2025年外研版2024選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年外研版2024選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷762考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、在進(jìn)行核移植時(shí)，通常將整個(gè)體細(xì)胞而不是細(xì)胞核注入去核卵母細(xì)胞中，下列有關(guān)其原因的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.體細(xì)胞太小，因而取出細(xì)胞核比較困難B.細(xì)胞質(zhì)中遺傳物質(zhì)也控制生物的部分性狀C.體細(xì)胞的核離開了原來(lái)的細(xì)胞質(zhì)將不能存活D.直接將體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞中簡(jiǎn)化操作程序2、某同學(xué)從植物中提取了W物質(zhì)；并研究其抑菌效果。在平板中央處打孔后加入提取物W，測(cè)量抑菌圈的大小和計(jì)算抑菌圈平均增幅速率，實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果如下圖所示。據(jù)圖分析下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.剛滅菌的培養(yǎng)基必須冷卻后才能倒平板，接種一定量菌液可得到試驗(yàn)菌平板B.在平板上打孔的鋼管需要灼燒滅菌，目的是防止其他雜菌污染已接種的平板C.抑菌圈直徑的大小與接種菌體濃度、提取物W的濃度和擴(kuò)散時(shí)間密切相關(guān)D.提取物W在培養(yǎng)基中擴(kuò)散，加入提取物W后的2小時(shí)可獲得最佳抑菌效果3、下列是有關(guān)腐乳制作的幾個(gè)問(wèn)題，其中正確的是（）A.含水量大約85%的豆腐有利于保持濕度，適宜制作腐乳B.將豆腐切成塊放在消毒的籠屜中，保持溫度在15℃～18℃，并保持干燥C.紅方腐乳可不加輔料，用豆腐本身滲出的水加鹽腌制而成D.腐乳外部有一層致密的“皮”，對(duì)人體是無(wú)害的4、下列實(shí)踐與基因工程無(wú)關(guān)的是（）A.研制酵母乙肝疫苗B.細(xì)胞產(chǎn)物工廠化生產(chǎn)C.選擇“工程菌”來(lái)生產(chǎn)胰島素D.培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉5、下列應(yīng)用實(shí)例最可能造成生物技術(shù)安全性與倫理問(wèn)題的是（）A.利用基因工程對(duì)豬的器官進(jìn)行改造，解決人類器官移植的來(lái)源問(wèn)題B.利用核移植獲得的胚胎分離ES細(xì)胞，進(jìn)而分化出造血干細(xì)胞用于治療白血病C.利用基因編輯技術(shù)設(shè)計(jì)試管嬰兒，以期得到臉蛋漂亮、身高標(biāo)準(zhǔn)和智力超群的嬰兒D.通過(guò)改造基因使胰島素B28與B29位的氨基酸交換位置生產(chǎn)速效型胰島素，用于糖尿病的治療評(píng)卷人得分二、多選題(共6題，共12分)6、2020年7月20日，國(guó)際醫(yī)學(xué)權(quán)威期刊《柳葉刀》上發(fā)表了新冠病毒疫苗II期臨床試驗(yàn)的成果。該試驗(yàn)是由陳薇院士等人領(lǐng)銜的團(tuán)隊(duì)開展的研究，試驗(yàn)中使用的疫苗是一種腺病毒載體重組新冠病毒疫苗(基因重組疫苗)。試驗(yàn)結(jié)果表明，單次接種疫苗28天后，99．5%的受試者產(chǎn)生了特異性抗體，95．3%受試者產(chǎn)生了中和抗體，89%的受試者產(chǎn)生了特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)。這表明，陳薇團(tuán)隊(duì)研發(fā)的新冠疫苗可為健康人群提供“三重保護(hù)”，將新冠病毒“拒之門外”。下列敘述正確的是（）A.該疫苗的制備需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶B.受試者接受重組新冠病毒疫苗的接種后，體內(nèi)能產(chǎn)生分泌特定抗體的效應(yīng)T細(xì)胞C.主要通過(guò)檢測(cè)受試者體內(nèi)新冠病毒抗體的含量來(lái)評(píng)價(jià)試驗(yàn)的有效性D.新冠肺炎康復(fù)患者可以不注射該疫苗7、中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所首席科學(xué)家；動(dòng)物克隆與受精生物學(xué)學(xué)科帶頭人陳大元；曾主持科研攻關(guān)項(xiàng)目——“攀登”，進(jìn)行大熊貓的異種克隆。他們將大熊貓的體細(xì)胞核放入兔子的去核卵母細(xì)胞之中，并使其成功發(fā)育成囊胚，標(biāo)志著異種核質(zhì)相容的問(wèn)題得到解決，異種克隆大熊貓邁過(guò)了第一道“坎”；然后至關(guān)重要的是選擇一種合適的“代孕母體”。下圖是該研究的理論流程圖。下列說(shuō)法正確的是（）

