2025年牛津譯林版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年牛津譯林版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、中國(guó)首例設(shè)計(jì)試管嬰兒的父母均為地中海貧血基因的攜帶者，為了挽救患有重度地中海貧血的姐姐，用他的臍帶血幫助姐姐進(jìn)行造血干細(xì)胞移植。下列相關(guān)說法正確的是（）A.該嬰兒的獲得運(yùn)用體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植和基因工程等技術(shù)B.移植前需對(duì)胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷C.姐姐健康后所生的孩子不含地中海貧血基因D.表明我國(guó)放開設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)的研究與應(yīng)用2、下列關(guān)于促進(jìn)雌性動(dòng)物大量排卵的敘述中，正確的是（）A.給未成年的雄性動(dòng)物注射大量的相關(guān)激素，使其排卵B.給性成熟的雄性動(dòng)物注射大量的相關(guān)激素，使其超數(shù)排卵C.給未成年的雌性動(dòng)物注射一定的相關(guān)激素，使其排卵D.給性成熟的雌性動(dòng)物注射一定的相關(guān)激素，使其超數(shù)排卵3、下列有關(guān)生物工程的敘述；不正確的有（）

①基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體。

②蛋白質(zhì)工程可通過直接改造蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)從而改變其功能。

③克隆羊的培育涉及細(xì)胞核移植；早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)。

④PCR技術(shù)需要利用限制性核酸內(nèi)切酶打開DNA雙鏈。

⑤利用核移植技術(shù)可以培育試管嬰兒。

⑥牛胚胎發(fā)育的歷程是：受精卵→桑椹胚→囊胚→原腸胚→幼體。

⑦利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和細(xì)胞融合技術(shù)可以制備單克隆抗體。

⑧利用植物莖尖培養(yǎng)脫毒苗時(shí)，全程都需要光照A.一項(xiàng)B.兩項(xiàng)C.三項(xiàng)D.四項(xiàng)4、甘薯由于能增強(qiáng)免疫功能、防癌抗癌、抗衰老、防止動(dòng)脈硬化等越來越被人們喜愛。但甘薯屬無性繁殖作物，同時(shí)又是同源六倍體，具有自交不育和雜交不親和性，這使甘薯生產(chǎn)和育種存在諸多常規(guī)方法難于解決的問題。下列相關(guān)操作不合理的是（）A.利用組織培養(yǎng)形成的胚狀體制作人工種子，解決種苗用量大、成本高的問題B.利用莖尖分生組織培養(yǎng)脫毒苗，使植株具備抗病毒的能力，產(chǎn)品質(zhì)量得到提高C.利用原生質(zhì)體融合實(shí)現(xiàn)體細(xì)胞雜交，可以克服雜交不親和，充分利用遺傳資源D.利用培養(yǎng)的愈傷組織進(jìn)行誘變育種，可以顯著提高變異頻率，大大縮短育種年限5、我國(guó)利用不同微生物的發(fā)酵作用制作食品，歷史悠久，在多種文獻(xiàn)中均有記載。下列說法錯(cuò)誤的是（）

①《齊民要術(shù)》中記載：“作鹽水；令極咸，于鹽水中洗菜，即內(nèi)雍中?！?/p>

②《北山酒經(jīng)》中記載：“每壇加蠟三錢；竹葉五片，隔水煮開，乘熱灌封壇口。”

③《齊民要術(shù)》中記載了二十三種利用谷物釀制食醋的工藝。其經(jīng)歷的三個(gè)主要發(fā)酵過程為：糖化→酒化→醋化。

④《本草綱目拾遺》中記述：“豆腐又名菽乳，豆腐腌過酒糟或醬制者，味咸甘心。”A.①介紹的是泡菜制作，配制鹽水要煮沸冷卻后使用，且鹽度不宜過大B.②中每壇加蠟隔水煮開，乘熱灌封壇口有助于陳酒的儲(chǔ)藏C.③中從酒化到醋化的過程需要移至溫度較低的環(huán)境中進(jìn)行D.④中發(fā)酵產(chǎn)腐乳用的豆腐坯屬固體培養(yǎng)基，不需對(duì)其進(jìn)行嚴(yán)格滅菌6、馬鈴薯利用塊莖進(jìn)行無性生殖，種植的世代多了以后往往會(huì)感染病毒而減產(chǎn)，為此農(nóng)戶都希望得到無病毒的幼苗進(jìn)行種植，獲得無病毒幼苗的最佳辦法是（）A.選擇優(yōu)良品種進(jìn)行雜交B.進(jìn)行遠(yuǎn)緣植物體細(xì)胞雜交C.利用莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)D.人工誘導(dǎo)基因突變7、下列有關(guān)培養(yǎng)基的敘述，正確的是（）A.培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素B.培養(yǎng)基中都只含有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽C.固體培養(yǎng)基表面可形成肉眼可見的單個(gè)細(xì)菌D.固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基評(píng)卷人得分二、多選題(共8題，共16分)8、下列就“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)的有關(guān)敘述，正確的是（）A.經(jīng)高壓蒸汽滅菌的培養(yǎng)基所倒平板和接種后培養(yǎng)時(shí)的平板均要倒置B.同一稀釋度下至少要涂布三個(gè)平板并且要培養(yǎng)到菌落數(shù)穩(wěn)定時(shí)計(jì)數(shù)C.在稀釋度足夠高時(shí)，所形成的單個(gè)菌落中所有細(xì)胞的遺傳信息必定相同D.在相同培養(yǎng)條件下，未接種的培養(yǎng)基表面無菌落生長(zhǎng)說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染9、模型是人們?yōu)榱四撤N特定目的而對(duì)認(rèn)識(shí)的對(duì)象所做的一種簡(jiǎn)化的概括性描述。對(duì)圖示生物概念模型的分析正確的是（）

A.若該模型表示體外受精技術(shù)，則C不能直接移植到代孕母體B.若該模型表示核移植技術(shù)，則C→D過程與胚胎移植技術(shù)有關(guān)C.若B表示培養(yǎng)液和胚胎干細(xì)胞，則C→D的培養(yǎng)過程中有可能出現(xiàn)分化現(xiàn)象D.若該模型表示農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法操作流程，則C可表示Ti質(zhì)粒，D是植物細(xì)胞10、下列實(shí)驗(yàn)過程中，出現(xiàn)的正?，F(xiàn)象有（）A.制作果酒時(shí)，發(fā)酵瓶中溶液產(chǎn)生較多泡沫B.用果酒制作果醋過程中，液面出現(xiàn)一層褐色菌膜C.制作腐乳過程中，豆腐表面發(fā)黏且長(zhǎng)有白色菌絲D.用固定化酵母進(jìn)行酒精發(fā)酵，凝膠珠浮在液面11、下圖是將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)爰?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”的示意圖。已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因。下列說法正確的是（）

A.若能在細(xì)菌B中檢測(cè)到人的生長(zhǎng)激素基因，則說明該基因工程項(xiàng)目獲得成功B.將完成導(dǎo)入過程后的細(xì)菌涂布在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能生長(zhǎng)的就是導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的細(xì)菌C.將人的生長(zhǎng)激素基因與質(zhì)粒A結(jié)合的過程共形成了4個(gè)磷酸二酯鍵D.將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌B之前，可以用Ca2+處理細(xì)菌B12、免疫PCR是對(duì)微量抗原的一種檢測(cè)方法。下圖是利用該技術(shù)檢測(cè)牛乳中微量抗生素的流程圖：首先將抗體1固定在微板上，沖洗后加入待檢的牛乳，再加入DNA標(biāo)記的抗體2，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，最后進(jìn)行電泳檢測(cè)，相關(guān)敘述正確的是（）

A.圖示中的DNA可以是非牛乳基因中的DNA片段B.如果第三次沖洗不充分則有可能出現(xiàn)假陽性現(xiàn)象C.電泳檢測(cè)結(jié)果只能判斷陽性與否，無法判斷牛乳中抗生素的含量D.微量抗原抗體反應(yīng)通過PCR技術(shù)間接擴(kuò)增放大，從而達(dá)到可檢測(cè)的水平13、高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性。研究者從熱泉中篩選高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌；其篩選過程如下圖1所示。將得到的菌懸液轉(zhuǎn)接于同時(shí)含有葡萄糖和淀粉作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用碘液作顯色處理，看到如下圖2所示情況。下列選項(xiàng)正確的是（）

