2025年西師新版選擇性必修3生物上冊月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年西師新版選擇性必修3生物上冊月考試卷176考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、分別將未分化細胞群培養(yǎng)在植物激素X和植物激素Y濃度比不同的培養(yǎng)基中；未分化細胞群的變化情況如圖所示。據(jù)圖分析下列敘述正確的是。

A.植物激素X是生長素B.植物激素Y可誘導(dǎo)芽的生成C.實驗所用的未分化細胞群可來自于不同種植物D.激素X和Y濃度比為1時細胞不能分化2、下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定的敘述，正確的是（）A.可以選取新鮮的洋蔥、豬成熟紅細胞等作為實驗材料B.DNA只能溶于2mol/LNaCI溶液C.預(yù)冷的乙醇可用來溶解DNAD.用二苯胺試劑鑒定DNA需要進行水浴加熱3、“X基因”是DNA分子上一個有遺傳效應(yīng)的片段；若要用PCR技術(shù)特異性地拷貝“X基因”，需在PCR反應(yīng)中加入兩種引物，兩種引物及其與模板鏈的結(jié)合位置如圖甲所示。經(jīng)4輪循環(huán)后，產(chǎn)物中有五種不同的DNA分子，如圖乙所示，其中第③和④種DNA分子的個數(shù)有（）

A.8個B.6個C.4個D.2個4、下圖表示改造哺乳動物遺傳特性的兩種途徑。下列敘述錯誤的是（）

A.將外源基因?qū)胧荏w細胞使用了顯微注射法B.獲得動物1的受體細胞是受精卵細胞C.獲得動物2的過程體現(xiàn)了受體細胞具有全能性D.動物1和2的獲得過程均運用了胚胎移植技術(shù)5、懸浮培養(yǎng)的動物細胞會因細胞密度過大、有害代謝產(chǎn)物積累等因素而分裂受阻。生產(chǎn)上常用灌流式培養(yǎng)避免這些現(xiàn)象出現(xiàn)。灌流式培養(yǎng)是在細胞培養(yǎng)管內(nèi)，一邊不斷注入新鮮培養(yǎng)基，一邊將培養(yǎng)液的上清液不斷移出。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.灌流式培養(yǎng)的細胞會貼壁生長，但不會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象B.灌流是在細胞密度達到一定濃度或者營養(yǎng)物質(zhì)低于一定濃度時進行C.過高的灌流速率會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)不能得到充分利用，造成培養(yǎng)基浪費D.配制灌流式培養(yǎng)所需培養(yǎng)基時應(yīng)考慮細胞生存的液體環(huán)境的滲透壓評卷人得分二、多選題(共6題，共12分)6、下列有關(guān)生物技術(shù)引起的安全性和倫理問題的敘述，不正確的是（）A.基因編輯制造嬰兒的行為是不符合倫理道德的B.設(shè)計試管嬰兒是為了治療疾病，不會出現(xiàn)負面影響C.我國禁止生殖性克隆人和有關(guān)人胚胎干細胞的研究D.世界各國都應(yīng)該禁止在任何情況下生產(chǎn)、儲存和發(fā)展生物武器7、為了檢測藥物X、Y和Z的抗癌效果，在細胞培養(yǎng)板的每個孔中加入相同數(shù)量的肺癌細胞使其貼壁生長。實驗組分別加入等體積相同濃度的溶于二甲基亞礬（溶劑）的藥物X、Y或Z，培養(yǎng)過程及結(jié)果如圖所示。下列敘述錯誤的是（）

實驗結(jié)果見下表：。組別細胞數(shù)目（個/孔）對照7．8×106藥物X6．7×104藥物Y5．3×105藥物Z8．0×106

A.對照組中只需加入等體積的二甲基亞礬溶劑即可B.細胞培養(yǎng)液中通常需要加入一定量的抗生素防止病毒污染C.計數(shù)時可用胰蛋白酶處理貼壁細胞，使肺癌細胞脫落下來D.根據(jù)實驗結(jié)果，三種藥物均具有抗癌效果，但藥物X的抗癌效果最好8、研究發(fā)現(xiàn)，跨膜糖蛋白CD47與巨噬細胞表面的信號調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，能抑制巨噬細胞的吞噬作用。腫瘤細胞表面的CD47含量比正常細胞表面的高，導(dǎo)致巨噬細胞對腫瘤細胞的清除效果減弱。為驗證抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用，科學(xué)家按照如下流程進行了實驗組實驗。下列敘述正確的是（）

A.①過程注射CD47相當(dāng)于給小鼠注射抗原B.②過程依據(jù)的原理是細胞膜具有流動性C.③過程需要進行抗體檢測D.與對照組相比，圖中巨噬細胞的吞噬指數(shù)會下降9、生活中常見的果酒、果醋和泡菜的制作離不開傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.家庭釀酒、制果醋和酸奶均需要選純種菌進行發(fā)酵B.果醋制作的溫度一般控制在30～35℃，果酒發(fā)酵的溫度一般控制在18～25℃C.制作泡菜壇口密封的目的是保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵時所需的無氧環(huán)境D.果醋制作中期通入氮氣，有利于醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?0、科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，未經(jīng)人工轉(zhuǎn)基因操作的番薯都含有農(nóng)桿菌的部分基因，而這些基因的遺傳效應(yīng)促使番薯根部發(fā)生膨大產(chǎn)生了可食用的部分，因此番薯被人類選育并種植。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.農(nóng)桿菌這些特定的基因可以在番薯細胞內(nèi)復(fù)制B.農(nóng)桿菌和番薯的基因都是4種堿基對的隨機排列C.農(nóng)桿菌和番薯的基因都是有遺傳效應(yīng)的DNA片段D.農(nóng)桿菌這些特定的基因可能在自然條件下轉(zhuǎn)入了番薯細胞11、新冠病毒通過刺突蛋白（S蛋白）的活性域（RBD）與人體細胞表面的ACE2受體相互作用感染細胞?？茖W(xué)家設(shè)計了一種自然界中不存在的蛋白質(zhì)LCB1，可與S蛋白的RBD緊密結(jié)合，以干擾新冠病毒的感染。下列說法合理的是（）A.LCB1可能與S蛋白的抗體在結(jié)構(gòu)上類似B.S蛋白的RBD結(jié)構(gòu)可為設(shè)計LCB1提供信息C.設(shè)計LCB1時，需避免在結(jié)構(gòu)上與ACE2類似D.生產(chǎn)LCB1涉及到基因工程的某些操作技術(shù)評卷人得分三、填空題(共6題，共12分)12、常用的轉(zhuǎn)化方法：

