T-WFSX 007.8-2024 動(dòng)物法醫(yī)學(xué)司法鑒定 涉案動(dòng)物病理學(xué)檢材的提取、固定、取材及保存規(guī)范鑒定標(biāo)準(zhǔn)

ICCSB41動(dòng)物法醫(yī)學(xué)司法鑒定涉案動(dòng)物病理學(xué)檢材的提取、固定、取材及保存規(guī)范鑒定標(biāo)準(zhǔn)2024-08-26發(fā)布2024-09-04實(shí)施T/WFSX007.8一2024 一、范圍 二、術(shù)語(yǔ)和定義 1三、病理檢材的提取 1、提取準(zhǔn)備 2、提取時(shí)機(jī) 3、提取方法 2四、病理檢材的固定 31、固定劑選擇 32、固定方法 4五、病理檢材的取材 41、取材準(zhǔn)備 42、取材要求 53、取材方法 5六、病理檢材的保存 51、保存條件 52、保存容器 63、保存期限 6T/WFSX007.8一2024本文件按照按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第一部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》給出的規(guī)則起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專(zhuān)利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些專(zhuān)利的責(zé)。本文件由濰坊市獸醫(yī)協(xié)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)與動(dòng)物司法鑒定委員會(huì)提出。本文件由濰坊市獸醫(yī)協(xié)會(huì)歸口。本文件技術(shù)支持單位：濰坊市市場(chǎng)監(jiān)管發(fā)展服務(wù)中心。本文件起草單位：濰坊市金山獸醫(yī)院有限公司、山東牧院、濰坊市臨朐縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局寺頭畜牧獸醫(yī)站、安丘市石堆鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站、山東駿琳馬術(shù)學(xué)院、濰坊學(xué)院、青島市寶發(fā)動(dòng)物醫(yī)院有限公司、濰坊市獸醫(yī)協(xié)會(huì)動(dòng)物法醫(yī)學(xué)委員會(huì)、青州爰佳寵醫(yī)院、濰坊安寵寵物醫(yī)院、山東晟華檢測(cè)技術(shù)有限公司、濰坊市獸醫(yī)協(xié)會(huì)、遼寧國(guó)托檢測(cè)有限公司、江蘇國(guó)托檢測(cè)有限公司、濰坊咪果寵物醫(yī)院。本文件主要起草人：王金山、王升寶、劉文學(xué)、唐璐、劉海源、馬廷法、張召彬、玄承燁、姚冬芹、付文卿、范晶晶、張悅、張春光、楊萬(wàn)郊、郭寶發(fā)、于志輝、丘玉海、囯興偉、殷治玉、孫大海、李智慧、王璐、韓海洋、韓成良、王升鑫、王凱越、管琳、劉秋晨、沙楚、宋蕙男、劉艷、單春?jiǎn)?、翟宏旭、李良佳。本文件為首次發(fā)布。1T/WFSX007.8一2024涉案動(dòng)物病理學(xué)檢材的提取、固定、取材及保存規(guī)范鑒定標(biāo)準(zhǔn)從動(dòng)物機(jī)體獲取的，用于病理學(xué)檢查、分析和診斷的組織、運(yùn)用適當(dāng)?shù)募夹g(shù)和方法，從動(dòng)物體采集病理采用化學(xué)試劑或物理方法使病理檢材中的生物大分子保持原有狀態(tài)和從已固定的病理檢材中選取適宜部分用于后續(xù)運(yùn)用適當(dāng)?shù)臈l件和方法對(duì)病理檢材進(jìn)行儲(chǔ)存，以維持其質(zhì)準(zhǔn)備解剖刀、手術(shù)剪、