A.過程①②合稱為稀釋涂布平板法B.甲乙試管中的液體均為選擇培養(yǎng)基C.Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基上的接種方法為平板劃線法D.圖2中周圍不顯藍(lán)色的菌落含有所需菌種14、據(jù)人民網(wǎng)報(bào)道，“一對(duì)名為露露和娜娜的基因編輯嬰兒于2018年11月在中國(guó)健康誕生。這對(duì)雙胞胎的一個(gè)基因經(jīng)過修改，使她們出生后即能天然抵抗艾滋病。這是世界首例免疫艾滋病的基因編輯嬰兒”。下列有關(guān)說法不正確的是（）A.基因編輯制造人類的行為是符合倫理道德的B.基因編輯技術(shù)，可改變?nèi)祟愡M(jìn)化的速度和方向，有利于人類的進(jìn)化C.通過基因編輯技術(shù)改變了人類的遺傳物質(zhì)，使人類進(jìn)化成新物種D.基因編輯技術(shù)可用于疾病預(yù)防領(lǐng)域研究，但不能用于編輯嬰兒15、剛果紅是一種染料，可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)紅色復(fù)合物中的纖維素被分解后紅色消失。表中是篩選纖維素分解菌的培養(yǎng)基，利用此培養(yǎng)基可從土壤中篩選纖維素分解菌，結(jié)果如圖。下列說法正確的是（）。培養(yǎng)基的成分：纖維素15gFeSO40．5gKH2PO41gZnSO40．5gK2HPO41gCaCl20．5g尿素0．5g剛果紅適量MgSO40．5g瓊脂20g定容1L

A.培養(yǎng)基中纖維素和尿素分別提供碳源和氮源B.KH2PO4和K2HPO4在提供無機(jī)鹽的同時(shí)還能維持培養(yǎng)基的pHC.將土壤稀釋液接種在平板上的方法為稀釋涂布平板法D.平板上5個(gè)菌落都有透明圈，說明5個(gè)菌落都能分解纖維素評(píng)卷人得分三、填空題(共6題，共12分)16、平板冷凝后，為什么要將平板倒置？________17、人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)一一培養(yǎng)基。其中，配制成的_______________的基質(zhì)稱為液體培養(yǎng)基，配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)稱為________________________。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑_______________________后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基，它是實(shí)驗(yàn)室中最常用的培養(yǎng)基之一。微生物在_________________培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)，可以形成肉眼可見的菌落。（瓊脂是一種從紅藻中提取的____________________。瓊脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常規(guī)培養(yǎng)條件下呈現(xiàn)固態(tài)。）18、加入酒精和用玻璃棒攪拌時(shí)，動(dòng)作要輕緩，以免加劇___________，導(dǎo)致DNA分子不能形成__________。19、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：

取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用______處理分散成______→制成______→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行______培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)_____培養(yǎng)。20、科學(xué)家采用定點(diǎn)誘變的方法構(gòu)建T4溶菌酶的新蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其中一種新蛋白質(zhì)的第9和第164位氨基酸殘基被轉(zhuǎn)換為半胱氨酸殘基，并形成一個(gè)二硫鍵。這種新蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性會(huì)有什么變化？這項(xiàng)技術(shù)的要點(diǎn)是什么？_________21、在日常生活中，我們還遇到哪些有關(guān)生物技術(shù)安全與倫理問題？我們能基于所學(xué)生物學(xué)知識(shí)參與這些問題的討論嗎？嘗試舉一個(gè)實(shí)例加以說明______。評(píng)卷人得分四、判斷題(共1題，共5分)22、“設(shè)計(jì)試管嬰兒”與“試管嬰兒”相比在植入前需要對(duì)胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷。()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共30分)23、鑒江是粵西沿海最大的河流，沿河兩岸的居民生活用水基本來源于鑒江。但若生活污水未經(jīng)處理排放到鑒江中，會(huì)導(dǎo)致大腸桿菌超標(biāo)，進(jìn)而引發(fā)細(xì)菌性痢疾等腸道疾病。研究發(fā)現(xiàn)，大腸桿菌能分解乳糖，產(chǎn)生酸性物質(zhì)和氣體。某研究小組擬對(duì)鑒江中的大腸桿菌進(jìn)行鑒別和統(tǒng)計(jì)。用到的兩種培養(yǎng)基配方和濾膜法步驟如下：。培養(yǎng)基名稱配方（L-1）pH乳糖蛋白胨培養(yǎng)基蛋白胨10g，牛肉膏5g，乳糖5g，NaCl5g，溴甲酚紫0．016g（溴甲酚紫在酸性時(shí)呈黃色，堿性時(shí)呈紫色）7．4牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基蛋白胨10g，牛肉膏5g，NaCl5g7．4

濾膜法具體步驟：

（一）用無菌的三角瓶接取1000毫升水樣；蓋好瓶塞。

（二）將漏斗和抽濾瓶固定好；用鑷子夾住濾膜邊緣，將水樣倒入漏斗中，邊抽濾；邊加水。

（三）用鑷子將濾膜取出；放在無菌平板上進(jìn)行培養(yǎng)；觀察并記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

回答下列問題：

(1)在乳糖蛋白胨培養(yǎng)基中，提供氮源的物質(zhì)有______________________。

(2)高壓滅菌條件常為121℃，15min，但乳糖蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí)，因?yàn)槿樘窃?21℃會(huì)被破壞，而選用了115℃，為了達(dá)到相同滅菌效果可以______________________；

(3)研究小組取兩支含乳糖蛋白胨培養(yǎng)基的試管A和B，A管中加入1ml待測(cè)水樣，B管不做處理，然后都放人培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。若A試管產(chǎn)生氣體，同時(shí)出現(xiàn)______________________（填顏色）時(shí)；則提示水樣被大腸桿菌污染。

(4)制作濾膜法中所用的無菌平板時(shí)，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上還應(yīng)加入______________________，便于統(tǒng)計(jì)菌落。按上述濾膜法步驟制作的3個(gè)樣品平板上的菌落初步從______________________（答出兩點(diǎn)）等方面進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定。然后統(tǒng)計(jì)三個(gè)平板上所有的菌落數(shù)分別為49、51、47，能否據(jù)此得出每升水樣中大腸桿菌數(shù)約為49的結(jié)論?______________________。理由是_________________________________________。24、柑橘潰瘍病是由地毯草黃單胞桿菌引起的；發(fā)生在柑橘的一種病害；植株受害后會(huì)發(fā)生落葉、落果，嚴(yán)重時(shí)葉片落光，整株枯死。利用基因工程將來自水稻的Xa27基因?qū)敫涕倏色@得抗柑橘潰瘍病的植株，利用植物組織離體培養(yǎng)技術(shù)則可培育無病毒植株。回答下列問題：

(1)為了獲得脫毒苗，通?？梢赃x取植株______附近的組織進(jìn)行離體培養(yǎng)，選取該部位組織的原因是______。

(2)如圖1表示科研人員利用柑橘幼苗獲得抗病轉(zhuǎn)基因植株的過程：

①基因表達(dá)載體必需的結(jié)構(gòu)除復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子、目的基因外，還有______。

②共培養(yǎng)時(shí)，Ti質(zhì)粒的作用是______。

③共培養(yǎng)后，要利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，目的是______。

④再分化過程中，誘導(dǎo)愈傷組織生根、生芽的先后順序?yàn)開_____。

⑤從個(gè)體生物學(xué)水平鑒定柑橘再生植株時(shí)可采用______（填具體操作）的方法。經(jīng)鑒定有幾棵植株沒有抗病的能力，分別提取這幾棵植株的DNA，依據(jù)______的特異性堿基序列設(shè)計(jì)引物，擴(kuò)增后利用______進(jìn)行檢測(cè)；結(jié)果如圖2。

