2025年華東師大版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年華東師大版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述中，正確的是（）A.操作過程中必須全程給予光照B.外植體經(jīng)過脫分化和再分化后形成愈傷組織C.可用于細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)D.花藥不能作為植物組織培養(yǎng)的材料2、下列有關(guān)克隆綿羊“多利”的說法正確的是（）

①“多利”的誕生屬無性繁殖②“多利”的誕生采用了核移植技術(shù)。

③“多利”的誕生采用了胚胎移植技術(shù)④“多利”的誕生采用了細胞融合技術(shù)。

⑤動物細胞培養(yǎng)是整個技術(shù)的基礎(chǔ)⑥“多利”的誕生采用了胚胎分割技術(shù)A.①②④⑤⑥B.①②③④⑥C.①②③⑤D.①②③④⑤3、藥物A能誘發(fā)DNA損傷，若該損傷不能被修復(fù)則會導(dǎo)致細胞死亡?，F(xiàn)有酵母菌突變體1（基因1功能缺失）和突變體2（基因2功能缺失），將其培養(yǎng)液進行梯度稀釋，各稀釋倍數(shù)下分別取等量菌液滴加在含不同濃度藥物A的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。一段時間后結(jié)果如圖，下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.各組實驗前未稀釋的酵母菌培養(yǎng)液的濃度可以不同B.實驗結(jié)果中，酵母菌的生長情況可反映其DNA損傷修復(fù)能力C.相比于基因2，基因1功能缺失對酵母菌DNA損傷修復(fù)的影響更大D.由實驗結(jié)果可以得出，除基因1和基因2外還有其他基因參與酵母菌DNA損傷修復(fù)4、2019年，中國科學(xué)院神經(jīng)科學(xué)研究所利用CRISPR—Cas9基因編輯技術(shù)，用基因敲除的猴的體細胞通過克隆技術(shù)成功培育出5只克隆疾病猴。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.克隆猴基因組成差異小，可減少個體差異對實驗的干擾B.受精卵經(jīng)基因編輯后形成的胚胎不一定都成功發(fā)育為克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機制和開發(fā)相應(yīng)藥物D.可以運用該基因編輯技術(shù)進行生殖性克隆人的研究5、下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的說法，正確的是（）A.制作腐乳過程中主要利用毛霉將蛋白質(zhì)分解成肽和氨基酸B.制作泡菜過程中先將蔬菜裝至八成滿，然后倒入煮沸的鹽水C.當(dāng)缺少糖源時醋酸菌進行無氧呼吸將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛，再將乙醛轉(zhuǎn)化為醋酸D.制作果酒過程中應(yīng)先將去除枝梗的葡萄用清水沖洗1~2次，然后晾干備用評卷人得分二、多選題(共8題，共16分)6、人參是一種名貴藥材；具有良好的滋補作用?？诜?干擾素在慢性乙肝；丙肝及部分腫瘤的治療中有一定療效。下圖為科研人員制備能合成干擾素的人參愈傷組織細胞的流程，①~④表示相關(guān)的操作，EcoRⅠ、BamHⅠ為限制酶，它們的識別序列及切割位點如表所示。下列選項正確的是（）

。限制酶。

識別序列和切割位點。

EcoRI

BamHI

A.步驟①中，利用PCR技術(shù)擴增干擾素基因時，設(shè)計引物序列的主要依據(jù)是干擾素基因兩端的部分核苷酸序列B.科研人員在兩種引物的一端分別加上了GAATTC和GGATCC序列，目的是方便后續(xù)的剪切和連接C.在過程③中T—DNA整合到受體細胞的染色體DNA上D.過程④中，科研人員最終未能檢測出干擾素基因，其原因可能是干擾素基因未能導(dǎo)入人參愈傷組織細胞7、下列關(guān)于高產(chǎn)奶?？寺∵^程的敘述，錯誤的是（）A.供體牛體細胞在進行體外培養(yǎng)時，不可能發(fā)生細胞貼壁和接觸抑制的現(xiàn)象B.培養(yǎng)至MⅡ中期的卵母細胞的細胞質(zhì)中含有能促進細胞核全能性表達的物質(zhì)C.通過電刺激促進供體與去核受體細胞兩兩融合，供體核進入卵母細胞D.胚胎移植時，應(yīng)將重組細胞直接移入代孕母牛的子宮8、下列防止生物武器的措施，正確的是（）A.通過立法，禁止生物武器的生產(chǎn)和擴散B.捕殺敵人投放的帶菌的小動物C.大力發(fā)展生物武器，以牙還牙D.根據(jù)生物武器的類型采取相應(yīng)措施9、下列關(guān)于生物技術(shù)的安全性及倫理問題的觀點，錯誤的是（）A.應(yīng)嚴格選擇轉(zhuǎn)基因植物的目的基因，避免產(chǎn)生對人類有害的物質(zhì)B.當(dāng)今社會的普遍觀點是禁止克隆人的實驗，反對治療性克隆C.反對設(shè)計試管嬰兒的原因之一是因為試管嬰兒技術(shù)屬于無性繁殖方式D.生物武器具有傳染性強、作用范圍廣等特點，應(yīng)嚴格禁止10、下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物安全性的敘述中，正確的是（）A.我國已經(jīng)對轉(zhuǎn)基因食品和轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品強制實施了產(chǎn)品標(biāo)識制度B.國際上大多數(shù)國家都在轉(zhuǎn)基因食品標(biāo)簽上警示性注明可能的危害C.開展風(fēng)險評估，預(yù)警跟蹤和風(fēng)險管理是保障轉(zhuǎn)基因生物安全的前提D.目前對轉(zhuǎn)基因生物安全性的爭論主要集中在食用安全性和環(huán)境安全性上11、抗生素可由微生物產(chǎn)生，具有抑菌作用，能在瓊脂培養(yǎng)基中擴散。在篩選產(chǎn)生抗生素的菌種時，先在瓊脂培養(yǎng)基平板上劃線接種從土壤中獲得的甲菌，在27℃下培養(yǎng)3天，形成菌落。然后接種乙、丙、丁三種致病菌（圖a），繼續(xù)在同樣條件下培養(yǎng)3天，結(jié)果如圖b。分析結(jié)果；可得出的結(jié)論是。