A.整個(gè)過(guò)程用到的技術(shù)手段有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物體細(xì)胞核移植和胚胎移植等B.誘導(dǎo)超數(shù)排卵所注射的激素只能作用于特定細(xì)胞C.重構(gòu)胚發(fā)育成囊胚所需營(yíng)養(yǎng)主要來(lái)源于“代孕母體”D.步驟甲和步驟乙中的供體和受體需要同期發(fā)情處理8、常乳是母牛泌乳期一周后直到泌乳停止前一周這個(gè)時(shí)間段內(nèi)分泌的乳汁。奶牛自身乳房和乳頭中可能含有的細(xì)菌，加上擠乳過(guò)程中產(chǎn)生的少量污染，常乳中會(huì)有一定量的細(xì)菌存在。研究小組要檢測(cè)一份常乳樣品中細(xì)菌的總量（不考慮菌種），檢測(cè)流程如下圖，每個(gè)平板上接種菌液量為0.1mL。下列說(shuō)法正確的是（）

A.倒平板時(shí)將培養(yǎng)皿打開一條細(xì)縫，不要完全打開，防止雜菌污染B.上述方法是稀釋涂布平板法，培養(yǎng)基要營(yíng)養(yǎng)全面，適合各種細(xì)菌生長(zhǎng)C.也可以通過(guò)連續(xù)劃線的方法接種，通過(guò)菌落數(shù)計(jì)算樣品中的細(xì)菌總數(shù)D.若三個(gè)平板上的菌落平均數(shù)為59，則所每毫升樣品中細(xì)菌總數(shù)為5.9×1079、下表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，下圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說(shuō)法正確的是（）。限制酶BamHⅠEcoRⅠHindⅢNheⅠMunⅠ識(shí)別序列和切割位點(diǎn)G↓GATCCG↓AATTCA↓AGCTTG↓CTAGCC↓AATTG

A.BamHI和NheI切割形成相同的黏性末端B.用EcoRI和HindⅢ切割質(zhì)粒，有助于目的基因的定向插入C.在目的基因和NheI的識(shí)別位點(diǎn)之間添加EcoRI識(shí)別位點(diǎn)，可改變其插入的方向D.通過(guò)花粉管通道法可將重組基因?qū)肱吣?0、下列有關(guān)小鼠體外受精及胚胎發(fā)育的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.精子在獲能液中于37℃、5%CO2條件下培養(yǎng)的目的是使精子獲得能量B.分割的胚胎細(xì)胞有相同的遺傳物質(zhì)，發(fā)育成的個(gè)體沒(méi)有形態(tài)學(xué)差異C.胚胎干細(xì)胞具有自我更新能力和分化潛能，可以分化形成各種組織D.囊胚期細(xì)胞開始分化，其增殖過(guò)程中可能會(huì)發(fā)生基因突變和染色體變異11、先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥是一種單基因遺傳??；下圖為該病的某家系圖，這對(duì)夫婦為了避免再次妊娠患兒，胚胎植入前進(jìn)行了遺傳學(xué)檢測(cè)（PGD），檢測(cè)結(jié)果如下表，以下敘述正確的是（）

。胚胎編號(hào)PGD檢測(cè)結(jié)果EA1攜帶母源致病基因EA2無(wú)致病基因EA3攜帶母源致病基因EA4攜帶母源致病基因EA5攜帶父源致病基因EA6致病基因純合EA7單細(xì)胞擴(kuò)增失敗A.檢測(cè)時(shí)應(yīng)選擇滋養(yǎng)層的少許細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)B.該過(guò)程中未用到核移植技術(shù)C.該技術(shù)可能會(huì)引發(fā)一定的倫理爭(zhēng)議D.EA1～EA5均可以作為植入的胚胎評(píng)卷人得分三、填空題(共6題，共12分)12、平板冷凝后，為什么要將平板倒置？________13、第一步：______14、通常將DNAD的羥基（—OH）成為_______________端，而磷酸基團(tuán)的末端成為___________端。由于_______________，因此DNA需要引物，因此DNA的合成方向總是從_________________延伸。15、現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的____________條件下，將優(yōu)良__________菌種直接接種在豆腐上，這樣可以避免__________________的污染，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。16、加入酒精和用玻璃棒攪拌時(shí)，動(dòng)作要輕緩，以免加劇___________，導(dǎo)致DNA分子不能形成__________。17、在___________條件下，DNA與___________反應(yīng)呈現(xiàn)______________，因此_____________可以作為鑒定DNA的試劑。評(píng)卷人得分四、判斷題(共4題，共16分)18、理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，就是聽之任之，不管不問(wèn)（______）A.正確B.錯(cuò)誤19、對(duì)微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最廣泛和取得實(shí)際應(yīng)用成果最多的領(lǐng)域，是因?yàn)槲⑸锞哂猩斫Y(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡(jiǎn)單、生長(zhǎng)繁殖快、對(duì)環(huán)境因素敏感和容易進(jìn)行遺傳物質(zhì)操作等優(yōu)點(diǎn)。（選擇性必修3P101）()A.正確B.錯(cuò)誤20、轉(zhuǎn)入油菜的抗除草劑基因，可能通過(guò)花粉傳入環(huán)境中。()A.正確B.錯(cuò)誤21、中國(guó)政府禁止生殖性克隆，但不反對(duì)治療性克隆。()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共6分)22、學(xué)校開展以“利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)制作食品”為主題的相關(guān)活動(dòng)。小余同學(xué)興致勃勃地回家；發(fā)現(xiàn)冰箱中可用的原材料有草莓；豆腐、白蘿卜、牛奶等。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般是指直接利用原材料中天然存在或前一次發(fā)酵保存下來(lái)的發(fā)酵物中的______進(jìn)行發(fā)酵；制作食品的技術(shù)。