據(jù)圖2分析，植株A、E、F不具有抗病能力的原因可能是______，植株B、C不具有抗病能力的原因可能是______。25、T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通過污染飼料引起畜禽中毒反應(yīng)。CYP3A是豬體內(nèi)降解T-2毒素的關(guān)鍵酶，T-2毒素可誘導(dǎo)CYP3A基因表達(dá)水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（選填“初級(jí)”或“次級(jí)”）代謝產(chǎn)物，主要以_____方式進(jìn)入豬細(xì)胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因啟動(dòng)子上游的兩個(gè)調(diào)控序列，為研究T-2毒素誘導(dǎo)CYP3A基因表達(dá)的機(jī)理，研究者首先將不同調(diào)控序列分別和CYP3A基因啟動(dòng)子及熒光素酶基因（LUC基因）連接構(gòu)建表達(dá)載體，再分別導(dǎo)入豬肝細(xì)胞，然后向各組豬肝細(xì)胞培養(yǎng)液中加入_____，適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)；24h后檢測(cè)LUC酶活性，計(jì)算啟動(dòng)子活性相對(duì)值，結(jié)果如圖1所示。據(jù)圖可知，B1和B2調(diào)控序列是CYP3A基因響應(yīng)T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1兩種蛋白均參與T-2毒素對(duì)CYP3A的誘導(dǎo)；B2是Spl的結(jié)合位點(diǎn)。研究者推測(cè)，NF-Y通過與B1結(jié)合，與Sp1共同調(diào)控CYP3A基因的表達(dá)。

①為證明Bl是NF-Y的結(jié)合位點(diǎn)，研究者依據(jù)B1序列制備了野生型和突變型探針，分別與豬肝細(xì)胞核蛋白提取物混合，實(shí)驗(yàn)分組及結(jié)果如圖2．據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測(cè)，第4組出現(xiàn)阻滯帶的原因是_____，進(jìn)而推測(cè)第5組結(jié)果產(chǎn)生的原因是_____。

②研究者設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明了NF-Y和Spl通過互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路是：增大或縮小B1和B2兩者之間的距離，檢測(cè)CYP3A基因的啟動(dòng)子活性。據(jù)此分析，實(shí)驗(yàn)假設(shè)是_____。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題，共36分)26、水果可以用來加工制作果汁；果酒和果醋等?；卮鹣铝袉栴}：

（1）制作果汁時(shí)；可以用果膠酶；纖維素酶等提高水果的出汁率和澄清度。果膠酶是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、___________、_________。纖維素酶可以分解植物__________（填“細(xì)胞膜”或“細(xì)胞壁”）中的纖維素。

（2）用果膠酶處理果泥時(shí)；為了提高出汁率，需要控制反應(yīng)的溫度，原因是__________。

（3）現(xiàn)有甲乙丙三種不同來源的果膠酶；某同學(xué)擬在果泥用量；溫度、pH等所有條件都相同的前提下比較這三種酶的活性。通常，酶活性的高低可用_____來表示。

（4）獲得的果汁（如蘋果汁）可以用來制作果酒或者果醋，制作果酒需要______菌，其代謝類型是________。果酒制作過程中也需要O2，O2的作用是___________。制作果醋需要醋酸菌，醋酸菌屬于________（填“好氧”或“厭氧”）的細(xì)菌，其生長(zhǎng)所需最適溫度和增殖方式分別是____和_____。27、某同學(xué)要分離土壤中能分解尿素的細(xì)菌；并統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中活菌數(shù)目，培養(yǎng)基配方如下。將各種物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL，再經(jīng)高溫滅菌，制成固體培養(yǎng)基備用。

。KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O蛋白胨葡萄糖尿素瓊脂1．4g2．1g0．2g1．0g10．0g1．0g15．0g

（1）根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該同學(xué)能否分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌？________（填“能”或“不能”），原因是________________________________。

（2）培養(yǎng)基常用________法滅菌，培養(yǎng)皿常用________法滅菌，待培養(yǎng)基冷卻到________（填“20”、“30”、“40”或“50”）℃左右時(shí)，在________附近倒平板，等平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，可以防止________________；造成污染。

（3）要統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中活菌數(shù)目，宜采用________法接種，根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的________就能大約推測(cè)出樣品中活菌數(shù)。

（4）培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是______________________________________。28、維生素C既是人與動(dòng)物必需的營(yíng)養(yǎng)成分；并有抗氧化作用而廣泛應(yīng)用于食品工業(yè)。中國(guó)科技工作者發(fā)明的維生素C“二步發(fā)酵法”生產(chǎn)工藝是世界首創(chuàng)：第一步發(fā)酵用醋酸桿菌為菌種，第二步發(fā)酵用氧化葡萄糖酸桿菌（“小菌”）和假單胞桿菌（“大菌”）混合菌種。下圖為二步發(fā)酵法的生產(chǎn)流程，請(qǐng)回答有關(guān)問題：

(1)為純化和保存菌種，將一步發(fā)酵液抽樣稀釋用_________法接種含有碳酸鈣粉的培養(yǎng)基上，以________（填下列選項(xiàng)代號(hào)）為最佳指標(biāo)；分離保存菌種。

A.菌落直徑大小B.溶鈣圈大小C.溶鈣圈直徑與菌落直徑比值。

(2)對(duì)一步發(fā)酵培養(yǎng)液檢測(cè)發(fā)現(xiàn)幾乎沒有雜菌存在，請(qǐng)推測(cè)可能的原因是_________。

(3)二步發(fā)酵過程中大小菌的菌種數(shù)比例會(huì)影響產(chǎn)酸率，種液接入發(fā)酵罐前衢對(duì)種液中的大小菌計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)所用的培養(yǎng)基除含有與發(fā)酵液相同的成分外，還需添加__________，根據(jù)菌落的____________對(duì)培養(yǎng)波中的大小菌分別計(jì)數(shù)?，F(xiàn)某檢測(cè)員將種液稀釋接種了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)假單孢桿菌的菌落數(shù)分別是30、100和200，取平均值110。該結(jié)果可信度低，原因是_____________。

(4)若要嘗試固定化混合菌進(jìn)行二步發(fā)酵來生產(chǎn)古龍酸，你認(rèn)為固定化混合菌操作時(shí)要注意哪些方面？_______________至少提出兩點(diǎn)）。29、多不飽和脂肪酸（PUFAs）是人體必需脂肪酸；豬肉是我國(guó)最主要的肉類消費(fèi)品，提高其PUFAs含量對(duì)居民健康具有重要意義。為解決豬肉中PUFAs含量不足的問題，研究者從線蟲中獲得控制PUFAs合成的必需酶基因fat1，培育轉(zhuǎn)fat1基因豬，操作過程如圖1。

(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增fat1基因時(shí)，應(yīng)在兩種引物的一端分別加上限制酶_____和_____識(shí)別與切割的序列。為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，構(gòu)建表達(dá)載體一般選用兩種限制酶，選擇的原則是_____。

a；目的基因編碼蛋白質(zhì)的序列中有兩種限制酶切割位點(diǎn)。

b；表達(dá)載體內(nèi)；每種限制酶只有一個(gè)切割位點(diǎn)。

c；酶切后；目的基因兩端的黏性末端序列相同。

d；酶切后；載體形成的兩個(gè)黏性末端序列不同。

(2)圖1中的連接產(chǎn)物需先導(dǎo)入大腸菌中的原因是_____；所構(gòu)建的重組基因表達(dá)載體中未標(biāo)注出的必需元件還有_____。

(3)將重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)染豬成纖維細(xì)胞，另設(shè)一組空白對(duì)照。48小時(shí)后于熒光顯微鏡下觀察到_____；說明轉(zhuǎn)染成功。然后以轉(zhuǎn)基因細(xì)胞為核供體構(gòu)建克隆胚胎，最終獲得轉(zhuǎn)fat1基因豬。

(4)研究者提取轉(zhuǎn)基因豬的基因組DNA，利用限制酶DraⅢ將其完全酶切并電泳分離。然后用探針通過_____的方法；檢測(cè)fat1基因是否成功整合在豬基因組DNA中，酶切方式及檢測(cè)結(jié)果如圖2。