A.甲菌產(chǎn)生了抗生素B.丙菌的生長被乙菌產(chǎn)生的抗生素抑制C.乙菌的生長被甲菌產(chǎn)生的抗生素抑制D.丁菌產(chǎn)生的抗生素抑制了丙菌的生長12、研究發(fā)現(xiàn)，跨膜糖蛋白CD47與巨噬細胞表面的信號調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，能抑制巨噬細胞的吞噬作用。腫瘤細胞表面的CD47含量比正常細胞表面的高，導(dǎo)致巨噬細胞對腫瘤細胞的清除效果減弱。為驗證抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用，科學(xué)家按照如下流程進行了實驗組實驗。下列敘述正確的是（）

A.①過程注射CD47相當(dāng)于給小鼠注射抗原B.②過程依據(jù)的原理是細胞膜具有流動性C.③過程需要進行抗體檢測D.與對照組相比，圖中巨噬細胞的吞噬指數(shù)會下降13、傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作需要各種各樣的微生物。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.腌制泡菜利用了乳酸菌的乳酸發(fā)酵B.制作腐乳利用了微生物產(chǎn)生的蛋白酶C.制作果酒利用了酵母菌在無氧條件下產(chǎn)生酒精D.制作果醋利用了醋酸菌在無氧條件下產(chǎn)生乙酸評卷人得分三、填空題(共8題，共16分)14、通過統(tǒng)計平板上的________________，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在_________________________的平板進行計數(shù)。15、基因的“剪刀”是_____，它的化學(xué)本質(zhì)是_____，它只能識別一種特定的_____，并在_____上切割DNA分子；基因的“針線”是______，它能連接DNA骨架上的_____，DNA的骨架由___________構(gòu)成；基因的運載體是將_____送入_____的運輸工具。目前常用的運載體有_____、________和_____。質(zhì)粒存在于許多_____和______等生物中，是擬核或_____外能夠_____的很小的環(huán)狀_____。16、______——“分子縫合針”17、回答下列問題。

（1）果酒的制作離不開酵母菌，溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件，酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在_________，醋酸菌是一種________細菌，它的最適生長溫度為_______________，乳酸菌是________細菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成___________。

（2）微生物的接種方法很多，最常用的是_____________和__________________，稀釋涂布平板法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目___________，這是因為______________________________。

（3）飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測定，將濾膜放在____________培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)___________；從而計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。

（4）固定化酶和固定化細胞技術(shù)是利用物理或化學(xué)方法將酶或細胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括化學(xué)結(jié)合法、____________和物理吸附法。酶更適合采用__________和___________固定化，而細胞多采用___________固定化。18、假設(shè)PCR反應(yīng)中，只有一個DNA片段作為模板，請計算在30次循環(huán)后，反應(yīng)物中大約有個這樣的_______個DNA片段，一共需要加入______________個引物。19、現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴格的____________條件下，將優(yōu)良__________菌種直接接種在豆腐上，這樣可以避免__________________的污染，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。20、加入酒精和用玻璃棒攪拌時，動作要輕緩，以免加劇___________，導(dǎo)致DNA分子不能形成__________。21、去除DNA中的雜質(zhì)，可以在濾液中加入2mol/L濃度的NaCL溶液，目的是____去除__________________；再調(diào)節(jié)NaCL溶液濃度為0．14mol/L，目的是_______________，_______________去除_______________；最后用濃度為2mol/L的NaCL溶液重新溶解________________評卷人得分四、判斷題(共3題，共6分)22、釀酒酵母的最適生長溫度為30度。()A.正確B.錯誤23、蛋白質(zhì)工程的基本思路是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)。（選擇性必修3P94）()A.正確B.錯誤24、中國政府禁止生殖性克隆，但不反對治療性克隆。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共12分)25、科學(xué)家的發(fā)現(xiàn)給人類的生活帶來了無限的想象；他們采集了某深海海域的沉積物樣品，分離；鑒定得到其中的深海放線菌，以期獲得具有前景的抗生素替代品。據(jù)此回答下列問題：