（2）小余同學(xué)將草莓洗凈、切塊，裝入瓶中。加入原漿醋（經(jīng)糧食直接釀制，不經(jīng)勾兌）少許、白糖兩勺，置于保溫箱中，每隔一段時(shí)間擰開瓶蓋換氣，兩周后得到草莓醋。小余同學(xué)加入原漿醋的目的是接種更多的______，加入糖并經(jīng)常開蓋換氣的目的是保證______都充足。保溫箱溫度應(yīng)保持在______℃。

（3）小余同學(xué)還打算制作一些腐乳和蘿卜泡菜給住宿生作早餐。從豆腐到腐乳，多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，其中起主要作用的是_______，屬于______（填“真核”或“原核”）生物。豆腐中的成分也會(huì)發(fā)生一定的變化，其中蛋白質(zhì)被分解成______，脂肪被分解成______；用白蘿卜制作泡菜的過(guò)程中，能達(dá)到縮短腌制時(shí)間的操作有______（填下面的序號(hào)）。

①將白蘿卜切成小塊②用沸水短時(shí)間處理白蘿卜塊。

③添加陳泡菜汁④向容器中通入無(wú)菌空氣。

（4）小余同學(xué)欲從泡菜汁中分離制作酸奶的乳酸菌，首先對(duì)陳泡菜汁進(jìn)行過(guò)濾，然后取濾液用無(wú)菌水進(jìn)行充分______，再用涂布器接種到特定的______培養(yǎng)基中進(jìn)行初步篩選。23、嗜熱土壤芽孢桿菌產(chǎn)生的β-萄糖苷酶(BglB)是一種耐熱纖維素酶。為使其在工業(yè)生產(chǎn)中更好地應(yīng)用；開展了以下實(shí)驗(yàn)。如圖為質(zhì)粒限制酶酶切圖譜，如表為幾種限制酶的識(shí)別序列及酶切位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)通常情況下，獲得的目的基因需要進(jìn)行擴(kuò)增，最簡(jiǎn)便的方法是_________技術(shù)。

(2)分析上圖，可選擇_______和_______兩種不同的限制酶切割質(zhì)粒，以防止質(zhì)粒自身環(huán)化。質(zhì)粒被切割后，可用_______將其與目的基因連接。在動(dòng)物基因工程中將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時(shí)通常的方法是_______。

(3)大腸桿菌不能降解纖維素，但轉(zhuǎn)入上述建構(gòu)好的表達(dá)載體后則獲得了降解纖維素的能力，這是因?yàn)開______。

(4)蛋白質(zhì)工程是二代基因工程，它的基本途徑是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→_______→_______→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列。評(píng)卷人得分六、綜合題(共3題，共15分)24、非細(xì)胞合成技術(shù)是一種運(yùn)用合成生物學(xué)方法；在細(xì)胞外構(gòu)建多酶催化體系，獲得目標(biāo)產(chǎn)物的新技術(shù)，其核心是各種酶基因的挖掘；表達(dá)等。中國(guó)科學(xué)家設(shè)計(jì)了4步酶促反應(yīng)的非細(xì)胞合成路線（如圖），可直接用淀粉生產(chǎn)肌醇（重要的醫(yī)藥食品原料），以期解決高溫強(qiáng)酸水解方法造成的嚴(yán)重污染問(wèn)題，并可以提高產(chǎn)率。

回答下列問(wèn)題：

（1）研究人員采用PCR技術(shù)從土壤微生物基因組中擴(kuò)增得到目標(biāo)酶基因。此外，獲得酶基因的方法還有___________。（答出兩種即可）

（2）高質(zhì)量的DNA模板是成功擴(kuò)增出目的基因的前提條件之一。在制備高質(zhì)量DNA模板時(shí)必須除去蛋白，方法有___________。（答出兩種即可）

（3）研究人員使用大腸桿菌BL21作為受體細(xì)胞、pET20b為表達(dá)載體分別進(jìn)行4種酶的表達(dá)。表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí)，首先應(yīng)制備___________細(xì)胞。為了檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá)出酶蛋白，需要采用的方法有___________。

（4）依圖所示流程，在一定的溫度、pH等條件下，將4種酶與可溶性淀粉溶液混合組成一個(gè)反應(yīng)體系。若這些酶最適反應(yīng)條件不同，可能導(dǎo)致的結(jié)果是___________。在分子水平上，可以通過(guò)改變___________，從而改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，實(shí)現(xiàn)對(duì)酶特性的改造和優(yōu)化。25、科研人員在雜交瘤細(xì)胞的基礎(chǔ)上；獲得了雙雜交瘤細(xì)胞，能夠產(chǎn)生雙特異性抗體，該抗體可以同時(shí)結(jié)合兩種抗原。

（1）科研人員將抗原分別注射到小鼠體內(nèi)；引起機(jī)體的______免疫，_____分泌相應(yīng)抗體。

（2）科研人員獲得上述小鼠的脾臟細(xì)胞；制備兩種雜交瘤細(xì)胞。每種雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體結(jié)構(gòu)，與抗原結(jié)合的情況如圖1所示。