將目的基因?qū)胫参锛毎翰捎米疃嗟姆椒ㄊ莀______，其次還有______和______等。

將目的基因?qū)雱游锛毎鹤畛Ｓ玫姆椒ㄊ莀______。此方法的受體細胞多是_______。

將目的基因?qū)胛⑸锛毎涸松镒鳛槭荏w細胞的原因是_______，最常用的原核細胞是_____，其轉(zhuǎn)化方法是：先用______處理細胞，使其成為______，再將______溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。13、來源：主要是從______中分離純化出來的。14、細胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細胞很快就______，稱為______。細胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細胞分裂生長到表面______時，細胞就會_____，這種現(xiàn)象稱為______。15、什么是生物武器？簡述生物武器的危害。__________16、生物武器的致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，但對植物無害。（選擇性必修3P111）()17、第四步：_____評卷人得分四、判斷題(共2題，共8分)18、利用基因工程技術(shù)建立移植器官工廠是目前基因工程取得實際應(yīng)用成果非常多的領(lǐng)域。（選擇性必修3P90）()A.正確B.錯誤19、生殖性克隆是指通過克隆技術(shù)產(chǎn)生獨立生存的新個體。（選擇性必修3P106）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共36分)20、保加利亞桿菌和嗜熱鏈球菌是工業(yè)生產(chǎn)酸奶的常用菌種。酸奶制品在包裝；運輸和貯藏過程中；易受酵母菌、霉菌等耐酸性真菌污染。為了篩選出抗真菌污染的乳酸桿菌作為酸奶的輔助發(fā)酵菌，進行如下實驗。

（1）將待選的多株乳酸桿菌接種到MRS____________（填“固體”或“液體”）培養(yǎng)基中，進行擴大培養(yǎng)。培養(yǎng)過程需提供密閉環(huán)境，原因是_____________。培養(yǎng)后收集發(fā)酵上清液待用。

（2）向放有牛津杯（小金屬環(huán)）的培養(yǎng)皿中倒入含耐酸性真菌作指示菌的培養(yǎng)基（圖1），待培養(yǎng)基完全凝固后拔出牛津杯，培養(yǎng)基上留下直徑相等的小孔。往孔中加入等量不同乳酸桿茵的發(fā)酵上清液，待其擴散后置于恒溫箱中培養(yǎng)24h，測量抑菌圈（圖2）的大小。選取____________的乳酸桿菌F作為目標(biāo)菌種。

（3）研究者認為還要用___________做指示菌；重復(fù)上述實驗，確認F菌確實可作為工業(yè)生產(chǎn)酸奶的輔助發(fā)酵苗。

（4）為研究F菌在酸奶體系中對耐酸性真菌的抑制效果；進行了如下實驗。

①霉菌污染實驗：

將添加了1×106、1×107單位F菌發(fā)酵后的酸奶作為實驗組（各3杯平行樣品），恒溫放置28d，每7天肉眼觀察一次，記錄杯中酸奶表面是否有霉菌生長。請設(shè)計一個記錄原始實驗結(jié)果的表格或呈現(xiàn)最終實驗結(jié)果的統(tǒng)計表格（二選一，要標(biāo)注表格名稱）。___________________________

②酵母菌污染實驗：

在添加1×106、1×107單位F菌發(fā)酵所得的酸奶中接種等量酵母菌，4℃下儲藏28d后，用稀釋涂布法對酵母菌進行計數(shù)，結(jié)果表明F菌對酵母菌具有較高的抑菌率。不宜采用直接觀察法研究酸奶中酵母菌的生長情況，原因是________________。

（5）請?zhí)岢鲆粋€有關(guān)F菌作為酸奶發(fā)酵輔助菌的后續(xù)研究方向。_______________________21、GDNF是一種多肽類的神經(jīng)營養(yǎng)因子；對損傷的神經(jīng)細胞有營養(yǎng)和保護作用，可用于運動神經(jīng)細胞損傷的治療。

（1）培養(yǎng)運動神經(jīng)細胞：接種前需對培養(yǎng)液進行滅菌處理，培養(yǎng)過程中通常還需添加一定量的______，以防止污染；當(dāng)培養(yǎng)的運動神經(jīng)細胞達到一定數(shù)量時，使用______處理；進行傳代培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細胞，用于實驗研究。

（2）研究GDNF對運動神經(jīng)細胞生長的影響：將（1）得到的細胞；平均分成4組進行處理，得到實驗結(jié)果如下表所示．

GDNF對運動神經(jīng)細胞生長的影響。

。分組處理細胞突起的平均數(shù)量（個）細胞突起的平均長度（μm）AGDNF0ng/mL176120．12BGDNF50ng/mL217141．60CGDNF100ng/mL241160．39DGDNF200ng/mL198147．68①該實驗的對照組是_______。

②由表格中的數(shù)據(jù)可知_______。

③基于上述研究和所學(xué)的生物學(xué)知識，你能為治療運動神經(jīng)細胞損傷提供的方法有______。22、《本草綱目》記載；“蟬花可治療驚癇，夜啼心悸，功同蟬蛻”。蟬花是蟬擬青霉寄生于蟬若蟲后形成的蟲菌復(fù)合體，內(nèi)含蟲草多糖；甘露醇和必需氨基酸等活性成分。研究人員從天然蟬花中分離純化蟬擬青霉菌株進行人工培養(yǎng)。

(1)制備培養(yǎng)基：

①該實驗選擇馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）培養(yǎng)基，配方如下：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，KH2PO42g，MgSO40.5g，瓊脂20g，用蒸餾水定容至1000mL，自然pH，培養(yǎng)基中的馬鈴薯可為蟬擬青霉生長提供_____等營養(yǎng)成分（至少寫出2種），該培養(yǎng)基的自然pH為______性范圍。