①轉(zhuǎn)基因豬1、2、3中分別被轉(zhuǎn)入了_____個(gè)fat1基因。

②請(qǐng)解釋圖2檢測(cè)結(jié)果中4條雜交帶位置不同的原因：_____。

③該實(shí)驗(yàn)_____（填“能”或“不能”）說明成功培育轉(zhuǎn)基因豬，理由是_____。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、B【分析】【分析】

1；試管嬰兒技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)是通過體外受精獲得許多胚胎；然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

【詳解】

A；設(shè)計(jì)試管嬰兒運(yùn)用了體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植和遺傳學(xué)診斷等技術(shù)；A錯(cuò)誤；

B；移植前需對(duì)胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷；從中選擇符合要求的胚胎，B正確；

C；姐姐進(jìn)行造血干細(xì)胞移植沒有改變其基因；故姐姐健康后所生的孩子仍含地中海貧血基因，C錯(cuò)誤；

D；設(shè)計(jì)試管嬰兒會(huì)帶來倫理道德問題；我國(guó)未放開設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)的研究與應(yīng)用，D錯(cuò)誤。

故選B。2、D【分析】【分析】

下丘腦可以分泌促性腺激素釋放激素作用于垂體；促進(jìn)垂體釋放促性腺激素，該激素能夠促進(jìn)性腺分泌性激素，同時(shí)性激素能夠促進(jìn)生殖器官的發(fā)育和生殖細(xì)胞的形成。

【詳解】

促進(jìn)雌性動(dòng)物大量排卵；首先要選擇性成熟的雌性動(dòng)物，注射促性腺激素，同時(shí)注射的量要適宜，太多了會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)生的性激素過多，通過反饋調(diào)節(jié)，抑制自身下丘腦和垂體的活動(dòng)，導(dǎo)致自身的性腺萎縮，故給性成熟的雌性動(dòng)物注射一定的促性腺激素，可使其超數(shù)排卵，即D正確。

故選D。

【點(diǎn)睛】3、D【分析】【分析】

1.將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體．用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。

2.植物組織培養(yǎng)的過程：離體的植物組織；器官或細(xì)胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育植株（新植體）。

3.植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞；進(jìn)而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。

4.基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲?。虎诨虮磉_(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與鑒定。

【詳解】

①基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的第二步；也是基因工程的核心步驟，①正確；

②蛋白質(zhì)工程是通過直接改造基因的結(jié)構(gòu)從而實(shí)現(xiàn)了對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)的改造；②錯(cuò)誤；

③克隆羊的培育涉及細(xì)胞核移植；早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)；屬于無性繁殖，③正確；

④PCR技術(shù)需要利用高溫打開DNA雙鏈；④錯(cuò)誤；

⑤利用體外受精；胚胎移植技術(shù)可以培育試管嬰兒；⑤錯(cuò)誤；

⑥哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育的歷程是：受精卵→桑椹胚→囊胚→原腸胚→幼體；牛也不例外，⑥正確；

⑦制備單克隆抗體的過程利用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和細(xì)胞融合技術(shù)；⑦正確；

⑧利用植物莖尖培養(yǎng)脫毒苗時(shí)；誘導(dǎo)芽形成的過程需要光照，其他過程中未必需要光，⑧錯(cuò)誤。

共四項(xiàng)錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】4、B【分析】【分析】

植物的體細(xì)胞雜交是將不同種的植物體細(xì)胞通過細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞；進(jìn)而利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。植物體細(xì)胞雜交依據(jù)的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性。

【詳解】

A；植物細(xì)胞工程應(yīng)用之一是利用胚狀體包囊人工胚乳和人工種皮制成人工種子；實(shí)現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)，從而降低成本，A正確；

B；莖尖等分裂旺盛部位病毒極少或無病毒感染；所以利用莖尖分生組織培養(yǎng)出無病毒且保持優(yōu)良性狀的幼苗，脫毒苗不等于抗毒苗，通過基因工程將抗病毒基因轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞從而培育出抗病毒的轉(zhuǎn)基因植物，B錯(cuò)誤；

C；通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)兩個(gè)植物物種間的體細(xì)胞雜交；得到同時(shí)具有兩種遺傳物質(zhì)的植物，可以實(shí)現(xiàn)種間的雜交，克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，C正確；

D；愈傷組織具有分裂旺盛的優(yōu)點(diǎn)；適于誘變育種的取材，能提高突變頻率，D正確。

故選B。5、C【分析】【分析】

1；用谷物釀制食醋經(jīng)歷的三個(gè)主要發(fā)酵過程為：糖化→酒化→醋化。分別是淀粉在微生物的作用下水解成葡萄糖；葡萄糖在微生物的作用下分解成乙醇和二氧化碳（在無氧的條件下），乙醇被微生物在有氧的環(huán)境下氧化成乙酸。

2；在制作泡菜時(shí)所配制的泡菜鹽水要煮沸；以殺滅鹽水中的微生物，防止雜菌污染。泡菜制作過程中，溫度過高、食鹽用量過低、腌制時(shí)間過短、容易造成細(xì)菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。

3；采用較低溫度（一般在60～82℃）；在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)，對(duì)食品進(jìn)行加熱處理，達(dá)到殺死微生物營(yíng)養(yǎng)體的目的，是一種既能達(dá)到消毒目的又不損害食品品質(zhì)的方法。由法國(guó)微生物學(xué)家巴斯德發(fā)明而得名。巴氏殺菌熱處理程度比較低，一般在低于水沸點(diǎn)溫度下進(jìn)行加熱，加熱的介質(zhì)為熱水?！侗鄙骄平?jīng)》中記載：“每壇加蠟三錢，竹葉五片，隔水煮開，乘熱灌封壇口?！边@種用加熱殺菌保存酒液的原理和方法，與釀酒中普遍使用的巴氏殺菌法基本相同。

4；腐乳發(fā)酵過程中；豆腐就是毛霉的固體培養(yǎng)基；現(xiàn)代腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格無菌條件下將優(yōu)良的毛霉菌種接種在豆腐上；味咸是因?yàn)榧恿他}，加鹽的目的除了調(diào)味外，還有抑制微生物的生長(zhǎng)，避免腐敗變質(zhì)以及具有析出豆腐中的水分、使豆腐變硬的作用，酒的含量一般控制在12%左右，目的是抑制微生物生長(zhǎng)，同時(shí)使腐乳具有獨(dú)特的香味。

【詳解】

A；根據(jù)以上分析可知；①介紹的是泡菜制作技術(shù)，配制的鹽水要煮沸冷卻后使用，以殺滅鹽水中的微生物，防止雜菌污染，同時(shí)鹽水的鹽度不宜過大，避免使發(fā)酵過程中的乳酸菌大量失水而死亡，A正確；

B；蠟封壇口可以創(chuàng)造無氧環(huán)境；有助于陳酒的儲(chǔ)藏；另外隔水煮開即加熱可以殺菌，B正確；

C；酵母菌發(fā)酵的適宜溫度為18~25℃；而醋酸菌發(fā)酵的適宜溫度為30~35℃，所以③中從酒化到醋化的過程需要移至溫度較高的環(huán)境中進(jìn)行，同時(shí)需要通氧，C錯(cuò)誤；

D；從微生物培養(yǎng)的角度看；豆腐是固體培養(yǎng)基，腐乳制作時(shí)主要利用的是空氣中的毛霉，接種時(shí)不需要對(duì)其進(jìn)行嚴(yán)格滅菌，D正確。

故選C。6、C【分析】【分析】

1；植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織；然后再分化生成根、芽，最終形成植物體．植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。

2；培育無病毒植株苗；應(yīng)選擇不含病毒部分培養(yǎng)，而植物體新生部位不含病毒，如根尖和莖尖。

【詳解】

進(jìn)行植物微型繁殖時(shí)常采用莖尖或根尖作為外植體；原因是莖尖或根尖病毒極少，因此切取一定大小的莖尖或根尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，再生的植株就可能不帶病毒，C正確；

故選C。7、A【分析】【分析】

培養(yǎng)基是人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求；配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。

【詳解】

A；在培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)；需要在培養(yǎng)基中添加維生素即生長(zhǎng)因子，A正確；

