高中生物第1章微生物技術(shù)1.1培養(yǎng)基對微生物的選擇作用課件北師大版選修

第1節(jié)培養(yǎng)基對微生物的選擇作用1.能說出培養(yǎng)基的類型、用途和基本成分。2.比較消毒和滅菌的區(qū)別。3.舉例說明常用的消毒與滅菌的方法。4.能記住培養(yǎng)基的配制方法。5.研究培養(yǎng)基對微生物的選擇作用。一二一、培養(yǎng)基的制備1.培養(yǎng)基(1)概念培養(yǎng)基是人工配制的適合微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物的

營養(yǎng)基質(zhì),用以培養(yǎng)、分離、鑒定和保存各種微生物。(2)成分一般包括水分、碳源、氮源、微量元素和無機(jī)鹽等。(3)種類培養(yǎng)基按物理狀態(tài)可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。后者常用瓊脂做凝固劑。一二2.培養(yǎng)基的配制和滅菌(1)培養(yǎng)基的制備包括配制和滅菌兩大步驟。(2)配制關(guān)鍵:準(zhǔn)確稱量、調(diào)準(zhǔn)pH、規(guī)范制作棉塞、徹底滅菌。(3)主要制作流程:稱量→溶化→調(diào)pH→分裝→加塞和包扎→滅菌→擺斜面及倒平板。(4)由于配制培養(yǎng)基的各類營養(yǎng)物質(zhì)和容器等含有多種不同的微生物,配制好的培養(yǎng)基必須立即滅菌,及時(shí)殺滅培養(yǎng)基中的微生物,同時(shí)防止微生物大量繁殖造成的培養(yǎng)基營養(yǎng)成分的改變。(5)常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法。通過高壓、高溫蒸汽使菌體蛋白質(zhì)凝固變性以達(dá)到滅菌的目的。一二思考：日常生活中的牛奶在進(jìn)入市場銷售前要進(jìn)行消毒,可采用哪種消毒方法呢?提示:用巴氏消毒法對牛奶進(jìn)行消毒,可以殺死牛奶中的微生物,同時(shí)使牛奶的營養(yǎng)成分不會被破壞。一二二、培養(yǎng)基對微生物的選擇作用1.菌落微生物通過某種方法接種到適于生長的固體培養(yǎng)基表面上,在適宜的溫度下培養(yǎng)一段時(shí)間后,單個(gè)的菌體或孢子就可以生長繁殖成一個(gè)個(gè)肉眼可見的細(xì)胞群體,稱為菌落。2.培養(yǎng)基對微生物的選擇作用的原理不同種微生物對營養(yǎng)要求不一樣,通過選擇不同的培養(yǎng)基,人為控制培養(yǎng)基的pH、碳源、氮源、滲透壓等條件,使選擇的培養(yǎng)基利于某類或某種微生物的生長,而不利于其他微生物的生存,可以達(dá)到分離、培養(yǎng)不同微生物的目的。例如,細(xì)菌生長需要的氮源高,pH中性或微堿性,因此培養(yǎng)細(xì)菌常采用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。酵母菌和霉菌生長所需的碳源含量高,pH偏酸性,因此分離真菌常采用馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。一二3.培養(yǎng)基對微生物的選擇作用的意義在科研和生產(chǎn)實(shí)踐中具有重要意義,它是分離和純化不同類型微生物的基礎(chǔ)。1.培養(yǎng)基的成分與微生物生長所需的營養(yǎng)

2.培養(yǎng)基的類型及其應(yīng)用

3.配制培養(yǎng)基的原則(1)目的要明確(2)營養(yǎng)要協(xié)調(diào)(3)pH要適宜4.消毒與滅菌的比較二者的區(qū)別:前者去除的是部分微生物,后者去除的是所有微生物。5.三種常用滅菌方法的比較

6.倒平板的注意事項(xiàng)(1)培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50~60℃后,才能用來倒平板?？梢杂檬钟|摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí),就可以進(jìn)行倒平板了。(2)倒平板前,要將裝有培養(yǎng)基的錐形瓶瓶口通過火焰灼燒,以防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。(3)平板冷凝后,需將平板倒置。平板冷凝后,皿蓋上會凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。(4)倒平板過程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,空氣中的微生物可能會在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此不要再繼續(xù)使用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。題型一題型二題型三題型四微生物的營養(yǎng)【例題1】

下列關(guān)于微生物的營養(yǎng)的說法,正確的是(

)A.同一種物質(zhì)不可能既作碳源又作氮源B.凡是碳源都能提供能量C.除水以外的無機(jī)物僅提供無機(jī)鹽D.無機(jī)氮源也可能提供能量解析:對某些微生物來說,含C、H、O、N的化合物既可以作為碳源,又可以作為氮源。CO2可以作為光能自養(yǎng)微生物的碳源,但不能提供能量。CO2和N2是無機(jī)物,也可以分別作為微生物的碳源和氮源。硝化細(xì)菌所利用的氮源是無機(jī)氮源氨,同時(shí)氨也為硝化細(xì)菌提供用以化能合成作用的能量。答案:D題型一題型二題型三題型四易錯(cuò)警示含C、H、O、N的化合物既可以作為一部分微生物的碳源,又可以作為氮源;有機(jī)碳源能提供能量,無機(jī)碳源不能提供能量。題型一題型二題型三題型四無菌操作相關(guān)技術(shù)【例題2】

細(xì)菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理方法,這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌?(