②為了便于篩選蟬擬青霉菌株，培養(yǎng)基中還應(yīng)加入氯霉素等抗生素以抑制_____的生長。該培養(yǎng)基從功能上分類屬于______培養(yǎng)基。

③配制的培養(yǎng)基必須進行滅菌處理，目的是_______。檢測固體培養(yǎng)基滅菌效果的常用方法是_____。

(2)蟬擬青霉的分離純化：取新鮮蟬花，挑取蟲體胸腔中的少量菌絲采用_______法接種至PDA培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。

(3)發(fā)酵生產(chǎn)：發(fā)酵生產(chǎn)中常用液體培養(yǎng)基擴大培養(yǎng)。下表為發(fā)酵菌絲體和天然蟬花的主要成分及含量的測定結(jié)果，據(jù)表判斷_______（填“能”或“不能”）用發(fā)酵菌絲體替代天然蟬花，判斷的理由是_______。粗蛋白（%）粗纖維（%）灰份（%）水分（%）蟲草多糖（mg/g）甘露醇（mg/g）發(fā)酵菌絲體25．388．327．878．9233．278．9天然蟬花19．653．127．849．8128．553．623、四尾柵藻是一種淡水藻類；繁殖快；適應(yīng)性強，可作為制備生物柴油的重要原料之一。為提高四尾柵藻油脂含量，研究人員將從含油量高的紫蘇中獲得的二酰甘油?；D(zhuǎn)移酶基因（DGAT1）與pBI121質(zhì)粒構(gòu)建表達載體，經(jīng)轉(zhuǎn)化成功獲得高產(chǎn)油脂四尾柵藻，主要研究過程如下圖，其中DGAT1-F（5'-GCATCTAGAATGGCGATCTTGGACTC-3'）和DGAT1-R（5'-CGGATCCCTACCTTGCACTAGCTTTTC-3'）是以DGAT1基因為依據(jù)設(shè)計的一對引物，1acZ基因編碼產(chǎn)物在X-ga1和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍色，否則菌落呈現(xiàn)白色。請回答下列問題。

(1)過程①中需要的酶有____________，過程②應(yīng)選用的限制酶是____________和____________。

(2)研究中，在保存DGAT1基因時，將克隆載體導(dǎo)入大腸桿菌的優(yōu)點有____________。

①穩(wěn)定保存②準(zhǔn)確復(fù)制③快速表達④方便取用。

(3)過程③經(jīng)轉(zhuǎn)化的大腸桿菌通過____________（方法）接種到培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。為篩選獲得目標(biāo)菌株，培養(yǎng)基應(yīng)加入的成分有____________。

(4)為檢測表達載體轉(zhuǎn)化四尾柵藻的情況及確定目的基因是否表達，研究人員進行了如下實驗，請完成下表。實驗步驟簡要操作過程初篩培養(yǎng)經(jīng)轉(zhuǎn)化后的四尾柵藻接種于含①____________的BG11固體培養(yǎng)基并放置于人工氣候箱培養(yǎng)，一段時間后觀察其生長情況②____________在BG11固體培養(yǎng)基上分別挑取數(shù)個單藻落接種至BG11液體培養(yǎng)基中光照搖床培養(yǎng)，編號備用PCR驗證收集四尾柵藻藻體，提取基因組DNA，以DGAT1-F和DGAT1-R為引物，進行PCR驗證，未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻作對照油脂含量測定利用索氏抽提法分別測定③____________的油脂含量結(jié)果處理統(tǒng)計并比較PCR驗證結(jié)果及藻體中油脂的含量評卷人得分六、綜合題(共4題，共16分)24、尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥；但尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收，只有當(dāng)土壤中的細菌將尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某課題小組從土壤中分離能夠分解尿素的細菌并進行計數(shù)的過程如圖1所示，圖2是乙中的培養(yǎng)基配方?；卮鹣铝袉栴}：

(1)從物理性質(zhì)上講，培養(yǎng)液甲與培養(yǎng)基乙的成分的區(qū)別是_____，培養(yǎng)基乙中尿素主要為微生物生長提供_____。

(2)若要對培養(yǎng)基乙中的微生物進行鑒定，可在培養(yǎng)基中加入_____，觀察菌落周圍是否有_____色出現(xiàn)。

(3)稱取1．0g某土壤樣品轉(zhuǎn)入99mL無菌水中，再經(jīng)100倍稀釋后獲得低密度菌懸液。分別取0．1mL菌懸液涂布在多個固體培養(yǎng)基上，若經(jīng)培養(yǎng)后平均長出了46個酵母菌菌落，則該樣品中每克土壤約含酵母菌_____個。該方法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比實際活菌數(shù)_____（填“偏高”或“偏低”），原因是_____。25、基因工程是新品種花卉培育中的一種重要技術(shù)手段。研究發(fā)現(xiàn)普通矮牽?；ㄒ蛉狈λ{色色素合成所需的轉(zhuǎn)座酶而不能開藍色花，因此研究人員嘗試將從薔薇花瓣細胞中分離提取的轉(zhuǎn)座酶F35H基因轉(zhuǎn)入普通的矮牽牛中，以期獲得藍色矮牽牛新品種，該過程所用的質(zhì)粒與含轉(zhuǎn)座酶F35H基因的DNA片段上相關(guān)限制酶的酶切位點分別如圖1、圖2所示。限制性內(nèi)切核酸酶BamHI、Sau3AI、HindIII識別的堿基序列和酶切位點分別為

請回答下列問題：

(1)圖1質(zhì)粒中沒有顯示的結(jié)構(gòu)是______，啟動子的功能是______________。

(2)基因工程中除質(zhì)粒外，______也可以作為運載體。若用圖中質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座酶F35H基因構(gòu)建基因表達載體時，最好選用______兩種限制酶來切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，理由是________。

(3)將構(gòu)建好的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入土壤農(nóng)桿菌，最終成功導(dǎo)入藍色素基因的農(nóng)桿菌，在含氨芐青霉素培養(yǎng)基、含四環(huán)素培養(yǎng)基、同時含氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基上的生存狀況應(yīng)該是_______________。