B；培養(yǎng)基中一般都含碳源、氮源、水和無機(jī)鹽；但還需滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求，B錯(cuò)誤；

C；微生物在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)；稀釋度足夠高時(shí)，可形成肉眼可見的單個(gè)菌落，肉眼不能看到單個(gè)細(xì)菌，C錯(cuò)誤；

D；液體培養(yǎng)基沒有加入凝固劑；固體培養(yǎng)基中含有凝固劑，加入少量水也不會(huì)制成液體培養(yǎng)基，D錯(cuò)誤。

故選A。二、多選題(共8題，共16分)8、A:B:D【分析】【分析】

土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)中；需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，計(jì)數(shù)的關(guān)鍵是經(jīng)梯度稀釋后的倍數(shù)要合適，計(jì)數(shù)時(shí)通常選擇菌落數(shù)在30-300之間的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。

【詳解】

A；倒置培養(yǎng)的原因是可以防止培養(yǎng)皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)基中造成污染；經(jīng)高壓蒸汽滅菌的培養(yǎng)基所倒平板和接種后培養(yǎng)時(shí)的平板均要倒置，以防止雜菌污染，A正確；

B；為使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更準(zhǔn)確；同一稀釋度下可以多涂布幾個(gè)平板，至少要涂布三個(gè)平板并且要培養(yǎng)到菌落數(shù)穩(wěn)定時(shí)計(jì)數(shù)，求平均值，B正確；

C；細(xì)菌在分裂生殖中也會(huì)產(chǎn)生基因突變；雖然一個(gè)菌落是由一個(gè)活菌繁殖而來，但是個(gè)菌落中所有細(xì)胞的遺傳信息不一定相同，C錯(cuò)誤；

D；證明選擇培養(yǎng)基沒有被雜菌污染的方法是對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行空白培養(yǎng)；即選取未接種的培養(yǎng)皿與接種樣品的培養(yǎng)皿同時(shí)培養(yǎng)，在相同培養(yǎng)條件下，未接種的培養(yǎng)基表面無菌落生長(zhǎng)，說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染，D正確。

故選ABD。9、A:B:C【分析】【分析】

1；基因表達(dá)載體是目的基因和載體重組后形成的。

2；體外受精是指獲能的精子和成熟的卵細(xì)胞結(jié)合形成受精卵的過程。

3；胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性；能夠分裂和分化。

4；動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核；移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。核移植得到的動(dòng)物稱克隆動(dòng)物。

【詳解】

A；若該模型表示體外受精技術(shù)；則C（受精卵）不能直接移植到代孕母體，需要將C移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力。當(dāng)胚胎發(fā)育到適宜的階段時(shí)，才可以將其取出向受體移植，A正確；

B；若該模型表示核移植技術(shù)；A和B表示供體細(xì)胞核和去核的卵細(xì)胞，則C→D過程表示胚胎體外培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)，B正確；

C；若A、B表示培養(yǎng)液和胚胎干細(xì)胞；則C→D的傳代培養(yǎng)過程中有可能出現(xiàn)分化現(xiàn)象，C正確；

D；若該模型表示農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法操作流程；則C可表示重組Ti質(zhì)粒，D是農(nóng)桿菌，D錯(cuò)誤。

故選ABC。10、A:C:D【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧條件下，進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖；（2）在無氧條件下，產(chǎn)生酒精和二氧化碳。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

3；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【詳解】

A；果酒制作時(shí)；除了產(chǎn)生酒精，還會(huì)產(chǎn)生大量二氧化碳，因此發(fā)酵瓶中容易產(chǎn)生較多泡沫，A正確；

B；用果酒制作果醋過程中；液面出現(xiàn)一層白色菌膜，而不是褐色菌膜，B錯(cuò)誤；

C；制作腐乳過程中；豆腐表面發(fā)黏且長(zhǎng)有白色菌絲，C正確；

D；用固定化酵母進(jìn)行酒精發(fā)酵；酒精濃度越來越高，因此凝膠珠逐漸浮上液面，D正確。

故選ACD。

【點(diǎn)睛】11、C:D【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；檢測(cè)到細(xì)菌B合成人的生長(zhǎng)激素才能說明獲得成功；A錯(cuò)誤；

B；根據(jù)題意；細(xì)菌B不含有質(zhì)粒A及其上的基因，即沒有抗氨芐青霉素基因；質(zhì)粒含抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因，基因發(fā)生重組時(shí)抗四環(huán)素基因被破壞，抗氨芐青霉素基因被保留，故在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)的是導(dǎo)入了普通質(zhì)?；蛘咧亟M質(zhì)粒的細(xì)菌，B錯(cuò)誤；

C；將人的生長(zhǎng)激素基因與質(zhì)粒A結(jié)合的過程連接兩個(gè)切口；該過程共形成4個(gè)磷酸二酯鍵，C正確；

D、將目的基因?qū)爰?xì)菌時(shí)，需要用Ca2+處理細(xì)菌；使其處于易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，D正確。

故選CD。

【點(diǎn)睛】12、A:B:D【分析】【分析】

免疫PCR是一種抗原檢測(cè)系統(tǒng)；將一段已知序列的DNA片段標(biāo)記到抗體2上，通過抗原抗體的特異性識(shí)別并結(jié)合，抗體2會(huì)和固定抗體1；抗生素形成復(fù)合物“固定抗體1—抗生素—抗體2”，再用PCR方法將這段DNA進(jìn)行擴(kuò)增，通過檢測(cè)PCR產(chǎn)物的量，即可推知固定抗體1上吸附的抗生素的量。

【詳解】

A；免疫PCR中所用的DNA不選用受檢樣品（牛乳）中可能存在的DNA。待檢測(cè)的牛乳中可能含有牛乳腺細(xì)胞的DNA（其上含有牛乳基因的DNA片段）；若圖示中的DNA用牛乳基因中的DNA片段，經(jīng)過PCR擴(kuò)增后的產(chǎn)物中，不僅有抗體2上的DNA擴(kuò)增產(chǎn)物，還可能有牛乳中本身含有的牛乳基因片段的擴(kuò)增產(chǎn)物，使檢測(cè)結(jié)果偏大，A正確；

B；如果第三次沖洗不充分；可能使殘留的、呈游離狀態(tài)的抗體2上的DNA也作為PCR的模板參與擴(kuò)增，會(huì)出現(xiàn)假陽性現(xiàn)象，B正確；

CD；微量抗原抗體反應(yīng)；是通過PCR技術(shù)擴(kuò)增抗體2上連接的DNA，最后通過檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物—DNA的量來確定抗生素的量的方法。因此，PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的量與牛乳中抗生素的量呈正相關(guān)，抗原、抗體的數(shù)量可通過PCR技術(shù)間接擴(kuò)增放大，C錯(cuò)誤，D正確。

故選ABD。13、A:C:D【分析】【分析】

接種微生物的方法主要是稀釋涂布平板法和平板劃線法；

稀釋涂布線法：逐步稀釋菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋；然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)；

平板劃線法由接種環(huán)沾取少許待分離的材料；在無菌平板表面進(jìn)行平行劃線；扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。

【詳解】

A；根據(jù)I號(hào)培養(yǎng)基上菌落分布均勻；可知①②過程為稀釋涂布平板法，A正確；

B；甲乙試管中的液體是用于樣品稀釋；應(yīng)為無菌水，B錯(cuò)誤；

C；由Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基上上的劃線區(qū)域可知從I號(hào)培養(yǎng)基上挑選的菌落進(jìn)行接種的方法是平板劃線法；C正確；

D；淀粉與碘液反應(yīng)呈藍(lán)色；但如果淀粉分解菌中的淀粉酶將淀粉水解后就不能呈藍(lán)色，因此周圍不顯藍(lán)色的菌落含有所需菌種，D正確。

故選ACD。14、A:B:C【分析】【分析】

基因編輯技術(shù)屬于基因工程；而對(duì)于人體胚胎的操作又涉及胚胎工程，所有對(duì)于人體的操作都應(yīng)經(jīng)過安全性審查，要符合倫理道德；但用于疾病預(yù)防領(lǐng)域的研究又具有進(jìn)步意義。

