致痙攣性殺鼠劑實驗室檢測方法

致痙攣性殺鼠劑實驗室檢測方法1.液液萃取/氣相色譜氮磷檢測器法定量測定血液中毒鼠強（中國疾病預防控制中心職業(yè)衛(wèi)生與中毒控制所，李曉華等）1.1適用范圍：對血液、血漿或血清樣品中進行毒鼠強定量測定。1.2原理：首先使用液液萃取對樣品前進行前處理，然后將處理后樣品定容，并經過毛細管柱分離，使用氮磷檢測器對其中組分毒鼠強進行測定，通過毒鼠強標準品的保留時間以及標準曲線來進行定性和定量檢測。1.3方法重要參數(shù)1.3.1線性范圍：標準品溶液0.1μg-5.0μg。可對血液、血漿或血清中毒鼠強含量在10ng/ml~500ng/ml的樣品進行毒鼠強定量測定。1.3.2精確度：批內精密度實驗低、中、高三個濃度變異系數(shù)分別為9.6%、9.8%和7.8%，批間精密度實驗低、中、高三個濃度變異系數(shù)分別為6.6%、8.5%和6.2%。1.3.3準確度：低、中、高三個濃度實驗變異系數(shù)分別為9.5%、9.8%和7.9%。1.3.4檢出限：最低定量濃度為10ng/ml。1.3.5全程測定時間：120分鐘1.4器材與試劑氣相色譜儀（配置氮磷檢測器）；非極性毛細管氣相色譜柱（HP-1）；振蕩儀；離心機；加樣槍；吹氮儀毒鼠強標準；乙酸乙酯1.5操作步驟1.5.1色譜條件a)色譜柱：HP-1交聯(lián)石英毛細管柱30m×0.32mmi.d.×0.25um。b)溫度：進樣口250℃，檢測器250℃。程序升溫：初始溫度150℃，保留時間1min，以7℃/min的速率升溫至250℃，保留時間1min；c)載氣：高純氮氣，柱頭壓力35kPa，不分流進樣，分流時間0.75min，隔墊清掃3.6ml/min。尾吹流量：30ml/min。氫氣流量：3.3ml/min。空氣流量：86ml/min。1.5.2標準曲線的配制稱取100mg毒鼠強標準，用乙酸乙酯在100ml容量瓶中定容，配制成1mg/ml的毒鼠強儲備液。用儲備液稀釋出5μg/ml、2μg/ml、1μg/ml、0.5μg/ml、0.2μg/ml和0.1μg/ml的標準溶液，利用此系列標準溶液繪制標準曲線，相關系數(shù)為0.999。1.5.2樣品前處理取出1ml血漿樣品放入試管中，加入2ml乙酸乙酯，石蠟膜封口，振蕩混勻4分鐘（如果乳化現(xiàn)象比較嚴重，可以加入0.5ml的異丙醇），3000rpm離心4分鐘，將上清液取出，重復上述萃取過程一次，將兩次上清液合并。合并的上清液在40℃水浴下吹氮至近干，加入0.1ml乙酸乙酯定容，振蕩混勻1分鐘。1.5.3進樣檢測取定容后的溶液1ul進樣檢測。1.6質量控制a)空白對照樣色譜圖上沒有保留時間與毒鼠強相同的峰。b)進待測樣品前必須進空白樣或乙酸乙酯溶劑，以確認進樣針和色譜儀器系統(tǒng)未受污染。c)樣品色譜圖上毒鼠強的保留時間與標準品的差值不應該超過0.03分鐘。d)標準曲線的相關系數(shù)應大于0.99，在4個標準濃度點中，可以去除1個點，重新計算標準曲線，但這個點不能是最高點和最