①制備雜交瘤細(xì)胞時(shí)，需將上述小鼠的脾臟組織，用____________處理獲得單細(xì)胞后，再與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選得到兩種雜交瘤細(xì)胞。將兩種雜交瘤細(xì)胞用____________試劑處理促進(jìn)其融合，在培養(yǎng)基中加入____________（天然成分）培養(yǎng)。若兩種細(xì)胞成功融合，則會(huì)同時(shí)表達(dá)出抗體的重鏈A、B和輕鏈a、b；這種細(xì)胞稱作雙雜交瘤細(xì)胞。

②抗體由兩條重鏈和兩條輕鏈組成，重鏈和輕鏈均分為恒定區(qū)和可變區(qū)，兩條重鏈依賴于A1或B1進(jìn)行組裝（A1與B1相同），重鏈與輕鏈的組裝依賴于恒定區(qū)A2、a或B2、b（a與b相同）。因此，雙雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體種類較多，其中有一種抗體能同時(shí)與抗原α、β結(jié)合稱為雙特異性抗體，如圖2。請(qǐng)將A1、A2、B1、B2、a、b；α、β等字符填入下面的表格中____________。

。123456A2③為使雙雜交瘤細(xì)胞只產(chǎn)生圖2所示雙特異性抗體，降低純化分離成本，科研人員對(duì)重鏈，輕鏈的結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造。改造思路是在A、B、a、b的恒定區(qū)通過(guò)改變____________；進(jìn)而改變蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，實(shí)現(xiàn)“榫卯”式互補(bǔ)組裝的唯一性。

（3）結(jié)合雙特異性抗體特點(diǎn)，請(qǐng)分析其在腫瘤治療方面的應(yīng)用前景：__________________________。26、某生物興趣小組利用沙棘制作果酒；大致流程如下：榨汁→倒入發(fā)酵瓶至2/3處→添加適量的糖→用溫水活化酵母并倒入發(fā)酵瓶→發(fā)酵15天→沙棘果酒。回答下列問(wèn)題：

(1)酵母菌屬于_____核生物，活化酵母菌使用溫水的原因_____。

(2)沙棘榨汁時(shí)可加入一定量的果膠酶，目的是_____，沙棘汁不能裝滿發(fā)酵瓶的目的是_____。

(3)根據(jù)實(shí)際經(jīng)驗(yàn)，添加適量的糖能夠增加酒精度，原因是_____。

(4)該小組繼續(xù)研究了酵母菌接種量對(duì)酒精度的影響，結(jié)果如下圖所示。據(jù)圖可知當(dāng)酵母菌的最適接種量為_____時(shí)，沙棘果酒中酒精含量高且風(fēng)味最佳。隨著酵母菌接種量的增大，酒精度不再增加，原因是_____。

參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、C【分析】【分析】

選用去核卵(母)細(xì)胞的原因：卵(母)細(xì)胞大；容易操作；卵(母)細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)多，營(yíng)養(yǎng)豐富；含有促使細(xì)胞全能性表達(dá)的物質(zhì)。

【詳解】

A；體細(xì)胞太小因而去除細(xì)胞核較困難；可將整個(gè)體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞中，A正確；

B；DNA主要位于細(xì)胞核；細(xì)胞質(zhì)中也含有少量的DNA，也能控制生物的部分性狀，B正確；

C；體細(xì)胞的核離開了原來(lái)的細(xì)胞質(zhì)；注入去核的卵母細(xì)胞依然能存活，C錯(cuò)誤；

D；將整個(gè)體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞中；不需要將體細(xì)胞的細(xì)胞核提取出來(lái)，簡(jiǎn)化了操作程序，D正確。

故選C。

【點(diǎn)睛】2、D【分析】【分析】

1；培養(yǎng)基一般含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽等；牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基屬于細(xì)菌培養(yǎng)基，麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基適合培養(yǎng)真菌。

2；微生物常見(jiàn)的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

3；常用的滅菌方法：干熱滅菌法、灼燒滅菌法、高壓蒸汽滅菌法。

【詳解】

A；菌液不能與剛滅菌的培養(yǎng)基混勻；否則會(huì)由于高溫殺死菌種，A正確；

B；在試驗(yàn)平板上打孔的鋼管需要灼燒滅菌；灼燒時(shí)鋼管上的微生物死亡，進(jìn)行打孔操作時(shí)可防止微生物對(duì)平板造成污染，B正確；

C；抑菌圈直徑的大小與菌體濃度、提取物W的濃度和預(yù)擴(kuò)散時(shí)間有很大關(guān)系；C正確；

D；提取物W在培養(yǎng)基中擴(kuò)散；加入提取物W后的2小時(shí)獲得抑菌圈最大平均增幅速率，說(shuō)明提取物在2小時(shí)內(nèi)擴(kuò)散得較快，但不能確定為最佳抑菌效果，上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，24小時(shí)抑菌圈的直徑最大，抑菌效果更佳，D錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】3、D【分析】【分析】

1；腐乳的制作的原理：

（1）腐乳的發(fā)酵在多種微生物的協(xié)同作用下進(jìn)行；其中起主要作用的是毛霉，它是一種絲狀真菌，新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。