【詳解】

A；基因編輯制造人類的行為不符合倫理道德；A錯(cuò)誤；

B；基因編輯技術(shù)；只是對(duì)個(gè)別人個(gè)別基因進(jìn)行編輯，不一定改變?nèi)祟愡M(jìn)化的速度和方向，B錯(cuò)誤；

C；基因編輯技術(shù)改變了人類的遺傳物質(zhì)；但并沒有出現(xiàn)生殖隔離，即沒有形成新物種，C錯(cuò)誤；

D；基因編輯技術(shù)可用于疾病預(yù)防領(lǐng)域研究；具有進(jìn)步意義，但不能用于編輯嬰兒，D正確。

故選ABC。15、A:B:C【分析】【分析】

本題知識(shí)點(diǎn)為剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理、培養(yǎng)基中各物質(zhì)的作用。剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)我們?cè)诤欣w維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時(shí)，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。纖維素為纖維素分解菌提供碳源，尿素為纖維素分解菌提供氮源，KH2PO4和K2HPO4具有緩沖作用；在提供無機(jī)鹽的同時(shí)還能維持培養(yǎng)基的pH。獲取單個(gè)菌落的方法可通過稀釋涂布平板或平板劃線等技術(shù)完成。

【詳解】

A；在此培養(yǎng)基中；纖維素為纖維素分解菌提供碳源，尿素為纖維素分解菌提供氮源，A正確；

B、KH2PO4和K2HPO4具有緩沖作用；在提供無機(jī)鹽的同時(shí)還能維持培養(yǎng)基的pH，B正確；

C；從平板上纖維素分解菌的菌落分布可以看出（菌落較均勻）；接種方法為稀釋涂布平板法，C正確；

D；菌落周圍有透明圈不一定是細(xì)胞分解了纖維素；還有可能是分解了剛果紅染料，D錯(cuò)誤；

故選ABC。三、填空題(共6題，共12分)16、略

【解析】平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠。將平板倒置，既可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染，又可避免培養(yǎng)基中的水分過快揮發(fā)17、略

【解析】①.液體狀態(tài)②.固體培養(yǎng)基③.瓊脂④.固體⑤.多糖18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】DNA斷裂絮狀沉淀19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】胰蛋白酶單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞懸液原代傳代20、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)形成二硫鍵，使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會(huì)提高。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，其步驟為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。【解析】會(huì)提高T4溶菌酶的耐熱性。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，該技術(shù)的要點(diǎn)是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。21、略

【分析】【詳解】

在日常生活中；我們遇到的有關(guān)生物技術(shù)安全與倫理問題有：生殖性克隆人倫理問題；試管嬰兒與設(shè)計(jì)試管嬰兒倫理問題、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性與倫理問題和生物武器的安全性等。

例如轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性：轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性的爭(zhēng)議；主要集中在兩個(gè)方面，一是對(duì)人是否安全，二是對(duì)環(huán)境的影響。

對(duì)人的安全方面；支持轉(zhuǎn)基因技術(shù)的人認(rèn)為投放市場(chǎng)的轉(zhuǎn)基因作物都是經(jīng)過充分實(shí)驗(yàn)的，被改變的基因僅限于增加作物的抗??；抗災(zāi)害能力，并且在北美地區(qū)轉(zhuǎn)基因食品已經(jīng)使用的很多年，可以說現(xiàn)在美國(guó)加拿大20歲左右的年輕人從小就是吃轉(zhuǎn)基因食品長(zhǎng)大的；反對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的人認(rèn)為轉(zhuǎn)基因食品有害，他們的證據(jù)主要是一位科學(xué)家的實(shí)驗(yàn)證明，用轉(zhuǎn)基因食品喂養(yǎng)的小白鼠癌癥發(fā)病率明顯升高，但問題是這個(gè)實(shí)驗(yàn)只成功過一次，后來別的科學(xué)家在相同的條件下都沒能再現(xiàn)這個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

在環(huán)境方面對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的爭(zhēng)議是最大的；也是歐洲人反對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的重要依據(jù)，反對(duì)人持有的觀點(diǎn)是，通過改良基因創(chuàng)造出抵抗病蟲害和其他災(zāi)害的植物，這種技術(shù)如果失去控制可能會(huì)把農(nóng)作物改造成適應(yīng)性極強(qiáng)的超級(jí)植物，自然平衡使任何生物都不可能占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)地位，但轉(zhuǎn)基因技術(shù)產(chǎn)生的超級(jí)植物可能會(huì)打破自然平衡而泛濫成災(zāi)。

倫理問題：由于轉(zhuǎn)基因技術(shù)創(chuàng)新打破了物種界限,使不同物種間的基因可以進(jìn)行前所未有的新組合,其可能造成的危害難以預(yù)見,這就使轉(zhuǎn)基因技術(shù)創(chuàng)新呈現(xiàn)前所未有的復(fù)雜性,并不可避免地會(huì)引發(fā)很多全新的社會(huì)倫理問題,引出種種有關(guān)生物科學(xué)家的道德責(zé)任和學(xué)術(shù)自由的哲學(xué)爭(zhēng)論。在轉(zhuǎn)基因植物技術(shù)創(chuàng)新中,功利主義的預(yù)設(shè)和學(xué)術(shù)自由的主張必須以人類的價(jià)值、尊嚴(yán)和社會(huì)公正為前提條件。相關(guān)領(lǐng)域的科學(xué)家必須擔(dān)當(dāng)起必要的道德責(zé)任,把握好倫理橫桿,以促使轉(zhuǎn)基因植物技術(shù)創(chuàng)新沿著科學(xué)的軌道健康發(fā)展?！窘馕觥吭谌粘Ｉ钪校晃覀冇龅降挠嘘P(guān)生物技術(shù)安全與倫理問題有：生殖性克隆人倫理問題；試管嬰兒與設(shè)計(jì)試管嬰兒倫理問題、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性與倫理問題和生物武器的安全性等。

例如轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性：轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性的爭(zhēng)議；主要集中在兩個(gè)方面，一是對(duì)人是否安全，二是對(duì)環(huán)境的影響。

對(duì)人的安全方面；支持轉(zhuǎn)基因技術(shù)的人認(rèn)為投放市場(chǎng)的轉(zhuǎn)基因作物都是經(jīng)過充分實(shí)驗(yàn)的，被改變的基因僅限于增加作物的抗病；抗災(zāi)害能力，并且在北美地區(qū)轉(zhuǎn)基因食品已經(jīng)使用的很多年，可以說現(xiàn)在美國(guó)加拿大20歲左右的年輕人從小就是吃轉(zhuǎn)基因食品長(zhǎng)大的；反對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的人認(rèn)為轉(zhuǎn)基因食品有害，他們的證據(jù)主要是一位科學(xué)家的實(shí)驗(yàn)證明，用轉(zhuǎn)基因食品喂養(yǎng)的小白鼠癌癥發(fā)病率明顯升高，但問題是這個(gè)實(shí)驗(yàn)只成功過一次，后來別的科學(xué)家在相同的條件下都沒能再現(xiàn)這個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

在環(huán)境方面對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的爭(zhēng)議是最大的；也是歐洲人反對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的重要依據(jù)，反對(duì)人持有的觀點(diǎn)是，通過改良基因創(chuàng)造出抵抗病蟲害和其他災(zāi)害的植物，這種技術(shù)如果失去控制可能會(huì)把農(nóng)作物改造成適應(yīng)性極強(qiáng)的超級(jí)植物，自然平衡使任何生物都不可能占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)地位，但轉(zhuǎn)基因技術(shù)產(chǎn)生的超級(jí)植物可能會(huì)打破自然平衡而泛濫成災(zāi)。

