2025年滬教版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年滬教版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷835考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、雖然人們知道基因和疾病之間存在一定聯(lián)系，但有些人仍然反對(duì)進(jìn)行基因檢測(cè)。下列哪項(xiàng)不是這些人反對(duì)基因檢測(cè)的原因A.基因檢測(cè)可能破壞自身的基因結(jié)構(gòu)B.存在某種致病基因并不意味著一定患病C.有些遺傳病即使檢測(cè)出，也不能得到有效治療D.檢測(cè)結(jié)果可能會(huì)給受檢測(cè)的人帶來心理壓力2、藍(lán)細(xì)菌擬核DNA上有控制葉綠素合成的chlL基因。某科學(xué)家通過構(gòu)建該種生物缺失chlL基因的變異株細(xì)胞；以研究chlL基因?qū)θ~綠素合成的控制，技術(shù)路線如下圖所示，下列相關(guān)敘述不正確的是（）

A.①②過程應(yīng)使用不同的限制性內(nèi)切核酸酶B.①②過程都要使用DNA連接酶C.終止密碼子是基因表達(dá)載體的重要組成部分D.若操作成功，可用含紅霉素的培養(yǎng)基篩選出該變異株3、下列敘述中，不正確的是（）A.每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只能分泌一種特異性抗體B.在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pHC.哺乳動(dòng)物細(xì)胞核移植可分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植D.植物組織培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合得到的都只是細(xì)胞或雜交（種）細(xì)胞4、印度沙漠貓是一種珍稀貓科動(dòng)物,通過胚胎工程技術(shù),可以讓家貓代孕而繁育,主要步驟如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是()

A.步驟甲、乙分別是指精子獲能、胚胎分割B.誘導(dǎo)超數(shù)排卵所注射的激素只能作用于特定細(xì)胞C.受精卵發(fā)育成早期胚胎所需營(yíng)養(yǎng)主要來源于培養(yǎng)液D.步驟甲使用的培養(yǎng)液和早期胚胎培養(yǎng)液成分基本相同5、某種轉(zhuǎn)基因玉米能高效合成一種多肽類的蛋白酶抑制劑，積累于莖葉中，讓取食它的害蟲的消化酶受抑制無法消化食物而死。下列就該玉米對(duì)人類安全性的評(píng)論中，不符合生物學(xué)原理的是()A.不安全。這種玉米的果實(shí)(種子)也可能含有蛋白酶抑制劑，食用后使人因無法消化食物而患病B.不安全。該玉米的蛋白酶抑制劑基因可通過食物鏈富集并在人體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，使人體無法消化食物而患病C.安全。因?yàn)槿伺c害蟲消化酶的結(jié)構(gòu)存在差異，玉米的蛋白酶抑制劑對(duì)人體很可能無影響D.安全。人類通常食用煮熟的玉米食品，玉米的蛋白酶抑制劑已被高溫破壞，不會(huì)影響人的消化6、如圖是培育“試管嬰兒”的主要過程。2012年中國(guó)首例“設(shè)計(jì)試管嬰兒”誕生；該女嬰出生目的是挽救患有重度致命貧血病的14歲姐姐。

下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.“設(shè)計(jì)試管嬰兒”需在②時(shí)進(jìn)行遺傳學(xué)診斷B.“試管嬰兒”“設(shè)計(jì)試管嬰兒”均屬有性生殖C.“設(shè)計(jì)試管嬰兒”的技術(shù)不屬于“治療性克隆”D.該女嬰造血干細(xì)胞不能挽救其他貧血病患者7、CD47是一種跨膜糖蛋白，它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1．6~5倍，導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱?？茖W(xué)家推測(cè)，抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，為此他們按照如下流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。下列錯(cuò)誤的是（）

A.多次進(jìn)行步驟①的目的是獲得更多已免疫的B淋巴細(xì)胞B.經(jīng)多次篩選可得到既能大量增殖又能產(chǎn)生抗CD47抗體的細(xì)胞C.實(shí)驗(yàn)組中巨噬細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的共培養(yǎng)體系需放入CO2培養(yǎng)箱D.對(duì)照組中吞噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)顯著高于實(shí)驗(yàn)組可驗(yàn)證上述推測(cè)8、關(guān)于DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的各步驟操作目的的表述哪項(xiàng)是錯(cuò)誤的（）A.離心沉淀的血細(xì)胞中加水是為了使血細(xì)胞破裂從而提取DNAB.加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液，是為了溶解DNAC.向溶解有DNA的NaCl溶液中加蒸餾水是為了洗滌DNA，除去雜質(zhì)D.離心后除去血液中的上清液是為了除去雜質(zhì)評(píng)卷人得分二、多選題(共7題，共14分)9、下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.較高溫度和密閉環(huán)境有利于果醋的發(fā)酵B.鹽的用量、酒的種類和用量、溫度等均會(huì)影響腐乳風(fēng)味C.果酒、果醋和腐乳制作的微生物細(xì)胞呼吸產(chǎn)生CO2的場(chǎng)所都是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)D.與自然發(fā)酵相比，人工接種菌種不易被雜菌污染10、下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物安全性的敘述中，正確的是（）A.我國(guó)已經(jīng)對(duì)轉(zhuǎn)基因食品和轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品強(qiáng)制實(shí)施了產(chǎn)品標(biāo)識(shí)制度B.國(guó)際上大多數(shù)國(guó)家都在轉(zhuǎn)基因食品標(biāo)簽上警示性注明可能的危害C.開展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，預(yù)警跟蹤和風(fēng)險(xiǎn)管理是保障轉(zhuǎn)基因生物安全的前提D.目前對(duì)轉(zhuǎn)基因生物安全性的爭(zhēng)論主要集中在食用安全性和環(huán)境安全性上11、營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株就是在人工誘變或自發(fā)突變后，微生物細(xì)胞代謝調(diào)節(jié)機(jī)制中的某些酶被破壞，使代謝過程中的某些合成反應(yīng)不能進(jìn)行的菌株。這種菌株能積累正常菌株不能積累的某些代謝中間產(chǎn)物，為工業(yè)生產(chǎn)提供大量的原料產(chǎn)物。以下是實(shí)驗(yàn)人員利用影印法初檢氨基酸缺陷型菌株的過程。下列說法不合理的是（）

