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降脂與降糖活性研究綜述目錄TOC\o"1-2"\h\u7176降脂與降糖活性研究綜述 1215111.1體外降脂降糖活性研究方法 1315111.1.1膽酸鹽含量檢測(cè)方法 1166271.1.2胰脂肪酶活性檢測(cè)方法 214531.1.3α-淀粉酶活性檢測(cè)方法 2241291.2膽酸鹽結(jié)合研究進(jìn)展 2253841.2.1膽酸鹽概述 2245041.1.2膽酸鹽結(jié)合機(jī)理 3252631.1.3膽酸鹽結(jié)合劑概況 3247161.3胰脂肪酶抑制研究進(jìn)展 4165391.3.1胰脂肪酶概述 424721.3.2胰脂肪酶抑制劑概況 4205501.4α-淀粉酶抑制研究進(jìn)展 4160741.5體內(nèi)降脂降糖活性研究方法 51.1體外降脂降糖活性研究方法目前關(guān)于測(cè)定體外降脂活性方法主要有體外結(jié)合膽酸鹽能力和抑制胰脂肪酶活性等,而體外降糖活性主要從對(duì)抑制淀粉酶活性和葡萄糖苷酶活性等方面進(jìn)行測(cè)定。1.1.1膽酸鹽含量檢測(cè)方法測(cè)定膽酸鹽含量的主要方法有紫外分光光度法、糠醛比色法和高效液相色譜法等。紫外分光光度法的原理是因?yàn)槟懼岬谋旧砣狈Ζ须娮?,不能發(fā)生電子躍遷,對(duì)其進(jìn)行紫外掃描時(shí)沒有特殊吸收波長(zhǎng),但通過添加濃硫酸會(huì)將其變?yōu)榉宇愇镔|(zhì),在387nm時(shí)會(huì)出現(xiàn)吸收峰。其方法操作簡(jiǎn)單,但靈敏性低。糠醛比色法是檢測(cè)膽酸鹽含量的一種常用的方法,其原理是糠醛分子的羧基會(huì)在濃硫酸催化下與膽汁酸分子的羥基發(fā)生縮合反應(yīng),對(duì)反應(yīng)物質(zhì)進(jìn)行紫外掃描時(shí),膽汁酸分子會(huì)在490~550nm的波長(zhǎng)范圍內(nèi)產(chǎn)生明顯的吸收峰。該檢測(cè)方法較為簡(jiǎn)便,并且靈敏度高,準(zhǔn)確度和重現(xiàn)率較好。高效液相色譜法是近年來(lái)流行的方法,主要用于膽汁酸含量的精密檢測(cè),其結(jié)果較為穩(wěn)定,最低檢測(cè)限值低,但操作方法較為復(fù)雜,成本較高。1.1.2胰脂肪酶活性檢測(cè)方法測(cè)定胰脂肪酶活性的檢測(cè)方法主要有堿滴定法、對(duì)硝基苯酚(PNP)法和銅皂法等。堿滴定法的原理是油脂會(huì)在胰脂肪酶的作用下水解產(chǎn)生游離脂肪酸,使用NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液作為滴定液,酚酞溶液作為指示劑,以每分鐘產(chǎn)生的脂肪酸含量作為胰脂肪酶活力單位,從而測(cè)得胰脂肪酶的活性,該測(cè)定速度快,但準(zhǔn)確性不高。PNP法的原理是對(duì)硝基苯酚棕櫚酸酯(PNPP)在胰脂肪酶的作用下產(chǎn)生PNP,PNP在405nm下有吸收峰,通過測(cè)定吸光度值來(lái)得出胰脂肪酶的活性。銅皂法是利用苯溶液來(lái)萃取脂肪酸再加入醋酸銅顯色劑,離心后取有機(jī)相,在710nm下測(cè)定吸光度值以得到胰脂肪酶的活性,該方法比較繁瑣,且具有一定的毒性,較少使用(江慧芳2007)。1.1.3α-淀粉酶活性檢測(cè)方法檢測(cè)α-淀粉酶的方法主要有:碘比色法、3,5-二硝基水楊酸(DNS)比色法和凝膠擴(kuò)散法等,其中最常用的是DNS比色法。該方法的原理是淀粉水解后會(huì)生成還原性糖,還原糖和DNS加熱后反應(yīng)生成紅棕色的氨基化合物,化合物在580nm波長(zhǎng)下具有最大吸收峰,通過測(cè)定吸光度值來(lái)得出α-淀粉酶的活性(張雪嬌等2020)。