(4)檢測轉(zhuǎn)座酶F35H基因是否成功在普通矮牽牛細胞中轉(zhuǎn)錄，常采用的檢測技術(shù)是______。

(5)通過基因工程，將轉(zhuǎn)座酶F35H基因?qū)肫胀ò珷颗Ｖ?，獲得藍色矮牽?；ㄐ缕贩N的育種原理是__________________。相比傳統(tǒng)的花卉育種方法，利用基因工程育種的優(yōu)點是_________（答出2點即可）。26、研究發(fā)現(xiàn)；新冠病毒外殼中的S蛋白具有很強的抗原性，可利用其制備單克隆抗體，制備流程設(shè)計如下圖所示，相關(guān)限制酶及其識別序列如下表所示，請分析回答問題：

限制酶識別序列和切割位點EcoRⅠG↓AATTCBamHⅡG↓GATCCBglⅠA↓GATCTSalⅠG↓TCGAC

（1）人體內(nèi)，分泌抗體的細胞可來自于____________________細胞的增殖分化。

（2）根據(jù)病毒的結(jié)構(gòu)，圖中①過程常用__________酶處理，完成②過程需要的酶是___________。

（3）檢測④過程是否獲得成功的方法是________________________，⑥過程常用的方法是_________________。

（4）利用PCR技術(shù)擴增無限增殖調(diào)控基因時，科研人員設(shè)計了如下一對引物（部分序列）：GAATTC____和____CCTAGG，其中下劃線部分序列的設(shè)計依據(jù)是___________，方框部分序列的設(shè)計目的是___________。

（5）抗體可變區(qū)氨基酸的組成和排列順序可隨抗體結(jié)合抗原的特異性不同而有較大的變異，由于可變區(qū)中氨基酸的種類以及排列順序干變?nèi)f化，故可形成許多種具有不同結(jié)合抗原特異性的抗體。為克服鼠源性單抗輸入人體后產(chǎn)生的免疫排斥反應(yīng)，科研人員通過人工改造鼠源性單抗獲得了嵌合抗體。分析下圖，你認為最符合臨床要求的嵌合抗體是A~D中的___________。嵌合抗體的研制屬于___________這一科技范疇。

27、2013年7月；中國試管嬰兒之母——盧光琇教授與研究伙伴共同宣布全球首批經(jīng)全基因組測序的PGD/PGS試管嬰兒在長沙誕生。新技術(shù)的突破意味著通過設(shè)計試管嬰兒解決部分不孕不育問題的同時，部分腫瘤疾??；遺傳性疾病的家族性遺傳也將有望避免。

（1）設(shè)計試管嬰兒時為了提高受孕率，胚胎移植時多采用多胚胎移植，因此需要用_________處理；促進母親排出更多的卵子。

（2）胚胎發(fā)育的卵裂期在_________內(nèi)進行。受精卵經(jīng)72小時體外培養(yǎng)發(fā)育成32細胞左右的桑椹胚，可用于__________。

（3）為了某些需要，需對胚胎的性別進行鑒定。目前最有效最準(zhǔn)確的方法是SRY﹣PCR法，操作的基本程序是：從被測的囊胚中取出幾個_______（填“部位”）細胞，提取DNA；然后用位于Y染色體上的性別決定基因（即SRY基因）的一段堿基作____，以_______為模板進行PCR擴增；與SRY特異性探針出現(xiàn)陽性反應(yīng)者，胚胎為_______性。

（4）設(shè)計試管嬰兒、克隆人等都是引起人們廣泛爭論的問題。我國不反對治療性克隆，即可利用人體細胞核移植等技術(shù)治療人類疾病，在去除卵母細胞的細胞核時，可用微型吸管把位于________和透明帶之間的第一極體一并吸出。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、D【分析】【詳解】

A；在植物組織培養(yǎng)中生長素的主要作用是促進細胞生長、分裂和分化；細胞分裂素的主要作用是促進細胞分裂、誘導(dǎo)芽的形成，二者共同起作用，故植物激素Y是生長素，植物激素X是細胞分裂素，A錯誤；

B；植物激素Y是生長素；可以誘導(dǎo)細胞群分化成根，B錯誤；

C；該實驗研究植物激素X和植物激素Y在植物組織培養(yǎng)中的作用；未分化細胞群應(yīng)來自于同種植物，C錯誤；

D；由圖可知；植物激素X與植物激素Y濃度比為1時，利于愈傷組織的形成，細胞不能分化；比值大于1時，利于細胞群分化出芽；比值小于1時，利于細胞群分化出根，D正確。

故選D。2、D【分析】【分析】

DNA的粗提取和分離：

1；DNA的溶解性：（1）DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低）；利用這一特點，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達到分離目的。（2）DNA不溶于酒精溶液，但是細胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進一步的分離。

2；DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性：蛋白酶能水解蛋白質(zhì)；但是對DNA沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60-80℃的高溫，而DNA在80℃以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解細胞膜，但對DNA沒有影響。

3；DNA的鑒定：在沸水浴條件下；DNA遇二苯胺會被染成藍色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A；豬是哺乳動物；哺乳動物的成熟紅細胞中沒有細胞核，不含DNA，不能用于做DNA提取實驗材料，A錯誤；

B；DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同；當(dāng)NaCl溶液的濃度為0.14mo/L時，DNA溶解度最小，0.15mol/L、2mol/LNaCI溶液中溶解度較大，B錯誤；

C；在預(yù)冷的95%酒精溶液中DNA的溶解度最低；DNA的沉淀量最大，故預(yù)冷的乙醇可用來進一步純化粗提的DNA，C錯誤；

D；在沸水浴條件下；DNA遇二苯胺會被染成藍色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑，D正確。

故選D。

【點睛】3、B【分析】PCR：

（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)；

（2）原理：DNA雙鏈復(fù)制；

（3）條件：模板DNA；四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；

（4）過程：高溫變性；低溫復(fù)性、中溫延伸。

（5）結(jié)果：經(jīng)過n次擴增，形成的DNA分子數(shù)是2n個；其中只有2條單鏈不含有引物。

【詳解】

通過圖中信息可知；“X基因”第1次復(fù)制得到兩個DNA：①和②各1個；“X基因”第2次復(fù)制得到4個DNA：①復(fù)制得①和③；②復(fù)制得②和④；“X基因”第3次復(fù)制得到8個DNA：①復(fù)制得①和③、③復(fù)制得③和⑤、②復(fù)制得②和④、④復(fù)制得④和⑤；“X基因”第4次復(fù)制得到16個DNA：①復(fù)制得①和③、②復(fù)制得②和④、2個③復(fù)制得2個③和2個⑤、2個④復(fù)制得2個④和2個⑤、兩個⑤復(fù)制得到4個⑤。