A.過程①的接種方法為稀釋涂布平板法，過程②兩種培養(yǎng)基的成分相同B.進(jìn)行過程②培養(yǎng)時(shí)必須先將絲絨布轉(zhuǎn)印至基本培養(yǎng)基上順序不能顛倒C.統(tǒng)計(jì)菌落種類和數(shù)量時(shí)要每隔24h觀察統(tǒng)計(jì)一次，直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定，以防止培養(yǎng)時(shí)間不足導(dǎo)致菌落數(shù)目偏大D.營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株細(xì)胞代謝調(diào)節(jié)機(jī)制中的某些酶被破壞，可能與核孔復(fù)合體的蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變有關(guān)12、勤洗手是預(yù)防病毒感染的有效措施。某公司在防控新型冠狀病毒期間推出一款新型免洗洗手凝膠。為衡量該凝膠的清洗效果；研究人員檢測(cè)了用凝膠洗手前后手部細(xì)菌的含量。凝膠洗手前的檢測(cè)流程見下圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.統(tǒng)計(jì)洗手前手部細(xì)菌的數(shù)量，選擇的接種方法是平板劃線法B.除圖中操作外，還需要設(shè)置一組未接種的空白培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)C.培養(yǎng)基上的一個(gè)菌落只可能來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌D.初步判斷培養(yǎng)基上菌種的類型，需要用顯微鏡觀察菌體的形狀13、生物技術(shù)的飛速發(fā)展在安全性和倫理道德方面引發(fā)了許多爭(zhēng)論，你認(rèn)為下列說法哪些是正確的？（）A.科學(xué)家要對(duì)自己的科學(xué)研究負(fù)責(zé)，對(duì)社會(huì)負(fù)責(zé)B.科學(xué)家應(yīng)向公眾傳播科學(xué)知識(shí)C.公眾應(yīng)該理性地、負(fù)責(zé)任地對(duì)待這些問題D.公眾可以根據(jù)自己的價(jià)值觀采取不同的態(tài)度14、克隆動(dòng)物常用的核移植方法主要有細(xì)胞質(zhì)內(nèi)注射法和透明帶下注射法兩種。前者是用微型注射針將供體細(xì)胞的細(xì)胞核吸出注入去核卵母細(xì)胞質(zhì)內(nèi)；后者是直接將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞透明帶內(nèi)，然后促使兩個(gè)細(xì)胞融合。世界首例體細(xì)胞克隆北極狼的供體細(xì)胞來自哈爾濱極地公園的一只野生北極狼的皮膚樣本，卵母細(xì)胞來自一只處于發(fā)情期的母犬，代孕母體則是一只比格犬。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.克隆北極狼的性狀由野生北極狼、發(fā)情期的母犬和比格犬的基因共同決定B.相比之下，透明帶下注射法對(duì)供體細(xì)胞核和卵母細(xì)胞的損傷更小C.供體細(xì)胞注入卵母細(xì)胞透明帶內(nèi)后，就可自行進(jìn)入卵母細(xì)胞D.細(xì)胞分裂、分化形成克隆胚胎的過程中發(fā)生了基因重組15、原腸胚形成期被稱為人體胚胎發(fā)育的“黑匣子”時(shí)期。研究人員利用胚胎干細(xì)胞，在實(shí)驗(yàn)室中制造出不能發(fā)育成完整胚胎的“擬原腸胚”模型，用來揭示人類早期胚胎發(fā)育的過程。下列說法正確的是（）A.滋養(yǎng)層細(xì)胞將來能發(fā)育成胎膜和胎盤B.利用核移植所得胚胎干細(xì)胞，可以誘導(dǎo)發(fā)育成適合移植的器官C.對(duì)原腸胚進(jìn)行胚胎分割，可以提高移植胚胎的利用率D.該模型可以研究酒精、藥物和病原體對(duì)胚胎發(fā)育的影響評(píng)卷人得分三、填空題(共9題，共18分)16、哺乳動(dòng)物核移植可以分為______核移植（比較容易）和______核移植（比較難）。17、酶是細(xì)胞合成的生物催化劑。隨著生物科學(xué)技術(shù)的發(fā)展；酶已經(jīng)走出實(shí)驗(yàn)室，走進(jìn)人們的生產(chǎn)和生活。請(qǐng)回答下面有關(guān)酶的問題：

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成________，____________將脂肪水解為甘油和脂肪酸。加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應(yīng)用最廣泛；效果最明顯的是____________。

（2）果膠酶包括_____________________________；生產(chǎn)中如果要固定果膠酶；最好采用______________________________________法固定化。

（3）酶提取和分離原理：需要用__________法去除相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白，以純化酶；利用_________________________法對(duì)酶進(jìn)行純度鑒定。18、基因的“剪刀”是_____，它的化學(xué)本質(zhì)是_____，它只能識(shí)別一種特定的_____，并在_____上切割DNA分子；基因的“針線”是______，它能連接DNA骨架上的_____，DNA的骨架由___________構(gòu)成；基因的運(yùn)載體是將_____送入_____的運(yùn)輸工具。目前常用的運(yùn)載體有_____、________和_____。質(zhì)粒存在于許多_____和______等生物中，是擬核或_____外能夠_____的很小的環(huán)狀_____。19、______——“分子手術(shù)刀”20、重組DNA或重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞后，篩選______的依據(jù)是______。21、目的：使目的基因在受體細(xì)胞中_____，并且可以______，使目的基因能夠______作用。22、假設(shè)PCR反應(yīng)中，只有一個(gè)DNA片段作為模板，請(qǐng)計(jì)算在30次循環(huán)后，反應(yīng)物中大約有個(gè)這樣的_______個(gè)DNA片段，一共需要加入______________個(gè)引物。23、DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中，二苯胺要___________。24、基因表達(dá)載體的組成及其作用。

一個(gè)基因表達(dá)載體的組成，除了______________、_______________外，還必須有__________、______________等(如圖所示)。

①______________②______________③______________

④______________⑤______________⑥______________

⑦_(dá)_____________評(píng)卷人得分四、判斷題(共1題，共10分)25、治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的細(xì)胞、組織和器官，用它們來修復(fù)或替代受損的細(xì)胞、組織和器官，從而達(dá)到治療疾病的目的。（選擇性必修3P106）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共8分)26、如圖為果酒與果醋發(fā)酵裝置示意圖；請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）釀造葡萄酒時(shí)；在葡萄榨汁前，葡萄要先進(jìn)行________再除去枝梗，可以避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機(jī)會(huì)。

（2）將發(fā)酵裝置放在18～25℃環(huán)境中，每天擰開氣閥b多次；排出發(fā)酵過程產(chǎn)生的大量________。裝置中d處設(shè)計(jì)成彎曲形狀的目的是____________________________________________。

（3）10天之后；利用酸性條件下的________對(duì)從出料口c取樣的物質(zhì)進(jìn)行檢驗(yàn)，若樣液變?yōu)開_______色，說明產(chǎn)生了酒精。

（4）產(chǎn)生酒精后，若在發(fā)酵液中加入醋酸菌，然后將裝置放在________環(huán)境中，適時(shí)打開______向發(fā)酵液中充氣，原因是______________________________________________。27、某興趣小組就“泡菜腌制過程中亞硝酸鹽含量變化”開展了研究；操作如下：1月4日下午選取1；2、3號(hào)三只相同的泡菜壇，在每個(gè)壇中加入洗凈的新鮮蓮花菜0.6kg，再分別倒入等量煮沸并冷卻的10%的鹽水，將壇密封，置于同一環(huán)境中。封壇前進(jìn)行第一次取樣測(cè)定亞硝酸鹽含量，后來定時(shí)測(cè)定，結(jié)果如下圖。

（1）測(cè)定亞硝酸鹽含量的方法是_______；其原理是：在鹽酸酸化的條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成_____，將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行目測(cè)比較，可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。

（2）實(shí)驗(yàn)中；鹽水加熱煮沸是為了______；冷卻之后再使用是為了保證_______等微生物的生命活動(dòng)不受影響。

（3）在腌制過程中；壇中溶液量會(huì)增加，原因是_____。

（4）圖中數(shù)據(jù)表明；泡菜在腌制的第_____天亞硝酸鹽含量達(dá)到最大值，腌制到第______天以后再食用可以較好地避免亞硝酸鹽對(duì)人體健康的危害。