倫理問題：由于轉(zhuǎn)基因技術(shù)創(chuàng)新打破了物種界限,使不同物種間的基因可以進(jìn)行前所未有的新組合,其可能造成的危害難以預(yù)見,這就使轉(zhuǎn)基因技術(shù)創(chuàng)新呈現(xiàn)前所未有的復(fù)雜性,并不可避免地會(huì)引發(fā)很多全新的社會(huì)倫理問題,引出種種有關(guān)生物科學(xué)家的道德責(zé)任和學(xué)術(shù)自由的哲學(xué)爭(zhēng)論。在轉(zhuǎn)基因植物技術(shù)創(chuàng)新中,功利主義的預(yù)設(shè)和學(xué)術(shù)自由的主張必須以人類的價(jià)值、尊嚴(yán)和社會(huì)公正為前提條件。相關(guān)領(lǐng)域的科學(xué)家必須擔(dān)當(dāng)起必要的道德責(zé)任,把握好倫理橫桿,以促使轉(zhuǎn)基因植物技術(shù)創(chuàng)新沿著科學(xué)的軌道健康發(fā)展。四、判斷題(共1題，共5分)22、A【分析】【分析】

“設(shè)計(jì)試管嬰兒”在植入前需要對(duì)胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷；而“試管嬰兒”是解決不孕不育等問題，不需要進(jìn)行遺傳學(xué)診斷。

【詳解】

“設(shè)計(jì)試管嬰兒”與“試管嬰兒”相比在植入前需要通過多種技術(shù)手段對(duì)胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷；以便選擇合適的設(shè)計(jì)出來的試管嬰兒。

故正確五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共30分)23、略

【分析】【分析】

培養(yǎng)基是人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求；配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)；根據(jù)物理性質(zhì)分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水；碳源、氮源和無機(jī)鹽，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因?yàn)樗鼈儊碓从趧?dòng)物原料，含有糖、維生素和有機(jī)氮等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。在提供上述幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的要求。(1)

由配方表分析可知；在乳糖蛋白胨培養(yǎng)基中，提供氮源的物質(zhì)有蛋白胨和牛肉膏。

(2)

高壓滅菌條件常為121℃；15min；但乳糖蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí)，因?yàn)槿樘窃?21℃會(huì)被破壞，而選用了115℃，為了達(dá)到相同滅菌效果可以適當(dāng)延長(zhǎng)滅菌時(shí)間。

(3)

研究小組取兩支含乳糖蛋白胨培養(yǎng)基的試管A和B；A管中加入1mL待測(cè)水樣，B管不做處理，然后都放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。若A試管產(chǎn)生氣體，還不可以提示水樣可能被大腸桿菌污染，這時(shí)還需要再觀察試管中的顏色變化，由于大腸桿菌能產(chǎn)生酸性物質(zhì)和氣體，同時(shí)培養(yǎng)基中的溴甲酚紫在酸性時(shí)呈黃色，故若A試管出現(xiàn)黃色時(shí)，則提示水樣被大腸桿菌污染。

(4)

制作濾膜法中所用的無菌平板時(shí)；在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上還應(yīng)加入瓊脂形成固體培養(yǎng)基，便于統(tǒng)計(jì)菌落。按上述濾膜法步驟制作的3個(gè)樣品平板上的菌落初步從形態(tài)；大小、顏色和透明度等方面進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定。該培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基，在平板上生長(zhǎng)的菌落，只有部分是大腸桿菌形成的菌落，因此大腸桿菌實(shí)際數(shù)值應(yīng)該小于49。

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的種類和作用，掌握菌落計(jì)數(shù)的方法和具體操作等知識(shí)，意在考查學(xué)生識(shí)記所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)的能力，同時(shí)獲取題干信息準(zhǔn)確答題?！窘馕觥?1)牛肉膏；蛋白胨##蛋白胨、牛肉膏。

(2)適當(dāng)延長(zhǎng)滅菌時(shí)間。

(3)黃色。

(4)①.瓊脂②.形態(tài)、大小、顏色和透明度③.否#不能④.培養(yǎng)基表面的菌落，只有部分是大腸桿菌形成的菌落24、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作步驟：①目的基因的獲取和篩選；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與鑒定；

2；植物頂端分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少；甚至無病毒，切取一定大小的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病毒，從而獲得脫毒苗。

【詳解】

（1）為了獲得脫毒苗；通常選取植株莖尖（或頂端分生區(qū)附近的組織）進(jìn)行離體培養(yǎng)，選取該組織的原因是此處病毒極少甚至無病毒。

（2）①基因表達(dá)載體上除有復(fù)制原點(diǎn)；啟動(dòng)子、終止子、目的基因外；還有標(biāo)記基因（便于篩選目的基因）；

②農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA片段可以攜帶目的基因并整合至植物細(xì)胞的染色體DNA上；

③選擇培養(yǎng)的目的是篩選出含有目的基因的柑橘細(xì)胞；

④先誘導(dǎo)生芽有利于生根；故再分化階段，需要先誘導(dǎo)愈傷組織生芽，待長(zhǎng)出芽后，再將其轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基上，進(jìn)一步誘導(dǎo)形成試管苗；

⑤在個(gè)體生物學(xué)水平可用接種地毯草黃單胞桿菌（或噴施地毯草黃單胞桿菌菌液）的方法，觀察植株是否患有柑橘潰瘍病來直接鑒定再生植株；分析再生植株沒有抗病能力的原因，可以提取各植株的DNA，依據(jù)Xa27基因（目的基因）的特異性堿基序列設(shè)計(jì)引物，擴(kuò)增后用（凝膠）電泳分離PCR產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)；植株B、C沒有出現(xiàn)條帶，則可能是因?yàn)闆]有導(dǎo)入目的基因；植株A、E、F出現(xiàn)條帶但不具有抗病能力，則可能是因?yàn)閷?dǎo)入植物細(xì)胞的目的基因不能轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)錄后未翻譯或翻譯出的蛋白質(zhì)沒有活性等?！窘馕觥?1)莖尖（或頂端分生區(qū)）此處病毒極少甚至無病毒。

(2)標(biāo)記基因攜帶目的基因并整合至植物細(xì)胞的染色體DNA上篩選出含有目的基因的植物細(xì)胞先誘導(dǎo)生芽，再誘導(dǎo)生根接種地毯草黃單胞桿菌（或噴施地毯草黃單胞桿菌菌液）Xa27基因（凝膠）電泳導(dǎo)入植物細(xì)胞的目的基因不能表達(dá)（或不能轉(zhuǎn)錄，轉(zhuǎn)錄后不能翻譯，翻譯出的蛋白質(zhì)沒有活性等，合理即可）沒有導(dǎo)入目的基因25、略

【分析】【分析】

圖1可知：T-2毒素是一種常見的菌素；CYP3A是降解T-2毒素的關(guān)鍵酶，T-2毒素可誘導(dǎo)其表達(dá)水平升高，當(dāng)用兩種調(diào)控序列同時(shí)連接啟動(dòng)子，啟動(dòng)子的活性最高。

圖2可知：野生型探針能與NF-Y結(jié)合；突變型探針不能與NF-Y結(jié)合，NF-Y抗體一定能與NF-Y結(jié)合。

【詳解】

（1）初級(jí)代謝產(chǎn)物一般是霉菌生命活動(dòng)所必需的，大多存在于細(xì)胞內(nèi)。次級(jí)代謝產(chǎn)物不是霉菌生命活動(dòng)必需的，并且分泌到體外，故T-2毒素是霉菌的次級(jí)代謝產(chǎn)物。T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子，脂溶性小分子以自由擴(kuò)散的方式進(jìn)入細(xì)胞。

（2）實(shí)驗(yàn)的自變量是有無調(diào)控序列；根據(jù)單一變量原則，對(duì)照組的目的是為了排除無光變量的影響，除了沒有調(diào)控序列，其他處理和實(shí)驗(yàn)組相同，所以對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組豬肝細(xì)胞均導(dǎo)入含CYP3A基因啟動(dòng)子及LUC基因的表達(dá)載體，然后向各組豬肝細(xì)胞培養(yǎng)液中加入加入等量T-2毒素，適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)。從圖中信息可知，缺失兩個(gè)調(diào)控序列和對(duì)照組活性一致，缺失一個(gè)比對(duì)照組活性略強(qiáng)，兩個(gè)都存在活性最高，說明這兩個(gè)調(diào)控序列是CYP3A基因響應(yīng)T-2毒素的核心元件。故缺失兩個(gè)調(diào)控序列或其中任一個(gè)，T-2毒素都不能誘導(dǎo)啟動(dòng)子活性明顯增強(qiáng)。

