2025年滬科版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年滬科版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、下列關(guān)于生物技術(shù)的安全性和倫理問(wèn)題的分析，不合理的觀點(diǎn)是A.試管嬰兒技術(shù)可廣泛用于設(shè)計(jì)嬰兒性別B.我國(guó)的政策是禁止進(jìn)行生殖性克隆人C.禁止運(yùn)用基因重組技術(shù)將致病菌等改造成生物武器D.轉(zhuǎn)基因生物合成的某些蛋白質(zhì)可能成為某些人的過(guò)敏源2、下列有關(guān)“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是（）A.隨NaCl溶液濃度增大，DNA的溶解度逐漸增大B.新鮮的豬血中不含DNA，新鮮的雞血中含DNAC.在酒精溶液中，某些蛋白質(zhì)的溶解度大于DNA的溶解度D.在50～60℃水浴中，DNA遇二苯胺試劑后即呈藍(lán)色3、腫瘤壞死因子（TNF）在體內(nèi)和體外均能殺死某些腫瘤細(xì)胞或抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，科研人員欲利用乳腺生物反應(yīng)器大量生產(chǎn)TNF，用于臨床上疾病的治療。已知HindⅢ、BamHI、BglⅡ和PstI為限制性內(nèi)切核酸酶，識(shí)別的序列均不相同。下列關(guān)于基因工程中重組質(zhì)粒構(gòu)建的說(shuō)法，正確的是（）

A.可選用PstI，BglⅡ和HindⅢ、BglⅡ兩種組合切割質(zhì)粒和目的基因B.可用DNA連接酶或DNA聚合酶連接TNF基因和切割開(kāi)的質(zhì)粒C.啟動(dòng)子指的就是起始密碼子，可驅(qū)動(dòng)TNF基因的轉(zhuǎn)錄過(guò)程D.四環(huán)素抗性基因?qū)儆跇?biāo)記基因，便于鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因4、下列關(guān)于“DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定”的實(shí)驗(yàn)，說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.PCR利用了DNA的熱變性原理，通過(guò)調(diào)節(jié)溫度來(lái)控制B.PCR的產(chǎn)物一般要通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定C.凝膠中DNA分子的遷移速率只與DNA分子的大小有關(guān)D.為避免外源DNA等因素的污染，PCR實(shí)驗(yàn)中使用的工具也需要滅菌處理5、下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是（）A.提取細(xì)胞中的DNA必須用蒸餾水漲破細(xì)胞B.常溫下菜花勻漿中有些酶類會(huì)影響DNA的提取C.將絲狀物加入二苯胺試劑，沸水浴冷卻后呈藍(lán)色D.DNA溶于95%的冷酒精，所以可用95%的冷酒精進(jìn)一步提純?cè)u(píng)卷人得分二、多選題(共9題，共18分)6、2016年初；首位由“三合一”胚胎人工授精技術(shù)培育的嬰兒出生，其培有過(guò)程如下圖所示。下列相關(guān)說(shuō)法正確的是（）

A.“三親嬰兒”孕育過(guò)程中使用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、核移植等技術(shù)B.融合激活后的卵母細(xì)胞要培養(yǎng)到MII中期才能完成受精作用C.卵母細(xì)胞A的捐獻(xiàn)者攜帶的血友病基因能遺傳給“三親嬰兒”D.“三親嬰兒”培育技術(shù)可以用來(lái)避免細(xì)胞質(zhì)遺傳病的遺傳7、近年來(lái)；全人源化單克隆抗體技術(shù)發(fā)展迅速，利用轉(zhuǎn)基因鼠技術(shù)進(jìn)行全人源化單克隆抗體的制備流程如圖所示，下列說(shuō)法正確的是（）