（5）實(shí)驗(yàn)中三只壇中產(chǎn)生的亞硝酸鹽含量存在差異；最可能的原因是__________。

（6）為了讓實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更好地表明泡菜腌制過程中亞硝酸鹽含量變化，對(duì)該實(shí)驗(yàn)所獲得的3組數(shù)據(jù)應(yīng)進(jìn)行怎樣的處理才更合理？_________________。28、物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物；會(huì)污染土壤。W在培養(yǎng)基中達(dá)到一定量時(shí)培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細(xì)菌（目標(biāo)菌）?；卮鹣铝袉栴}。

（1）要從土壤中分離目標(biāo)菌，所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應(yīng)該是_________。

（2）在從土壤中分離目標(biāo)菌的過程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細(xì)菌都能生長(zhǎng)并形成菌落（如圖所示）。如果要得到目標(biāo)菌，應(yīng)該選擇________菌落進(jìn)一步純化，選擇的依據(jù)是________。

（3）土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈础Ｈ粢O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?，?qǐng)簡(jiǎn)要寫出實(shí)驗(yàn)思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論，即_______。

（4）該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌；使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶（酶E）。為了比較酶E與天然酶降解W能力的差異，該小組擬進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)完善相關(guān)內(nèi)容。

①在含有一定濃度W的固體培養(yǎng)基上，A處滴加含有酶E的緩沖液，B處滴加含有相同濃度天然酶的緩沖液，C處滴加_________；三處滴加量相同。

②一段時(shí)間后，測(cè)量透明圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透明圈，說明___________；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說明___________。29、《本草綱目》記載；“蟬花可治療驚癇，夜啼心悸，功同蟬蛻”。蟬花是蟬擬青霉寄生于蟬若蟲后形成的蟲菌復(fù)合體，內(nèi)含蟲草多糖；甘露醇和必需氨基酸等活性成分。研究人員從天然蟬花中分離純化蟬擬青霉菌株進(jìn)行人工培養(yǎng)。

(1)制備培養(yǎng)基：

①該實(shí)驗(yàn)選擇馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）培養(yǎng)基，配方如下：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，KH2PO42g，MgSO40.5g，瓊脂20g，用蒸餾水定容至1000mL，自然pH，培養(yǎng)基中的馬鈴薯可為蟬擬青霉生長(zhǎng)提供_____等營(yíng)養(yǎng)成分（至少寫出2種），該培養(yǎng)基的自然pH為______性范圍。

②為了便于篩選蟬擬青霉菌株，培養(yǎng)基中還應(yīng)加入氯霉素等抗生素以抑制_____的生長(zhǎng)。該培養(yǎng)基從功能上分類屬于______培養(yǎng)基。

③配制的培養(yǎng)基必須進(jìn)行滅菌處理，目的是_______。檢測(cè)固體培養(yǎng)基滅菌效果的常用方法是_____。

(2)蟬擬青霉的分離純化：取新鮮蟬花，挑取蟲體胸腔中的少量菌絲采用_______法接種至PDA培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。

(3)發(fā)酵生產(chǎn)：發(fā)酵生產(chǎn)中常用液體培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)。下表為發(fā)酵菌絲體和天然蟬花的主要成分及含量的測(cè)定結(jié)果，據(jù)表判斷_______（填“能”或“不能”）用發(fā)酵菌絲體替代天然蟬花，判斷的理由是_______。粗蛋白（%）粗纖維（%）灰份（%）水分（%）蟲草多糖（mg/g）甘露醇（mg/g）發(fā)酵菌絲體25．388．327．878．9233．278．9天然蟬花19．653．127．849．8128．553．6評(píng)卷人得分六、綜合題(共3題，共9分)30、家畜胚胎的性別鑒定技術(shù)對(duì)畜牧業(yè)的發(fā)展具有重要意義。巢式PCR擴(kuò)增反應(yīng)在兩次PCR反應(yīng)中使用兩組不同引物；先使用外引物對(duì)目標(biāo)區(qū)域DNA片段進(jìn)行第一次PCR擴(kuò)增，產(chǎn)生中間產(chǎn)物，然后使用內(nèi)引物對(duì)中間產(chǎn)物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增，產(chǎn)生目標(biāo)產(chǎn)物。下圖是式PCR工作原理示意圖，請(qǐng)回答：

（1）巢式PCR反應(yīng)體系中需要加入模板、________、________、引物、Mg2+；緩沖液等。

（2）相比于常規(guī)PCR獲得的產(chǎn)物而言，巢式PCR獲得的產(chǎn)物特異性________，原因是如果利用外引物擴(kuò)增產(chǎn)生了錯(cuò)誤片段，再利用內(nèi)引物擴(kuò)增在錯(cuò)誤片段上進(jìn)行引物配對(duì)并擴(kuò)增的概率________。

（3）巢式PCR通常在一個(gè)試管中進(jìn)行第一階段反應(yīng)，然后將中間產(chǎn)物等轉(zhuǎn)移到第二試管中進(jìn)行第二階段反應(yīng)，不在同一試管完成的主要原因是________。

（4）科研人員利用多重巢式PCR技術(shù)同時(shí)擴(kuò)增Y染色體上雄性決定基因（SRY）和常染色體上的酪蛋白基因（CSN1S1）；進(jìn)行早期胚胎的性別鑒定，并將鑒定后的胚胎進(jìn)行移植。下表是主要實(shí)驗(yàn)步驟，請(qǐng)完成下表：

。實(shí)驗(yàn)?zāi)康姆椒ú襟E要點(diǎn)胚胎樣品DNA提取選取囊胚的①________細(xì)胞提取DNAPCR引物的設(shè)計(jì)和合成根據(jù)牛的SRY和CSN1S1基因序列設(shè)計(jì)合成②________對(duì)引物PCR過程預(yù)變性→③________→退火→延伸觀察擴(kuò)增結(jié)果電泳分析受體牛④________處理對(duì)受體牛注射前列腺素胚胎移植將篩選出的胚胎移植到受體牛的子宮內(nèi)

（5）電泳結(jié)果如下圖所示，1~5號(hào)為取自不同胚胎的DNA樣品進(jìn)行巢式PCR的產(chǎn)物。A和B條帶中代表CSN1S1的是________?？梢源_定1~5號(hào)中________號(hào)胚胎為雌性。

（6）牛胚胎性別的鑒定除了可以利用PCR外，下列方法也可行的有________。

①差速離心法。

②核酸探針雜交法。

③染色體核型分析法。

④H-Y抗血清免疫學(xué)法（H-Y抗原編碼基因位于Y染色體上）31、黃色鐮刀菌污染動(dòng)物飼料后會(huì)產(chǎn)生一種毒性較高的代謝產(chǎn)物—－脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON）；這給飼養(yǎng)的動(dòng)物及人類健康帶來巨大威脅。科研人員利用雜交瘤技術(shù)制備出抗DON的單克隆抗體，實(shí)現(xiàn)了對(duì)DON的高效低成本檢測(cè)。回答下列問題:

（1）制備單克隆抗體時(shí)，首先需要_______，隨后從小鼠脾臟獲得Ｂ淋巴細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)所需氣體____________。

（2）通過_________技術(shù)獲得雜交細(xì)胞后，再經(jīng)過篩選獲得所需的雜交瘤細(xì)胞，該細(xì)胞具有的特點(diǎn)是______________。