(1)研究人員欲篩選出深海放線菌進行研究，取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后取菌液通過_______________法接種到高氏一號（加數(shù)滴質(zhì)量分數(shù)為10%的酚）培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

(2)通過PCR技術(shù)擴增分離得到的放線菌的16SrRNA基因可進行菌株的種屬鑒定。PCR技術(shù)中起關(guān)鍵作用的酶是_____________。該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR產(chǎn)物一般可通過_________________鑒定。

(3)科學(xué)家還將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細胞中。2~3周后，這些細胞顯示出ES細胞的形態(tài)、具有活躍的分裂能力，它們就是iPS細胞。在這個實驗過程中，逆轉(zhuǎn)錄病毒的作用是_______________如何證明iPS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用？請寫出實驗設(shè)計思路______________26、四尾柵藻是一種淡水藻類；繁殖快；適應(yīng)性強，可作為制備生物柴油的重要原料之一。為提高四尾柵藻油脂含量，研究人員將從含油量高的紫蘇中獲得的二酰甘油?；D(zhuǎn)移酶基因（DGAT1）與pBI121質(zhì)粒構(gòu)建表達載體，經(jīng)轉(zhuǎn)化成功獲得高產(chǎn)油脂四尾柵藻，主要研究過程如下圖，其中DGAT1-F（5'-GCATCTAGAATGGCGATCTTGGACTC-3'）和DGAT1-R（5'-CGGATCCCTACCTTGCACTAGCTTTTC-3'）是以DGAT1基因為依據(jù)設(shè)計的一對引物，1acZ基因編碼產(chǎn)物在X-ga1和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍色，否則菌落呈現(xiàn)白色。請回答下列問題。

(1)過程①中需要的酶有____________，過程②應(yīng)選用的限制酶是____________和____________。

(2)研究中，在保存DGAT1基因時，將克隆載體導(dǎo)入大腸桿菌的優(yōu)點有____________。

①穩(wěn)定保存②準(zhǔn)確復(fù)制③快速表達④方便取用。

(3)過程③經(jīng)轉(zhuǎn)化的大腸桿菌通過____________（方法）接種到培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。為篩選獲得目標(biāo)菌株，培養(yǎng)基應(yīng)加入的成分有____________。

(4)為檢測表達載體轉(zhuǎn)化四尾柵藻的情況及確定目的基因是否表達，研究人員進行了如下實驗，請完成下表。實驗步驟簡要操作過程初篩培養(yǎng)經(jīng)轉(zhuǎn)化后的四尾柵藻接種于含①____________的BG11固體培養(yǎng)基并放置于人工氣候箱培養(yǎng)，一段時間后觀察其生長情況②____________在BG11固體培養(yǎng)基上分別挑取數(shù)個單藻落接種至BG11液體培養(yǎng)基中光照搖床培養(yǎng)，編號備用PCR驗證收集四尾柵藻藻體，提取基因組DNA，以DGAT1-F和DGAT1-R為引物，進行PCR驗證，未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻作對照油脂含量測定利用索氏抽提法分別測定③____________的油脂含量結(jié)果處理統(tǒng)計并比較PCR驗證結(jié)果及藻體中油脂的含量27、嗜熱土壤芽孢桿菌產(chǎn)生的β-萄糖苷酶(BglB)是一種耐熱纖維素酶。為使其在工業(yè)生產(chǎn)中更好地應(yīng)用；開展了以下實驗。如圖為質(zhì)粒限制酶酶切圖譜，如表為幾種限制酶的識別序列及酶切位點。請回答下列問題：

(1)通常情況下，獲得的目的基因需要進行擴增，最簡便的方法是_________技術(shù)。

(2)分析上圖，可選擇_______和_______兩種不同的限制酶切割質(zhì)粒，以防止質(zhì)粒自身環(huán)化。質(zhì)粒被切割后，可用_______將其與目的基因連接。在動物基因工程中將目的基因?qū)胧荏w細胞時通常的方法是_______。

(3)大腸桿菌不能降解纖維素，但轉(zhuǎn)入上述建構(gòu)好的表達載體后則獲得了降解纖維素的能力，這是因為_______。

(4)蛋白質(zhì)工程是二代基因工程，它的基本途徑是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→_______→_______→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列。28、新冠病毒竟然是友軍？近日有媒體報道稱感染新冠病毒可以治療肺癌；該報道中的結(jié)論是基于美國科學(xué)家發(fā)表的一篇論文《鼻部吸入新冠刺突蛋白S1可緩解肺癌發(fā)展》。該研究使用新冠病毒的刺突蛋白S1進行了體內(nèi)和體外實驗，分析回答下列問題：

(1)體外實驗：首先培養(yǎng)肺癌細胞，在細胞培養(yǎng)液中除了加入必要的營養(yǎng)物質(zhì)外，還加了一定濃度的________以防止雜菌污染，細胞瓶放在37℃的________中培養(yǎng)。隨后用刺突蛋白S1處理肺癌細胞并檢測細胞的凋亡率，結(jié)果如圖1。結(jié)果表明________。

