠血液提取其中的抗體，利用抗原—抗體雜交的方法檢測(cè)其是否含有抗SSB的抗體?！窘馕觥?1)逆轉(zhuǎn)錄用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物

使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸

(2)5’BamHⅠ和XhoI

(3)使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)卡那霉素氯霉素能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)而不能在含氯霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的。

(4)提取其中的抗體，利用抗原—抗體雜交的方法檢測(cè)其是否含有抗SSB的抗體六、綜合題(共3題，共21分)27、略

【分析】【分析】

分析題圖：圖示是利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)治療遺傳性糖尿?。ɑ蛉毕輰?dǎo)致胰島B細(xì)胞不能正常合成胰島素）的過(guò)程設(shè)計(jì)圖解；核移植是將體細(xì)胞核移至去核卵細(xì)胞中，因此圖中①為細(xì)胞核；②應(yīng)該為囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞；③表示核移植過(guò)程；④表示將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。

（1）

由以上分析可知；圖中①為細(xì)胞核，②為囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞。

（2）

③表示將體細(xì)胞核移至去核卵細(xì)胞；該過(guò)程需要采用核移植技術(shù)。④需要采用基因工程技術(shù)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。

（3）

④需要采用基因工程技術(shù)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；該技術(shù)中，將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞前需先構(gòu)建基因表達(dá)載體，其組成包括啟動(dòng)子；目的基因、標(biāo)記基因和終止子等。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合治療性克隆的流程圖，考查基因工程和細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟；識(shí)記動(dòng)物體細(xì)胞克隆的具體過(guò)程及相關(guān)應(yīng)用；能正確分析題圖，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題?！窘馕觥浚?）細(xì)胞核內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞（或胚胎干細(xì)胞）

（2）核移植技術(shù)基因工程技術(shù)。

（3）基因表達(dá)載體28、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同