1.2膽酸鹽結(jié)合研究進(jìn)展1.1.1膽酸鹽概述人體內(nèi)的膽細(xì)胞可以分泌膽汁,其中膽汁酸是膽汁的主要成分,其他成分包括水、膽固醇、無(wú)機(jī)鹽等。大多數(shù)的膽汁酸會(huì)和鈉離子、鉀離子、甘氨酸和?;悄懰嵯嘟Y(jié)合而形成膽(汁)酸鹽。膽汁酸鹽在結(jié)構(gòu)上既具有磺酸基、羥基等親水基團(tuán),又具有甲基等疏水的基團(tuán)。由于具有兩種的親側(cè)面基團(tuán),所以膽汁酸鹽具有較強(qiáng)的界面活性(Alrefai2007)。根據(jù)不同的來(lái)源可將膽汁酸分為兩種類型:初級(jí)膽汁酸和次級(jí)膽汁酸。初級(jí)膽汁酸是來(lái)源于肝臟,由其中的膽固醇在肝臟細(xì)胞微液和線粒體中一系列轉(zhuǎn)錄酶的作用下催化而來(lái)的。根據(jù)形態(tài)分布,可以將初級(jí)膽汁酸分為:游離型和結(jié)合型。其具有較強(qiáng)的親水性能力,極性高的特點(diǎn),可以與鉀鈉離子結(jié)合而形成膽汁酸鹽。次級(jí)膽汁酸是將初級(jí)膽汁酸被腸道中微生物的分解脫羥而形成的,同樣分為游離型和結(jié)合型。前者包括脫氧膽酸和石膽酸,而后者包括甘氨脫氧膽酸和?;敲撗跄懰幔⊿jovall1960)。在肝臟中的膽細(xì)胞首先分泌產(chǎn)生膽汁,在腸道中絕大多數(shù)的膽酸鹽會(huì)經(jīng)過重吸收,重回血液中經(jīng)過靜脈循環(huán)的方式重新回到肝臟中。在腸道循環(huán)中游離型膽汁酸會(huì)變?yōu)榻Y(jié)合型膽汁酸,兩種方式得到的結(jié)合型膽汁酸會(huì)和膽汁一起進(jìn)入腸道中。整個(gè)過程就是膽汁酸鹽的腸道循環(huán)過程。在腸道中對(duì)于膽酸鹽的重吸收的類型大多是主動(dòng)型,有少量游離型膽汁酸會(huì)通過被動(dòng)型重吸收的作用而回到血液中,石膽酸和復(fù)溶物不被吸收而直接通過糞便排出(Zarras1999)。1.1.2膽酸鹽結(jié)合機(jī)理膽酸鹽的生物合成與代謝起到著維持體內(nèi)膽固醇水平平衡的作用,如果膽汁酸在循環(huán)前被結(jié)合,從而不能進(jìn)入肝臟,會(huì)促進(jìn)肝臟膽固醇的降解得到的更多的膽汁酸,從而使血液中的膽固醇進(jìn)入肝臟(彭新磊1998)。膽酸鹽的結(jié)合劑可以降血脂,在腸道中與膽汁酸相結(jié)合會(huì)降低其重吸收率,不溶的復(fù)合物增多,排泄物的增多會(huì)使得膽汁酸無(wú)法從腸道循環(huán)而回到肝臟,從而促使膽汁酸的含量增多,降低血液或肝臟中的膽固醇含量。1.1.3膽酸鹽結(jié)合劑概況膽酸鹽結(jié)合劑是指可以在腸道循環(huán)過程中結(jié)合膽酸鹽形成不溶性物質(zhì)并排出體外,從而增加膽汁酸的分泌,增強(qiáng)分解膽固醇的能力,從而減少膽固醇的含量。膽酸鹽結(jié)合劑可分為陰離子交換樹脂和膳食纖維結(jié)合劑。研究表明,不溶性的膳食纖維的對(duì)膽酸鹽的結(jié)合能力要強(qiáng)于可溶性膳食纖維。膳食纖維結(jié)合膽酸鹽包括直接結(jié)合作用、結(jié)合水分和溶脹作用三種。Zacherl等(2011)發(fā)現(xiàn)檸檬中膳食纖維是通過直接結(jié)合的方式來(lái)結(jié)合膽酸鹽;燕麥β-葡聚糖、果膠等多糖既可以通過直接結(jié)合的方式來(lái)結(jié)合膽酸鹽,也可以經(jīng)過水分結(jié)合,增加胃腸道的粘度來(lái)增加膽酸鹽的排出量;某些海藻類膳食纖維可以通過溶脹作用來(lái)降低膽酸鹽的濃度。Kahlon(2000)等人研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)燕麥麩中不溶性膳食纖維體外結(jié)合膽酸鹽的能力存在著很大的差異,米麩的降血脂機(jī)理與其結(jié)合膽酸鹽的能力呈正相關(guān)。