(2)小鼠體內(nèi)實驗：流程如圖2，實驗結(jié)果如圖3。其中NNK是尼古丁的衍生物亞硝胺酮，長時間對小鼠進行NNK處理的目的是________。

(3)對比體內(nèi)實驗和體外實驗的結(jié)果發(fā)現(xiàn)刺突蛋白S1在體內(nèi)抑癌的效果比體外的效果好得多，推測原因可能是刺突蛋白S1引起了免疫系統(tǒng)的________功能激活。為了進一步確認肺部腫瘤比例的減少到底是不是因為新冠病毒刺突蛋白S1的作用，還應(yīng)增加一組對照為NNK+________。

(4)上述研究成果是否足以證明感染新冠病毒可以治療肺癌？請做出判斷并說明理由________________。評卷人得分六、綜合題(共1題，共7分)29、閱讀下面的材料；回答問題。

胰島素的應(yīng)用是糖尿病治療歷史上的一個里程碑。胰島素自1922年用于臨床以來；就成為治療糖尿病的特效藥物。目前全世界糖尿病患者已超過四億，為臨床提供充足；質(zhì)量可靠的胰島素制劑是現(xiàn)代生物制藥領(lǐng)域的一項重要工程。

人胰島素由胰島β細胞合成；核糖體上最初形成的是前胰島素原單鏈多肽，進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔后，信號肽被切除，形成胰島素原。高爾基體內(nèi)的特異性肽酶將胰島素原的C肽區(qū)域切除，A鏈和B鏈通過二硫鍵形成共價交聯(lián)的活性胰島素（如圖）。

最初用于臨床的胰島素幾乎都是從豬；牛胰臟中提取的。豬、牛胰島素與人胰島素生理功能相似；但氨基酸序列有微小差異。接受動物胰島素治療的患者有5％～10％出現(xiàn)不同程度的過敏反應(yīng)，抗動物胰島素抗體還可能對患者的胰島β細胞功能產(chǎn)生負面影響。

隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展；重組人胰島素逐漸取代動物胰島素。早期的重組人胰島素生產(chǎn)，采用A；B鏈分別表達法。后來該方法被胰島素原表達法取代，即由大腸桿菌合成胰島素原，然后經(jīng)細胞外酶切獲得胰島素。1987年用酵母菌生產(chǎn)重組人胰島素的方法出現(xiàn)。重組人胰島素的結(jié)構(gòu)與人體自身分泌的胰島素結(jié)構(gòu)完全相同，但無法完全模擬生理胰島素曲線，容易導(dǎo)致血糖波動，甚至導(dǎo)致低血糖發(fā)生。

上世紀(jì)90年代；科學(xué)家通過改變胰島素的氨基酸序列和結(jié)構(gòu)，研制出能更好模擬生理胰島素分泌特點的胰島素類似物，包括速效胰島素和長效胰島素類似物。例如，將人胰島素B鏈第28位的脯氨酸替換為天門冬氨酸，可有效抑制胰島素單體的聚合，皮下注射這種速效胰島素類似物后，起效快（10-20分鐘起效）；血藥濃度峰值高、藥效消失快，已經(jīng)在臨床上廣泛應(yīng)用。

（1）用豬胰島素進行治療，易誘導(dǎo)人體產(chǎn)生抗豬胰島素抗體，原因是____________。

（2）人胰島素基因有2個內(nèi)含子。利用大腸桿菌通過胰島素原法生產(chǎn)重組人胰島素，獲取目的基因時，不宜采用的方法是________

a．直接從細胞內(nèi)總DNA中分離目的基因。

b．用化學(xué)方法直接人工合成目的基因。

c．以mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄合成目的基因。

d．利用PCR擴增人胰島素原基因的編碼序列。

（3）與大腸桿菌相比，利用酵母菌生產(chǎn)胰島素的優(yōu)勢有_____________________。

（4）重組人胰島素工程菌構(gòu)建完成后，還需要通過________工程技術(shù)進行胰島素的生產(chǎn)。

（5）正常人胰島素的生理性分泌，可分為基礎(chǔ)胰島素分泌（24小時持續(xù)脈沖式分泌微量胰島素，維持空腹?fàn)顟B(tài)下血糖穩(wěn)定）和進餐后的胰島素分泌。能更好地模擬餐時生理胰島素曲線的是________（選填“速效”或“長效”）胰島素類似物。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、C【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)是指利用特定的培養(yǎng)基將離體的植物細胞；組織或器官培養(yǎng)成完整植株的過程。愈傷組織是一團無定形狀態(tài)的薄壁細胞。二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化處理后會得到單倍體植株；然后再經(jīng)秋水仙素處理，得到能穩(wěn)定遺傳的二倍體植株。胚狀體外包上人工薄膜，可制成人工種子。

【詳解】

A；誘導(dǎo)愈傷組織應(yīng)該避光培養(yǎng)；原因是在有光時往往形成維管組織，而不形成愈傷組織；愈傷組織再分化成胚狀體時需要光照，原因是：①葉綠素的合成需要光照；②試管苗需要光進行光合作用制造有機物提供營養(yǎng)物質(zhì)，A錯誤；

