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…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁,總=sectionpages22頁第=page11頁,總=sectionpages11頁2025年人教新課標選擇性必修3生物上冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍:全部知識點;考試時間:120分鐘學校:______姓名:______班級:______考號:______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題,共10分)1、下列有關動物細胞培養(yǎng)的技術操作,正確的是()A.用纖維素酶和果膠酶處理動物組織,獲得分散的單個細胞B.通常用高壓蒸汽滅菌的方法對配置好的細胞培養(yǎng)液進行滅菌C.將培養(yǎng)裝置置于含有95%O2和5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D.當培養(yǎng)裝置中的細胞出現(xiàn)接觸抑制時,需要分瓶來傳代培養(yǎng)2、下列關于動物細胞工程的敘述,錯誤的是()A.動物細胞培養(yǎng)過程中通常會出現(xiàn)細胞貼壁現(xiàn)象B.胚胎干細胞可以用于治療人類的某些疾病C.動物細胞培養(yǎng)過程中需使用胃蛋白酶D.動物細胞培養(yǎng)液中通常需加入血清、血漿等天然成分3、新型冠狀病毒的檢測主要包含核酸檢測、抗體檢測、抗原檢測等幾種方法。其中利用實時熒光RT-PCR技術檢測新型冠狀病毒特異性核酸序列是最常用的方法。RT-PCR是將逆轉錄(RT)、PCR以及熒光標記等相結合的技術。下列說法錯誤的是()A.與抗體檢測方法相比,核酸檢測能夠檢測到早期患者和無癥狀感染者B.利用上述技術檢測新型冠狀病毒時,PCR的模板實際上是逆轉錄得到的cDNAC.利用上述技術檢測新型冠狀病毒時,逆轉錄酶在每次循環(huán)中都能夠發(fā)揮作用D.RT-PCR反應中需加入樣品、脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶、引物、逆轉錄酶等4、馬鈴薯利用塊莖進行無性生殖,種植的世代多了以后往往會感染病毒而減產,為此農戶都希望得到無病毒的幼苗進行種植,獲得無病毒幼苗的最佳辦法是()A.選擇優(yōu)良品種進行雜交B.進行遠緣植物體細胞雜交C.利用莖尖進行組織培養(yǎng)D.人工誘導基因突變5、如圖是中國科學家首次用體細胞核移植技術克隆出兩只獼猴的簡單流程,相關敘述錯誤的是()

A.選擇MⅡ期的卵母細胞有利于細胞核全能性的恢復B.重構胚可以用PEG、滅活的病毒等激活C.克隆猴的遺傳物質與供體體細胞不完全一致D.培養(yǎng)供體體細胞的培養(yǎng)液中常需添加動物血清評卷人得分二、多選題(共5題,共10分)6、科學家運用基因工程技術,將人凝血因子基因導入山羊的受精卵中,培育出山羊乳腺生物反應器,使山羊乳汁中含有人凝血因子。以下有關敘述錯誤的是()A.可用顯微注射技術將含有人凝血因子基因的重組DNA分子導入山羊的受精卵B.在該轉基因羊中,人凝血因子存在于乳腺細胞,而不存在于其他細胞C.人凝血因子基因開始轉錄后,DNA聚合酶以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNAD.科學家將人凝血因子基因與乳腺蛋白基因重組在一起,從而使人凝血因子基因只在乳腺細胞中特異表達7、下列關于“DNA粗提取與鑒定”實驗的敘述,正確的是()A.DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸餾水B.洗滌劑能瓦解植物細胞壁并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度C.調節(jié)NaCl溶液濃度或加入冷酒精后過濾,都可以去除部分雜質D.在酸性條件下,DNA與二苯胺會發(fā)生反應,最終產生藍色物質8、在動物細胞培養(yǎng)的過程中,貼壁的細胞不一定都能增殖并形成克?。▎蝹€細胞繁殖形成的細胞群體),而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞,這一特點可用于測定動物細胞的增殖能力。大致流程如下圖,相關敘述不正確的是()

A.出現(xiàn)接觸抑制后,細胞克隆停止增殖B.克隆細胞與接種的細胞的遺傳信息不一定相同C.胰蛋白酶可使細胞分散成單個利于計數(shù)D.需采用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)才能形成細胞克隆9、基因定點突變技術通過改變基因特定位點的核苷酸來改變蛋白質的氨基酸序列;常用于研究某個氨基酸對蛋白質的影響,其原理是利用人工合成的誘變寡核苷酸引物和多種酶來合成突變基因,過程如圖所示。下列分析錯誤的是()