（3）為獲得大量的單克隆抗體，可將雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行______，從________中提取;或?qū)㈦s交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔；從小鼠腹水中提取。

（4）將已知濃度帶熒光標(biāo)記DON的溶液（標(biāo)準(zhǔn)樣品）、未知濃度不帶熒光標(biāo)記DoN的溶液（待測(cè)樣品）等量混合，加入事先吸附有上述單克隆抗體的固相載體中保溫一段時(shí)間，________________________（抗體與兩種DoN的結(jié)合能力相同）。得出劃線部分判斷所依據(jù)的原理是____________________。32、抗除草劑轉(zhuǎn)基因作物的推廣可有效減輕除草勞動(dòng)強(qiáng)度；提高農(nóng)業(yè)生產(chǎn)效率。圖1為抗除草劑轉(zhuǎn)基因玉米的技術(shù)流程。

(1)構(gòu)建含除草劑抗性基因的表達(dá)載體，傳統(tǒng)的方法是目的基因通過____________酶與載體進(jìn)行重組。載體上目的基因插入位點(diǎn)的限制酶識(shí)別序列____________（填“能”或“不能”）出現(xiàn)在目的基因內(nèi)部，可通過____________技術(shù)在目的基因兩側(cè)添加相應(yīng)限制酶識(shí)別序列；以便構(gòu)建表達(dá)載體。

(2)為了減少限制酶識(shí)別序列的影響，科研人員研發(fā)了新的DNA重組方法：無縫克隆In-Fusion技術(shù)（圖2），其中In-Fusion酶可以將任何具有相同15bp末端序列的線性DNA分子進(jìn)行連接；類似同源重組。

①科研人員希望應(yīng)用以上方法構(gòu)建含有A和GUS基因的重組DNA分子；首先獲得了3種DNA分子如圖3，然后混合進(jìn)行In-Fusion反應(yīng)。

如果引物2上額外添加的片段對(duì)應(yīng)于GUS基因中加粗的e片段，那么引物1和引物4上額外增加的片段分別對(duì)應(yīng)載體中的片段______________。完成重組反應(yīng)后，將產(chǎn)物表達(dá)載體加入經(jīng)過______________處理的農(nóng)桿菌中。

②為篩選成功轉(zhuǎn)入目標(biāo)重組DNA分子的菌落，可以選取引物______________擴(kuò)增目的基因并電泳檢測(cè)。請(qǐng)?jiān)趫D4中畫出陽(yáng)性菌落的電泳結(jié)果。

(3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化愈傷組織時(shí)，用含______________的選擇培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)化的愈傷組織。轉(zhuǎn)化過程中，愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌，導(dǎo)致未轉(zhuǎn)化愈傷組織（假陽(yáng)性）也可能在選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。已知報(bào)告基因GUS表達(dá)產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色，請(qǐng)敘述排除假陽(yáng)性的原理________。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、A2、C【分析】【分析】

分析題圖：圖示為變異株的培育過程。①是chIL基因與質(zhì)粒重組形成質(zhì)粒1的過程；②是紅霉素抗性基因和質(zhì)粒1重組形成質(zhì)粒2的過程；③是將重組質(zhì)粒2導(dǎo)入有chIL基因的藍(lán)藻細(xì)胞；并同源替換chIL基因，最終獲得無chIL基因的藍(lán)細(xì)菌。

【詳解】

A；①②過程切割的位點(diǎn)不同；應(yīng)該使用不同的限制性核酸內(nèi)切酶，A正確；

B；①②過程都是形成重組質(zhì)粒的過程；因此都要使用限制酶和DNA連接酶，B正確；

C；終止子是基因表達(dá)載體的重要組成部分；終止密碼子在mRNA上，不在基因上，C錯(cuò)誤；

D；②過程插入了紅霉素抗性基因；可作為標(biāo)記基因，若操作成功，可用含紅霉素的培養(yǎng)基篩選出該變異株，D正確。

故選C。

【點(diǎn)睛】

本題以藍(lán)細(xì)菌為素材，結(jié)合變異株的培育過程圖，考查基因工程的原理及技術(shù)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、工具及操作步驟。3、D【分析】【分析】

1；植物細(xì)胞工程包括植物組織培養(yǎng)技術(shù)和植物體細(xì)胞雜交技術(shù)；二者均利用了細(xì)胞的全能性；

2；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)利用了細(xì)胞增殖的原理；動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)只體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞核的全能性。

【詳解】

A；每一個(gè)效應(yīng)B淋巴細(xì)胞都是受到特定抗原刺激后產(chǎn)生的；只能分泌一種特異性抗體，A正確；

B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，5%CO2的作用是調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH；B正確；

C；根據(jù)核供體的不同；哺乳動(dòng)物細(xì)胞核移植可分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，C正確；

D；植物組織培養(yǎng)可獲得試管苗；植物體細(xì)胞雜交可獲得雜種植株，D錯(cuò)誤。

故選D。4、B【分析】【分析】

分析題圖：步驟甲為受精作用；步驟乙為胚胎移植，其中誘導(dǎo)超數(shù)排卵用的是促性腺激素，受精過程使用的培養(yǎng)液是獲能溶液或?qū)Ｓ檬芫芤?，早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分，除了一些無機(jī)鹽和有機(jī)鹽類外，還需添加維生素；激素、氨基酸、核苷酸以及血清等。

【詳解】

A；步驟甲、乙分別指受精作用、胚胎移植；A錯(cuò)誤；

B；誘導(dǎo)超數(shù)排卵所注射的激素是促性腺激素；只能作用于性腺，B正確；

C；受精卵發(fā)育成早期胚胎所需營(yíng)養(yǎng)主要來自受精卵；C錯(cuò)誤；

D；受精過程使用的培養(yǎng)液是獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤?；與早期胚胎培養(yǎng)液有區(qū)別，D錯(cuò)誤。

故選B。

【點(diǎn)睛】

本題是對(duì)胚胎工程的考查，解答本題的關(guān)鍵在于理解試管動(dòng)物培養(yǎng)的過程、超數(shù)排卵的激素作用特點(diǎn)和早期胚胎培養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)來源以及幾種不同培養(yǎng)液的成分：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液、植物組織培養(yǎng)基成分、體外受精培養(yǎng)液、早期胚胎培養(yǎng)液。5、B【分析】【分析】

1；（1）目前科學(xué)家對(duì)基因的結(jié)構(gòu)、基因間的相互作用以及基因的調(diào)控機(jī)制等都了解得相當(dāng)有限。（2）許多轉(zhuǎn)移的基因是異種生物的基因。（3）外源基因插入宿住基因組的部位往往是隨機(jī)的。因此在轉(zhuǎn)基因生物中；有時(shí)候會(huì)出現(xiàn)一些人們意想不到的后果。

2；轉(zhuǎn)基因食品的安全問題是雙刃劍；既有安全性也有不安全性。基因是有遺傳效應(yīng)的DNA片段，屬于大分子有機(jī)物，外源基因進(jìn)入動(dòng)物和人體的消化道后會(huì)被消化成小分子物質(zhì)，不能直接進(jìn)入動(dòng)物和人體細(xì)胞內(nèi)，更談不上通過食物鏈的富集和在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。