B；外植體經(jīng)過脫分化后形成愈傷組織；B錯誤；

C；植物組織培養(yǎng)可用于細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)；C正確；

D；花藥具有全能性；能作為組織培養(yǎng)的材料，D錯誤。

故選C。

【點睛】2、C【分析】【分析】

【詳解】

①克隆動物沒有兩性生殖細胞的結(jié)合；屬于無性繁殖，①正確；

②克隆采用了核移植技術(shù)；即將動物的一個細胞的細胞核移入一個去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組細胞，②正確；

③克隆綿羊“多利”的培育采用了核移植技術(shù)；動物細胞培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)；③正確；

④克隆不涉及細胞融合技術(shù)；④錯誤；

⑤動物細胞工程的基礎(chǔ)是動物細胞培養(yǎng)；⑤正確；

⑥“多利”的誕生沒有采用了胚胎分割技術(shù)；⑥錯誤。

故選C。

【點睛】3、B【分析】【分析】

分析題意；酵母菌突變體1（基因1功能缺失）和突變體2（基因2功能缺失）與不同濃度藥物A混合培養(yǎng)，藥物A能誘發(fā)DNA損傷，若該損傷不能修復(fù)，細胞會死亡。

【詳解】

A；根據(jù)實驗的單一變量原則；各組實驗前未稀釋的酵母菌培養(yǎng)液的濃度應(yīng)該相同，A錯誤；

B；根據(jù)“藥物A能誘發(fā)DNA損傷；若該損傷不能被修復(fù)則會導(dǎo)致細胞死亡”可知，實驗結(jié)果中，酵母菌的生長情況可反映其DNA損傷修復(fù)能力，若酵母菌存活數(shù)量多，則說明修復(fù)損傷DNA的能力強，B正確；

C；從圖上看；不同稀釋倍數(shù)下，酵母菌突變體1的存活情況比突變體2好，說明二者相比，基因2缺失對酵母菌DNA損傷修復(fù)的影響更大，C錯誤；

D；酵母菌突變體1和突變體2與對照組相比；存活量都低于對照組，說明缺了基因1和基因2都影響DNA損傷修復(fù)，是否有其他基因參與酵母菌DNA損傷修復(fù)，需要進一步做實驗確認，D錯誤。

故選B。4、D【分析】【分析】

動物細胞核移植技術(shù)是將動物一個細胞的細胞核移入去核的卵母細胞中；使這個重新組合的細胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動物個體的技術(shù)。

【詳解】

A；用基因敲除的猴的體細胞通過克隆技術(shù)成功培育出克隆疾病猴；該過程是屬于無性繁殖，所以基因組成差異小，可減少個體差異對實驗的干擾，A正確；

B；胚胎發(fā)育會受到環(huán)境因素的影響；受精卵經(jīng)基因編輯后形成的胚胎不一定都成功發(fā)育為克隆疾病猴，B正確；

C；克隆特定疾病模型的動物；還能為研究該疾病的致病機制和開發(fā)相應(yīng)的藥物提供幫助，所以克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機制和開發(fā)相應(yīng)藥物，C正確；

D；不可以運用該基因編輯技術(shù)進行生殖性克隆人的研究；D錯誤。

故選D。5、A【分析】【分析】

1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量；（2）在無氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

3；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【詳解】

A；制作腐乳過程中主要利用毛霉產(chǎn)生的蛋白酶將蛋白質(zhì)分解成肽和氨基酸；產(chǎn)生的脂肪酶將脂肪分解為甘油和脂肪酸，A正確；

B；制作泡菜過程中先將蔬菜裝至半壇；然后倒入煮沸后冷卻的鹽水，B錯誤；

C；醋酸菌為需氧型細菌；進行有氧呼吸，當(dāng)缺少糖源時醋酸菌將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛，再將乙醛轉(zhuǎn)化為醋酸，C錯誤；

D；制作果酒過程中應(yīng)該先用清水沖洗1~2次；然后再去除葡萄的枝梗，D錯誤。

故選A。二、多選題(共8題，共16分)6、A:B:D【分析】【分析】

分析圖解：圖中過程①表示利用PCR技術(shù)擴增目的基因；過程②表示基因表達載體的構(gòu)建，過程③表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入根瘤農(nóng)桿菌，過程④表示目的基因的檢測和鑒定。

【詳解】

A；步驟①中；利用PCR技術(shù)擴增干擾素基因時，設(shè)計引物序列的主要依據(jù)是干擾素基因兩端的部分核苷酸序列，A正確；

B；由于需要用EcoRⅠ、BamHⅠ兩種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒；因此科研人員還在兩種引物的一端分別加上了GAATTC和GGATCC序列，以便于后續(xù)的剪切和連接，B正確；

C；在過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入根瘤農(nóng)桿菌；而根瘤農(nóng)桿菌在侵染人參愈傷組織細胞時，T-DNA才整合到受體細胞的染色體DNA上，C錯誤；

D；干擾素基因未能導(dǎo)入人參愈傷組織細胞或?qū)肴藚⒂鷤M織細胞的干擾素基因未能轉(zhuǎn)錄；這會導(dǎo)致通過該方法不能檢測出干擾素基因，D正確。