A.基因定點突變的原理是使基因發(fā)生堿基對的替換B.誘變寡核苷酸引物的延伸需要消耗四種核糖核苷酸C.突變基因的合成是以正?;虻膯捂溩鳛槟0宓腄.延伸過程遵循堿基互補配對原則,且需要DNA聚合酶的催化10、原腸胚形成期被稱為人體胚胎發(fā)育的“黑匣子”時期。研究人員利用胚胎干細胞,在實驗室中制造出不能發(fā)育成完整胚胎的“擬原腸胚”模型,用來揭示人類早期胚胎發(fā)育的過程。下列說法正確的是()A.滋養(yǎng)層細胞將來能發(fā)育成胎膜和胎盤B.利用核移植所得胚胎干細胞,可以誘導發(fā)育成適合移植的器官C.對原腸胚進行胚胎分割,可以提高移植胚胎的利用率D.該模型可以研究酒精、藥物和病原體對胚胎發(fā)育的影響評卷人得分三、填空題(共7題,共14分)11、一般包括______、______等技術12、通過統(tǒng)計平板上的________________,就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結果準確,一般選擇菌落數(shù)在_________________________的平板進行計數(shù)。13、生物數(shù)據(jù)庫的知識與正在迅猛發(fā)展的生物信息學有關。什么是生物信息學________?14、動物細胞培養(yǎng)的條件:_____、_____、_____、_____等。15、第四步:_____16、首先要檢測轉基因生物的染色體DNA上是否插入了______,方法是采用______。17、基因工程是蛋白質工程的關鍵技術;蛋白質工程是基因工程的延伸。有人對基因工程和蛋白質工程的關系進行了比較,并歸納為下表。

基因工程與蛋白質工程的比較。比較項目蛋白質工程蛋白質工程原理中心法則中心法則區(qū)別過程獲取目的基因→構建表達載體→導入受體細胞→目的基因的檢測與鑒定預期蛋白質功能→設計蛋白質結構→推測氨基酸序列→合成DNA→表達出蛋白質實質定向改造生物的遺傳特性,以獲得人類所需要的生物類型或生物產品(基因的異體表達)定向改造蛋白質的分子結構以生產人類所需要的蛋白質定向改造蛋白質的分子結構以生產人類所需要的蛋白質結果生產自然界中已有的蛋白質生產自然界中已有的蛋白質生產自然界中已有的蛋白質聯(lián)系蛋白質工程是第二代基因工程

上表的比較是否正確?如果有不妥之處,嘗試進行修改。_________評卷人得分四、判斷題(共3題,共27分)18、胚胎發(fā)育早期,細胞的數(shù)量不斷增加,胚胎的總體積也增加。()A.正確B.錯誤19、對微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最廣泛和取得實際應用成果最多的領域,是因為微生物具有生理結構和遺傳物質簡單、生長繁殖快、對環(huán)境因素敏感和容易進行遺傳物質操作等優(yōu)點。(選擇性必修3P101)()A.正確B.錯誤20、生物武器包括致病菌類、病毒類和生化毒劑類等。(選擇性必修3P111)()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題,共32分)21、研究發(fā)現(xiàn)柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白質)均有抑菌作用;兩者的提取及應用如圖所示。

(1)柚皮易焦糊,宜采用____________法提取柚皮精油,該過程得到的糊狀液體可通過___________除去其中的固體雜質。

(2)篩選乳酸菌A時可選用平板劃線法或____________接種。對新配制的培養(yǎng)基滅菌時所用的設備是_______________。實驗前需對超凈工作臺進行____________處理。

(3)培養(yǎng)基中的尿素可為乳酸菌A生長提供______________。電泳法純化乳酸菌素時,若分離帶電荷相同的蛋白質,則其分子量越大,電泳速度___________。

(4)抑菌實驗時,在長滿致病菌的平板上,會出現(xiàn)以抑菌物質為中心的透明圈??赏ㄟ^測定透明圈的______________來比較柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果22、柑橘潰瘍病是由地毯草黃單胞桿菌引起的;發(fā)生在柑橘的一種病害;植株受害后會發(fā)生落葉、落果,嚴重時葉片落光,整株枯死。利用基因工程將來自水稻的Xa27基因導入柑橘可獲得抗柑橘潰瘍病的植株,利用植物組織離體培養(yǎng)技術則可培育無病毒植株?;卮鹣铝袉栴}:

(1)為了獲得脫毒苗,通??梢赃x取植株______附近的組織進行離體培養(yǎng),選取該部位組織的原因是______。

(2)如圖1表示科研人員利用柑橘幼苗獲得抗病轉基因植株的過程:

①基因表達載體必需的結構除復制原點、啟動子、終止子、目的基因外,還有______。

②共培養(yǎng)時,Ti質粒的作用是______。

③共培養(yǎng)后,要利用選擇培養(yǎng)基進行培養(yǎng),目的是______。

④再分化過程中,誘導愈傷組織生根、生芽的先后順序為______。

⑤從個體生物學水平鑒定柑橘再生植株時可采用______(填具體操作)的方法。經鑒定有幾棵植株沒有抗病的能力,分別提取這幾棵植株的DNA,依據(jù)______的特異性堿基序列設計引物,擴增后利用______進行檢測;結果如圖2。