【詳解】

A；該種玉米的果實(shí)（種子）也可能含有蛋白酶抑制劑；食用后使人因無法消化食物而患病，不安全，A正確；

B；生物體攝取的蛋白酶抑制劑基因會(huì)被生物體消化為小分子核苷酸被吸收；不會(huì)在體內(nèi)表達(dá)，是安全的，B錯(cuò)誤；

C；由于不同物種的酶在結(jié)構(gòu)上有差異；該抑制劑對(duì)人體消化酶無影響，因此對(duì)人體是安全的，C正確；

D；人類通常食用煮熟的玉米；該抑制劑會(huì)被高溫破壞，因此不會(huì)影響人體，是安全的，D正確。

故選B。6、D【分析】【分析】

試管嬰兒技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)是通過體外受精獲得許多胚胎，然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

【詳解】

A；“設(shè)計(jì)試管嬰兒”的目的是用于治療某些疾?。恍柙冖谂咛ヒ浦睬斑M(jìn)行遺傳學(xué)診斷，A正確；

B；“試管嬰兒”和“設(shè)計(jì)試管嬰兒”均涉及精卵細(xì)胞在體外受精；所以均屬有性生殖，B正確；

C；“設(shè)計(jì)試管嬰兒”也是利用體外授精和胚胎移植的方法；培育新生命，屬于有性生殖，不屬于克隆，C正確；

D；只要供者和受者的主要HLA有一半以上相同；即可進(jìn)行器官移植，因此該女嬰造血干細(xì)胞也能挽救其他貧血病患者，D錯(cuò)誤。

故選D。7、D【分析】【分析】

單克隆抗體制備過程需要用到動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)；該過程中需要對(duì)融合細(xì)胞進(jìn)行兩次篩選，第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選的目的是獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。

單克隆抗體特異性強(qiáng)；靈敏度高；并能大量制備。

【詳解】

A；由圖可知；①過程為用CD47免疫小鼠，此過程需要多次進(jìn)行，目的是使小鼠產(chǎn)生更多已免疫的B淋巴細(xì)胞，A正確；

B；經(jīng)多次篩選得到的雜交瘤細(xì)胞即具有B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生抗CD47抗體的特性；又具有骨髓瘤細(xì)胞能大量增殖的特性，B正確；

C、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要放到含95%空氣和5%CO2混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；C正確；

D；由題干“抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用”可知；若實(shí)驗(yàn)組中抗CD47的單克隆抗體與腫瘤細(xì)胞表面的CD47結(jié)合，從而解除了CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，最終導(dǎo)致巨噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的吞噬指數(shù)高于對(duì)照組，才可以驗(yàn)證科學(xué)家們推測(cè)，D錯(cuò)誤。

故選D。8、C【分析】【分析】

①DNA在氯化鈉溶液中的溶解度；是隨著氯化鈉濃度的變化而變化的。當(dāng)氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L時(shí)。DNA的溶解度最低。利用這一原理，可以使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出。

②DNA不溶于酒精溶液；但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精。利用這一原理，可以進(jìn)一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA。

③DNA遇二苯胺（沸水?。?huì)染成藍(lán)色；因此，二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A；離心沉淀的血細(xì)胞中加水是為了使血細(xì)胞破裂釋放DNA；從而提取DNA，A正確；

B；氯化鈉溶液的物質(zhì)的量濃度為2mol/L時(shí)；DNA溶解，B正確；

C；向溶解DNA的燒杯中加蒸餾水是為了降低氯化鈉溶液的濃度；從而是DNA析出，C錯(cuò)誤；

D；離心后除去血液中的上清液是為了除去雜質(zhì)；獲取血細(xì)胞，D正確。

故選C。二、多選題(共7題，共14分)9、A:C【分析】【分析】

1；在利用酵母菌發(fā)酵時(shí)最好是先通入足夠的無菌空氣在有氧環(huán)境下一段時(shí)間使其繁殖；再隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵；酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2；醋酸菌是好氧性細(xì)菌；當(dāng)缺少糖源時(shí)和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生長(zhǎng)的最佳溫度是在30℃～35℃。

3；豆腐的主要營(yíng)養(yǎng)成分是蛋白質(zhì)和脂肪；都是大分子有機(jī)化合物，難以消化、吸收，毛霉、酵母菌等多種微生物分泌的蛋白酶，能將蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸，在多種微生物的協(xié)同下，豆腐轉(zhuǎn)變成腐乳。

【詳解】

A；果醋制作的菌種是醋酸菌；屬于好氧菌，故密閉環(huán)境不利于果醋的發(fā)酵，A錯(cuò)誤；

B；腐乳制作過程中；鹽的用量、酒的種類和用量、溫度等均會(huì)影響腐乳風(fēng)味，B正確；

C、參與果酒制作的酵母菌是兼性厭氧型真核生物，參與果醋制作的醋酸菌是需氧型原核生物，參與腐乳制作的毛霉是需氧型真核生物，所以果酒制作的微生物細(xì)胞呼吸產(chǎn)生CO2的場(chǎng)所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)或線粒體、果醋制作的微生物細(xì)胞呼吸產(chǎn)生CO2的場(chǎng)所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，而腐乳制作的微生物細(xì)胞呼吸產(chǎn)生CO2的場(chǎng)所是線粒體；C錯(cuò)誤；

D；與自然發(fā)酵相比；人工接種過程中利用了嚴(yán)格的滅菌措施，可以防止其它雜菌污染，且發(fā)酵獲得的產(chǎn)品品質(zhì)更好，D正確。

故選AC。

【點(diǎn)睛】10、A:C:D【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。轉(zhuǎn)基因食品、產(chǎn)品上都要標(biāo)注原料來自轉(zhuǎn)基因生物；如“轉(zhuǎn)基因××”“轉(zhuǎn)基因××加工品（制成品）”“加工原料為轉(zhuǎn)基因××”“本產(chǎn)品為轉(zhuǎn)基因××加工制成”．對(duì)于轉(zhuǎn)基因食物潛在隱患要進(jìn)行開展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、預(yù)警跟蹤等措施多環(huán)節(jié)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)陌踩栽u(píng)價(jià)，保障了現(xiàn)代生物技術(shù)的安全性。

【詳解】

A；為了加強(qiáng)對(duì)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物的標(biāo)識(shí)管理；保護(hù)消費(fèi)者的知情權(quán)，我國(guó)對(duì)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物實(shí)行了標(biāo)識(shí)制度，A正確；

B；轉(zhuǎn)基因食品上只標(biāo)明原料來自轉(zhuǎn)基因生物；并未標(biāo)明其危害，B錯(cuò)誤；

C；為了保障現(xiàn)代生物技術(shù)的安全性；需要開展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、預(yù)警跟蹤等措施，C正確；

D；生物安全是指擔(dān)心轉(zhuǎn)基因生物會(huì)影響到生物多樣性；D正確。

故選ACD。11、A:C:D【分析】【分析】

完全培養(yǎng)基中含有微生物生長(zhǎng)所需要的各種營(yíng)養(yǎng)成分；基本培養(yǎng)基缺少某種營(yíng)養(yǎng)成分，通過影印培養(yǎng)法，二者接種的菌種相同，基本培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)的菌株即為營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株。

