T-WSWXH 009-2024 棉花枯萎病拮抗細菌防治效果評價方法

ICS65.080CCSB10/14WSWXH新疆維吾爾自治區(qū)微生物學會團體標準MethodsforevaluatingtheeffectivenessofantagonisticbacteriapreventingcottonIT/WSWXH009—2024前言 2規(guī)范性引用文件 3術語和定義 4試驗條件 5試驗內容 5.1試驗設計 5.2試驗方法 5.3對照藥劑 25.4棉花枯萎病病原菌田間接種 26調查方法、時間和次數 26.1調查方法 26.2調查時間和次數 27藥效計算 28影響因素 28.1防治其他病蟲害藥劑的資料要求 28.2對棉花的其他影響 39結果 39.1棉花的產量及質量 39.2數據分析 3T/WSWXH009—2024本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由新疆農業(yè)大學農學院提出。本文件由新疆維吾爾自治區(qū)微生物學會歸口。本文件起草單位：新疆農業(yè)大學農學院、新疆冠豐農業(yè)科技有限公司、新疆農業(yè)職業(yè)技術學院生物科技分院、南京農業(yè)大學農學院。本文件主要起草人：顧愛星、劉燕、宋東博、高翔宇、李海薇、靳改龍、郭旺珍、何丹。1T/WSWXH009—2024棉花枯萎病拮抗細菌防治效果評價方法本文件規(guī)定了利用拮抗細菌防治棉花枯萎病田間實驗的方案設計、試驗實施、數據分析、效果評價及試驗報告撰寫。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T15671DB65/T3843農作物薄膜包衣種子技術條件棉花生產全程機械化技術規(guī)程3術語和定義下列術語和定義適用于本文件。3.1拮抗細菌antagonisticbacteria是指一種細菌在其生命活動中，產生某種代謝產物或改變環(huán)境條件，從而抑制其它微生物的生長繁殖，甚至殺死其它微生物的現象。3.2微生物菌劑microbialinoculant一種或多種目的微生物通過培養(yǎng)增殖直接應用或制成濃縮的活菌制劑。3.3棉花枯萎病cottonFusariumwilt棉花枯萎病是由尖孢鐮刀菌引起的、發(fā)生在棉花的病害。該病在苗期和成株期可表現出多種明顯不同的癥狀，主要有黃色網紋型、黃化型、紫紅型、青枯型四個典型癥狀。3.4種衣劑seeddressingagent是一種用于處理種子的農藥或添加劑，目的是保護種子免受病害、蟲害和其他壓力的影響，提高種子的出芽率和作物產量。4試驗條件田間試驗應選擇具有完備灌溉系統(tǒng)且歷年發(fā)病較重的棉區(qū)地塊，并在有利于枯萎病流行時期進行鑒定，所有試驗小區(qū)的栽培條件（如土壤類型、施肥、株行距等）應一致，且符合當地科學的農業(yè)實踐。5試驗內容5.1試驗設計試驗小區(qū)應保持大小相同的原則并隨機分布，新疆棉區(qū)采用機采棉一膜六行寬窄行種植或一膜三行等行距種植方式，地膜寬度2.05m，地膜厚度0.01mm，符合DB65/T3843標準，各試驗小區(qū)之間規(guī)劃出0.5m走道以便于后期觀察棉株發(fā)病情況。5.2試驗方法注明拮抗細菌拉丁名稱、中文名、保存方式以及保存單位，試驗拮抗細菌處理濃度依據協(xié)議（試驗委托方與試驗承擔方簽訂的試驗協(xié)議）規(guī)定用量。2T/WSWXH009—20245.2.1菌液浸種采用羧甲基纖維素鈉作為成膜劑，菌液與成膜劑重量比例為100:1，菌液與種子重量的比例為1:100，包衣要求符合GB/T15671標準。5.2.2離心液浸種使用離心發(fā)酵液與成膜劑進行種子包衣，重量比例為100:1，離心液與種子重量比例為1:100。5.2.3離心液噴施于病原菌接種后使用離心發(fā)酵液進行葉面噴施，每次噴施間隔10天，濃度按照試驗協(xié)議規(guī)定用量進5.3對照藥劑對照藥劑須是已登記注冊的市面常見藥劑并在實踐中證明有較好防效。對照藥劑的類型和作用方式應同試驗藥劑相近并使用當地常用劑量，特殊情況可視試驗目的而定。5.4棉花枯萎病病原菌田間接種將濃度為1×108CFU/mL枯萎病病原菌菌液分次倒入25cm×60cm菌袋(含滅菌棉籽殼基質)，放置于陰涼通風處28℃培養(yǎng)30d。采用傷根接菌方法于6月初田間二次灌水之前在棉株雙行之間挖坑并傷根處理，將菌袋基質撒至已傷根處填埋，及時澆水保證菌種活性。6調查方法、時間和次數6.1調查方法播種后以穴為單位每隔3天記錄一次出苗情況并計算出苗率，各處理小區(qū)以第二株起開始定株，隨機標記50株進行調查；記錄各株病葉數以及整株葉片數，收獲期后對棉株進行剖稈處理，記錄截面發(fā)病情況，對發(fā)病率和病情指數進行統(tǒng)計分析。病葉分級法的病情等級劃分：0級：整株葉片無發(fā)病癥狀；1級：發(fā)病葉片數量占整株葉片數量的1%～25%；2級；發(fā)病葉片數量占整株葉片數量的26%～50%；3級：發(fā)病葉片數量占整株葉片數量的51%～75%；4級：發(fā)病葉片數量占整株葉片數量的76%～100%。6.2調查時間和次數按協(xié)議要求進行，通常施藥前調查病情基數，施藥后每隔7天調查防治效果。特殊情況視病害發(fā)展情況和藥劑的持效期決定調查的時間和次數。7藥效計算通過對病情等級的調查來計算病情指數與防效：病情指數計算公式防治效果計算公式防治效果=對照區(qū)病病情指數×100 8影響因素8.1防治其他病蟲害藥劑的資料要求3T/WSWXH009—2024如使用其他防病抗蟲藥劑，應選擇對試驗藥劑和試驗對象無影響的藥劑，并對所有的小區(qū)進行均一處理，而且與試驗藥劑和對照藥劑分開使用，使這些藥劑的干擾保持在最小程度，記錄這類藥劑施用的時間及用量。8.2對棉花的其他影響觀察拮抗細菌對棉花是否具有病害產生，如有病害要記錄病害的程度，同時，應準確描述棉花