1.3胰脂肪酶抑制研究進(jìn)展1.3.1胰脂肪酶概述在日常進(jìn)食中的絕大部分脂肪都是經(jīng)過TG而吸收的,整個(gè)消化過程是食物從進(jìn)入開始,在腸道中被脂肪酶消化水解,隨后經(jīng)過十二指腸中胰脂肪酶(PPL)和其輔酶的作用下,水解生成游離脂肪酸和單脂等產(chǎn)物。在人進(jìn)食后,自由脂肪酶經(jīng)過腸道循環(huán),通過依靠脂蛋白來(lái)運(yùn)輸?shù)讲煌钠鞴?,從而形成新的TG分子。而PPL在TG的有效消化中起著重要作用。能夠負(fù)責(zé)一半以上的膳食脂肪的水解。因此,胰脂肪酶水解飲食中絕大多數(shù)的脂肪,其產(chǎn)生的脂肪酸與甘油單酯會(huì)結(jié)合膽固醇和膽鹽等物質(zhì)而形成凝膠基團(tuán),這些基團(tuán)會(huì)被腸道細(xì)胞所吸收從而形成人體的甘油三酯,過度的脂肪積累將會(huì)形成肥胖。抑制PPL的活性,從而減少TG的吸收,是降低血脂水平,改善肥胖的一大方面。如今,唯一臨床批準(zhǔn)使用的抑制PPL活性的藥物只有奧利司他,但其使用后會(huì)有腹脹腹瀉、便秘、油性斑點(diǎn)等副作用。而天然的PPL抑制劑并不會(huì)有這些毒副作用,所以從天然產(chǎn)物中尋找高效、低毒的PPL抑制劑就成了如今研究的熱點(diǎn)。1.3.2胰脂肪酶抑制劑概況PPL的抑制劑主要來(lái)源有三種,分別是化學(xué)合成產(chǎn)物、天然產(chǎn)物和微生物的代謝產(chǎn)物,而治療肥胖的PPL抑制劑主要來(lái)源于后兩者。其中天然產(chǎn)物主要包括皂苷、黃酮和多酚類等從天然植物中提取的產(chǎn)物。如今有研究發(fā)現(xiàn),多糖類化合物在降脂方面有著不錯(cuò)的效果。多糖類化合物對(duì)動(dòng)物的TG、TC、LDL-C和游離脂肪酸等血脂的代謝指標(biāo)有不錯(cuò)的抑制效果,并可以提高血液中HDL-C的含量。李向陽(yáng)等研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)金釵石斛多糖能明顯降低高脂飲食大鼠血清中的TG、TC、LDL-C的含量,抵消其肝臟細(xì)胞的脂肪化效果。楮盼盼等(2015)的研究結(jié)果表明苦蕎麥多糖對(duì)PPL有著良好的抑制效果,抑制率可達(dá)到50%以上。植物多糖在抑制胰脂肪酶活性方面是值得深入研究的1.4α-淀粉酶抑制研究進(jìn)展抑制α-淀粉酶的活性是控制血糖水平的重要影響因素,通過抑制淀粉代謝過程中的關(guān)鍵酶,可以延遲餐后血糖的升高,控制血糖指數(shù)的升高,對(duì)胰島素的抗性也有一定的幫助。α-淀粉酶在消化途徑中發(fā)揮重要作用,可將食物中的碳水化合物轉(zhuǎn)化為葡萄糖,經(jīng)小腸進(jìn)入血液而升高血糖,一些已投入使用的抗糖藥物,如阿卡波糖、米格列醇等,通過抑制α-淀粉酶等腸道關(guān)鍵酶的活性,來(lái)控制糖尿病患者飯后的血糖含量。天然產(chǎn)物及微生物的代謝產(chǎn)物有著不錯(cuò)抑制α-淀粉酶的效果,例如茶葉(Wangetal2010)、玫瑰茄(Hansawasdi2020)等提取物都對(duì)α-淀粉酶有著不錯(cuò)的抑制效果。王飛等(2012)在研究桃膠多糖的降血糖活性作用時(shí),發(fā)現(xiàn)桃膠多糖可以通過抑制α-淀粉酶的方式來(lái)降低血糖水平。Hasan等(2014)研究表明石巖楓多糖具有α-淀粉酶抑制活性,并在之后的動(dòng)物試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)其能有效降低大鼠的血糖水平。BelHadj等人(2013)研究發(fā)現(xiàn)石莼多糖干預(yù)下的糖尿病大鼠模型的血漿和小腸中α-淀粉酶活性受到抑制,并且血漿中TG和TC水平有著明顯的下,說明石莼多糖具有治療糖尿病的潛在作用。如今

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