從上面的推測可知，經(jīng)4輪循環(huán)產(chǎn)物后，產(chǎn)物中有8個⑤、3個④、3個③、1個②、1個①。因此，經(jīng)4輪循環(huán)后，第③和④種DNA分子的個數(shù)有：3+3=6個，故選B。4、C【分析】【分析】

分析題圖：動物1是含有外源基因的受體細胞直接發(fā)育而來的轉(zhuǎn)基因動物；動物2是采用基因工程；核移植技術(shù)培養(yǎng)形成的轉(zhuǎn)基因克隆動物。

【詳解】

A；受體細胞為動物細胞時；將外源基因?qū)胧荏w細胞使用了顯微注射法，A正確；

B；轉(zhuǎn)基因動物的獲得需將目的基因?qū)胧芫?；故獲得動物1的受體細胞是受精卵細胞，因為受精卵的全能性高，B正確；

C；由重組細胞發(fā)育成一個完整的生物體動物2依據(jù)的原理是全能性；受體細胞不具有全能性，C錯誤；

D；兩種動物的獲得均運用了胚胎移植技術(shù)（分別需要移植到動物1和動物2體內(nèi)）；D正確。

故選C。5、A【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)：（1）概念：動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個細胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和繁殖。（2）原理：細胞增殖。（3）動物細胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。

【詳解】

A；懸浮培養(yǎng)的動物細胞不出現(xiàn)貼壁生長現(xiàn)象；A錯誤；

B；懸浮培養(yǎng)的動物細胞會因細胞密度過大、有害代謝產(chǎn)物積累等因素而分裂受阻；而灌流是在細胞密度達到一定濃度或者營養(yǎng)物質(zhì)低于一定濃度時進行，B正確；

C；過高的灌流速率；培養(yǎng)的細胞沒有及時利用營養(yǎng)物質(zhì)，會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)不能得到充分利用，造成培養(yǎng)基浪費，C正確；

D；動物細胞的細胞外液的滲透壓是相對穩(wěn)定且適宜的；配制灌流式培養(yǎng)所需培養(yǎng)基時應(yīng)考慮細胞生存的液體環(huán)境的滲透壓，D正確。

故選A。二、多選題(共6題，共12分)6、B:C【分析】【分析】

人們現(xiàn)在的倫理道德觀念還不能接受克隆人﹔設(shè)計試管嬰兒是為了治療疾??；但有可能被濫用，如用于設(shè)計嬰兒性別等，可能會出現(xiàn)負面影響﹔進行基因檢測時，可通過基因進行檢測，也可通過測定基因的表達產(chǎn)物蛋白質(zhì)來進行;對于基因歧視現(xiàn)象，可通過正確的科學(xué)知識傳播；倫理道德教育和立法得以解決。

【詳解】

A；基因編輯制造嬰兒的行為不符合倫理道德；A正確；

B；設(shè)計試管嬰兒如專門用來設(shè)計嬰兒性別是不符合倫理道德的；可能會存在負面影響，B錯誤；

C；我國禁止生殖性克隆人；但允許人胚胎干細胞的研究在有關(guān)規(guī)定下進行，C錯誤；

D；生物武器危害巨大；世界各國都應(yīng)禁止生物武器，D正確。

故選BC。7、B:D【分析】【分析】

分析題意可知:該實驗?zāi)康氖菣z測藥物X和Y的抗癌活性；自變量是藥物X或Y，因變量是檢測細胞數(shù)量。

【詳解】

A；加入等體積的二甲基亞礬溶作為空白對照；排除體積和溶劑等無關(guān)因素的影響，A正確;

B；抗生素具有殺菌(不是殺病毒)作用；為防止培養(yǎng)液被污染，可在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素，B錯誤;

C；要使貼壁細胞從瓶壁上分離下來；需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，C正確;

D；分析實驗結(jié)果；加入X的癌細胞個數(shù)是6.7×104，加入Y的癌細胞個數(shù)是5.3×105，說明藥物X的抗癌效果比Y好，加入Z的癌細胞個數(shù)是8.0×106，與空白對照相比無抗癌作用，D錯誤。

故選BD。8、A:B:C【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導(dǎo)B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；①過程注射CD47相當(dāng)于給小鼠注射抗原；通過多次注射可獲得更多已免疫的B淋巴細胞，A正確；

B；②過程表示誘導(dǎo)細胞融合；依據(jù)的原理是細胞膜具有流動性，B正確；

C；③過程表示雜交瘤細胞多次篩選培養(yǎng)；該過程需要進行抗體檢測，從而獲得能產(chǎn)生我們所需要抗體的雜交瘤細胞，C正確；

D；根據(jù)題干中“抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用”；因此與對照組相比，圖中巨噬細胞的吞噬指數(shù)會升高，D錯誤。

故選ABC。9、B:C【分析】【分析】

制作果醋的菌種為原核生物中的醋酸菌。醋酸菌是一種好氧菌。當(dāng)氧氣；糖源都充足時；醋酸菌將果汁中的糖分分解成醋酸；當(dāng)氧氣充足、糖源缺乏時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

A；家庭制作果酒、果醋和酸奶過程中有多種微生物參與發(fā)酵過程；因此均不是純種發(fā)酵，A錯誤；

B；果醋制作的溫度一般控制在30～35℃；果酒發(fā)酵的溫度一般控制在18～25℃，B正確；

C；泡菜腌制時需要乳酸菌發(fā)酵；乳酸菌是厭氧細菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成乳酸，因此壇子加水密封的目的是營造缺氧環(huán)境，利于乳酸菌發(fā)酵，C正確；