據(jù)圖2分析,植株A、E、F不具有抗病能力的原因可能是______,植株B、C不具有抗病能力的原因可能是______。23、科學家的發(fā)現(xiàn)給人類的生活帶來了無限的想象;他們采集了某深海海域的沉積物樣品,分離;鑒定得到其中的深海放線菌,以期獲得具有前景的抗生素替代品。據(jù)此回答下列問題:

(1)研究人員欲篩選出深海放線菌進行研究,取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng),稀釋后取菌液通過_______________法接種到高氏一號(加數(shù)滴質量分數(shù)為10%的酚)培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

(2)通過PCR技術擴增分離得到的放線菌的16SrRNA基因可進行菌株的種屬鑒定。PCR技術中起關鍵作用的酶是_____________。該技術能在放線菌總的DNA中專一性擴增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR產物一般可通過_________________鑒定。

(3)科學家還將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉錄病毒轉入小鼠成纖維細胞中。2~3周后,這些細胞顯示出ES細胞的形態(tài)、具有活躍的分裂能力,它們就是iPS細胞。在這個實驗過程中,逆轉錄病毒的作用是_______________如何證明iPS細胞的產生不是由于培養(yǎng)基的作用?請寫出實驗設計思路______________24、T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子;可通過污染飼料引起畜禽中毒反應。CYP3A是豬體內降解T-2毒素的關鍵酶,T-2毒素可誘導CYP3A基因表達水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____(選填“初級”或“次級”)代謝產物,主要以_____方式進入豬細胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因啟動子上游的兩個調控序列,為研究T-2毒素誘導CYP3A基因表達的機理,研究者首先將不同調控序列分別和CYP3A基因啟動子及熒光素酶基因(LUC基因)連接構建表達載體,再分別導入豬肝細胞,然后向各組豬肝細胞培養(yǎng)液中加入_____,適宜條件下進行培養(yǎng);24h后檢測LUC酶活性,計算啟動子活性相對值,結果如圖1所示。據(jù)圖可知,B1和B2調控序列是CYP3A基因響應T-2毒素的核心元件,理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1兩種蛋白均參與T-2毒素對CYP3A的誘導;B2是Spl的結合位點。研究者推測,NF-Y通過與B1結合,與Sp1共同調控CYP3A基因的表達。

①為證明Bl是NF-Y的結合位點,研究者依據(jù)B1序列制備了野生型和突變型探針,分別與豬肝細胞核蛋白提取物混合,實驗分組及結果如圖2.據(jù)實驗結果推測,第4組出現(xiàn)阻滯帶的原因是_____,進而推測第5組結果產生的原因是_____。

②研究者設計實驗進一步證明了NF-Y和Spl通過互作共同發(fā)揮調控功能,實驗設計思路是:增大或縮小B1和B2兩者之間的距離,檢測CYP3A基因的啟動子活性。據(jù)此分析,實驗假設是_____。評卷人得分六、綜合題(共3題,共18分)25、某些微生物能通過合成纖維素酶而分解纖維素;請分析并回答下列問題。

(1)纖維素酶是一種復合酶,一般認為它至少包括三種組分,前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,第三種酶將纖維二糖分解成___________。

(2)某同學從牛胃中分離纖維素分解菌,然后進行培養(yǎng),需要向培養(yǎng)基中加入________制成固體培養(yǎng)基。在篩選纖維素分解菌的過程中,通常用_____________染色法;加入的物質能夠與纖維素結合形成紅色復合物,進而對纖維素分解菌進行篩選。

(3)若要獲得純化的菌株,常采用平板劃線的方法進行接種,接種過程中要對接種環(huán)采用____________(填“高壓蒸汽”或“灼燒”)的滅菌方法;注意要等冷卻后進行劃線。

(4)常見的菌種接種方法:________________法、________________法。

(5)另一同學在提取和分離纖維素酶的過程中,為了保證抵制外界酸和堿對酶活性的影響,采取的措施是向提取液和分離液中添加_____________________;若探究纖維素酶活性的最適溫度,應如何設置對照?________________________________。26、新型冠狀病毒是一種RNA病毒;其表面的棘突蛋白(簡稱S蛋白)是主要的病毒抗原。單克隆抗體既可作為診斷試劑,又可阻斷病毒的黏附和入侵,故抗體藥物的研發(fā)已成為治療新冠肺炎的研究熱點之一。制備抗S蛋白單克隆抗體的流程如下圖,請回答下列問題:

(1)步驟①必須給小鼠注射__________________,目的是__________________________;取小鼠的脾臟剪碎后用酶處理一段時間,再加入培養(yǎng)液可制成單細胞懸液。

(2)步驟④誘導融合操作后,體系中出現(xiàn)多種類型細胞的原因是____________________。

(3)步驟⑤培養(yǎng)的結果是__________________;還需進行步驟⑥的原因是______________________。

(4)步驟⑥含多次篩選,篩選依據(jù)的基本原理是_______________________________,選出的雜交瘤細胞的特點是_____________________________________________________________。27、發(fā)酵能讓食物改頭換面;擁有全新的模樣和味道。利用不同微生物的發(fā)酵作用制作食品歷史悠久,遍布民間,稱為傳統(tǒng)發(fā)酵技術。利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術制作的果酒;果醋、腐乳、泡菜極大地豐富了人們的飲食。請回答下列問題:

(1)果酒和果醋的制作:

①果酒發(fā)酵利用的微生物是酵母菌,其代謝類型是___________。

②果酒發(fā)酵結束后,接種醋酸菌可將果酒轉變成果醋,其總反應式為____________。

(2)腐乳的制作:

將長出毛霉的豆腐裝瓶加鹽腌制一段時間后,最上層的豆腐塊長出了黑毛和綠毛,原因可能是___________。在加鹵湯裝瓶階段,若制作的鹵湯中酒精含量過高,則會導致腐乳___________。市面上有近百種不同風味的腐乳,可能的原因是___________(答出2點)。

(3)泡菜的制作:

①泡菜制作離不開乳酸菌,常見的乳酸菌有___________。

②泡菜中的亞硝酸鹽在特定條件下(適宜的pH、溫度和一定的微生物的作用),可能轉變成致癌物___________。

③若制作的泡菜“咸而不酸”,最可能的原因是___________。參考答案一、選擇題(共5題,共10分)1、D【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)的條件:(1)無菌、無毒的環(huán)境:①消毒、滅菌;②添加一定量的抗生素;③定期更換培養(yǎng)液,以清除代謝廢物。(2)營養(yǎng)物質:糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等,還需加入血清、血漿等天然物質。(3)溫度和PH。(4)氣體環(huán)境:95%空氣(細胞代謝必需的)和5%的CO2(維持培養(yǎng)液的PH)。

【詳解】

A;培養(yǎng)動物細胞時;要用胰蛋白酶處理動物組織使細胞分散開,以獲得單個細胞,A錯誤;

B;高壓蒸汽滅菌可用于對培養(yǎng)基進行滅菌;動物細胞培養(yǎng)一般通過添加抗生素的方法避免雜菌污染,B錯誤;

C、細胞培養(yǎng)時,通常將培養(yǎng)裝置置于95%空氣加5%CO2的混合氣體培養(yǎng)箱中培養(yǎng);C錯誤;

D;在細胞培養(yǎng)過程中;當出現(xiàn)接觸抑制后,常常需要分瓶繼續(xù)培養(yǎng),這時需要用胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)將貼壁細胞分離開,形成單層細胞,D正確。

故選D。2、C【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)過程取動物胚胎或幼齡動物器官;組織。將材料剪碎;并用胰蛋白酶(或用膠原蛋白酶)處理(消化),形成分散的單個細胞,將處理后的細胞移入培養(yǎng)基中配成一定濃度的細胞懸浮液。懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上,稱為細胞貼壁。當貼壁細胞分裂生長到互相接觸時,細胞就會停止分裂增殖,出現(xiàn)接觸抑制。此時需要將出現(xiàn)接觸抑制的細胞重新使用胰蛋白酶處理。再配成一定濃度的細胞懸浮液。另外,原代培養(yǎng)就是從機體取出后立即進行的細胞、組織培養(yǎng)。

【詳解】

A;結合分析可知;動物細胞培養(yǎng)的過程中通常會出現(xiàn)細胞貼壁生長的現(xiàn)象,A正確;

B;胚胎干細胞經過誘導可分化成多種組織細胞;因而可以用于治療人類的某些疾病,B正確;

C;動物細胞培養(yǎng)過程中需使用胰蛋白酶將組織細胞分散成單個細胞制成單細胞懸液;而不能使用胃蛋白酶,C錯誤;

D;動物細胞培養(yǎng)液中通常需加入血清、血漿等天然成分;從而有利于動物細胞增殖,D正確。

故選C。

【點睛】3、C【分析】【分析】

1;PCR技術的條件:模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)。

2;在反應體系中;首先加熱至90~95℃,此時模板DNA在高溫條件下變性,即其中的氫鍵斷裂,解開為單鏈,接著反應體系中溫度降低,兩種引物分別與解開的兩條單鏈之間形成氫鍵完成中溫復性的過程,然后體系中溫度上升體系中的游離的脫氧核苷酸依次連在引物上開始中溫延伸過程。

【詳解】

A;目前新型冠狀病毒的檢測方法主要集中在核酸和抗體檢測上;因抗體的產生需要一個免疫過程,與抗體檢測相比,核酸檢測的優(yōu)點是早期診斷、靈敏度和特異性高等,故核酸檢測能夠檢測到早期患者和無癥狀感染者,A正確;

B;新冠病毒的遺傳物質為RNA;要先將病毒RNA逆轉錄,再將得到的cDNA進行多聚酶鏈式反應擴增得到了大量DNA片段,故PCR的模板實際上是逆轉錄得到的cDNA,B正確;