（2）毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以將脂肪水解成甘油和脂肪酸。

2；腐乳的制作過(guò)程主要是：讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。

【詳解】

A；含水量大約70%的豆腐有利于保持濕度；適宜制作腐乳，A錯(cuò)誤；

B；先將豆腐切成塊放在消毒的籠屜中；保持溫度在15～18℃，并保持一定的濕度，B錯(cuò)誤；

C；腌制青方時(shí)可以不加入輔料；是用豆腐本身滲出的水加鹽腌制而成，C錯(cuò)誤；

D；腐乳外部一層致密的皮是毛霉的匍匐菌絲形成的；對(duì)人體無(wú)害，D正確。

故選D。4、B【分析】【分析】

1；植物基因工程的應(yīng)用：（1）抗蟲轉(zhuǎn)基因植物；（2）抗病轉(zhuǎn)基因植物；（3）抗逆轉(zhuǎn)基因植物；（4）轉(zhuǎn)基因改良植物品質(zhì)?？傊蚬こ淘谵r(nóng)業(yè)上用于生產(chǎn)高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)和具有優(yōu)良品質(zhì)的品種；能產(chǎn)生抗逆性品種。

2；動(dòng)物基因工程的成果：（1）提高動(dòng)物的生長(zhǎng)速度：外源生長(zhǎng)激素基因；（2）改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)；（3）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物；（4）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作器官移植的供體；（5）基因工程藥物；如人胰島素、細(xì)胞因子、抗體、疫苗、生長(zhǎng)激素、干擾素等。

【詳解】

A；將乙肝病毒相關(guān)基因轉(zhuǎn)入酵母菌；獲得乙肝疫苗，運(yùn)用了基因工程，A錯(cuò)誤；

B；將一種植物的葉綠體移入另一種植物以提高光合作用效率；這屬于細(xì)胞工程技術(shù)的應(yīng)用，與基因工程無(wú)關(guān)，B正確；

C；選擇“工程菌”來(lái)生產(chǎn)胰島素；需要將胰島素基因?qū)牍こ叹瑢儆诨蚬こ碳夹g(shù)的應(yīng)用，因此與基因工程有關(guān)，C錯(cuò)誤；

D；培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉；需要將抗蟲基因?qū)朊藁?xì)胞內(nèi)，屬于基因工程技術(shù)的應(yīng)用，因此與基因工程有關(guān)，D錯(cuò)誤。

故選B。5、C【分析】【分析】

基因工程又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)；是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來(lái)源的基因按預(yù)先設(shè)計(jì)的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性；獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品。

【詳解】

A；人類器官供求緊張；利用基因工程對(duì)豬的器官進(jìn)行改造，解決人類器官移植的來(lái)源問(wèn)題，A不符合題意；

B；白血病是一類造血干細(xì)胞異常的克隆性惡性疾病；ES細(xì)胞（胚胎干細(xì)胞）分裂能力強(qiáng)，可以分化成造血干細(xì)胞用于治療白血病，B不符合題意；

C；我國(guó)嚴(yán)禁對(duì)人體進(jìn)行基因編輯；最可能造成生物技術(shù)安全性與倫理問(wèn)題，C符合題意；

D；糖尿病與胰島素不足有關(guān)；通過(guò)改造基因使胰島素B28與B29位的氨基酸交換位置生產(chǎn)速效型胰島素，用于糖尿病的治療，D不符合題意。

故選C。二、多選題(共6題，共12分)6、A:C:D【分析】【分析】

疫苗研制已經(jīng)發(fā)展了三代：

第一代疫苗指的是滅活疫苗和減毒活疫苗；通過(guò)體外培養(yǎng)病毒，然后用滅活的病毒刺激人體產(chǎn)生抗體，它是使用最為廣泛的傳統(tǒng)疫苗；

第二代疫苗又稱為亞單位疫苗；是通過(guò)基因工程原理獲得的具有免疫活性的病原特異性結(jié)構(gòu)蛋白，刺激人體產(chǎn)生抗體；

第三代疫苗是核酸疫苗；又稱基因疫苗，包括DNA疫苗和mRNA疫苗，其中DNA疫苗是將編碼某一抗原蛋白的基因作為疫苗，注射到人體中，通過(guò)正常的人體生理活動(dòng)產(chǎn)生抗原蛋白，誘導(dǎo)機(jī)體持續(xù)作出免疫應(yīng)答產(chǎn)生抗體。

【詳解】

A；該疫苗是基因重組疫苗；需要將腺病毒載體和新冠病毒的基因進(jìn)行連接，所以該疫苗的制備需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，A正確；

B；受試者接受重組新冠病毒疫苗的接種后；體內(nèi)能產(chǎn)生分泌特定抗體的漿細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

C；主要通過(guò)檢測(cè)受試者體內(nèi)新冠病毒抗體的含量來(lái)評(píng)價(jià)試驗(yàn)的有效性；C正確；

D；新冠肺炎康復(fù)患者體內(nèi)產(chǎn)生了新冠病毒抗體和和相應(yīng)的記憶細(xì)胞；可以不注射該疫苗，D正確。

故選ACD。7、A:B【分析】【分析】

1；析題圖：步驟甲為細(xì)胞核移植；步驟乙為胚胎移植，其中誘導(dǎo)超數(shù)排卵用的是促性腺激素。

2；動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物。

3；胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎或者通過(guò)體外受精及其他方式得到的胚胎移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物體內(nèi)；使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。其中提供胚胎的個(gè)體稱為“供體”，接受胚胎的個(gè)體叫“受體”。