D；當(dāng)氧氣充足、糖源缺乏時；醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿幔珼錯誤。

故選BC。

【點睛】

本題考查考生運用所學(xué)知識解決問題的能力。10、A:C:D【分析】【分析】

1；基因的概念：基因是具有遺傳效應(yīng)的DNA片段；是決定生物性狀的基本單位。

2；基因和遺傳信息的關(guān)系：基因中的脫氧核苷酸（堿基對）排列順序代表遺傳信息。

【詳解】

A；DNA能夠自我復(fù)制；農(nóng)桿菌這些特定的基因可以在番薯細胞內(nèi)復(fù)制，A正確；

B；基因中4種堿基對的排列順序是特定的；B錯誤；

C；農(nóng)桿菌和番薯的基因都是有遺傳效應(yīng)的DNA片段；C正確；

D；農(nóng)桿菌這些特定的基因可能在自然條件下轉(zhuǎn)入了番薯細胞；如利用運載體，D正確。

故選ACD。

【點睛】11、A:B:D【分析】【分析】

1；蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。

2；蛋白質(zhì)工程崛起的緣由：基因工程只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)。

3；蛋白質(zhì)工程的基本原理：它可以根據(jù)人的需求來設(shè)計蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)；又稱為第二代的基因工程。

4；基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)；設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白質(zhì)工程特有的途徑。

【詳解】

A；S蛋白的抗體能與S蛋白RBD特異性結(jié)合；而根據(jù)題干可知：LCB1可與S蛋白RBD緊密結(jié)合，說明LCB1可能與S蛋白的抗體在結(jié)構(gòu)上類似，A正確；

B；由于LCB1可與S蛋白RBD緊密結(jié)合；故LCB1可依據(jù)S蛋白的RBD結(jié)構(gòu)進行設(shè)計，B正確；

C；由題干信息分析可知；新冠病毒是通過其表面的S蛋白的RBD與人體細胞表面的ACE2受體相互作用；而人工合成的LCB1可識別并緊密結(jié)合S蛋白的RBD，阻止S蛋白的RBD與ACE2受體結(jié)合，由此說明LCB1可能與ACE2受體的某些區(qū)域結(jié)構(gòu)類似，C錯誤；

D；可用蛋白質(zhì)工程進行LCB1的設(shè)計和生產(chǎn)；而蛋白質(zhì)工程是建立在基因工程的基礎(chǔ)之上的，因此生產(chǎn)LCB1用到了基因工程的操作技術(shù)，D正確。

故選ABD。

【點睛】三、填空題(共6題，共12分)12、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法顯微注射技術(shù)受精卵繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少大腸桿菌Ca2+感受態(tài)細胞重組表達載體DNA分子13、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】原核生物14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】貼附在瓶壁上細胞貼壁相互抑制停止分裂增殖細胞的接觸抑制。15、略

【分析】【詳解】

生物武器種類：包括致病菌類、病毒類、生化毒劑類等，以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。生物武器致病力強、攻擊范圍廣。把這些病原體直接或者間接通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由消化道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，也能損害植物，若用與戰(zhàn)爭，則可以對軍隊和平民造成大規(guī)模殺傷后果?！窘馕觥可镂淦鞣N類：包括致病菌類、病毒類、生化毒劑類等，以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。生物武器致病力強、攻擊范圍廣。把這些病原體直接或者間接通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由消化道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，也能損害植物。16、略

【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，同時可毀壞植物，該說法錯誤?！窘馕觥垮e誤17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因的檢測和鑒定四、判斷題(共2題，共8分)18、B【分析】【詳解】

基因工程技術(shù)可以使建立移植器官工廠的設(shè)想成為現(xiàn)實；說明并未開始實際應(yīng)用。

故題中描述錯誤。19、A【分析】【詳解】

生殖性克隆，即通常所說的克隆人，通過克隆技術(shù)產(chǎn)生獨立生存的新個體，即通常所說的克隆人，該說法正確。五、實驗題(共4題，共36分)20、略

【分析】醇母菌生長時不出現(xiàn)菌絲；無法肉眼直接觀察研究F菌抑菌的機理，F(xiàn)茵抑菌物質(zhì)的化學(xué)本質(zhì)，F(xiàn)菌是否會影響酸奶的感官品質(zhì)，F(xiàn)菌對人體健康的影響（合理即可）

【分析】

菌種的擴大培養(yǎng)是發(fā)酵生產(chǎn)的第一道工序；該工序又稱之為種子制備。種子制備不僅要使菌體數(shù)量增加，更重要的是，經(jīng)過種子制備培養(yǎng)出具有高質(zhì)量的生產(chǎn)種子供發(fā)酵生產(chǎn)使用。擴大培養(yǎng)一般選液體培養(yǎng)基，因為液體培養(yǎng)基可與菌種充分接觸。

【詳解】

（1）將待選的多株乳酸桿菌接種到MRS液體培養(yǎng)基中；進行擴大培養(yǎng)。培養(yǎng)過程需提供密閉環(huán)境，原因是乳酸菌是厭氧型微生物/為乳酸菌創(chuàng)造無氧環(huán)境。培養(yǎng)后收集發(fā)酵上清液待用。

（2）據(jù)題意分析可知；選取抑菌圈較大的乳酸桿菌F作為目標(biāo)菌種，因為抑菌圈大，說明其抑制真菌的能力強。

（3）研究者認為還要用保加利亞桿菌和嗜熱鏈球菌做指示菌；重復(fù)上述實驗，確認F菌確實可作為工業(yè)生產(chǎn)酸奶的輔助發(fā)酵苗。

（4）為研究F菌在酸奶體系中對耐酸性真菌的抑制效果；進行了如下實驗。

①霉菌污染實驗：依據(jù)實驗的對照原則；還應(yīng)設(shè)置空白對照組，且同樣設(shè)3杯平行樣品，其它操作及觀察同實驗組，具體圖表見答案。

②酵母菌污染實驗：不宜采用直接觀察法研究酸奶中酵母菌的生長情況；原因是醇母菌生長時不出現(xiàn)菌絲，無法肉眼直接觀察.