【詳解】

A；過程①得到的菌落均勻分布；接種方法為稀釋涂布平板法，過程②兩種培養(yǎng)基的成分不同，基本培養(yǎng)基中缺乏某種氨基酸，A錯(cuò)誤；

B；進(jìn)行過程②培養(yǎng)時(shí)先將絲絨布轉(zhuǎn)印至完全培養(yǎng)基上；可能會(huì)攜帶某種氨基酸進(jìn)入基本培養(yǎng)基，因此順序不能顛倒，B正確；

C；統(tǒng)計(jì)菌落種類和數(shù)量時(shí)要每隔24h觀察統(tǒng)計(jì)一次；直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定，以防止培養(yǎng)時(shí)間不足導(dǎo)致菌落數(shù)目偏小，C錯(cuò)誤；

D；若該菌株為原核細(xì)胞；則不存在核孔復(fù)合體，營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株細(xì)胞代謝調(diào)節(jié)機(jī)制中的某些酶被破壞，應(yīng)是控制該酶合成的基因發(fā)生突變，D錯(cuò)誤。

故選ACD。

【點(diǎn)睛】12、A:C:D【分析】微生物常見的接種方法（稀釋涂布平板法可用于微生物的計(jì)數(shù)）：

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；平板劃線無法得知稀釋倍數(shù)；不能用于活菌計(jì)數(shù)，故統(tǒng)計(jì)洗手前手部細(xì)菌的數(shù)量，選擇的接種方法是稀釋涂布平板法，A錯(cuò)誤；

B；除圖中操作外；還需要設(shè)置一組未接種的空白培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，以驗(yàn)證培養(yǎng)基是否被雜菌污染，B正確；

C；由于當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)；平板上顯示的只是一個(gè)菌落，故培養(yǎng)基上的一個(gè)菌落可能來源于樣品稀釋液中的一個(gè)、甚至幾個(gè)活菌，C錯(cuò)誤；

D；由于菌落肉眼可見；故初步判斷培養(yǎng)基上菌種的類型，可用肉眼觀察菌體的形態(tài)特征，D錯(cuò)誤。

故選ACD。13、A:B:C【分析】【分析】

1；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）．對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的正確做法是趨利避害；不能因噎廢食.

2；對(duì)生物技術(shù)中的倫理問題的爭(zhēng)論；中國(guó)政府的態(tài)度：禁止生殖性克隆人，堅(jiān)持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)），不反對(duì)治療性克隆人.

【詳解】

A；科學(xué)家要對(duì)自己的科學(xué)研究負(fù)責(zé)；對(duì)社會(huì)負(fù)責(zé)，重視轉(zhuǎn)基因生物的安全性等問題，A正確；

B；科學(xué)家應(yīng)向公眾傳播科學(xué)知識(shí)；使人們正確認(rèn)識(shí)生物技術(shù)的安全性和倫理道德問題，B正確；

C；公眾應(yīng)科學(xué)理性地對(duì)待轉(zhuǎn)基因生物和轉(zhuǎn)基因食品等生物技術(shù)問題；正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食，C正確；

D；公眾應(yīng)該理性地、負(fù)責(zé)任地對(duì)待這些問題；不可以根據(jù)自己的價(jià)值觀采取不同的態(tài)度，D錯(cuò)誤。

故選ABC。14、A:C:D【分析】【分析】

動(dòng)物核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核；移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成為動(dòng)物個(gè)體。

【詳解】

A；克隆北極狼的供體細(xì)胞來自野生北極狼；卵母細(xì)胞來自發(fā)情期的母犬，因此性狀由野生北極狼、發(fā)情期的母犬的基因共同決定，比格犬只是代孕母體，不提供遺傳物質(zhì)，A錯(cuò)誤；

B；透明帶下注射法不抽取供體細(xì)胞的細(xì)胞核；操作簡(jiǎn)單且對(duì)供體細(xì)胞核損傷小，同時(shí)注射的位置是卵母細(xì)胞外的透明帶，然后誘導(dǎo)兩個(gè)細(xì)胞融合，對(duì)卵母細(xì)胞的損傷小，B正確；

C；供體細(xì)胞注入卵母細(xì)胞透明帶內(nèi)后；還需要電融合法等誘導(dǎo)才能使供體細(xì)胞進(jìn)入卵母細(xì)胞形成重構(gòu)胚，C錯(cuò)誤；

D；細(xì)胞分裂、分化形成克隆胚胎的過程是有絲分裂過程；而基因重組發(fā)生在減數(shù)分裂過程，D錯(cuò)誤。

故選ACD。15、A:B:D【分析】【分析】

胚胎干細(xì)胞：

1；哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞；來源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來；

2；具有胚胎細(xì)胞的特性；在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞；另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造。

【詳解】

A；滋養(yǎng)層細(xì)胞將來能發(fā)育成胎膜和胎盤；A正確；

B；利用核移植所得胚胎干細(xì)胞；可以誘導(dǎo)發(fā)育成適合移植的器官，可減少免疫排斥反應(yīng)，B正確；

C；胚胎分割時(shí)應(yīng)該選擇形態(tài)正常、發(fā)育良好的桑葚胚或囊胚；C錯(cuò)誤；

D；“擬原腸胚”模型可以研究酒精、藥物和病原體對(duì)胚胎發(fā)育的影響；D正確。

故選ABD。三、填空題(共9題，共18分)16、略

【解析】①.胚胎細(xì)胞②.體細(xì)胞17、略

【分析】【分析】

1；腐乳制作過程中多種微生物參與了發(fā)酵；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物產(chǎn)生蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪轉(zhuǎn)化成甘油和脂肪酸。

2；果膠酶能夠分解果膠；瓦解植物的細(xì)胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易，而果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得渾濁的果汁變得澄清。果膠酶并不特指某一種酶，而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶。

【詳解】

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪水解為甘油和脂肪酸；加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應(yīng)用最廣泛；效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。

（2）果膠酶并不特指某一種酶；而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶；果膠分解酶和果膠酯酶；在果汁生產(chǎn)過程中如果要固定果膠酶，最好采用化學(xué)結(jié)合和物理吸附法固定化，這是因?yàn)槊阜肿有?，體積小的酶容易從包埋材料中漏出。

（3）酶提取和分離原理：需要用凝膠色譜法去除相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白；以純化酶；利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法對(duì)酶進(jìn)行純度鑒定。

【點(diǎn)睛】

本題考查腐乳制作和酶提取等知識(shí)，對(duì)于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)采用的試劑及試劑的作用等，需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過程中注意積累?！窘馕觥啃》肿与暮桶被嶂久笁A性蛋白酶和堿性脂肪酶半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶化學(xué)結(jié)合法和物理吸附凝膠色譜（分配色譜）聚丙烯酰胺凝膠電泳18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】限制酶蛋白質(zhì)核苷酸序列特定的切點(diǎn)DNA連接酶缺口磷酸-脫氧核糖外源基因受體細(xì)胞質(zhì)粒噬菌體動(dòng)植物病毒細(xì)菌酵母菌細(xì)胞核自主復(fù)制DNA分子19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞標(biāo)記基因是否表達(dá)。21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】穩(wěn)定存在遺傳至下一代表達(dá)和發(fā)揮22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2030×22030×2－223、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】現(xiàn)配現(xiàn)用24、略

【分析】略【解析】目的基因標(biāo)記基因啟動(dòng)子終止子啟動(dòng)子上游RNA聚合酶終止子下游轉(zhuǎn)錄標(biāo)記四、判斷題(共1題，共10分)25、A【分析】【詳解】

