微生物檢驗的質(zhì)量控制

微生物檢驗的質(zhì)量控制在實際工作中存在許多復雜因素影響微生物學檢驗，可能給檢驗結果帶來偏差甚至錯誤，因此必須對影響檢驗結果的諸多因素采取控制手段保證檢驗結果的正確性，不斷完善微生物檢驗的質(zhì)量控制。

一、質(zhì)量控制

1、檢驗人員

(1)微生物檢驗不能完全依賴全自動鑒定儀器，檢驗工作中每一步驟均需要有高度的主觀分析和判斷能力，與個人的經(jīng)驗.技能和微生物檢驗基礎知識水平密切相關。

(2)除要求微生物檢驗人員必須具備嚴肅認真的工作態(tài)度，精密細致的觀察和操作習慣,注重個人衛(wèi)生外，還必須訓練掌握微生物檢驗技術。

(3)檢驗人員應執(zhí)行上崗前培訓制度，上崗前培訓合格方能上崗操作，還要主動參加學習、培訓、講座，學習新技術，掌握微生物學檢驗方法，標準及相關法律法規(guī)。

(4)參與編寫測試程序及儀器操作程序，學習質(zhì)量保證體系知識和計量學基本知識。

(5)參加各類水平測試和盲樣測試，提高檢測水平和分析問題，解決問題的能力。

(6)微生物學檢驗室負責人應定期對檢驗人員進行專業(yè)知識和操作熟練程度的考核，提高檢驗人員的素質(zhì)。

2、培養(yǎng)基

（1）為保證干粉培養(yǎng)基質(zhì)量指標，在實際工作中應注意；

加強包裝的密封性能；使用時盡量縮短開蓋時間；一般干性培養(yǎng)基放在低溫干燥的環(huán)境中保存，對于易受潮的品種，啟用后宜放入干燥器中保存；由于配制水分不同，啟用次數(shù)或時間增加，干粉培養(yǎng)基的pH值可能會有所變化，應隨時略加調(diào)整。

（2）培養(yǎng)基的配制應嚴格按照標準規(guī)定的方法進行操作，并做好原始記錄。

（3）為保證培養(yǎng)基必須在玻璃容器，搪瓷或鋁鍋中進行，如用銅，鐵器皿，會對微生物生長有毒害作用；

（4）配制培養(yǎng)基時應按檢驗項目規(guī)定的配方添加，不得隨意增減或更改培養(yǎng)基成分。

（5）要用專用的角匙取藥品，避免交叉污染而影響檢驗結果；培養(yǎng)基配制最好用蒸餾水或去離子水，避免使用自來水，因其中含有氯等抗菌物質(zhì)；

3、檢驗質(zhì)量

除按國家標準方法對所需檢驗項目進行檢測外，在實際工作中還應注意以下幾個方面，否則會影響檢驗結果的準確性：

（1）在定量檢驗時用重量法還是用體積法，檢驗結果會有誤差，因為此重不等于1的樣品，1ml和1g的化驗結果絕不會相等。一般固態(tài)的樣品宜用重量法，液體樣品宜用體積法。但對粘性液體，如用體積法，會粘附一定量的樣品在吸管上，因此此類樣品最好用重量法。

(2)如檢樣需用用無菌水或無菌生理鹽水稀釋，則最好用均質(zhì)器或組織碎機，以8000`10000轉/min的轉速處理1min，制成均勻的菌懸液。

(3)樣品稀釋時，常會滯留少量樣品在吸管內(nèi)外，應多加注意。

吸入液體后，應沿管壁慢慢注入遞增的稀釋中，特別注意此時吸管尖端切不可碰到稀釋液中。

(4)在培養(yǎng)基注入檢樣，菌懸液時，注意培養(yǎng)基溫度宜在45℃

-50℃

之間，并使培養(yǎng)基與檢樣，菌懸液充分混合。

(5)微生物培養(yǎng)時，應根據(jù)要求選擇正確的培養(yǎng)溫度和時間。二、微生物檢驗常用需監(jiān)控的設備和儀器：

培養(yǎng)箱（生化培養(yǎng)箱或CO2培養(yǎng)箱等）、干燥箱、高壓滅菌鍋、凈化工作臺、pH計、冰箱，（低溫冰箱或冷柜）溫度計、紫外燈、顯微鏡、離心機、天平。

小計量容器。

微生物測定儀器、微生物檢定儀器、空氣采樣器、酶標儀專用等。

1、高壓滅菌鍋的溫度控制

高壓滅菌鍋：生物指示菌法（常用）、化學變色紙片及高壓滅菌鍋溫度計等方法進行檢測。

生物指示菌法是一種高壓滅菌鍋的效果顯示法。

高壓滅菌鍋由專人按作業(yè)指導書操作，并做好每一次的作業(yè)記錄。

高壓滅菌鍋使用時，內(nèi)置物品不能太多，單位體積內(nèi)的內(nèi)容物（每瓶內(nèi)的培養(yǎng)基）不能太多。同時應注意內(nèi)容物不同耐受溫度?？偟谋┞稌r間最好不要超過45min。

高壓滅菌鍋日常工作記錄應包含以下信息：高壓滅菌的材料、開始時間、壓力/溫度、取出時間、高壓滅菌膠帶的顏色變化（日常常用無菌培養(yǎng)代替）。

高壓滅菌鍋溫度波動范圍：110，115和121±2℃。

高壓滅菌鍋校準周期一般在半年。

2、干燥滅菌箱溫度控制

干燥滅菌箱日常工作記錄中應包括以下信息：開始的時間、到達滅菌溫度時的時間、取出的時間（或關閉時間）。

干燥滅菌箱的溫度校準；用參考溫度計進行溫度測試。

干燥滅菌箱溫度要求與精確度：160±5℃或180

±5℃。前者為滅菌2h，后者為30min；

3、培養(yǎng)基配制用蒸餾水的控制

對于蒸餾水器來說：按設備說明，定期清潔離子交換器和更換離子交換材料。

檢測要求：西歐標準為微生物檢驗用蒸餾水的特定電導率<0.5ms/m；細菌數(shù)<50cfu>。我們的國家標準要求電導率≤25μS/cm，菌落總數(shù)不超過1000CFU/mL。

檢測頻率：1次/每月。

蒸餾水定點供應，并做好相應的質(zhì)量控制，記錄檢測結果。

4、天平的管理

天平放置要求：無振動、無氣流影響及水平臺面上

天平要有使用及運行檢查記錄。

天平作為計量儀器是列入國家強制檢定的范圍，一般1次/年進行檢定。

運行檢查頻率按運行計劃或按產(chǎn)品（天平生產(chǎn)廠家）給出的標準重量單位進行對照。

5、pH計

pH計使用前應用標準液進行校準。

緩沖液使用有效期：pH4.00約6個月；pH7.00約6個月；pH9.00約6個月；

pH計的維護：電極外表的定期清洗；電極敏感性檢測及極性恢復。

6、凈化工作臺的控制

水平流凈化工作臺工作區(qū)域，要求潔凈度