法庭科學(xué)DNA數(shù)據(jù)庫(kù)快速建設(shè)方案

法庭科學(xué)DNA數(shù)據(jù)庫(kù)

快速建設(shè)方案2000年2004年2011年起步全國(guó)聯(lián)網(wǎng)1000萬公安機(jī)關(guān)DNA數(shù)據(jù)庫(kù)的發(fā)展存在問題資金不足人員不足設(shè)備不足血樣血樣血樣血樣現(xiàn)有的技術(shù)改進(jìn)DNA提取血樣DNA免提取技術(shù)PCR擴(kuò)增快速PCR擴(kuò)增技術(shù)電泳分析快速電泳分析技術(shù)設(shè)計(jì)要求：擴(kuò)增時(shí)間一小時(shí)內(nèi)；5色熒光標(biāo)記；包括CODIS基因座，不少于15個(gè)基因座?？焖贁U(kuò)增試劑的研制快速擴(kuò)增試劑的研制組分終濃度Mg2+

2.5mMdNTPs0.25mM熱啟動(dòng)Taq酶5.0UTris-HCl10mMKCl50mMTC10mMNaN3

0.008%DPB0.3mg/mL94℃1min；98℃5s，59℃15s，72℃10s，28～30cycles；72℃10min；4℃forever。

快速擴(kuò)增試劑的研制峰值檢測(cè)：等位基因Ladder整體峰值不低于400RFU；基因座內(nèi)最低和最高峰峰值的比例≥60%；同色各基因座平均峰值的比例≥60%；不同色間平均峰值的比例≥60%；等位基因范圍內(nèi)非特異峰的峰值不能超過相鄰等位基因的20%?？焖贁U(kuò)增試劑的研制快速擴(kuò)增試劑的研制快速擴(kuò)增試劑的研制EX16ABkit9700型擴(kuò)增儀

57分鐘

3小時(shí)9分鐘

Veriti擴(kuò)增儀

35分鐘

2小時(shí)50分鐘

快速擴(kuò)增試劑的研制0.12ng的9947A，能夠檢出每個(gè)基因座的基因分型快速擴(kuò)增試劑的研制0.5ng9947A擴(kuò)增結(jié)果，達(dá)到試劑盒均衡性要求快速擴(kuò)增試劑的研制狗的DNA分型結(jié)果快速擴(kuò)增試劑的研制9947A：9948=1：4分型結(jié)果快速擴(kuò)增試劑的研制9947A：9948=4：1分型結(jié)果快速擴(kuò)增試劑的研制快速擴(kuò)增試劑的研制快速擴(kuò)增試劑的研制快速擴(kuò)增試劑的研制快速擴(kuò)增試劑的研制快速擴(kuò)增試劑的研制快速電泳膠的研制

通過在聚(N,N—二甲基丙烯酰胺)存在的溶液中合成無規(guī)共聚(丙烯酰胺—N,N-二甲丙基烯酰胺)，形成一種新型準(zhǔn)互穿聚合物網(wǎng)絡(luò)，解決了傳統(tǒng)毛細(xì)管電泳凝膠不能兼顧分離效果與自涂敷功能的難題，合成新型毛細(xì)管電泳凝膠EXq_20。結(jié)果1、提取時(shí)間血樣直接擴(kuò)增，無需提取時(shí)間。2、擴(kuò)增時(shí)間采用9700型擴(kuò)增儀用時(shí)57分鐘，采用Veriti擴(kuò)增儀用時(shí)35分鐘。3、電泳時(shí)間采用EX-Q20膠電泳分析16個(gè)樣本一個(gè)Run用時(shí)