A.該技術(shù)能降低單克隆抗體藥物的免疫排斥反應(yīng)B.過(guò)程①②采用核移植技術(shù)，體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞核的全能性C.過(guò)程⑧要經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)基篩選、克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)等過(guò)程D.體外培養(yǎng)B細(xì)胞也可以大量獲得針對(duì)該抗原的單克隆抗體8、為探究提高“日照藍(lán)莓”品質(zhì)和產(chǎn)量的新途徑，某生物興趣小組以“日照藍(lán)莓”的主要品種——兔眼藍(lán)莓為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行脫毒處理，其技術(shù)路線為“取材→消毒→愈傷組織培養(yǎng)→出芽→生根→移栽”。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.取材時(shí)可選用兔眼藍(lán)莓的芽尖等分生組織作為外植體B.用70%酒精和5%左右次氯酸鈉對(duì)外植體消毒時(shí)，要控制好時(shí)間以避免造成傷害C.對(duì)分化培養(yǎng)基滅菌前需添加生長(zhǎng)素類、細(xì)胞分裂素類和赤霉素類等生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑D.脫毒后的兔眼藍(lán)莓果實(shí)體積更大，產(chǎn)量更高，后代個(gè)體中更不易被病毒感染9、在進(jìn)行擬矮牽牛和矮牽牛的種間原生質(zhì)體融合時(shí)，利用親本材料對(duì)藥物抗性的差異來(lái)選擇雜種細(xì)胞的過(guò)程如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.只有雜種細(xì)胞能在含放線菌素D的MS培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng)B.同一株植物的不同細(xì)胞經(jīng)離體培養(yǎng)獲得的再生苗基因型可能不相同C.②中的融合過(guò)程一定要在無(wú)菌水中進(jìn)行，防止雜菌污染D.通過(guò)③得到的愈傷組織等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子10、下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞工程操作的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中除了加入細(xì)胞所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需要加入瓊脂B.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交都能形成雜種個(gè)體C.干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等，有著自我更新能力及分化潛能D.動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植11、基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.若某基因是從人的細(xì)胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，則該基因中不含啟動(dòng)子序列B.擴(kuò)增目的基因時(shí)，利用耐高溫的DNA聚合酶從引物a、b的3'－端進(jìn)行子鏈合成C.導(dǎo)入人血清白蛋白基因的綿羊受體細(xì)胞是乳腺細(xì)胞D.利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可將含有目的基因的重組質(zhì)粒整合到植物受體細(xì)胞的染色體DNA上12、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的過(guò)程中兩種引物分別為A和B，其原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類似。下列敘述正確的是（）A.從理論上推測(cè)，第二輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物A的DNA片段占3/4B.在第二輪循環(huán)產(chǎn)物中開(kāi)始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長(zhǎng)的DNA片段C.引物之間或引物自身發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)則不能擴(kuò)增目的基因D.耐熱的DNA聚合酶總將游離的脫氧核苷酸連接到3’端13、下列關(guān)于限制酶和DNA連接酶的理解，錯(cuò)誤的是（）A.限制酶能在特定部位的兩個(gè)核苷酸之間切斷磷酸二酯鍵B.DNA連接酶可以恢復(fù)DNA分子中的氫鍵，將兩條DNA片段的黏性末端之間的縫隙連接起來(lái)C.在基因工程操作中，可以用DNA聚合酶代替DNA連接酶D.限制酶廣泛存在于動(dòng)植物體內(nèi)，微生物內(nèi)很少分布14、圖甲為培育轉(zhuǎn)基因生物時(shí)選用的載體，圖乙是含有目的基因的一段DNA序列，圖中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.若通過(guò)PCR技術(shù)提取該目的基因，應(yīng)該選用引物a和引物cB.構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)應(yīng)選用BamHⅠ和HindⅡ這兩種限制酶C.圖乙中一個(gè)DNA分子在PCR儀中經(jīng)過(guò)四輪復(fù)制得到所需目的基因的分子數(shù)為8個(gè)D.只利用含四環(huán)素的培養(yǎng)基就可以直接篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的受體細(xì)胞評(píng)卷人得分三、填空題(共5題，共10分)15、在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？____________________________16、原核基因采取______獲得，真核基因是______。人工合成目的基因的常用方法有______和______。17、來(lái)源：主要是從______中分離純化出來(lái)的。18、通過(guò)____________的方式，來(lái)控制NaCL溶液的濃度，使DNA在鹽溶液中溶解或析出。19、科學(xué)家采用定點(diǎn)誘變的方法構(gòu)建T4溶菌酶的新蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其中一種新蛋白質(zhì)的第9和第164位氨基酸殘基被轉(zhuǎn)換為半胱氨酸殘基，并形成一個(gè)二硫鍵。這種新蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性會(huì)有什么變化？這項(xiàng)技術(shù)的要點(diǎn)是什么？_________評(píng)卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共40分)20、單克隆抗體特異性強(qiáng)；靈敏度高，用于診療疾病具有準(zhǔn)確；高效等特點(diǎn)。下圖表示單克隆抗體制備過(guò)程。

回答下列問(wèn)題：

（1）若細(xì)胞B是小鼠的骨髓瘤細(xì)胞；則A是_________________細(xì)胞，誘導(dǎo)d過(guò)程常用的因素是_________________（答出一個(gè)即可）。

（2）用于篩選細(xì)胞D的培養(yǎng)基必需滿足兩個(gè)條件：一是_________________細(xì)胞都會(huì)死亡；二是保證_________________細(xì)胞能生長(zhǎng)。

（3）使用合成培養(yǎng)基體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞時(shí)；通常需要加入_________________等一些天然成分，并置于含有_________混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（4）制備抗新冠病毒單克隆抗體檢測(cè)試劑，可用_________________（選填數(shù)字標(biāo)號(hào)：①新冠病毒滅活疫苗、②新冠病毒RNA疫苗、③新冠病毒滅活疫苗或RNA疫苗）免疫小鼠，以獲得圖中的A細(xì)胞。21、如圖為釀制葡萄酒的兩個(gè)簡(jiǎn)易裝置；請(qǐng)分析回答：

（1）制作果酒與果醋的菌種在結(jié)構(gòu)上最主要的區(qū)別在于前者有_____，后者應(yīng)將溫度控制在_____℃

（2）甲裝置中，A液體是_____，NaHCO3溶液的作用是_____；若用乙裝置，在發(fā)酵過(guò)程中，必須進(jìn)行的操作是每隔12小時(shí)左右將瓶蓋_____一次。

（3）將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí)，要留有大約1/3的空間，這是因?yàn)開(kāi)__________

（4）果酒制作是否成功，需發(fā)酵后取樣鑒定，可用_____試劑檢驗(yàn)。

（5）醋酸菌可以利用果酒進(jìn)行發(fā)酵，請(qǐng)寫(xiě)出相應(yīng)反應(yīng)式：_________________22、《傷寒論》中記載的芍藥甘草湯是由芍藥和甘草兩味藥物制成，具有調(diào)和肝脾，緩急止痛的作用，芍藥和甘草的主要活性成分分別為芍藥苷和甘草酸。科研團(tuán)隊(duì)通過(guò)制備抗芍藥苷的單克隆抗體，將其純化后結(jié)合在固相載體上，讓芍藥甘草湯流過(guò)，去除湯中芍藥苷，用于探究芍藥苷與芍藥甘草湯對(duì)小鼠鎮(zhèn)痛作用的相關(guān)性。回答下列問(wèn)題。

(1)制備單克隆抗體依賴的生物技術(shù)有______________、_________________等。將芍藥苷與蛋白質(zhì)結(jié)合作為抗原，定期間隔免疫小鼠，取免疫后的小鼠脾臟，剪碎并用_____________酶處理得到小鼠脾臟細(xì)胞。