故選ABD。7、A:D【分析】【分析】

動物核移植是指將動物的一個細胞的細胞核移入一個去掉細胞核的卵母細胞中；使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎。這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。核移植得到的動物稱克隆動物，克隆動物的核基因完全來自供體動物，而細胞質(zhì)基因來自受體細胞。

【詳解】

A；供體牛體細胞在進行體外培養(yǎng)時；當(dāng)貼壁細胞分裂生長到細胞表面相互接觸時，細胞會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的接觸性抑制，A錯誤；

B；核移植用MⅡ中期的卵母細胞做受體細胞原因有卵母細胞體積大；便于操作；含有促使細胞核表達全能性的物質(zhì)；營養(yǎng)物質(zhì)豐富，B正確；

C；去核的卵母細胞與供體細胞通過電擊后融合；供體核進入受體卵母細胞，構(gòu)建成重組胚胎，C正確；

D；胚胎移植時；應(yīng)先將重組細胞培養(yǎng)成早期胚胎，再把早期胚胎移入代孕母牛的子宮，D錯誤。

故選AD。8、A:B:D【分析】【分析】

生物武器種類：包括致病菌、病毒、生化毒劑，以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。把這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方，可以對軍隊和平民造成大規(guī)模殺傷后果。

生物武器的特點：1、單位面積效應(yīng)大；2、有特定的傷害對象；3、具有傳染性；4、危害時間久；5、不易被發(fā)現(xiàn)和鑒定；6、使用者本身易受傷害；7、生物武器造價低，技術(shù)難度不大，隱秘性強，可以在任何地方研制和生產(chǎn)。

生物武器的局限性：1；生物武器主要指病原微生物；所以它們的生存、繁殖、死亡易受環(huán)境條件（如溫度）的影響。2、還受地形、風(fēng)向等多種條件影響。3、生物武器使用時不易控制，使用不當(dāng)可危害本方安全。

【詳解】

生物武器是多種多樣的；對于不同的生物武器應(yīng)用不同的防治方法，但總的原則是禁止生物武器的生產(chǎn)和擴散，因此ABD正確，C錯誤。

故選ABD。9、B:C【分析】【分析】

1；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。對待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊；正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。

2；生物武器的特點：單位面積效應(yīng)大；有特定的傷害對象；具有傳染性；危害時間久；不易被發(fā)現(xiàn)和鑒定；使用者本身易受傷害；生物武器造價低；技術(shù)難度不大，隱秘性強，可以在任何地方研制和生產(chǎn)。

【詳解】

A；嚴格選擇轉(zhuǎn)基因植物的目的基因；可避免產(chǎn)生對人類有害的物質(zhì)，減少人們對轉(zhuǎn)基因食物安全的擔(dān)憂，A正確；

B；當(dāng)今社會的普遍觀點是禁止克隆人的實驗；反對生殖性克隆，但是不反對治療性克隆，B錯誤；

C；試管嬰兒技術(shù)利用了體外受精技術(shù)；屬于有性繁殖，試管嬰兒可以設(shè)計嬰兒的性別，反對設(shè)計試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計嬰兒，C錯誤；

D；生物武器是指有意識的利用微生物、毒素、昆蟲侵襲敵人的軍隊、人口、農(nóng)作物或者牲畜等目標(biāo)；以達到戰(zhàn)爭目的一類武器，有傳染性強、作用范圍廣等特點，應(yīng)嚴格禁止，D正確。

故選BC。10、A:C:D【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。轉(zhuǎn)基因食品、產(chǎn)品上都要標(biāo)注原料來自轉(zhuǎn)基因生物；如“轉(zhuǎn)基因××”“轉(zhuǎn)基因××加工品（制成品）”“加工原料為轉(zhuǎn)基因××”“本產(chǎn)品為轉(zhuǎn)基因××加工制成”．對于轉(zhuǎn)基因食物潛在隱患要進行開展風(fēng)險評估、預(yù)警跟蹤等措施多環(huán)節(jié)、嚴謹?shù)陌踩栽u價，保障了現(xiàn)代生物技術(shù)的安全性。

【詳解】

A；為了加強對業(yè)轉(zhuǎn)基因生物的標(biāo)識管理；保護消費者的知情權(quán)，我國對農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物實行了標(biāo)識制度，A正確；

B；轉(zhuǎn)基因食品上只標(biāo)明原料來自轉(zhuǎn)基因生物；并未標(biāo)明其危害，B錯誤；

C；為了保障現(xiàn)代生物技術(shù)的安全性；需要開展風(fēng)險評估、預(yù)警跟蹤等措施，C正確；

D；生物安全是指擔(dān)心轉(zhuǎn)基因生物會影響到生物多樣性；D正確。

故選ACD。11、A:C【分析】【分析】

【詳解】

分析培養(yǎng)結(jié)果（圖b）可知，乙、丙、丁三種致病菌不會產(chǎn)生抗生素，否則靠近乙、丙、丁的甲菌落不能生長。進一步由b圖可知；乙菌的生長被抑制，最可能的原因是甲菌產(chǎn)生了抗生素，此種抗生素只能抑制乙菌的生長，而對丙；丁兩種菌沒有影響，AC正確。