（3）①實(shí)驗(yàn)的目的是要驗(yàn)證NF-Y能與B1結(jié)合；根據(jù)第2組和第3組結(jié)果，依據(jù)B1序列制備的NF-Y結(jié)合位點(diǎn)野生型探針能與NF-Y結(jié)合，根據(jù)第4組結(jié)果，突變型探針不能與NF-Y結(jié)合。第5組加入了NF-Y抗體，一定能與NF-Y結(jié)合。故可以解釋為：結(jié)合位點(diǎn)突變的探針不能結(jié)合核蛋白中的NF-Y，也不會(huì)競(jìng)爭(zhēng)NF-Y與標(biāo)記探針的結(jié)合，所以第4組與第2組同樣位置出現(xiàn)阻滯帶。第5組，NF-Y的抗體結(jié)合NF-Y，因此第5組中出現(xiàn)標(biāo)記探針；NF-Y和NF-Y抗體的結(jié)合物，結(jié)合物分子量大，阻滯帶的位置更靠后。

②假設(shè)NF-Y和Sp1通過互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，它們之間的距離是發(fā)揮作用的最佳距離，故增大或縮小B1和B2兩者之間的距離都會(huì)降低CYP3A基因的啟動(dòng)子的活性?！窘馕觥?1)次級(jí)自由擴(kuò)散。

(2)等量的T-2毒素缺失兩個(gè)調(diào)控序列或其中任一個(gè)；T-2毒素都不能誘導(dǎo)啟動(dòng)子活性增強(qiáng)。

(3)結(jié)合位點(diǎn)突變的探針不能結(jié)合核蛋白中的NF-Y，也不會(huì)競(jìng)爭(zhēng)NF-Y與標(biāo)記探針的結(jié)合，所以第4組與第2組同樣位置出現(xiàn)阻滯帶。NF-Y的抗體結(jié)合NF-Y，因此第5組中出現(xiàn)標(biāo)記探針、NF-Y和NF-Y抗體的結(jié)合物，結(jié)合物分子量大，阻滯帶的位置更靠后。NF-Y和Sp1通過互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，它們之間的距離是發(fā)揮作用的最佳距離。六、綜合題(共4題，共36分)26、略

【分析】【分析】

1；果膠酶的種類：多聚半乳糖醛酸酶、果膠酯酶、果膠分解酶；果膠酶能分解植物的細(xì)胞壁，瓦解植物細(xì)胞之間的胞間層，能將果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸，從而提高果汁的出汁率和澄清度。2、溫度通過影響酶的活性，從而影響化學(xué)反應(yīng)速率。3、果酒制作的菌種是酵母菌，代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧，果醋制作的菌種是醋酸菌，代謝類型是異養(yǎng)需氧型。

【詳解】

（1）果膠酶是分解果膠的一類酶的總稱；包括多聚半乳糖醛酸酶；果膠酯酶、果膠分解酶，酶具有專一性，纖維素酶能分解植物細(xì)胞壁中的纖維素。

（2）溫度是影響果膠酶活性的因素之一；為了提高出汁率，需要將溫度控制在果膠酶的最適溫度，因?yàn)樵谧钸m宜的溫度下果膠酶的活性最強(qiáng)。

（3）酶活性是指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力；酶活性的高低可以用在一定條件下，酶所催化某一化學(xué)反應(yīng)的速度來表示，在該實(shí)驗(yàn)中可通過比較在一定條件下，單位時(shí)間內(nèi)；單位體積中反應(yīng)物的消耗量或產(chǎn)物的增加量來表示。

（4）制作果酒需要酵母菌，酵母菌是異養(yǎng)兼性厭氧型微生物；果酒制作過程中O2的作用是促進(jìn)酵母菌有氧呼吸大量繁殖；制作果醋需要醋酸菌；醋酸菌屬于好氧細(xì)菌，醋酸菌生長(zhǎng)的最適溫度是30-35℃，繁殖方式是二分裂。

【點(diǎn)睛】

熟知果膠酶的種類及其催化作用的特點(diǎn)是解答本題的關(guān)鍵，識(shí)記果酒和果醋制作的基本原理。【解析】果膠分解酶果膠酯酶細(xì)胞壁在最適宜的溫度下果膠酶的活性最強(qiáng)單位時(shí)間內(nèi)單位體積中反應(yīng)物的消耗量或產(chǎn)物的增加量酵母菌異養(yǎng)兼性厭氧型促進(jìn)有氧呼吸，使酵母菌大量繁殖好氧30-35℃二分裂式27、略

【分析】【分析】

1；配制以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基；在該培養(yǎng)基上能夠生長(zhǎng)的細(xì)菌就是能分解尿素的細(xì)菌，分解尿素的細(xì)菌能合成脲酶將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變紅，可確定該種細(xì)菌能夠分解尿素。

2；為了保證稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的結(jié)果準(zhǔn)確；一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。

（1）

該培養(yǎng)基中含有蛋白胨和尿素；蛋白胨和尿素中都含有氮元素，故尿素不是唯一氮源，該培養(yǎng)基不能選擇出只以尿素為氮源的微生物。

（2）

培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌；培養(yǎng)皿常用干熱滅菌法滅菌。待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右不太燙手時(shí)可以進(jìn)行倒平板，倒平板操作需要在酒精燈火焰附近進(jìn)行。等平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，可以防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染，也避免了培養(yǎng)基中水分過快的揮發(fā)。

（3）

要統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中活菌數(shù)目；宜采用稀釋涂布平板法接種。稀釋倍數(shù)足夠大時(shí)，每個(gè)細(xì)胞則會(huì)長(zhǎng)成單菌落，故根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)目就能大約推測(cè)出樣品中活菌數(shù)。

（4）

檢測(cè)固體培養(yǎng)基是否被污染的方法是：將未接種的培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適宜的時(shí)間；觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生，如果有菌落產(chǎn)生，則說明培養(yǎng)基被污染了。

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物培養(yǎng)中的無菌技術(shù)、微生物的分離和計(jì)數(shù)、培養(yǎng)基的分類和作用等相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)能力，對(duì)相關(guān)知識(shí)點(diǎn)的識(shí)記和理解是解題的關(guān)鍵?！窘馕觥浚?）不能培養(yǎng)基含蛋白胨；尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物（培養(yǎng)基含蛋白胨，蛋白胨中含有氮元素）

（2）高壓蒸汽滅菌干熱滅菌50酒精燈火焰培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基。

（3）（稀釋）涂布平板菌落數(shù)目。

（4）將未接種的培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生28、略

【分析】【分析】

1.微生物接種常用的兩種方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過足夠稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后，可形成單菌落。

2.固定化酶和固定化細(xì)胞技術(shù)是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)；包括包埋法；化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。一般來說，酶更合適采用化學(xué)結(jié)合和物理吸附法固定化，而細(xì)胞多采用包埋法固定化。這是因?yàn)榧?xì)胞體積大，而酶分子??；體積大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合，而體積小的酶容易從包埋材料中漏出。

3.菌落：是指由單個(gè)微生物細(xì)胞或一堆同種細(xì)胞在適宜固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長(zhǎng)繁殖到一定程度；形成以母細(xì)胞為中心的一團(tuán)肉眼可見的；有一定形態(tài)、構(gòu)造等特征的子細(xì)胞集團(tuán)。各種微生物在一定條件下形成的菌落特征，如大小、形狀、邊緣、表面、質(zhì)地、顏色等，具有一定的穩(wěn)定性，是衡量菌種純度、辨認(rèn)和鑒定菌種的重要依據(jù)。

(1)

為純化和保存菌種；將一步發(fā)酵液抽樣稀釋后用稀釋涂布平板法接種在含有碳酸鈣粉的培養(yǎng)基上，由于醋酸菌代謝過程中產(chǎn)生的醋酸會(huì)與培養(yǎng)基中的碳酸鈣發(fā)生反應(yīng)，形成溶鈣圈，我們以溶鈣圈直徑與菌落直徑比值，即C為最佳指標(biāo)