C;由于PCR反應體系加熱至95℃時;逆轉錄酶會變性失活,因此逆轉錄酶不能在每次循環(huán)中都發(fā)揮作用,C錯誤;

D;RT-PCR技術(聚合酶鏈式反應)是在實驗室以少量樣品制備大量DNA的一項生化技術;反應系統(tǒng)中包括微量DNA樣品、耐高溫的DNA聚合酶、引物、4種脫氧核苷酸、逆轉錄酶等,D正確。

故選C。

【點睛】4、C【分析】【分析】

1;植物組織培養(yǎng)過程是:離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織;然后再分化生成根、芽,最終形成植物體.植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細胞的全能性。

2;培育無病毒植株苗;應選擇不含病毒部分培養(yǎng),而植物體新生部位不含病毒,如根尖和莖尖。

【詳解】

進行植物微型繁殖時常采用莖尖或根尖作為外植體;原因是莖尖或根尖病毒極少,因此切取一定大小的莖尖或根尖進行組織培養(yǎng),再生的植株就可能不帶病毒,C正確;

故選C。5、B【分析】【分析】

動物細胞核移植技術是將動物一個細胞的細胞核移入去核的卵母細胞中;使這個重新組合的細胞發(fā)育成新胚胎,繼而發(fā)育成動物個體的技術。

【詳解】

A;MⅡ期的卵母細胞含有激發(fā)細胞核全能性的物質;有利于細胞核全能性的恢復,A正確;

B、用物理或化學方法(如電刺激、Ca2+載體;乙醇、蛋白酶合成抑制劑等)激活重構胚;使其完成細胞分裂和發(fā)育進程,PEG、滅活的病毒可以誘導細胞融合,B錯誤;

C;克隆猴的遺傳物質大部分來自供體體細胞;少部分來自去核卵母細胞,所以克隆猴的遺傳物質與供體體細胞不完全一致,C正確;

D;培養(yǎng)供體體細胞的培養(yǎng)液中常需添加動物血清以補充其發(fā)育所需物質;D正確。

故選B。二、多選題(共5題,共10分)6、B:C:D【分析】【分析】

轉基因動物生產藥物:

(1)基因來源:藥用蛋白基因+乳腺組織特異性表達的啟動子(原理:基因的選擇性表達)。

(2)成果:乳腺生物反應器。

(3)過程:將藥物蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調控組件重組在一起;導入哺乳動物的受精卵中,最終培育的轉基因動物進入泌乳期后,可以通過分泌的乳汁生產所需要的藥物。(只有在產下雌性動物個體中,轉入的基因才能表達)。

【詳解】

A;將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法;因此可用顯微注射技術將含有人凝血因子基因的重組DNA分子導入羊的受精卵,A正確;

B;在該轉基因羊中;人凝血因子存在于所有細胞中,但只在乳腺細胞中表達,B錯誤;

C;人凝血因子基因開始轉錄后;RNA聚合酶以DNA分子一條鏈為模板合成mRNA,C錯誤;

D;科學家將人凝血因子基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調控組件重組在一起;從而使人凝血因子基因只在乳腺細胞中特異表達,D錯誤。

故選BCD。7、A:C:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鑒定的原理:

1;DNA的溶解性:DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同(DNA在0.14mol/L的氯化鈉中溶解度最低);DNA不溶于酒精溶液;但細胞中的某些蛋白質溶于酒精。

2;DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。

3;DNA的鑒定:在沸水浴的條件下;DNA遇二苯胺會被染成藍色。

【詳解】

A;DNA不溶于酒精溶液;但DNA既溶于2mol/L的NaCl溶液,也溶于蒸餾水,A正確;

B;洗滌劑能瓦解細胞膜;但不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度,B錯誤;

C;DNA在濃度為0.14mol/LNaCl溶液中的溶解度最低;因此用蒸餾水將NaCl溶液濃度調至0.14mol/L或加入冷酒精后過濾,都可以去除部分雜質,C正確;

D;在酸性條件下;DNA與二苯胺試劑反應,最終產生藍色物質,因此常用二苯胺試劑鑒定DNA,D正確。

故選ACD。8、D【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)的過程:取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)液中(原代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞;制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)液(傳代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

【詳解】

A;在動物細胞培養(yǎng)的過程中;當出現(xiàn)接觸抑制后,細胞克隆停止增殖,A正確;

B;在細胞分裂的過程中;可能會發(fā)生基因突變,因此,克隆細胞與接種的細胞的遺傳信息不一定相同,B正確;

C;胰蛋白酶可使細胞分散成單個;從而利于計數(shù),C正確;

D;需采用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)才能形成細胞克??;D錯誤。

故選D。9、B:C【分析】【分析】

1;DNA復制過程為:

(1)解旋:需要細胞提供能量;在解旋酶的作用下,兩條螺旋的雙鏈解開。

(2)合成子鏈:以解開的每一段母鏈為模板;在DNA聚合酶等酶的作用下,利用游離的4種脫氧核苷酸為原料,按照堿基互補配對原則,合成與母鏈互補的子鏈。

(3)形成子代DNA分子:延伸子鏈;母鏈和相應子鏈盤繞成雙螺旋結構。

2;特點:邊解旋邊復制;復制方式:半保留復制。

3;條件:模板是親代DNA分子的兩條鏈;原料是游離的4種脫氧核苷酸;能量是ATP;酶是解旋酶、DNA聚合酶。

【詳解】

A;定點突變改變特定位點的核苷酸;先是人工合成誘變寡核苷酸引物,隨后經過延伸和復制,產生新的突變基因,A正確;

B;誘變寡核苷酸引物的延伸需要消耗四種脫氧核苷酸;B錯誤;

C;突變基因的合成以正常基因的單鏈為模板;C錯誤;

D;延伸過程中遵循堿基互補配對原則;該過程需要將脫氧核苷酸連接起來,所以需要DNA聚合酶的催化,D正確。

故選BC。10、A:B:D【分析】【分析】

胚胎干細胞:

1;哺乳動物的胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞;來源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來;

2;具有胚胎細胞的特性;在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小,細胞核大,核仁明顯;在功能上,具有發(fā)育的全能性,可分化為成年動物體內任何一種組織細胞;另外,在體外培養(yǎng)的條件下,可以增殖而不發(fā)生分化,可進行冷凍保存,也可進行遺傳改造。

【詳解】

A;滋養(yǎng)層細胞將來能發(fā)育成胎膜和胎盤;A正確;

B;利用核移植所得胚胎干細胞;可以誘導發(fā)育成適合移植的器官,可減少免疫排斥反應,B正確;

C;胚胎分割時應該選擇形態(tài)正常、發(fā)育良好的桑葚胚或囊胚;C錯誤;

D;“擬原腸胚”模型可以研究酒精、藥物和病原體對胚胎發(fā)育的影響;D正確。

故選ABD。三、填空題(共7題,共14分)11、略

【解析】①.動物細胞培養(yǎng)和核移植技術、②.動物細胞融合與單克隆抗體12、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】菌落數(shù)30~30013、略

【分析】【詳解】

生物信息學是研究生物信息的采集、處理、存儲、傳播,分析和解釋等各方面的學科,也是隨著生命科學和計算機科學的迅猛發(fā)展,生命科學和計算機科學相結合形成的一門新學科,生物信息學主要是核酸和蛋白質序列數(shù)據(jù)的計算機處理和分析?!窘馕觥可镄畔W是研究生物信息的采集、處理、存儲、傳播,分析和解釋等各方面的學科,也是隨著生命科學和計算機科學的迅猛發(fā)展,生命科學和計算機科學相結合形成的一門新學科14、略

【分析】略【解析】營養(yǎng)無菌、無毒的環(huán)境適宜的溫度、pH和滲透壓氣體環(huán)境15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因的檢測和鑒定16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因DNA分子雜交技術。17、略

【分析】【詳解】

蛋白質工程是指以蛋白質分子的結構規(guī)律及其生物功能的關系作為基礎,通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質進行改造,或制造一種新的蛋白質,其結果是生產自然界沒有的蛋白質。【解析】蛋白質工程的結果是生產自然界沒有的蛋白質四、判斷題(共3題,共27分)18、B【分析】【詳解】

胚胎發(fā)育早期;細胞數(shù)量不斷增加,但胚胎總體積不變或略有縮小。

故錯誤。19、A【分析】【詳解】

微生物具有生理結構和遺傳物質簡單的優(yōu)點,便于研究,生長周期短,具有生長繁殖快的優(yōu)點,遺傳物質簡單,具有容易進行遺傳物質操作的優(yōu)點,對環(huán)境因素敏感,因此對微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最廣泛和取得實際應用成果最多的領域,這句話是正確的。20、A【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。生物武器種類包括致病菌、病毒、生化毒劑以及經過基因重組的致病菌等。故該說法正確。五、實驗題(共4題,共32分)21、略

【分析】【詳解】

(1)植物芳香油的提取方法有蒸餾、壓榨和萃取等。具體采用哪種方法要根據(jù)植物原料的特點來決定。柚皮易焦糊,宜采用壓榨法提取柚皮精油。壓榨過程中得到的糊狀液體需用過濾法除去其中固定雜質。

(2)篩選、純化培養(yǎng)某一特定微生物時,常用平板劃線法或稀釋涂布平板法。為防止雜菌的污染,需對器具培養(yǎng)基等進行消毒滅菌處理,培養(yǎng)基宜采用高壓蒸汽滅菌鍋進行高溫滅菌處理,而超凈工作臺常使用紫外線或化學藥物進行消毒處理。