（5）請?zhí)岢鲆粋€有關(guān)F菌作為酸奶發(fā)酵輔助菌的后續(xù)研究方向:研究F菌抑菌的機理；F茵抑菌物質(zhì)的化學(xué)本質(zhì)，F(xiàn)菌是否會影響酸奶的感官品質(zhì)，F(xiàn)菌對人體健康的影響。

【點睛】

本題主要考察微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識，其中準(zhǔn)確理解微生物培養(yǎng)的步驟，是解題的關(guān)鍵?！窘馕觥恳后w乳酸菌是厭氧型微生物/為乳酸菌創(chuàng)造無氧環(huán)境抑菌圈較大保加利亞桿菌和嗜熱鏈球菌記錄原始實驗結(jié)果表格。

。組別。

杯號。

放置時間（天數(shù)）

0

7

14

21

28

21

28

對照組。

1

2

3

實驗組1（1×106單位）

1

2

3

實驗組2（1×107單位）

1

2

3

呈現(xiàn)實驗結(jié)果的統(tǒng)計表格。

。組別。

放置時間（天數(shù)）

0

7

14

21

28

28

對照組。

實驗組1

實驗組2

21、略

【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)的具體過程：取胚胎或幼齡動物的器官或組織--剪碎組織--用胰蛋白酶處理分散成單個細胞--制成細胞懸液--轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)--貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞；制成細胞懸液--轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)．

（1）

動物細胞培養(yǎng)過程中；接種前需對培養(yǎng)液進行滅菌處理，培養(yǎng)過程中通常還需添加一定量的抗生素，以防止污染；當(dāng)培養(yǎng)的運動神經(jīng)細胞達到一定數(shù)量時，使用胰蛋白酶處理，進行傳代培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細胞，用于實驗研究。

（2）

①分析表格可知；A組的GDNF濃度為0，作為實驗的對照組。

②由表格中的數(shù)據(jù)可知；與對照組比較可知，實驗組中的細胞突起的平均數(shù)量和平均長度都更大，在一定范圍內(nèi)，且隨GDNF濃度增加，細胞突起的平均數(shù)量和平均長度都在增加，因此由表格中的數(shù)據(jù)可知，GDNF對運動神經(jīng)細胞生長有促進作用；在一定范圍內(nèi)，隨GDNF濃度增加，促進作用增強，超過最適濃度，促進作用減弱；GDNF濃度在100ng/ml時促進作用最明顯。

③從實驗可知；GDNF對運動神經(jīng)細胞生長有一定的促進作用，因此在治療運動神經(jīng)細胞損傷時，可以通過藥物/注射治療；基因治療、動物細胞融合制備單抗等方法治療運動神經(jīng)細胞損傷。

【點睛】

本題考查了動物細胞工程的有關(guān)知識，要求考生能夠識記動物細胞培養(yǎng)過程，能夠利用對照實驗的觀點分析表格數(shù)據(jù)，難度適中?！窘馕觥浚?）抗生素胰蛋白酶（膠原蛋白酶）

（2）A組GDNF對運動神經(jīng)細胞生長有促進作用；在一定范圍內(nèi)，隨GDNF濃度增加，促進作用增強，超過最適濃度，促進作用減弱；GDNF濃度在100ng/ml時促進作用最明顯藥物/注射治療、基因治療、動物細胞融合制備單抗等22、略

【分析】【分析】

為了殺滅培養(yǎng)基中的微生物；實驗所配制的培養(yǎng)基必須進行滅菌處理；可將滅菌后的固體培養(yǎng)基放置在適宜的溫度下培養(yǎng)一段時間，以檢測培養(yǎng)基的滅菌效果，若培養(yǎng)基中無菌落長出，說明培養(yǎng)基的滅菌是合格的；在固體培養(yǎng)基上接種微生物的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。

【詳解】

（1）①馬鈴薯中含有淀粉；蛋白質(zhì)和無機鹽等物質(zhì)；故培養(yǎng)基中的馬鈴薯可為蟬擬青霉生長提供碳源、氮源、無機鹽等營養(yǎng)成分；

培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性；培養(yǎng)細菌時需將pH調(diào)至中性或微堿性，即培養(yǎng)蟬擬青霉的培養(yǎng)基的自然pH為酸性范圍。

②氯霉素等抗生素可以通過抑制肽聚糖（細菌細胞壁的主要成分）的合成來抑制細菌的生長；而對真菌的生長無影響。為了便于篩選蟬擬青霉（真菌）菌株，培養(yǎng)基中還應(yīng)加入氯霉素等抗生素以抑制細菌的生長，該培養(yǎng)基從功能上分類屬于選擇培養(yǎng)基。

③為了殺滅培養(yǎng)基中的微生物；配制的培養(yǎng)基必須進行滅菌處理；將滅菌后的固體培養(yǎng)基放置在適宜的溫度下培養(yǎng)一段時間，若培養(yǎng)基中無菌落長出，說明固體培養(yǎng)基的滅菌是合格的。

（2）蟬擬青霉的分離純化：由（1）的題干信息可知；PDA為固體培養(yǎng)基，在固體培養(yǎng)基上接種微生物的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。

（3）根據(jù)題意“蟬花是蟬擬青霉寄生于蟬若蟲后形成的蟲菌復(fù)合體，內(nèi)含蟲草多糖、甘露醇和必需氨基酸等活性成分”，并結(jié)合表格信息可知，發(fā)酵菌絲體中各種活性成分的含量明顯高于天然蟬花，故能用發(fā)酵菌絲體來替代天然蟬花?！窘馕觥?1)碳源；氮源、無機鹽酸細菌選擇殺滅培養(yǎng)基中的微生物將滅菌的固體培養(yǎng)基放置在適宜的溫度下培養(yǎng)一段時間；觀察是否長出菌落。

(2)平板劃線（稀釋涂布平板）

(3)能發(fā)酵菌絲體活性成分的含量明顯高于天然蟬花23、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本工具：限制性內(nèi)切核酸酶；識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開。DNA連接酶，將兩個DNA片段連接起來，恢復(fù)被限制酶切開的磷酸二酯鍵。載體，將外源基因送入受體細胞。