【詳解】

A；步驟甲和步驟乙分別是指細(xì)胞核移植和胚胎移植作用；所以整個(gè)過(guò)程用到的技術(shù)手段有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（重組胚胎培養(yǎng)）、動(dòng)物體細(xì)胞核移植和胚胎移植等，A正確；

B；誘導(dǎo)超數(shù)排卵所注射的激素是促性腺激素；只能作用于性腺，B正確；

C；重組細(xì)胞發(fā)育成早期胚胎所需營(yíng)養(yǎng)主要來(lái)源于去核的卵母細(xì)胞；C錯(cuò)誤；

D；步驟乙中的供體和受體需要同期發(fā)情處理；甲不需要，D錯(cuò)誤。

故選AB。

【點(diǎn)睛】

分本題結(jié)合圖解，考查胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記體外受精的過(guò)程及條件；識(shí)記早期胚胎培養(yǎng)的過(guò)程及條件，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。8、A:B:D【分析】【分析】

分析題文描述和題圖：圖示為采用稀釋涂布平板法分離常乳樣品中細(xì)菌總量的流程圖。首先將常乳樣品進(jìn)行一系列梯度稀釋，然后取1×105倍稀釋的稀釋液0.1mL分別涂布到3個(gè)平板上進(jìn)行培養(yǎng)。為了防止雜菌污染；稀釋涂布平板的所有操作都應(yīng)控制無(wú)菌條件。

【詳解】

A；為了防止雜菌污染；倒平板時(shí)應(yīng)將培養(yǎng)皿打開一條細(xì)縫，不要完全打開，A正確；

B；為了檢測(cè)一份常乳樣品中細(xì)菌的總量；圖示對(duì)常乳樣品進(jìn)行了一系列梯度稀釋，由此可見(jiàn)，上述方法是稀釋涂布平板法，培養(yǎng)基要營(yíng)養(yǎng)全面，適合各種細(xì)菌生長(zhǎng)，B正確；

C；通過(guò)連續(xù)劃線的方法接種；不易分離出單個(gè)菌落，不能用于微生物的計(jì)數(shù)，C錯(cuò)誤；

D、取1×105倍稀釋的稀釋液0.1mL分別涂布到3個(gè)平板上進(jìn)行培養(yǎng)，若三個(gè)平板上的菌落平均數(shù)為59，則所每毫升樣品中細(xì)菌總數(shù)為59÷0.1×105＝5.9×107；D正確。

故選ABD。9、B:D【分析】【分析】

我國(guó)科學(xué)家采用他們獨(dú)創(chuàng)的一種方法—花粉管通道法；將Bt基因?qū)肓嗣藁?xì)胞?；ǚ酃芡ǖ婪ㄓ卸喾N操作方式。例如，可以用微量注射器將含目的基因的DNA溶液直接注入子房中；可以在植物受粉后的一定時(shí)間內(nèi)，剪去柱頭，將DNA溶液滴加在花柱切面上，使目的基因借助花粉管通道進(jìn)入胚囊。除此之外，將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用的方法還有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。

【詳解】

A；根據(jù)表格信息；BamHI形成的黏性末端是-GATC-，NheI切割形成的粘性末端是-CTAG-，兩者形成的是不同的黏性末端，A錯(cuò)誤；

B；用EcoRI和HindⅢ切割質(zhì)粒；用MunI和HindⅢ切割目的基因，能讓目的基因定向插入質(zhì)粒的啟動(dòng)子和終止子之間，B正確；

C；在目的基因和NheI的識(shí)別位點(diǎn)之間添加EcoRI識(shí)別位點(diǎn)；EcoRI會(huì)破壞目的基因，不能使用EcoRI，C錯(cuò)誤；

D；花粉管萌發(fā)時(shí)；通過(guò)花粉管通道法可將重組基因?qū)肱吣?，?shí)現(xiàn)目的基因的導(dǎo)入，D正確。

故選BD。10、A:B【分析】【分析】

1；胚胎干細(xì)胞（1）哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞；來(lái)源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來(lái)。（2）具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造。

2；胚胎分割的特點(diǎn)：來(lái)自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)；胚胎分割可以看做動(dòng)物無(wú)性繁殖或克隆的方法之一。

【詳解】

A、精子在獲能液中于37℃、5%CO2條件下培養(yǎng)的目的是使精子獲能；具有受精“能力”，而不是獲得能量，A錯(cuò)誤；

B；分割的胚胎細(xì)胞有相同的遺傳物質(zhì)；但個(gè)體的性狀還受到環(huán)境的影響，因此發(fā)育成的個(gè)體有形態(tài)學(xué)差異，B錯(cuò)誤；