)A.接種針、手、培養(yǎng)基 B.高壓鍋、手、接種針C.培養(yǎng)基、手、接種針 D.接種針、手、高壓鍋解析:高壓蒸汽滅菌鍋通常用于培養(yǎng)基的滅菌。用酒精擦拭雙手可以進(jìn)行消毒?；鹧孀茻梢匝杆購氐椎販缇?適用于微生物的接種工具,如接種針。答案:C題型一題型二題型三題型四反思領(lǐng)悟微生物培養(yǎng)過程中的無菌操作包括消毒和滅菌兩大類,各自具有不同的方法。應(yīng)對實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒;對用于培養(yǎng)微生物的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。題型一題型二題型三題型四培養(yǎng)基的制備【例題3】

下列關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述,錯(cuò)誤的是(

)A.操作順序?yàn)榉Q量、溶化、分裝、調(diào)pH、加塞和包扎、滅菌、擺斜面及倒平板B.將配制的培養(yǎng)基分裝入試管或錐形瓶內(nèi)C.待培養(yǎng)基冷卻至50~60℃后,制成斜面或平板后備用D.配制好的培養(yǎng)基必須立即滅菌解析:制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的操作順序是稱量、溶化、調(diào)pH、分裝、加塞和包扎、滅菌、擺斜面及倒平板。答案:A題型一題型二題型三題型四選擇培養(yǎng)基的特點(diǎn)與應(yīng)用【例題4】

氯苯化合物是重要的有機(jī)化工原料,不易降解,會污染環(huán)境。某研究小組依照下列實(shí)驗(yàn)方案(圖甲)篩選出能高效降解氯苯化合物的微生物SP1菌。培養(yǎng)基配方如下表。題型一題型二題型三題型四(1)配制Ⅱ號固體培養(yǎng)基時(shí),除添加Ⅱ號液體培養(yǎng)基成分外,還應(yīng)添加1%的

。

(2)培養(yǎng)基配制時(shí),滅菌與調(diào)pH的先后順序是

。(3)從用途上來說,Ⅰ號培養(yǎng)基和Ⅱ號培養(yǎng)基分別屬于

培養(yǎng)基和

培養(yǎng)基。在Ⅱ號培養(yǎng)基中,為SP1菌提供氮源的成分是

。

(4)在營養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時(shí),SP1的菌體會變成一個(gè)圓形的休眠體,這種休眠體被稱為

。

題型一題型二題型三題型四(5)將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的Ⅲ號培養(yǎng)液中培養(yǎng),得到生長曲線(圖乙)。從圖乙可知,SP1菌在

的培養(yǎng)條件下最早停止生長,其原因是

。題型一題型二題型三題型四解析:(1)固體培養(yǎng)基必須含有適量的瓊脂。(2)配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)先調(diào)pH,后滅菌。(3)Ⅰ號培養(yǎng)基是為了獲得更多的菌株,屬于通用培養(yǎng)基,Ⅱ號培養(yǎng)基是為了選擇出SP1菌株,屬于選擇培養(yǎng)基,Ⅱ號培養(yǎng)基成分中含N物質(zhì)為硝酸銨,則應(yīng)由它為SP1菌株提供氮源。(4)在惡劣環(huán)境下,一些菌體會形成芽孢休眠體,以抵抗不良環(huán)境的影響。(5)SP1菌株以氯苯為碳源,當(dāng)氯苯耗盡時(shí),菌株因缺少碳源而不能繼續(xù)生存,故氯苯含量越少,SP1菌株越早停止生長。答案:(1)瓊脂(2)先調(diào)pH,后滅菌(3)通用選擇硝酸銨(4)芽孢(5)20mg/L氯苯碳源最早耗盡123451.下列敘述錯(cuò)誤的是(

)A.微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)一般都要求在無菌條件下進(jìn)行B.細(xì)菌生長只需要氮源C.培養(yǎng)基的配制包括配制和滅菌兩大步驟D.不同培養(yǎng)基對微生物的選擇作用是分離和純化不同類型微生物的基礎(chǔ)答案:B123452.在微生物培養(yǎng)過程中,需要對培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌,其標(biāo)準(zhǔn)是(

)A.殺死所有的病原微生物B.殺死所有的微生物C.殺死所有微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子D.使病原菌不生長答案:C123453.下列有關(guān)培養(yǎng)基配制的敘述,正確的是(

)A.任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水B.碳源和氮源必須具有一定比例,碳元素的含量最多,其次為氮元素C.微生物的生長除受營養(yǎng)因素影響外,還受到溫度、pH、氧、滲透壓等的影響D.營養(yǎng)物質(zhì)的濃度越高越好答案:C解析:自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基不需要加碳源,自生固氮菌的培養(yǎng)基不需要加氮源。培養(yǎng)基中碳源和氮源必須具有一定比例,但含量最多的元素是氧。營養(yǎng)物質(zhì)的濃度并不是越多越好,濃度過高會導(dǎo)致培養(yǎng)物細(xì)胞失水。123454.無菌技術(shù)常圍繞著如何避免雜菌的污染展開,下列常見的無菌技術(shù)中,屬于滅菌處理的是(

)A.操作者的雙手用酒精擦拭B.實(shí)驗(yàn)室用紫外線照射C.對接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理D.水源用氯氣處理答案:C解析:滅菌是用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子。常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法。123455.微生物培養(yǎng)過程中,肉眼鑒別金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的重要依據(jù)是(

)A.細(xì)菌的大小、形狀、顏色