2；基因工程的基本過程：目的基因的篩選與獲?。换虮磉_載體的構(gòu)建，將目的基因?qū)胧荏w細胞，目的基因的檢測和鑒定。

【詳解】

（1）過程①包括逆轉(zhuǎn)錄和PCR，逆轉(zhuǎn)錄需要反轉(zhuǎn)錄酶的參與，PCR過程需要耐高溫的DNA聚合酶。限制酶的作用是識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開，對比幾種限制酶的結(jié)合位點和DGAT1-F、DGAT1-R的堿基序列，可知過程②應(yīng)選用的限制酶是BamHI和XbaI。

（2）將克隆載體導(dǎo)入大腸桿菌；可以與外界環(huán)境隔離，能夠穩(wěn)定保存，準(zhǔn)確復(fù)制，大腸桿菌比基因方便取用，故選①②④。

（3）根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的分布可知所用接種方法是稀釋涂布平板法?？寺≥d體中含有氨芐青霉素抗性基因；1acZ基因；1acZ基因編碼產(chǎn)物在X-ga1和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍色，否則菌落呈現(xiàn)白色，所以為篩選獲得目標(biāo)菌株，培養(yǎng)基應(yīng)加入的成分有氨芐青霉素、X-gal、IPTG。

（4）pBI121質(zhì)粒中含有卡那霉素抗性基因，所以經(jīng)轉(zhuǎn)化后的四尾柵藻接種于含卡那霉素的BG11固體培養(yǎng)基并放置于人工氣候箱培養(yǎng)，一段時間后觀察其生長情況。在BG11固體培養(yǎng)基上分別挑取數(shù)個單藻落接種至BG11液體培養(yǎng)基中光照搖床培養(yǎng)，液體培養(yǎng)基可以用于擴大培養(yǎng)，增加四尾柵藻種群密度。上一步驟中用未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻作對照，所以利用索氏抽提法分別測定（等量的）轉(zhuǎn)化后和未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻的油脂含量，從而檢測表達載體轉(zhuǎn)化四尾柵藻的情況及確定目的基因是否表達?！窘馕觥?1)反轉(zhuǎn)錄酶、耐高溫的DNA聚合酶BamHIXbaI

(2)①②④

(3)稀釋涂布平板法氨芐青霉素；X-gal、IPTG

(4)卡那霉素擴大培養(yǎng)（等量的）轉(zhuǎn)化后和未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻六、綜合題(共4題，共16分)24、略

【分析】【分析】

1.培養(yǎng)基的概念及營養(yǎng)構(gòu)成。

（1）概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求；配制出的供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。

（2）營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水；碳源、氮源、無機鹽；此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細菌時需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時則需要提供無氧的條件。

2.微生物常見的接種的方法：

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

(1)

從物理性質(zhì)上講；培養(yǎng)液甲中無瓊脂，因此為液體狀態(tài)，培養(yǎng)基乙為固體狀態(tài)，是因為其成分中加入了凝固劑--瓊脂。培養(yǎng)基乙中尿素主要為微生物生長提供氮源，因為尿素中含有氮元素。

(2)

若要對培養(yǎng)基乙中的微生物進行鑒定；可在培養(yǎng)基中加入酚紅溶液，觀察菌落周圍是否有紅色出現(xiàn)，因為尿素分解菌能將尿素分解成氨和二氧化碳，其中氨會使培養(yǎng)基的pH升高，進而可使酚紅指示劑變紅。

(3)

稱取1．0g某土壤樣品轉(zhuǎn)入99mL無菌水中，再經(jīng)100倍稀釋后獲得低密度菌懸液。相當(dāng)于稀釋了104倍，分別取0．1mL菌懸液涂布在多個固體培養(yǎng)基上，若經(jīng)培養(yǎng)后平均長出了46個酵母菌菌落，則該樣品中每克土壤約含酵母菌46÷0.1×104=4．6×106個。該方法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比實際活菌數(shù)“偏低”；這是當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時，平板上只能觀察到一個菌落，而我們也統(tǒng)計的一個菌落，因此數(shù)量偏低。

【點睛】

熟知培養(yǎng)基的概念、成分和分類是解答本題的關(guān)鍵，掌握微生物接種的方法以及相關(guān)計算是解答本題的另一關(guān)鍵。分解尿素的微生物的分離和鑒別是本題的重要考點?！窘馕觥?1)培養(yǎng)液甲中無瓊脂氮源。

(2)酚紅溶液紅。

(3)4．6×106偏低當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時，平板上只能觀察到一個菌落25、略

【分析】【分析】

基因工程的基本操作程序：1；目的基因的獲?。涸嘶虿扇≈苯臃蛛x獲得、真核基因是人工合成；人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法、化學(xué)合成法、PCR技術(shù)擴增目的基因。2、基因表達載體的構(gòu)建；3、將目的基因?qū)胧荏w細胞；4、目的基因的檢測和表達。

【小題1】

基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟；基因表達載體上包括：目的基因；啟動子、終止子、復(fù)制原點和標(biāo)記基因等，根據(jù)圖1所示，質(zhì)粒中含有目的基因、標(biāo)記基因、啟動子、終止子，沒有標(biāo)注出來的結(jié)構(gòu)是復(fù)制原點。啟動子的作用是啟動轉(zhuǎn)錄，是RNA聚合酶識別并結(jié)合的部位。

【小題2】

基因工程中的運載體包括質(zhì)粒；噬菌體和動植物病毒。若選用BamHI限制酶；會將兩種標(biāo)記基因都破壞。選用HindIII和Sau3AI限制酶，既避免了目的基因和質(zhì)粒的任意連接，又保留了一種標(biāo)記基因（氨芐青霉素抗性基因）。

【小題3】

構(gòu)建好的重組質(zhì)粒上；含有氨芐青霉素抗性基因，但四環(huán)素抗性基因受損，因此能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長，但不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長。

【小題4】

目的基因是否成功在宿主細胞中轉(zhuǎn)錄；可采用PCR等技術(shù)檢測。

【小題5】

基因工程育種的原理是基因重組?；蚬こ痰膬?yōu)點主要有兩點：能按照人們的意愿定向改造生物的性狀、能打破不同物種間的生殖障礙?！窘馕觥?1)復(fù)制原點啟動轉(zhuǎn)錄；是RNA聚合酶識別并結(jié)合的部位。

(2)噬菌體和動植物病毒HindIII；Sau3AI防止