(3)微生物培養(yǎng)過程中為微生物的生長提供氮源的有尿素、蛋白胨等含氮豐富的物質。電泳法純化特定生物成分,是利用了待分離樣品中各種分子帶電性質的差異以及分子本身的大小、形狀的不同,這些不同使帶電分子產生不同的遷移速度,從而實現(xiàn)樣品中不同分子的分離。當待分離分子所帶電荷相同時,分子量越大,電泳速度越慢。

(4)抑菌實驗時;在長滿致病菌的平板上,會出現(xiàn)以抑菌物質為中心的透明圈,透明圈越大,抑菌效果越好。

【點睛】【解析】①.壓榨②.過濾③.稀釋涂布平板法(或:稀釋混合平板法)④.高壓蒸汽滅菌鍋⑤.消毒⑥.氮源⑦.越慢⑧.直徑(或:大小)22、略

【分析】【分析】

1;基因工程的基本操作步驟:①目的基因的獲取和篩選;②基因表達載體的構建;③將目的基因導入受體細胞;④目的基因的檢測與鑒定;

2;植物頂端分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少;甚至無病毒,切取一定大小的莖尖進行組織培養(yǎng),再生的植株就有可能不帶病毒,從而獲得脫毒苗。

【詳解】

(1)為了獲得脫毒苗;通常選取植株莖尖(或頂端分生區(qū)附近的組織)進行離體培養(yǎng),選取該組織的原因是此處病毒極少甚至無病毒。

(2)①基因表達載體上除有復制原點;啟動子、終止子、目的基因外;還有標記基因(便于篩選目的基因);

②農桿菌Ti質粒上的T-DNA片段可以攜帶目的基因并整合至植物細胞的染色體DNA上;

③選擇培養(yǎng)的目的是篩選出含有目的基因的柑橘細胞;

④先誘導生芽有利于生根;故再分化階段,需要先誘導愈傷組織生芽,待長出芽后,再將其轉接到誘導生根的培養(yǎng)基上,進一步誘導形成試管苗;

⑤在個體生物學水平可用接種地毯草黃單胞桿菌(或噴施地毯草黃單胞桿菌菌液)的方法,觀察植株是否患有柑橘潰瘍病來直接鑒定再生植株;分析再生植株沒有抗病能力的原因,可以提取各植株的DNA,依據(jù)Xa27基因(目的基因)的特異性堿基序列設計引物,擴增后用(凝膠)電泳分離PCR產物進行檢測;植株B、C沒有出現(xiàn)條帶,則可能是因為沒有導入目的基因;植株A、E、F出現(xiàn)條帶但不具有抗病能力,則可能是因為導入植物細胞的目的基因不能轉錄或轉錄后未翻譯或翻譯出的蛋白質沒有活性等?!窘馕觥?1)莖尖(或頂端分生區(qū))此處病毒極少甚至無病毒。

(2)標記基因攜帶目的基因并整合至植物細胞的染色體DNA上篩選出含有目的基因的植物細胞先誘導生芽,再誘導生根接種地毯草黃單胞桿菌(或噴施地毯草黃單胞桿菌菌液)Xa27基因(凝膠)電泳導入植物細胞的目的基因不能表達(或不能轉錄,轉錄后不能翻譯,翻譯出的蛋白質沒有活性等,合理即可)沒有導入目的基因23、略

【分析】【分析】

PCR原理:在解旋酶作用下;打開DNA雙鏈,每條DNA單鏈作為母鏈,以4種游離脫氧核苷酸為原料,合成子鏈,在引物作用下,DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈,即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內DNA的復制過程。DNA的復制需要引物,其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

【詳解】

(1)分析題意可知;研究人員取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng),稀釋后可通過稀釋涂布平板法接種到培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

(2)PCR技術是一項通過體外控制溫度擴增DNA的技術,該技術中由于溫度較高,起關鍵作用的酶是耐高溫DNA聚合酶;PCR擴增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段,分析題意,該技術能在放線菌總的DNA中專一性擴增出16SrRNA基因的原因是:引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設計合成的;PCR產物一般可通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定:凝膠中的DNA分子通過染色;可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來。

(3)分析題意,科學家將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉錄病毒轉入小鼠成纖維細胞中,該過程中逆轉錄病毒是載體,能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細胞;分析題意,實驗目的是iPS細胞的產生不是由于培養(yǎng)基的作用,故實驗的自變量是外源基因的有無,因變量是IPS細胞的產生情況,實驗設計應遵循對照與單一變量原則,故可設計實驗如下:將轉入外源基因的細胞和沒有轉入外源基因的細胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中,在相同且適宜的條件下,如果只有轉入外源基因的細胞轉化成了iPS細胞,則可以證明iPS細胞的產生不是由于培養(yǎng)基的作用。【解析】(1)稀釋涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高溫DNA聚合酶引物能與16SrRNA基因特異性結合(引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設計合成的)瓊脂糖凝膠電泳。

(3)逆轉錄病毒是載體,能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細胞。將轉入外源基因的細胞和沒有轉入外源基因的細胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中,在相同且適宜的條件下,如果只有轉入外源基因的細胞轉化成了iPS細胞,則可以證明iPS細胞的產生不是由于培養(yǎng)基的作用24、略