故選AC。12、A:B:C【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導(dǎo)B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；①過程注射CD47相當(dāng)于給小鼠注射抗原；通過多次注射可獲得更多已免疫的B淋巴細胞，A正確；

B；②過程表示誘導(dǎo)細胞融合；依據(jù)的原理是細胞膜具有流動性，B正確；

C；③過程表示雜交瘤細胞多次篩選培養(yǎng)；該過程需要進行抗體檢測，從而獲得能產(chǎn)生我們所需要抗體的雜交瘤細胞，C正確；

D；根據(jù)題干中“抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用”；因此與對照組相比，圖中巨噬細胞的吞噬指數(shù)會升高，D錯誤。

故選ABC。13、A:B:C【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

3；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

4；泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開乳酸菌。在無氧條件下；乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。

【詳解】

A；在無氧條件下；乳酸菌能將葡萄糖分解成乳酸，腌制泡菜利用了乳酸菌的乳酸發(fā)酵，A正確；

B；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；制作腐乳利用了毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸，B正確；

C；酵母菌在無氧條件下；可通過無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳，制作果酒利用了酵母菌在無氧條件下產(chǎn)生酒精，C正確；

D；醋酸菌是好氧型生物；制作果醋利用了醋酸菌在有氧條件下產(chǎn)生醋酸，D錯誤。

故選ABC。三、填空題(共8題，共16分)14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】菌落數(shù)30～30015、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】限制酶蛋白質(zhì)核苷酸序列特定的切點DNA連接酶缺口磷酸-脫氧核糖外源基因受體細胞質(zhì)粒噬菌體動植物病毒細菌酵母菌細胞核自主復(fù)制DNA分子16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】DNA連接酶17、略

【分析】【分析】

果酒制作菌種是酵母菌；來源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌種保藏中心，條件是無氧；溫度是18～25℃，pH值呈酸性．果醋制備的菌種是醋酸菌，條件是發(fā)酵過程中充入無菌氧氣，溫度為30～35℃。

【詳解】

（1）酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在18～25℃；醋酸菌是一種好氧細菌，它的最適生長溫度為30～35℃。乳酸菌是厭氧細菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成乳酸。

（2）微生物的接種方法很多；最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，稀釋涂布平板法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低，這是因為當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。

（3）飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測定；將濾膜放在伊紅美藍培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，從而計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。

（4）固定化技術(shù)一般包括化學(xué)結(jié)合法；包埋法和物理吸附法。酶更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定化；而細胞多采用包埋法固定化。

【點睛】

本題考查果酒和果醋制備原理，意在考查學(xué)生理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，屬識記內(nèi)容?！窘馕觥?8－25℃好氧30－35℃厭氧乳酸平板劃線法稀釋涂布平板法低當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落伊紅美藍黑色包埋法化學(xué)結(jié)合法物理吸附法包埋法18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2030×22030×2－219、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】無菌毛霉其他菌種20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】DNA斷裂絮狀沉淀21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】不容的雜質(zhì)析出DNA過濾溶液中的雜質(zhì)DNA四、判斷題(共3題，共6分)22、B【分析】【詳解】

釀酒酵母的最適生長溫度是28℃；但在發(fā)酵過程中，一般將溫度控制在18-30℃，這是因為果皮表面附著的野生酵母菌可能有多種（有多種酵母菌參與了發(fā)酵過程），從實踐的角度看，大致控制溫度范圍比較簡單易行。

故本說法錯誤。23、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。蛋白質(zhì)工程的基本思路是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)。

故正確。24、A【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。治療性克?。褐咐每寺〖夹g(shù)產(chǎn)生特定細胞和組織（皮膚、神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植。生殖性克?。褐笇⒖寺〖夹g(shù)用于生育目的；即用于產(chǎn)生人類個體。中國政府：禁止生殖性克隆人，堅持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗），不反對治療性克隆人。

【詳解】

據(jù)分析可知；中國政府禁止生殖性克隆，但不反對治療性克隆。

故正確。五、實驗題(共4題，共12分)25、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

【詳解】

（1）分析題意可知；研究人員取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后可通過稀釋涂布平板法接種到培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

（2）PCR技術(shù)是一項通過體外控制溫度擴增DNA的技術(shù)，該技術(shù)中由于溫度較高，起關(guān)鍵作用的酶是耐高溫DNA聚合酶；PCR擴增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析題意，該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴增出16SrRNA基因的原因是：引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計合成的；PCR產(chǎn)物一般可通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定：凝膠中的DNA分子通過染色；可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來。

（3）分析題意，科學(xué)家將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細胞中，該過程中逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細胞；分析題意，實驗?zāi)康氖莍PS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用，故實驗的自變量是外源基因的有無，因變量是IPS細胞的產(chǎn)生情況，實驗設(shè)計應(yīng)遵循對照與單一變量原則，故可設(shè)計實驗如下：將轉(zhuǎn)入外源基因的細胞和沒有轉(zhuǎn)入外源基因的細胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細胞轉(zhuǎn)化成了iPS細胞，則可以證明iPS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用?！窘馕觥?1)稀釋涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高溫DNA聚合酶引物能與16SrRNA基因特異性結(jié)合（引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計合成的）瓊脂糖凝膠電泳。