C；胚胎干細(xì)胞是從哺乳動(dòng)物的早期胚胎或原始性腺中獲得的；具有發(fā)育的全能性，具有自我更新能力和分化潛能，可以分化形成各種組織，C正確；

D；囊胚期細(xì)胞開始分化；其增殖過(guò)程中進(jìn)行的是有絲分裂，該過(guò)程中可能會(huì)發(fā)生基因突變和染色體變異，D正確。

故選AB。11、A:B:C:D【分析】【分析】

1；胚胎植入前遺傳學(xué)診斷通常是從體外授精后6～10個(gè)細(xì)胞階段的胚胎活檢；1～2個(gè)細(xì)胞進(jìn)行DNA的分析，將無(wú)遺傳病的胚胎植入子宮，從而防止有遺傳病的患兒出生或孕育中發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后，面臨終止妊娠的痛苦。

2；為行PGD而對(duì)配子或胚胎進(jìn)行的操作；在心理和倫理上可能很難被一些患者接受。

【詳解】

A；內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的細(xì)胞將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織。滋養(yǎng)層細(xì)胞；它們將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤。所以做基因診斷時(shí)，通常取少量滋養(yǎng)層細(xì)胞診斷是否患有遺傳病，A正確；

B；動(dòng)物細(xì)胞核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核；移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成一個(gè)新的個(gè)體；該過(guò)程中未用到核移植技術(shù)，B正確；

C；該技術(shù)在胚胎移植前進(jìn)行了遺傳學(xué)診斷；若該技術(shù)運(yùn)用不當(dāng)，如被用于性別鑒定等，可能會(huì)引發(fā)一定的倫理爭(zhēng)議，C正確；

D；分析遺傳系譜圖；該病為常染色體隱性遺傳病，雙親均為雜合子，EA1、EA3、EA4、EA5均為雜合子，EA2是顯性純合，EA1～EA5不患病均可作為植入的胚胎，D正確。

故選ABCD。

【點(diǎn)睛】三、填空題(共6題，共12分)12、略

【解析】平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠。將平板倒置，既可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染，又可避免培養(yǎng)基中的水分過(guò)快揮發(fā)13、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因的獲取14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】3，5，DNA聚合酶不能從頭開始合成，而只能從3，端延伸DNA子鏈的5，端向3，端15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】無(wú)菌毛霉其他菌種16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】DNA斷裂絮狀沉淀17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】沸水浴二苯胺藍(lán)色二苯胺四、判斷題(共4題，共16分)18、B【分析】【詳解】

理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，正確的做法是趨利避害，而不能因噎廢食，所以本題錯(cuò)誤。19、A【分析】【詳解】

微生物具有生理結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡(jiǎn)單的優(yōu)點(diǎn)，便于研究，生長(zhǎng)周期短，具有生長(zhǎng)繁殖快的優(yōu)點(diǎn)，遺傳物質(zhì)簡(jiǎn)單，具有容易進(jìn)行遺傳物質(zhì)操作的優(yōu)點(diǎn)，對(duì)環(huán)境因素敏感，因此對(duì)微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最廣泛和取得實(shí)際應(yīng)用成果最多的領(lǐng)域，這句話是正確的。20、A【分析】【詳解】

轉(zhuǎn)入到油菜的抗除草劑基因，則可能通過(guò)減數(shù)分裂進(jìn)入到花粉細(xì)胞中，進(jìn)而傳入環(huán)境中的其他生物體內(nèi)。本說(shuō)法正確。21、A【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)；過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。治療性克?。褐咐每寺〖夹g(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞和組織（皮膚、神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植。生殖性克隆：指將克隆技術(shù)用于生育目的；即用于產(chǎn)生人類個(gè)體。中國(guó)政府：禁止生殖性克隆人，堅(jiān)持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)），不反對(duì)治療性克隆人。

【詳解】

據(jù)分析可知；中國(guó)政府禁止生殖性克隆，但不反對(duì)治療性克隆。

故正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共6分)22、略

【分析】【分析】

醋酸菌是好氧性細(xì)菌；當(dāng)缺少糖源和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當(dāng)氧氣；糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?。腐乳的制作利用的微生物主要是毛霉，多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸，這些小分子物質(zhì)有利于人體的消化和吸收。

【詳解】

（1）傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般是指直接利用原材料中天然存在或前一次發(fā)酵保存下來(lái)的發(fā)酵物中的微生物進(jìn)行發(fā)酵；制作食品的技術(shù)；一般不需要嚴(yán)格滅菌。

（2）原漿醋中含有發(fā)酵產(chǎn)生醋酸的醋酸菌；加入原漿醋的目的是接種更多的醋酸菌，加入糖并經(jīng)常開蓋換氣的目的是保證糖源；氧氣都充足，當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。醋酸菌適宜的發(fā)酵溫度為30~35℃，故保溫箱溫度應(yīng)保持在30~35℃。

（3）腐乳的制作利用的微生物主要是毛霉；毛霉屬于真核生物，毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸，這些小分子物質(zhì)有利于人體的消化和吸收。①將白蘿卜切成小塊可以擴(kuò)大白蘿卜與腌料的接觸面積，縮短腌制時(shí)間，①正確；②用沸水短時(shí)處理，可抑制某些微生物的繁殖，提高泡菜品質(zhì)，也可縮短腌制時(shí)間，②正確；③泡菜汁中含有一定量的發(fā)酵菌種，所以在腌制過(guò)程中，加入一些已經(jīng)腌制過(guò)泡菜汁可縮短腌制時(shí)間，③正確；④泡菜制作所需菌種為乳酸菌，制作過(guò)程中應(yīng)保持無(wú)氧環(huán)境，向容器中通入無(wú)菌空氣不利于腌制，④錯(cuò)誤；綜上分析，①②③操作能達(dá)到縮短腌制時(shí)間。