(2)圖中誘導(dǎo)其與骨髓瘤細(xì)胞融合的試劑X是____________，經(jīng)選擇培養(yǎng)篩選出的細(xì)胞Y具有________________________特點(diǎn)。用多孔培養(yǎng)板培養(yǎng)細(xì)胞Y并收集上清液，利用___________________技術(shù)對(duì)上清液進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)。

(3)研究人員將生理狀態(tài)相同的小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、造模組進(jìn)行如下處理，造模組前期已完成冰醋酸致痛處理（冰醋酸能引起深部的、大面積且較持久的疼痛刺激，此時(shí)小鼠會(huì)出現(xiàn)扭體反應(yīng)）。請(qǐng)完善實(shí)驗(yàn)方案。。組別前期處理后期處理對(duì)照組腹腔注射生理鹽水I造模組腹腔注射冰醋酸模型組：口服生理鹽水陽(yáng)性藥組：口服芍藥甘草湯陽(yáng)性藥組：口服芍藥甘草湯實(shí)驗(yàn)組：Ⅱ?qū)嶒?yàn)組：Ⅱ

①表中I的處理是_____________、Ⅱ的處理_______________。

②結(jié)果與分析：

若前期處理后，造模組小鼠扭體次數(shù)顯著__________對(duì)照組，表明致痛處理成功。后期處理結(jié)束后測(cè)定各組小鼠扭體次數(shù)，若結(jié)果為_(kāi)_____________________，則表明芍藥苷是芍藥甘草湯中發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用的重要成分之一。23、黏多糖貯積癥是由IDUA基因突變導(dǎo)致的遺傳病?？蒲腥藛T對(duì)此病的治療進(jìn)行相關(guān)研究。

(1)黏多糖貯積癥患者細(xì)胞中IDUA基因由于堿基對(duì)___________造成突變，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長(zhǎng)度不變但提前出現(xiàn)終止密碼子，最終導(dǎo)致合成的IDUA酶分子量___________；與正常IDUA酶的空間結(jié)構(gòu)差異顯著而失去活性，積累過(guò)多的黏多糖無(wú)法及時(shí)清除，造成人體多系統(tǒng)功能障礙。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)、功能相同，但它的反密碼子可以與終止密碼子配對(duì)。在上述這一類突變基因的翻譯過(guò)程中，加入sup-tRNA可以發(fā)揮的作用是___________；從而誘導(dǎo)通讀獲得有功能的全長(zhǎng)蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以攜帶不同氨基酸；為比較它們的通讀效果，科研人員進(jìn)行了相關(guān)研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖。

注：“-”代表未加入。

據(jù)圖分析，實(shí)驗(yàn)組將___________基因?qū)胧荏w細(xì)胞，并采用___________技術(shù)檢測(cè)導(dǎo)入基因的表達(dá)情況。據(jù)結(jié)果分析，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人員利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對(duì)IDUA突變基因純合小鼠及IDUA基因敲除小鼠進(jìn)行治療，檢測(cè)肝臟細(xì)胞IDUA酶活性和組織黏多糖的積累量，與不治療的小鼠相比較，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為_(kāi)____________，表明攜帶酪氨酸的sup-tRNA可以治療黏多糖貯積癥。評(píng)卷人得分五、綜合題(共2題，共18分)24、青蒿素是有效的抗瘧疾藥物，但野生黃花蒿中青蒿素的產(chǎn)量較低。為緩解青蒿素供應(yīng)不足的狀況，科學(xué)家將tms基因和tmr基因?qū)朦S花蒿的愈傷組織；獲得了黃花蒿的冠癭組織，改造過(guò)程用到的部分結(jié)構(gòu)如圖所示。

（1）科學(xué)家將目的基因?qū)朦S花蒿愈傷組織細(xì)胞的常用方法是_____________________。

（2）圖中結(jié)構(gòu)P、T是基因成功轉(zhuǎn)錄的保證，其中結(jié)構(gòu)P位于基因的首端，其作用是__________________________。為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，并將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)，圖中還缺少的結(jié)構(gòu)是_________________________。構(gòu)建重組DNA的目的是_________________________________________________。

（3）要檢測(cè)目的基因是否插入到冠癭組織細(xì)胞的染色體DNA上，可采用_______________技術(shù)。該技術(shù)的原理是____________________________。

（4）與愈傷組織相比，冠癭組織的生長(zhǎng)速度更快，原因可能是________________________。25、四尾柵藻是一種淡水藻類；繁殖快；適應(yīng)性強(qiáng)，可作為制備生物柴油的重要原料之一。為提高四尾柵藻油脂含量，研究人員將從含油量高的紫蘇中獲得的二酰甘油?；D(zhuǎn)移酶基因（DGAT1）與pBI121質(zhì)粒構(gòu)建表達(dá)載體，經(jīng)轉(zhuǎn)化成功獲得高產(chǎn)油脂四尾柵藻，研究過(guò)程如下圖，其中DGAT1-F（5'-GCATCTAGAATGGCGATCTTGGACTC-3'）和DGATI-R（5'-CGGATCCCTACCTTGCACTAGCTTTTC-3'）是以DGATI基因?yàn)橐罁?jù)設(shè)計(jì)的一對(duì)引物，1acZ基因編碼產(chǎn)物在X-gal和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。

(1)過(guò)程②應(yīng)選用的限制酶是__________和__________。

(2)過(guò)程③經(jīng)轉(zhuǎn)化的大腸桿菌接種到培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，為篩選獲得目標(biāo)菌株，培養(yǎng)基應(yīng)加入的成分有__________、__________；IPTG。