治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的細(xì)胞、組織和器官，用它們來修復(fù)或替代受損的細(xì)胞、組織和器官，從而達(dá)到治療疾病的目的。本說法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共8分)26、略

【分析】【分析】

1；果酒制作過程中的相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作：

（1）材料的選擇與處理：選擇新鮮的葡萄；榨汁前先將葡萄進(jìn)行沖洗，除去枝梗。

（2）滅菌：①榨汁機(jī)要清洗干凈；并晾干；②發(fā)酵裝置要清洗干凈，并用70%的酒精消毒。

（3）榨汁：將沖洗除枝梗的葡萄放入榨汁機(jī)榨取葡萄汁。

（4）發(fā)酵：①將葡萄汁裝人發(fā)酵瓶；要留要大約1/3的空間，并封閉充氣口；②制葡萄酒的過程中，將溫度嚴(yán)格控制在18℃～25℃，時(shí)間控制在10～12d左右，可通過出料口對(duì)發(fā)酵的情況進(jìn)行，及時(shí)的監(jiān)測(cè)。③制葡萄醋的過程中，將溫度嚴(yán)格控制在30℃～35℃，時(shí)間控制在前7～8d左右，并注意適時(shí)通過充氣口充氣。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型，果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

（1）釀造葡萄酒時(shí)；在葡萄榨汁前，葡萄要先進(jìn)行進(jìn)行沖洗，然后再除去枝梗，可以避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機(jī)會(huì)。

（2）榨汁機(jī)要清洗干凈，并晾干，發(fā)酵裝置要清洗干凈，并用70%的酒精消毒，再裝入葡萄汁，將發(fā)酵裝置放在18～23℃環(huán)境中，發(fā)酵過程中由于酵母菌呼吸作用會(huì)產(chǎn)生二氧化碳，因此每天擰開氣閥b多次；排出發(fā)酵過程產(chǎn)生的大量二氧化碳。裝置中d處設(shè)計(jì)成彎曲形狀利用了巴斯德的鵝頸瓶的原理，即為了防止排氣時(shí)空氣中微生物的污染。

（3）酵母菌發(fā)酵的產(chǎn)物中會(huì)產(chǎn)生酒精；利用橙色的重鉻酸鉀可以檢測(cè)酒精的存在，酒精遇到橙色的重鉻酸鉀會(huì)變?yōu)榛揖G色，從而鑒定酒精的存在。

（4）溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件；20℃左右最適合酵母菌繁殖，因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌，最適生長(zhǎng)溫度為30℃～35℃，因此要將溫度控制在30℃～35℃。醋酸菌是好氧菌，在將酒精變?yōu)榇姿釙r(shí)需要氧的參與，因此要適時(shí)向發(fā)酵裝置中充氣，需要打開a閥通入空氣。

【點(diǎn)睛】

本題考查果酒和果醋的制作過程的知識(shí)點(diǎn)，要求學(xué)生掌握果酒的制作的原理、過程以及發(fā)酵過程中的注意事項(xiàng)是該題的重點(diǎn)，識(shí)記果酒的制作過程是解決重點(diǎn)的關(guān)鍵。理解并識(shí)記果醋的發(fā)酵過程和原理是解決第（4）問的關(guān)鍵。【解析】沖洗CO2防止排氣時(shí)空氣中微生物的污染重鉻酸鉀灰綠30～35℃氣閥a醋酸菌是好氧細(xì)菌，酒精轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿嵝枰鯕獠拍苓M(jìn)行27、略

【分析】試題分析：本題考查泡菜的制作；考查對(duì)泡菜制作原理；亞硝酸鹽含量檢測(cè)原理的理解和識(shí)記。解答此題，可根據(jù)圖中曲線升降規(guī)律判斷泡菜制作過程中亞硝酸鹽含量變化趨勢(shì)，分析其升降原因，確定適合食用的發(fā)酵時(shí)間。

（1）測(cè)定亞硝酸鹽含量可用比色法；其原理是：在鹽酸酸化的條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N—1—萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料，將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行目測(cè)比較，可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。

（2）高溫可使微生物中的蛋白質(zhì)變性；殺死微生物，實(shí)驗(yàn)中鹽水加熱煮沸可殺滅雜菌；冷卻之后再使用是為了避免高溫使乳酸菌死亡。

（3）在腌制過程中；由于鹽水溶液濃度過高，細(xì)胞滲透失水，使壇中溶液量會(huì)增加。

（4）據(jù)圖可知；1；2、3號(hào)泡菜壇中，在腌制的第7天亞硝酸鹽含量均達(dá)到最大值，腌制到第14天以后亞硝酸鹽含量降到較低水平，可以避免亞硝酸鹽對(duì)人體健康的危害。

（5）泡菜制作過程中亞硝酸鹽含量變化與微生物的數(shù)量和代謝強(qiáng)度有關(guān)；實(shí)驗(yàn)中三只壇中產(chǎn)生的亞硝酸鹽含量存在差異，最可能的原因是各壇中微生物種類和數(shù)量可能存在差異。

（6）為讓實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更好的表明泡菜腌制過程中亞硝酸鹽含量變化，避免偶然因素造成的數(shù)據(jù)誤差，應(yīng)對(duì)該實(shí)驗(yàn)所獲得的三組數(shù)據(jù)先求平均值，再繪制一條曲線(將三個(gè)壇中每次測(cè)定的亞硝酸鹽的含量分別記錄，求出平均值，然后以日期為橫坐標(biāo)，亞硝酸鹽的平均含量為縱坐標(biāo)畫出一條曲線)?！窘馕觥勘壬倒寮t色染料殺滅雜菌乳酸菌外界溶液濃度過高使細(xì)胞滲透失水814各壇中微生物種類和數(shù)量可能存在差異(或其他合理答案)先求平均值，再繪制一條曲線（將三個(gè)壇中每次測(cè)定的亞硝酸鹽的含量分別記錄，求出平均值，然后以日期為橫坐標(biāo)，亞硝酸鹽的平均含量為縱坐標(biāo)畫出一條曲線）28、略

【分析】【分析】

篩選培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或?qū)δ承┗瘜W(xué)；物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的；能選擇性地區(qū)分這種微生物的培養(yǎng)基。利用選擇培養(yǎng)基，可使混合菌群中的目標(biāo)菌種變成優(yōu)勢(shì)種群，從而提高該種微生物的篩選效率。

【詳解】

（1）該研究小組的目標(biāo)菌是能夠降解物質(zhì)W的細(xì)菌；而物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物，故可作篩選培養(yǎng)基中的氮源。

（2）研究小組的目標(biāo)菌；是能夠降解物質(zhì)W的細(xì)菌，培養(yǎng)基中乙菌落的周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌落能夠降解物質(zhì)W，故乙菌落為該小組的目標(biāo)細(xì)菌。

（3）目標(biāo)菌能夠利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?；故選用的篩選培養(yǎng)基不添加氮源，能夠在無氮源的培養(yǎng)基上生存的細(xì)菌便是目的細(xì)菌，故實(shí)驗(yàn)操作為：將甲；乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上，若細(xì)菌能生長(zhǎng)，則說明該細(xì)菌能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈础?/p>