(3)逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細胞。將轉(zhuǎn)入外源基因的細胞和沒有轉(zhuǎn)入外源基因的細胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細胞轉(zhuǎn)化成了iPS細胞，則可以證明iPS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用26、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本工具：限制性內(nèi)切核酸酶；識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開。DNA連接酶，將兩個DNA片段連接起來，恢復(fù)被限制酶切開的磷酸二酯鍵。載體，將外源基因送入受體細胞。

2；基因工程的基本過程：目的基因的篩選與獲??；基因表達載體的構(gòu)建，將目的基因?qū)胧荏w細胞，目的基因的檢測和鑒定。

【詳解】

（1）過程①包括逆轉(zhuǎn)錄和PCR，逆轉(zhuǎn)錄需要反轉(zhuǎn)錄酶的參與，PCR過程需要耐高溫的DNA聚合酶。限制酶的作用是識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開，對比幾種限制酶的結(jié)合位點和DGAT1-F、DGAT1-R的堿基序列，可知過程②應(yīng)選用的限制酶是BamHI和XbaI。

（2）將克隆載體導(dǎo)入大腸桿菌；可以與外界環(huán)境隔離，能夠穩(wěn)定保存，準(zhǔn)確復(fù)制，大腸桿菌比基因方便取用，故選①②④。

（3）根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的分布可知所用接種方法是稀釋涂布平板法?？寺≥d體中含有氨芐青霉素抗性基因；1acZ基因；1acZ基因編碼產(chǎn)物在X-ga1和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍色，否則菌落呈現(xiàn)白色，所以為篩選獲得目標(biāo)菌株，培養(yǎng)基應(yīng)加入的成分有氨芐青霉素、X-gal、IPTG。

（4）pBI121質(zhì)粒中含有卡那霉素抗性基因，所以經(jīng)轉(zhuǎn)化后的四尾柵藻接種于含卡那霉素的BG11固體培養(yǎng)基并放置于人工氣候箱培養(yǎng)，一段時間后觀察其生長情況。在BG11固體培養(yǎng)基上分別挑取數(shù)個單藻落接種至BG11液體培養(yǎng)基中光照搖床培養(yǎng)，液體培養(yǎng)基可以用于擴大培養(yǎng)，增加四尾柵藻種群密度。上一步驟中用未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻作對照，所以利用索氏抽提法分別測定（等量的）轉(zhuǎn)化后和未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻的油脂含量，從而檢測表達載體轉(zhuǎn)化四尾柵藻的情況及確定目的基因是否表達?！窘馕觥?1)反轉(zhuǎn)錄酶、耐高溫的DNA聚合酶BamHIXbaI

(2)①②④

(3)稀釋涂布平板法氨芐青霉素；X-gal、IPTG

(4)卡那霉素擴大培養(yǎng)（等量的）轉(zhuǎn)化后和未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻27、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作過程主要包括四個步驟：目的基因的獲??；基因表達載體的構(gòu)建；將目的基因?qū)耸荏w細胞；目的基因的檢測與鑒定。（1）目的基因的獲取方法目的基因的獲取方法主要有從自然界已有的物種中分離出來（如鳥槍法從基因文庫或cDNA文庫中獲?。?、人工合成（常用的方法有化學(xué)合成法和反轉(zhuǎn)錄法）、PCR技術(shù)擴增目的基因。（2）構(gòu)建基因表達載體；需分別用限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，用限制酶切割質(zhì)粒時，選擇的限制酶不可以破壞質(zhì)粒上的標(biāo)記基因和復(fù)制原點、啟動子、終止子等必須的結(jié)構(gòu)。用DNA連接酶連接，構(gòu)成重組質(zhì)粒。（3）將目的基因?qū)雱游锛毎Ｓ蔑@微注射法：將含有目的基因的表達載體提純→從雌性動物體內(nèi)取出卵（可在體外受精，也可在體內(nèi)受精）→采用顯微注射儀進行顯微注射→將注射了目的基因的受精卵經(jīng)胚胎早期培養(yǎng)一段時間后，移植到雌性動物的輸卵管或子宮內(nèi)，使其發(fā)育成為具有新性狀的動物。

2；蛋白質(zhì)工程的基本途徑是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列。

【詳解】

（1）獲取目的基因的方法主要有三種；最簡便的是PCR技術(shù)。

（2）用限制酶切割質(zhì)粒時；選擇的限制酶不可以破壞質(zhì)粒上的標(biāo)記基因和復(fù)制原點；啟動子、終止子等必須的結(jié)構(gòu)，由圖可知可選用NdeⅠ、BamHⅠ兩種限制酶切割質(zhì)粒。用DNA連接酶將切割后的質(zhì)粒與目的基因連接。在動物基因工程中將目的基因?qū)胧荏w細胞時通常的方法是顯微注射法。

（3）上述建構(gòu)好的表達載體含有能夠表達β-萄糖苷酶(BglB)的基因；轉(zhuǎn)基因大腸桿菌能夠分泌出有活性的β-萄糖苷酶，所以能夠降解纖維素。

（4）蛋白質(zhì)工程的基本途徑是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列?！?/p>