(3)為檢測(cè)表達(dá)載體轉(zhuǎn)化四尾柵藻的情況及確定目的基因是否表達(dá)，研究人員進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)完成下表。實(shí)驗(yàn)步驟簡(jiǎn)要操作過(guò)程初篩培養(yǎng)經(jīng)轉(zhuǎn)化后的四尾柵藻接種于含①__________的BG11固體培養(yǎng)基并放置于人工氣候箱培養(yǎng)，一段時(shí)間后觀察其生長(zhǎng)情況擴(kuò)大培養(yǎng)在BG11固體培養(yǎng)基上分別挑取數(shù)個(gè)單藻落接種至BG11液體培養(yǎng)基中光照搖床培養(yǎng)，編號(hào)備用驗(yàn)證收集四尾柵藻藻體，提取基因組DNA，以DGAT1-F和DGAT1-R為引物，采用②__________技術(shù)驗(yàn)證是否含有目的基因，未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻作對(duì)照油脂含量測(cè)定利用索氏抽提法分別測(cè)定③__________的油脂含量結(jié)果處理統(tǒng)計(jì)并比較驗(yàn)證結(jié)果及藻體中油脂的含量參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、A【分析】【分析】

本題考查了生物技術(shù)的安全性和倫理問(wèn)題方面的觀點(diǎn)；屬于對(duì)識(shí)記；理解層次的考查。

【詳解】

與試管嬰兒相比，設(shè)計(jì)試管嬰兒在操作技術(shù)上的特點(diǎn)是胚胎在移植前，需進(jìn)行遺傳學(xué)診斷。有些人認(rèn)為那些配型不合適的胚胎被丟棄或殺死，及濫用設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)如設(shè)計(jì)嬰兒性別等引起性別比例失調(diào)，違反了倫理道德，故本題選A。2、C【分析】【分析】

DNA粗提取和鑒定的原理：1；DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性；

2；DNA的鑒定：在沸水浴的條件下；DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色。

【詳解】

A；DNA在氯化鈉溶液中的溶解度；是隨著氯化鈉的濃度變化而改變的。當(dāng)氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L時(shí)，DNA的溶解度最低，高于或低于該濃度，DNA的溶解度都會(huì)升高，A錯(cuò)誤；

B；哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞不含細(xì)胞核和細(xì)胞器；沒(méi)有DNA，但新鮮的豬血中含有血細(xì)胞和未成熟的紅細(xì)胞，所以也含有DNA，B錯(cuò)誤；

C；在酒精溶液中；某些蛋白質(zhì)的溶解度大于DNA的溶解度，所以可以用酒精溶液對(duì)提取的DNA進(jìn)行提純，C正確；

D；二苯胺鑒定DNA分子時(shí)需要沸水浴加熱；待試管冷卻后才能觀察到現(xiàn)象，D錯(cuò)誤。

故選C。

【點(diǎn)睛】3、D【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定。

【詳解】

A；據(jù)圖可知；限制酶PstI切割質(zhì)粒時(shí)，會(huì)將質(zhì)粒切成兩段，且會(huì)破壞標(biāo)記基因，切掉啟動(dòng)子，因此不能選用PstI．BglⅡ這一組合，A錯(cuò)誤；

B；不能使用DNA聚合酶連接目的基因和切割開(kāi)的質(zhì)粒；應(yīng)使用DNA連接酶，B錯(cuò)誤；

C；起始密碼子位于mRNA上；啟動(dòng)子是一段具有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，可驅(qū)動(dòng)TNF基因的轉(zhuǎn)錄過(guò)程，C錯(cuò)誤；

D；四環(huán)素抗性基因?qū)儆跇?biāo)記基因；便于鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，D正確。

故選D。4、C【分析】【分析】

DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對(duì)酶；高溫和洗滌劑的耐受性。

【詳解】

A；PCR技術(shù)利用了DNA的熱變性原理；通過(guò)調(diào)節(jié)該變性-復(fù)性-延伸步驟中不同溫度來(lái)控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合，A正確；

B；對(duì)PCR擴(kuò)增后的產(chǎn)物；一般需要通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定，凝膠中的DNA分子需要染色，以便使電泳結(jié)果更直觀，B正確；

C；在凝膠中DNA分子的遷移速率與DNA分子的大小和構(gòu)象、凝膠的濃度有關(guān)；C錯(cuò)誤；

D；為避免外源DNA等因素的污染；PCR實(shí)驗(yàn)中使用的微量離心管、槍頭、蒸餾水等在使用前都必須進(jìn)行高壓滅菌處理，D正確。

故選C。5、B【分析】【分析】

1；DNA的溶解性（1）DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低）；利用這一特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達(dá)到分離目的。（2）DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離。

2；DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性蛋白酶能水解蛋白質(zhì)；但是對(duì)DNA沒(méi)有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60-80℃的高溫，而DNA在80℃以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，但對(duì)DNA沒(méi)有影響。

3；DNA的鑒定在沸水浴條件下；DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A；提取動(dòng)物細(xì)胞中的DNA用蒸餾水漲破細(xì)胞；提取植物細(xì)胞的DNA用洗滌劑和食鹽，A錯(cuò)誤；

B；常溫下菜花勻漿中有些酶類可破壞DNA而影響DNA的提??；B正確；

C；將絲狀物DNA溶解于2mol/L的NaCl溶液；加入二苯胺試劑，沸水浴冷卻后呈藍(lán)色，C錯(cuò)誤；

D；DNA不溶于酒精；而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)能溶于酒精，D錯(cuò)誤。