（4）①C處作為空白對(duì)照；要排除作為溶劑的緩沖液對(duì)實(shí)驗(yàn)可能造成的影響，故需要在C處滴加緩沖液，且保持滴加量相同；②培養(yǎng)基中的透明圈表示物質(zhì)W被降解的情況，若C處不出現(xiàn)透明圈，則說明緩沖液不能降解物質(zhì)W；若A；B處形成的透明圈直徑大小相近，說明物質(zhì)W被降解的程度相近，即酶E與天然酶降解物質(zhì)W的能力相近。

【點(diǎn)睛】

本題考查篩選培養(yǎng)基的配置和使用，針對(duì)不同要求的目標(biāo)菌種，選擇不同物質(zhì)配制不同篩選作用的培養(yǎng)基。并且要求學(xué)生理解識(shí)別目標(biāo)菌種篩選的現(xiàn)象，判斷篩選結(jié)果。【解析】①.W②.乙③.乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌能降解W④.將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上，若細(xì)菌能生長(zhǎng)，則說明該細(xì)菌能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈储?緩沖液⑥.緩沖液不能降解W⑦.酶E與天然酶降解W的能力相近29、略

【分析】【分析】

為了殺滅培養(yǎng)基中的微生物；實(shí)驗(yàn)所配制的培養(yǎng)基必須進(jìn)行滅菌處理；可將滅菌后的固體培養(yǎng)基放置在適宜的溫度下培養(yǎng)一段時(shí)間，以檢測(cè)培養(yǎng)基的滅菌效果，若培養(yǎng)基中無菌落長(zhǎng)出，說明培養(yǎng)基的滅菌是合格的；在固體培養(yǎng)基上接種微生物的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。

【詳解】

（1）①馬鈴薯中含有淀粉；蛋白質(zhì)和無機(jī)鹽等物質(zhì)；故培養(yǎng)基中的馬鈴薯可為蟬擬青霉生長(zhǎng)提供碳源、氮源、無機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)成分；

培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性；培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性，即培養(yǎng)蟬擬青霉的培養(yǎng)基的自然pH為酸性范圍。

②氯霉素等抗生素可以通過抑制肽聚糖（細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分）的合成來抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)；而對(duì)真菌的生長(zhǎng)無影響。為了便于篩選蟬擬青霉（真菌）菌株，培養(yǎng)基中還應(yīng)加入氯霉素等抗生素以抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)，該培養(yǎng)基從功能上分類屬于選擇培養(yǎng)基。

③為了殺滅培養(yǎng)基中的微生物；配制的培養(yǎng)基必須進(jìn)行滅菌處理；將滅菌后的固體培養(yǎng)基放置在適宜的溫度下培養(yǎng)一段時(shí)間，若培養(yǎng)基中無菌落長(zhǎng)出，說明固體培養(yǎng)基的滅菌是合格的。

（2）蟬擬青霉的分離純化：由（1）的題干信息可知；PDA為固體培養(yǎng)基，在固體培養(yǎng)基上接種微生物的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。

（3）根據(jù)題意“蟬花是蟬擬青霉寄生于蟬若蟲后形成的蟲菌復(fù)合體，內(nèi)含蟲草多糖、甘露醇和必需氨基酸等活性成分”，并結(jié)合表格信息可知，發(fā)酵菌絲體中各種活性成分的含量明顯高于天然蟬花，故能用發(fā)酵菌絲體來替代天然蟬花?！窘馕觥?1)碳源；氮源、無機(jī)鹽酸細(xì)菌選擇殺滅培養(yǎng)基中的微生物將滅菌的固體培養(yǎng)基放置在適宜的溫度下培養(yǎng)一段時(shí)間；觀察是否長(zhǎng)出菌落。

(2)平板劃線（稀釋涂布平板）

(3)能發(fā)酵菌絲體活性成分的含量明顯高于天然蟬花六、綜合題(共3題，共9分)30、略

【分析】【分析】

PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)，所利用的原理為DNA分子的復(fù)制，因此PCR技術(shù)一般用于基因擴(kuò)增。PCR技術(shù)：①概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)；②原理：DNA復(fù)制；③條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；④方式：以指數(shù)的方式擴(kuò)增，即約2n；⑤過程：高溫變性；低溫復(fù)性、中溫延伸。

（1）

PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))反應(yīng)包括三個(gè)基本步驟，即：模板DNA的變性、模板DNA與引物的退火復(fù)性、引物的延伸。PCR反應(yīng)體系包括5種基本成分，依次為：引物、DNA聚合酶、dNTP（原料）、模板DNA、Mg2+。

（2）

巢式PCR通過兩輪PCR反應(yīng)；使用兩套引物擴(kuò)增特異性的DNA片斷，第二對(duì)引物的功能是特異性的擴(kuò)增位于首輪PCR產(chǎn)物內(nèi)的一段DNA片斷。第一輪擴(kuò)增中，外引物用以產(chǎn)生擴(kuò)增產(chǎn)物，此產(chǎn)物在內(nèi)引物的存在下進(jìn)行第二輪擴(kuò)增，從而提高反應(yīng)的特異性，獲得的產(chǎn)物特異性更強(qiáng)。利用內(nèi)引物擴(kuò)增在錯(cuò)誤片段上進(jìn)行引物配對(duì)并擴(kuò)增的概率提高。

（3）

巢式PCR兩次擴(kuò)增所用的引物是不同的；因此兩個(gè)階段反應(yīng)不在同一試管完成的主要原因是防止引物配對(duì)特異性不強(qiáng)造成的非特異性擴(kuò)增的污染。

（4）

對(duì)胚胎進(jìn)行性別鑒定時(shí)；宜取囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行鑒定。本實(shí)驗(yàn)用巢式PCR技術(shù)，用的是兩輪PCR，因此需要設(shè)計(jì)2對(duì)引物。PCR過程一般是預(yù)變性→變性→退火→延伸。在胚胎移植前需要對(duì)受體牛進(jìn)行同期發(fā)情處理，便于移植。

（5）

題中利用多重巢式PCR技術(shù)同時(shí)擴(kuò)增Y染色體上雄性決定基因（SRY）和常染色體上的酪蛋白基因（CSN1S1）進(jìn)行電泳；雌性個(gè)體沒有SRY，只有一條帶，雄性有兩條帶，因此1，2，4是雌性，3，5是雄性，雌性和雄性共有的是常染色體上的酪蛋白基因（CSN1S1），因此A是CSN1S1，B是SRY。

（6）

①差速離心法是分離各種細(xì)胞器的方法；不能性別鑒定；②核酸探針雜交法，Y染色體上雄性決定基因（SRY）制成探針可以鑒定性別；③染色體核型分析法，XY染色體形態(tài)不同，因此也可以進(jìn)行性別鑒定；④H-Y抗血清免疫學(xué)法（H-Y抗原編碼基因位于Y染色體上），也可以性別鑒定。因此可行的是②③④。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查PCR技術(shù)、胚胎分割移植的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記PCR技術(shù)的條件；識(shí)記胚胎分割的特點(diǎn)及注意事項(xiàng)，能結(jié)合圖中信息答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查?！窘馕觥浚?）TaqDNA聚合酶dNTP

（2）更強(qiáng)升高。

（3）防止引物配對(duì)特異性不強(qiáng)造成的非特異性擴(kuò)增的污染。

（4）滋養(yǎng)層2變性同期發(fā)情。

（5）A1；2，4

（6）②③④31、略

【分析】1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物；