DB51-T 3216-2024 人牙來源間充質(zhì)干細(xì)胞質(zhì)量規(guī)范

DB51I 2 4 6 6 本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定本文件由四川省經(jīng)濟(jì)和信息化廳提出、歸口、解釋并組1人牙來源間充質(zhì)干細(xì)胞質(zhì)量規(guī)范本文件適用于人牙來源間充質(zhì)干細(xì)胞的制備、檢測和質(zhì)GB/T40365-2021細(xì)胞無菌人牙來源間充質(zhì)干細(xì)胞humandental-derivedmesenchymals4縮略語HBV：乙型肝炎病毒（HepatitisBViruHCV：丙型肝炎病毒（HepatitisCViruHIV：人類免疫缺陷病毒（HumanImmunHTLV：人類嗜T細(xì)胞病毒（HumanT-lymphotropicVir2TP：梅毒螺旋體（TreponemaPallSOP：標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（StandardOperating5.1原材料和輔助材料質(zhì)量規(guī)范5.1.1.1用于人牙來源間充質(zhì)干細(xì)胞分離的原材料來源5.1.1.2用于人牙來源間充質(zhì)干細(xì)胞分離的原材料供者應(yīng)簽署書面的合法有效的知情同意書；如原材5.1.1.3用于人牙來源間充質(zhì)干細(xì)胞分離的原材料5.1.2.1用于人牙來源間充質(zhì)干細(xì)胞分離的采集器械、容器、清洗液、保存液、培養(yǎng)基、生長因子等5.1.2.2用于人牙來源間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基，應(yīng)5.1.2.3用于人牙來源間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基中如含有人源血液成分，應(yīng)明確其來源、批號及質(zhì)5.1.2.4用于人牙來源間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基，在樣本來源于無菌條件的前提下，原則上不添加供者應(yīng)篩查HIV、HBV、HCV、HTLV、EBV、HCMV、TP，并記5.2人牙來源間充質(zhì)干細(xì)胞關(guān)鍵質(zhì)量指標(biāo)達(dá)CD11b、CD19、CD31、CD34、CD45、HLA-DR，陽性率3未經(jīng)凍存的細(xì)胞存活率≥90%，凍存后復(fù)蘇的細(xì)人牙來源間充質(zhì)干細(xì)胞具有成骨、成脂、成神經(jīng)5.2.6成瘤性人牙來源間充質(zhì)干細(xì)胞在免疫缺陷小鼠體內(nèi)成瘤試驗結(jié)果應(yīng)單一供者來源的細(xì)胞各代次及批次細(xì)胞短串聯(lián)重復(fù)序列（STR）檢測結(jié)果應(yīng)5.2.10微生物5.3質(zhì)量控制識別碼。保存溫度為2℃~10℃。錄入檔保留至少20年；運輸溫度為2℃~10℃,運輸時間不得超過12小時。4的樣本，應(yīng)保存在2℃~10℃條件下，最長時間不得超過12小時。5.3.4.1細(xì)胞分離與培養(yǎng)應(yīng)制定完整的操作規(guī)范；細(xì)胞分離與培養(yǎng)過程中應(yīng)避免不同供體之間的交叉5.3.4.2細(xì)胞分離后擴(kuò)增培養(yǎng)過程中應(yīng)明確細(xì)胞的名稱、培養(yǎng)代次、操作時間、培養(yǎng)條件等詳細(xì)的操5.3.4.3細(xì)胞凍存應(yīng)制定完整的操作規(guī)范，凍存的細(xì)胞應(yīng)標(biāo)明細(xì)胞名稱、培養(yǎng)代次、細(xì)胞量、凍存體5.3.4.4細(xì)胞復(fù)蘇應(yīng)制定完整的操作規(guī)范，復(fù)蘇的細(xì)胞應(yīng)標(biāo)明細(xì)胞名稱、代次、批次、培養(yǎng)條件、操5.3.5.1細(xì)胞運輸應(yīng)制定完整的操作規(guī)范及應(yīng)急預(yù)案，運輸人員應(yīng)是經(jīng)過培訓(xùn)合格的人員；根據(jù)干細(xì)5.3.5.2運輸條件的控制應(yīng)包括但不限5.3.5.3細(xì)胞的運輸應(yīng)全程記錄，包括但不限于細(xì)胞運輸?shù)姆绞健l件、路徑、時間、人員、地址及5.3.5.4凍存細(xì)胞應(yīng)采用-150℃至-196℃的低溫條件下運輸，復(fù)蘇的細(xì)胞或新鮮細(xì)胞制劑應(yīng)在2℃~采用流式細(xì)胞術(shù)檢測人牙來源間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)志蛋5體外利用成脂分化定向誘導(dǎo)培養(yǎng)條件培養(yǎng)14至28天后，采體外利用成神經(jīng)分化定向誘導(dǎo)培養(yǎng)條件培養(yǎng)5至10天后，采用免疫熒光法檢測細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)元標(biāo)志蛋采用流式細(xì)胞術(shù)測定牙源性間充質(zhì)干細(xì)胞對于活化的人總淋巴細(xì)胞的增殖和對不同淋巴細(xì)胞亞群增殖能力的影響；采用ELISA技術(shù)對淋巴細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子（TNF-α)分泌的影響。和國藥典》無菌檢測法（通則1101）執(zhí)行，對于效期短、批量小，采用現(xiàn)行無菌檢6存液、清洗液、培養(yǎng)基上清、細(xì)胞懸液、凍存液等）中HIV、HBV、HCV、存液、清洗液、培養(yǎng)基上清、細(xì)胞懸液、凍存液等）對TP進(jìn)行檢每批次細(xì)胞進(jìn)行出庫檢驗，檢驗項目包括5.2中規(guī)定8.1應(yīng)在符合倫理規(guī)范的前提下，建立剩余原材料、