故選B。

【點(diǎn)睛】二、多選題(共9題，共18分)6、A:B:D【分析】【分析】

1；試管嬰兒技術(shù)是指通過(guò)人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過(guò)培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)是通過(guò)體外受精獲得許多胚胎，然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；分析題圖：圖示表示三親嬰兒的培育過(guò)程；由圖可知，三親嬰兒的培育采用了核移植技術(shù)、體外受精技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)等。

【詳解】

A；由圖可知；“三親嬰兒”孕育過(guò)程中使用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、體外受精、核移植等技術(shù)，A正確；

B；融合激活后的卵母細(xì)胞要培養(yǎng)到MⅡ中期才具備受精能力；從而完成受精作用，B正確；

C；卵母細(xì)胞A的捐獻(xiàn)者提供的是細(xì)胞質(zhì)；而其攜帶的血友病基因位于細(xì)胞核內(nèi)的染色體上，所以其攜帶的血友病基因不能遺傳給“三親嬰兒”，C錯(cuò)誤；

D；“三親嬰兒”培育技術(shù)可以通過(guò)核移植來(lái)避免細(xì)胞質(zhì)遺傳病的遺傳；D正確。

故選ABD。7、A:C【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過(guò)程是：對(duì)小動(dòng)物注射抗原；從該動(dòng)物的脾臟中獲取B淋巴細(xì)胞，將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞，最后獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；利用轉(zhuǎn)基因鼠技術(shù)進(jìn)行全人源化單克隆抗體；能降低單克隆抗體藥物的免疫排斥反應(yīng)，A正確；

B；過(guò)程①②利用的是轉(zhuǎn)基因技術(shù)；B錯(cuò)誤；

C；融合后的細(xì)胞需要用選擇培養(yǎng)基篩選獲得雜交瘤細(xì)胞；還要經(jīng)過(guò)克隆化培養(yǎng)、（專一性）抗體檢測(cè)等，C正確；

D；B細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下不能無(wú)限增殖；體外培養(yǎng)B細(xì)胞不能獲得大量的單克隆抗體，D錯(cuò)誤。

故選AC。8、A:B【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)技術(shù)：

1；過(guò)程：離體的植物組織；器官或細(xì)胞(外植體)→愈傷組織→胚狀體→植株(新植體)。

2；原理：植物細(xì)胞的全能性。

3；條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件(如適宜溫度、適時(shí)的光照、pH和無(wú)菌環(huán)境等)；②一定的營(yíng)養(yǎng)(無(wú)機(jī)、有機(jī)成分)和植物激素(生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素)。

【詳解】

A；取材時(shí)可選用兔眼藍(lán)莓的芽尖等分生組織作為外植體；這是因?yàn)檠考夥至淹?，且很少帶有病毒，甚至不含毒，A正確；

B；用70%酒精和5%左右次氯酸鈉對(duì)外植體消毒時(shí)；要控制好時(shí)間以避免造成傷害，否則外植體會(huì)受到損失，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，B正確；

C；生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑應(yīng)該在培養(yǎng)基滅菌后添加；否則高溫可能使其失去效果，C錯(cuò)誤；

D；脫毒后的兔眼藍(lán)莓果實(shí)體積更大；產(chǎn)量更高，后代個(gè)體中含病毒較少，但并不是不易被病毒感染，D錯(cuò)誤。

故選AB。9、C:D【分析】【分析】

人工種子是以植物組織培養(yǎng)的胚狀體；不定芽、頂芽和腋芽為原料,用人工薄膜包裝而成的種子。

【詳解】

A；由圖可知；只有雜種細(xì)胞能在含放線菌素D的MS培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng)得到雜種植物，A正確；

B；同一株植物的不同細(xì)胞的基因型可能不同；比如：配子的基因型與體細(xì)胞的基因型不同，離體培養(yǎng)獲得的再生苗基因型可能不相同，B正確；

C；②是原生質(zhì)體的融合過(guò)程；原生質(zhì)體放入無(wú)菌水中可能會(huì)吸水漲破，C錯(cuò)誤；

D；通過(guò)③得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子；D錯(cuò)誤。

故選CD。10、A:B【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)包括動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)；動(dòng)物細(xì)胞融合、核移植技術(shù)等技術(shù)；其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中除了加入細(xì)胞所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需要加入血清等天然成分。干細(xì)胞包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等，存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，有著自我更新能力及分化潛能。

【詳解】

A；在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)；培養(yǎng)基中除了加入細(xì)胞所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需要加入血清等天然成分，A錯(cuò)誤；

B；動(dòng)物細(xì)胞融合不能形成雜種個(gè)體；形成的是雜種細(xì)胞，而植物體細(xì)胞雜交能形成雜種個(gè)體，兩者都能形成雜種細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

C；干細(xì)胞包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等；存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，有著自我更新能力及分化潛能，C正確；

D；動(dòng)物體細(xì)胞分化程度較高；全能性較低，因此動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，D正確。

故選AB。11、C:D【分析】【分析】

將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上?；虮磉_(dá)載體常包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因。標(biāo)記基因是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。

【詳解】

A；啟動(dòng)子是位于DNA上RNA聚合酶的結(jié)合部位；mRNA是由基因啟動(dòng)子后面的序列編碼而來(lái)的，若某基因是從人的細(xì)胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，則該基因中不含啟動(dòng)子序列，A正確；

B、引物的延伸方向?yàn)?'端，擴(kuò)增目的基因時(shí)，利用耐高溫的DNA聚合酶從引物a、b的3'－端進(jìn)行子鏈合成；B正確；

C；導(dǎo)入人血清白蛋白基因的綿羊受體細(xì)胞不是乳腺細(xì)胞；而是受精卵或早期胚胎細(xì)胞，C錯(cuò)誤；

D；農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞；并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn)，將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因的T-DNA整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上，D錯(cuò)誤。