（4）從泡菜汁中可分離制作酸奶的乳酸菌；首先對(duì)經(jīng)多次發(fā)酵的泡菜汁進(jìn)行過(guò)濾，然后取濾液用無(wú)菌水進(jìn)行稀釋，再用涂布分離的方法在特定的熱選擇培養(yǎng)基中進(jìn)行初步篩選乳酸菌。

【點(diǎn)睛】

本題考查傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用，意在考查考生對(duì)發(fā)酵原理、發(fā)酵過(guò)程的識(shí)記和應(yīng)用能力?！窘馕觥课⑸锎姿峋窃?、氧氣30~35毛霉真核小分子肽和氨基酸甘油和脂肪酸①②③稀釋選擇23、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作過(guò)程主要包括四個(gè)步驟：目的基因的獲??；基因表達(dá)載體的構(gòu)建；將目的基因?qū)耸荏w細(xì)胞；目的基因的檢測(cè)與鑒定。（1）目的基因的獲取方法目的基因的獲取方法主要有從自然界已有的物種中分離出來(lái)（如鳥槍法從基因文庫(kù)或cDNA文庫(kù)中獲?。?、人工合成（常用的方法有化學(xué)合成法和反轉(zhuǎn)錄法）、PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體；需分別用限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，用限制酶切割質(zhì)粒時(shí)，選擇的限制酶不可以破壞質(zhì)粒上的標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子等必須的結(jié)構(gòu)。用DNA連接酶連接，構(gòu)成重組質(zhì)粒。（3）將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法：將含有目的基因的表達(dá)載體提純→從雌性動(dòng)物體內(nèi)取出卵（可在體外受精，也可在體內(nèi)受精）→采用顯微注射儀進(jìn)行顯微注射→將注射了目的基因的受精卵經(jīng)胚胎早期培養(yǎng)一段時(shí)間后，移植到雌性動(dòng)物的輸卵管或子宮內(nèi)，使其發(fā)育成為具有新性狀的動(dòng)物。

2；蛋白質(zhì)工程的基本途徑是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列。

【詳解】

（1）獲取目的基因的方法主要有三種；最簡(jiǎn)便的是PCR技術(shù)。

（2）用限制酶切割質(zhì)粒時(shí)；選擇的限制酶不可以破壞質(zhì)粒上的標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)；啟動(dòng)子、終止子等必須的結(jié)構(gòu)，由圖可知可選用NdeⅠ、BamHⅠ兩種限制酶切割質(zhì)粒。用DNA連接酶將切割后的質(zhì)粒與目的基因連接。在動(dòng)物基因工程中將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時(shí)通常的方法是顯微注射法。

（3）上述建構(gòu)好的表達(dá)載體含有能夠表達(dá)β-萄糖苷酶(BglB)的基因；轉(zhuǎn)基因大腸桿菌能夠分泌出有活性的β-萄糖苷酶，所以能夠降解纖維素。

（4）蛋白質(zhì)工程的基本途徑是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列。【解析】(1)PCR

(2)NdeⅠBamHⅠDNA連接酶顯微注射法。

(3)轉(zhuǎn)基因的大腸桿菌分泌出有活性的BglB酶。

(4)設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列六、綜合題(共3題，共15分)24、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。簭幕蛭膸?kù)中獲取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）分析題意；研究人員從土壤微生物基因組中擴(kuò)增得到目標(biāo)酶基因采用了PCR技術(shù)，此外獲得酶基因的方法還有從基因文庫(kù)中獲取和人工合成法。

（2）高質(zhì)量的DNA模板是成功擴(kuò)增出目的基因的前提條件之一。在制備高質(zhì)量DNA模板時(shí)必須除去蛋白；可根據(jù)DNA和蛋白質(zhì)的溶解性；對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性去除蛋白質(zhì)，方法有鹽析、酶解法或高溫變性法等。

（3）研究人員使用大腸桿菌BL21作為受體細(xì)胞、pET20b為表達(dá)載體分別進(jìn)行4種酶的表達(dá)。表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí)；首先應(yīng)制備感受態(tài)細(xì)胞，即利用鈣離子處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，使其易于接受外來(lái)的DNA分子?；蚬こ讨?，酶基因（目的基因）成功表達(dá)的產(chǎn)物酶蛋白的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，常用抗原-抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。

（4）依圖所示流程；在一定的溫度；pH等條件下，將4種酶與可溶性淀粉溶液混合組成一個(gè)反應(yīng)體系。由于酶的作用條件較溫和，若這些酶最適反應(yīng)條件不同，則可能導(dǎo)致有的酶失活而使反應(yīng)中斷。在分子水平上，可以通過(guò)改變基因的堿基序列，從而改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，實(shí)現(xiàn)對(duì)酶特性的改造