【分析】【分析】

圖1可知:T-2毒素是一種常見的菌素;CYP3A是降解T-2毒素的關鍵酶,T-2毒素可誘導其表達水平升高,當用兩種調控序列同時連接啟動子,啟動子的活性最高。

圖2可知:野生型探針能與NF-Y結合;突變型探針不能與NF-Y結合,NF-Y抗體一定能與NF-Y結合。

【詳解】

(1)初級代謝產物一般是霉菌生命活動所必需的,大多存在于細胞內。次級代謝產物不是霉菌生命活動必需的,并且分泌到體外,故T-2毒素是霉菌的次級代謝產物。T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子,脂溶性小分子以自由擴散的方式進入細胞。

(2)實驗的自變量是有無調控序列;根據(jù)單一變量原則,對照組的目的是為了排除無光變量的影響,除了沒有調控序列,其他處理和實驗組相同,所以對照組和實驗組豬肝細胞均導入含CYP3A基因啟動子及LUC基因的表達載體,然后向各組豬肝細胞培養(yǎng)液中加入加入等量T-2毒素,適宜條件下進行培養(yǎng)。從圖中信息可知,缺失兩個調控序列和對照組活性一致,缺失一個比對照組活性略強,兩個都存在活性最高,說明這兩個調控序列是CYP3A基因響應T-2毒素的核心元件。故缺失兩個調控序列或其中任一個,T-2毒素都不能誘導啟動子活性明顯增強。

(3)①實驗的目的是要驗證NF-Y能與B1結合;根據(jù)第2組和第3組結果,依據(jù)B1序列制備的NF-Y結合位點野生型探針能與NF-Y結合,根據(jù)第4組結果,突變型探針不能與NF-Y結合。第5組加入了NF-Y抗體,一定能與NF-Y結合。故可以解釋為:結合位點突變的探針不能結合核蛋白中的NF-Y,也不會競爭NF-Y與標記探針的結合,所以第4組與第2組同樣位置出現(xiàn)阻滯帶。第5組,NF-Y的抗體結合NF-Y,因此第5組中出現(xiàn)標記探針;NF-Y和NF-Y抗體的結合物,結合物分子量大,阻滯帶的位置更靠后。

②假設NF-Y和Sp1通過互作共同發(fā)揮調控功能,它們之間的距離是發(fā)揮作用的最佳距離,故增大或縮小B1和B2兩者之間的距離都會降低CYP3A基因的啟動子的活性?!窘馕觥?1)次級自由擴散。

(2)等量的T-2毒素缺失兩個調控序列或其中任一個;T-2毒素都不能誘導啟動子活性增強。

(3)結合位點突變的探針不能結合核蛋白中的NF-Y,也不會競爭NF-Y與標記探針的結合,所以第4組與第2組同樣位置出現(xiàn)阻滯帶。NF-Y的抗體結合NF-Y,因此第5組中出現(xiàn)標記探針、NF-Y和NF-Y抗體的結合物,結合物分子量大,阻滯帶的位置更靠后。NF-Y和Sp1通過互作共同發(fā)揮調控功能,它們之間的距離是發(fā)揮作用的最佳距離。六、綜合題(共3題,共18分)25、略

【分析】【分析】

纖維素的單體是葡萄糖,纖維素酶能夠將纖維素分解為葡萄糖。纖維素酶是一種復合酶,包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。纖維素分解菌可以用剛果紅染液進行鑒別;能夠產生透明圈的菌落就是纖維素分解菌。

(1)

纖維素酶是一種復合酶,包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶;前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。

(2)

配置固體培養(yǎng)基;需要向培養(yǎng)基中加入瓊脂。利用剛果紅染色法來篩選纖維素分解菌,剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物。當培養(yǎng)基中的纖維素被纖維素酶分解后,剛果紅-纖維素的復合物就無法形成,培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。

(3)

接種環(huán)一般采用灼燒滅菌法。

(4)

常見的菌種接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。

(5)

在提取液和分離液中添加緩沖溶液可保證液體的pH不受干擾。若探究纖維素酶活性的最適溫度;自變量為溫度,應設置不同的溫度梯度進行相互對照。

【點睛】

本題主要考查纖維素分解菌的相關知識,意在強化學生對纖維素分解菌的相關知識點的識記與理解?!窘馕觥浚?)葡萄糖。

(2)瓊脂剛果紅。

(3)灼燒。

(4)平板劃線稀釋涂布平板。

(5)緩沖溶液設置不同的溫度梯度進行相互對照26、略

【分析】【分析】

制備單克隆抗體的具體過程:用目的抗原免疫小鼠;使小鼠產生經過免疫的B淋巴細胞→誘導各種淋巴細胞可與骨髓瘤細胞發(fā)生融合,形成雜交瘤細胞→在選擇性培養(yǎng)基中,未融合的骨髓瘤細胞;未融合的淋

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