故選CD。12、A:C:D【分析】【分析】

PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)，所利用的原理為DNA分子的復(fù)制，因此PCR技術(shù)一般用于基因擴(kuò)增。

【詳解】

A；基因擴(kuò)增中引物通常是一小段DNA或RNA片段；每一次循環(huán)后DNA分子數(shù)量增加一倍，從理論上推測(cè)，第二輪后只有一個(gè)DNA片段只有引物B，含引物A的比例為3/4，A正確；

B；引物A和引物B均不在該片段的端點(diǎn)；因此第一輪循環(huán)后，得到的兩DNA片段中兩條脫氧核苷酸鏈都不等長(zhǎng)，通過(guò)繪圖可推知，第二輪中也不會(huì)出現(xiàn)等長(zhǎng)的引物，所以在第二輪循環(huán)產(chǎn)物中不會(huì)出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長(zhǎng)的DNA片段，B錯(cuò)誤；

C；引物A和引物B必須與目的基因配對(duì)；如果引物之間或引物自身發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)，則不能擴(kuò)增目的基因，C正確；

D；由于復(fù)制過(guò)程子鏈的合成方向是從子鏈的5’端向3’端延伸；所以耐熱的DNA聚合酶總將游離的脫氧核苷酸連接到3’端，D正確。

故選ACD。13、B:C:D【分析】【分析】

限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開(kāi)。

DNA連接酶是鏈接兩個(gè)DNA的片段；形成磷酸二酯鍵。

【詳解】

A；限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列；能在特定部位的兩個(gè)核苷酸之間切斷磷酸二酯鍵，A正確；

B；DNA連接酶可以恢復(fù)DNA分子中的磷酸二酯鍵；將兩條DNA片段的黏性末端之間的縫隙連接起來(lái)，B錯(cuò)誤；

C；DNA聚合酶將單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端；形成磷酸二酯鍵，DNA連接酶是鏈接兩個(gè)DNA的片段，形成磷酸二酯鍵。在基因工程操作中，不可以用DNA聚合酶代替DNA連接酶，C錯(cuò)誤；

D；限制酶主要來(lái)源于微生物；D錯(cuò)誤。

故選BCD。14、B:D【分析】【分析】

分析題圖：構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)；不能選用限制酶BamHⅠ，否則會(huì)導(dǎo)致兩種抗性基因都被破壞，因此應(yīng)該選擇Bc1I和HindⅢ這兩種限制酶，根據(jù)引物的延伸方向，所用的引物為圖乙中引物a和引物c。

【詳解】

A；PCR技術(shù)要求兩種引物分別和目的基因的兩條單鏈結(jié)合；根據(jù)引物的延伸方向，所用的引物為圖乙中引物a和引物c，A正確；

B；根據(jù)圖甲可知；BamHⅠ會(huì)導(dǎo)致兩種抗性基因都被破壞，同時(shí)為防止目的基因自身環(huán)化，因此只能選BclI和HindⅢ兩種限制酶切割，B錯(cuò)誤；

C；圖乙中一個(gè)DNA分子在PCR儀中經(jīng)過(guò)四輪復(fù)制可得到16個(gè)DNA片段；其中所需目的基因的分子數(shù)為8個(gè)，C正確；

D；由于選擇BclI和HindⅢ這兩種限制酶；破壞了氨芐青霉素抗性基因，但沒(méi)有破壞四環(huán)素抗性基因，因此應(yīng)該先用含四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選出含有基因表達(dá)載體和普通質(zhì)粒的大腸桿菌，再用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基篩選含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，培養(yǎng)基加氨芐青霉素含普通質(zhì)粒的大腸桿菌能生存，而含重組質(zhì)粒的不能生存，從而篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的受體細(xì)胞，D錯(cuò)誤。

故選BD。三、填空題(共5題，共10分)15、略

【解析】避免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】直接分離人工合成反轉(zhuǎn)錄法化學(xué)合成法17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】原核生物18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】滴加蒸餾水逐漸稀釋2mol/L濃度的NaCL溶液19、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)形成二硫鍵，使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會(huì)提高。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，其步驟為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。【解析】會(huì)提高T4溶菌酶的耐熱性。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，該技術(shù)的要點(diǎn)是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。四、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共40分)20、略

【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)：

（1）原理：細(xì)胞增殖。

（2）培養(yǎng)基性質(zhì)：液體培養(yǎng)基。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分與體內(nèi)細(xì)胞基本相同；如需要有葡萄糖；氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素、動(dòng)物血清或血漿，還有適量的抗生素以保證無(wú)菌環(huán)境。

（3）需要使用動(dòng)物血清。

（4）適宜的溫度：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4。

（5）無(wú)菌條件下進(jìn)行。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。

（6）氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。

2；單克隆抗體的制備：

（1）單克隆抗體制備的原理包括：①免疫原理：B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生特異性抗體。②細(xì)胞融合原理：利用病毒對(duì)宿主細(xì)胞的穿透性使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。③動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)：對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)；體外培養(yǎng)。

（2）單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

（3）制備單克隆抗體過(guò)程中的幾種細(xì)胞：①免疫B細(xì)胞（漿細(xì)胞）：能產(chǎn)生單一抗體；但不能無(wú)限增殖。②骨髓瘤細(xì)胞：能無(wú)限增殖，但不能產(chǎn)生抗體。③雜交瘤細(xì)胞：既能產(chǎn)生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下無(wú)限增殖。

（4）動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性；細(xì)胞的增殖。動(dòng)物細(xì)胞融合誘導(dǎo)手段有電刺激、聚乙二醇、滅活的病毒等；結(jié)果產(chǎn)生雜交細(xì)胞。

【詳解】

（1）若細(xì)胞B是小鼠的骨髓瘤細(xì)胞；則此過(guò)程可以為單克隆抗體的制備過(guò)程。故A是已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞或能產(chǎn)生特定抗體的B細(xì)胞。動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性；細(xì)胞的增殖。動(dòng)物細(xì)胞融合誘導(dǎo)手段（誘導(dǎo)d過(guò)程）有電刺激、聚乙二醇、滅活的病毒等，結(jié)果產(chǎn)生雜交細(xì)胞。

（2）一般來(lái)說(shuō)；誘導(dǎo)A細(xì)胞和B細(xì)胞融合，形成C細(xì)胞后，必須利用選擇培養(yǎng)基來(lái)篩選出目的細(xì)胞。那么滿足的條件必須是：未融合的（親本）細(xì)胞和融合的同種（核的）細(xì)胞都會(huì)死亡，而雜交（瘤）細(xì)胞（或雜種細(xì)胞）能夠在選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。

（3）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)：一是液體培養(yǎng)基。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分與體內(nèi)細(xì)胞基本相同，如需要有葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素、動(dòng)物血清或血漿，還有適量的抗生素以保證無(wú)菌環(huán)境。二是氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。

（4）選用免疫原性好的細(xì)菌；病毒、立克次體、螺旋體等；經(jīng)人工培養(yǎng)，再用物理或化學(xué)方法將其殺滅制成疫苗，即為滅活疫苗。而新冠病毒為RNA病毒，選用RNA疫苗都可以。故選③新冠病毒滅活疫苗或RNA疫苗。

【點(diǎn)睛】

本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，對(duì)某些現(xiàn)實(shí)生活中的生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論。【解析】經(jīng)過(guò)（抗原、病原體）免疫的（小鼠）B（淋巴）細(xì)胞（或漿細(xì)胞，或已免疫的B細(xì)胞，或能產(chǎn)生特定抗體的B細(xì)胞）聚乙二醇（PEG）、滅活的（仙臺(tái)）病毒、電激（或電融合）未融合的（親本）細(xì)胞和融合的同種（核的）細(xì)胞雜交（瘤）細(xì)胞（或雜種細(xì)胞））血清（或血漿）95%空氣和5%CO2③21、略

【分析】【分析】

分析題圖：圖示為釀制葡萄酒的兩個(gè)簡(jiǎn)易裝置，甲裝置中，A為葡萄汁，能為酵母菌提供碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子；NaHCO3溶液能夠吸收酵母菌酒精發(fā)酵產(chǎn)生的CO2；乙裝置需要定期擰松瓶蓋排氣。

（1）

制作果酒的菌種是酵母菌；屬于真核生物；制作果醋的菌種是醋酸菌，屬于原核生物，它們?cè)诮Y(jié)構(gòu)上最主要的區(qū)別在于前者有以核膜為界限的細(xì)胞核，即有核膜包被的細(xì)胞核。醋酸菌發(fā)酵的適宜溫度為30℃～35℃，因此制作果酒后制果醋，應(yīng)將溫度控制在30℃～35℃。

（2）

甲裝置中，A液體是葡萄汁，能為酵母菌提供碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子；NaHCO3溶液的作用是吸收酵母菌酒精發(fā)酵產(chǎn)生的CO2；若用乙裝置；在發(fā)酵過(guò)程中，必須進(jìn)行的操作是每隔12小時(shí)左右將瓶蓋擰松一次，排除二氧化碳。

（3）

酵母菌屬于兼性厭氧菌；其在有氧條件下可以大量繁殖，故將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí)，要留有大約1/3的空間，這樣既為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣，又可防止發(fā)酵旺盛時(shí)汁液溢出。

（4）

酒精可用重鉻酸鉀來(lái)檢驗(yàn)；在酸性條件下，該試劑與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。

（5）

醋酸菌可以利用果酒進(jìn)行發(fā)酵，相應(yīng)反應(yīng)式為：

【點(diǎn)睛】

本題考查果酒和果醋的制作，要求考生識(shí)記參與果酒和果醋制作的微生物及其代謝類型，掌握果酒和果醋制作的原理及條件，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，難度適中?！窘馕觥浚?）核膜包被的細(xì)胞核30-35

（2）葡萄汁吸收酵母菌酒精發(fā)酵產(chǎn)生的CO2擰松。

（3）為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣；防止發(fā)酵旺盛時(shí)汁液溢出。

（4）重鉻酸鉀。

（5）22、略

【分析】【分析】

1；單克隆抗體：由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。具有特異性強(qiáng)、靈敏度高；并可能大量制備的特點(diǎn)。

2；單克隆抗體的制備過(guò)程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)；使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞，利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，單克隆抗體制備過(guò)程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞(A為B淋巴細(xì)胞，B為骨髓瘤細(xì)胞)，不需要A、B、AA、BB型細(xì)胞。第二次篩選：利用多孔板法和抗原抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。

【詳解】

（1）單克隆抗體制備的基本步驟：對(duì)小鼠進(jìn)行免疫→提取B淋巴細(xì)胞→將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合→通過(guò)篩選；克隆化培養(yǎng)和擴(kuò)大化培養(yǎng)→最終注入小鼠體內(nèi)→從腹腔腹水中提取單克隆抗體；此過(guò)程依賴的生物技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合等。剪碎后的組織用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。

（2）誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合的試劑是聚乙二醇（PEG）；因此試劑X是聚乙二醇（PEG）。用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，只有雜交瘤細(xì)胞才能成活，因此經(jīng)選擇培養(yǎng)篩選出的細(xì)胞Y具有既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生抗體的特點(diǎn)。上清液中含有雜交瘤細(xì)胞，由于雜交瘤細(xì)胞能分泌抗體，故利用抗原-抗體雜交技術(shù)對(duì)上清液進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)，以便篩選出能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)胞，選擇陽(yáng)性孔中的細(xì)胞（即能產(chǎn)生芍藥苷抗體的細(xì)胞）繼續(xù)植入小鼠腹腔內(nèi)進(jìn)行體內(nèi)培養(yǎng)，從小鼠腹水中可提取到抗芍藥苷的單克隆抗體，也可以將陽(yáng)性孔中的細(xì)胞在體外進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。

（3）①正常對(duì)照組：前期處理為腹腔注射生理鹽水(空白對(duì)照)；后期處理為a腹腔注射生理鹽水(空白對(duì)照)；造模組：模型組為口服生理鹽水(產(chǎn)生模型小鼠)，陽(yáng)性藥組為口服芍藥甘草湯(藥物具有顯著的鎮(zhèn)痛作用)，實(shí)驗(yàn)組為c口服去除芍藥苷的芍藥甘草湯(檢驗(yàn)去除芍藥苷的芍藥甘草湯是否具有鎮(zhèn)痛作用)。

②因?yàn)樵炷＝M注射了冰醋酸，結(jié)合題意可知，冰醋酸能引起小鼠的扭體反應(yīng)，因此前期處理后，造模組小鼠扭體次數(shù)顯著高于正常對(duì)照組，表明致痛處理成功。如果芍藥苷是芍藥甘草湯中發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用的重要成分之一，則陽(yáng)性藥組小鼠的扭體次數(shù)最低，實(shí)驗(yàn)組小鼠雖然口服的是去除了芍藥苷的芍藥甘草湯，但芍藥甘草湯中除了芍藥苷還有其他成分能夠起到鎮(zhèn)痛作用，則實(shí)驗(yàn)組小鼠扭體次數(shù)低于模型組，因此若結(jié)果為實(shí)驗(yàn)組小鼠扭體次數(shù)高于陽(yáng)性藥組低于模型組，則表明芍藥苷是芍藥甘草湯中發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用的重要成分之一?！窘馕觥?1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合胰蛋白（膠原蛋白）

(2)聚乙二醇（PEG）既能大量增殖，又能產(chǎn)生抗體抗原—抗體雜交

(3)腹腔注射生理鹽水口服去除芍藥苷的芍藥甘草湯高于實(shí)驗(yàn)組小鼠扭體次數(shù)高于陽(yáng)性藥組低于模型組23、略

【分析】【分析】

基因突變是指DNA分子中發(fā)生堿基對(duì)的替換；增添和缺失；而引起的基因結(jié)構(gòu)的改變。翻譯是指在核糖體上，以mRNA為模板、以氨基酸為原料合成蛋白質(zhì)的過(guò)程，該過(guò)程還需要tRNA來(lái)運(yùn)轉(zhuǎn)氨基酸。

密碼子由位于mRNA上決定一個(gè)氨基酸的三個(gè)相鄰的堿基組成。終止密碼子的作用是終止翻譯過(guò)程。

基因工程中檢測(cè)目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)可以用抗原-抗體雜交技術(shù)。

【詳解】

（1）由題干信息可知；黏多糖貯積癥患者細(xì)胞中IDUA基因突變后，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長(zhǎng)度不變，說(shuō)明其沒(méi)有發(fā)生堿基對(duì)的增添和缺失，因?yàn)檫@兩者改變會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄出的mRNA長(zhǎng)度改變，因此推測(cè)其基因突變是由于堿基對(duì)替換。由于終止密碼子提前出現(xiàn)，導(dǎo)致翻譯提前終止，肽鏈變短，IDUA酶分子量變小，空間結(jié)構(gòu)改變而失活。

（2）由題干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最終誘導(dǎo)核糖體通讀mRNA上的遺傳信息合成具有功能的全長(zhǎng)蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)；功能相同，據(jù)此推測(cè)該抑制性tRNA可以攜帶氨基酸至核糖體并與終止密碼子堿基配對(duì)使翻譯過(guò)程繼續(xù)。

（3）本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖潜容^攜帶不同氨基酸的sup-tRNA的通讀效果；需要保證實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞含有突變IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾），同時(shí)保證在不同的實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中可以轉(zhuǎn)錄出攜帶不同中氨基酸的sup-tRNA，因此實(shí)驗(yàn)組中受體細(xì)胞中應(yīng)該含有導(dǎo)入攜帶不同氨基酸的sup-tRNA基因和突變IDUA基因。若要判斷各個(gè)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中攜帶不同氨基酸的sup-tRNA是否成功誘導(dǎo)了具有功能的IDUA酶，可以采用該酶的特異性抗體對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，即進(jìn)行抗原-抗體雜交。分析題圖可知，與對(duì)照組（含正常IDUA基因的組）相比，含攜帶酪氨酸的sup-tRNA的受體細(xì)胞中表達(dá)的全長(zhǎng)IDUA蛋白量比其他實(shí)驗(yàn)組都多，說(shuō)明其能有效恢復(fù)細(xì)胞中全長(zhǎng)IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上實(shí)驗(yàn)可知，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能有效誘導(dǎo)核糖體對(duì)突變IDUA基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA進(jìn)行通讀，進(jìn)而產(chǎn)生具有正常功能的IDUA酶，因此利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對(duì)IDUA突變基因純合小鼠進(jìn)行治療，與不進(jìn)行治療的IDUA突變基因純合小鼠相比，治療組小鼠的IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；同時(shí)，利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對(duì)IDUA基因敲除小鼠進(jìn)行治療，與不進(jìn)行治療的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，則其細(xì)胞內(nèi)都沒(méi)有相應(yīng)mRNA，因此攜帶酪氨酸的sup-tRNA無(wú)法發(fā)揮作用，