鑷子、止血鉗、注射器、采樣管、無(wú)菌棉簽、載玻片、離器械和工具使用前應(yīng)進(jìn)行清潔、消毒和滅菌處操作人員應(yīng)穿戴一次性無(wú)菌手術(shù)衣、手套、口罩、護(hù)目鏡、帽子等防護(hù)裝備，防止自準(zhǔn)備好記錄表格、標(biāo)簽、記號(hào)筆等，用于記錄檢材的來(lái)源、種類(lèi)、采集時(shí)間T/WFSX007.8一2024對(duì)于自然死亡的動(dòng)物，應(yīng)在死亡后盡快（一般不超過(guò)6-24小時(shí)，變類(lèi)型等因素確定）進(jìn)行檢材提取。在高溫、潮濕等環(huán)境條件下，應(yīng)盡快縮短提取時(shí)對(duì)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和研究目的，在預(yù)定的時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行檢材提取。如果實(shí)驗(yàn)對(duì)于臨床病例，應(yīng)在動(dòng)物接受治療前或治療過(guò)程中，根據(jù)疾病的發(fā)展和診斷需要，適時(shí)根據(jù)動(dòng)物的種類(lèi)、體型、病變部位和研究目的，選擇合適的解剖部位和切口位置。在在切取組織檢材時(shí)，應(yīng)避免過(guò)度牽拉、擠壓和損傷組織，保持組織的原有形態(tài)和結(jié)構(gòu)?；虿煌?lèi)型的病變，應(yīng)分別提取檢材，并做好標(biāo)記和記錄，注明檢材的來(lái)源、病變類(lèi)型完整地摘取病變器官或目標(biāo)器官，在摘取過(guò)程中應(yīng)注意保護(hù)器官的血管、神經(jīng)和去除器官表面的結(jié)締組織、脂肪、筋膜和其他附著物，用生理鹽水輕輕沖洗將摘取的器官檢材放入無(wú)菌容器或保鮮袋中，做好標(biāo)記和記錄，盡），22G針頭），在無(wú)菌操作條件下進(jìn)行穿刺采集。穿刺部位應(yīng)選擇在積液較多選擇在肋間隙、腹腔穿刺可選擇在臍與恥骨聯(lián)合在穿刺過(guò)程中，應(yīng)緩慢進(jìn)針，避免損傷內(nèi)臟器官和血管。當(dāng)針頭進(jìn)入體腔后，緩慢抽?。?，T/WFSX007.8一2024采集完成后，立即將離心管密封，做好標(biāo)記和記錄，盡快進(jìn)行離心處理使用無(wú)菌刮片、毛刷或吸管等工具，采集病變部位的細(xì)胞，將細(xì)胞均勻涂抹在載玻對(duì)于液體樣本（如血液、腦脊液、尿液等），可采用離心涂），采集血液時(shí)，可通過(guò)靜脈穿刺、心臟穿刺、動(dòng)脈穿刺等方法進(jìn)行。對(duì)于小型動(dòng)物（），），前肢靜脈、后肢靜脈或頸靜脈穿刺的方法采集血液；對(duì)于大），前腔靜脈或尾靜脈穿刺的方法采集血液；對(duì)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的心臟穿刺采血，應(yīng)在麻醉狀態(tài)血液采集完成后，根據(jù)檢測(cè)目的和后續(xù)處理方法，將血液收集到抗凝管（如肝素二鉀抗凝管等）或促凝管中?？鼓苤械难簯?yīng)輕輕顛倒混勻，防止血液凝固；促對(duì)于麻醉狀態(tài)下的動(dòng)物，可采用輸尿管插管法或膀胱造瘺法采集尿液。輸尿管插管法是尿管，將尿液引流到收集容器中；膀胱造瘺法是在動(dòng)物的膀胱上進(jìn)行手術(shù)造瘺，將尿?qū)τ谛⌒蛣?dòng)物，可使用唾液收集管或吸附棉棒等工具，刺激動(dòng)物口腔分泌唾液，收集唾動(dòng)物，可使用口腔引流裝置或唾液收集器等10%中性福爾馬林溶液是一種常用的固定劑，T/WFSX007.8一2024性保存較好，適用于免疫組織化學(xué)、原位雜交等需要檢測(cè)抗原和核根據(jù)特殊的研究目的和檢測(cè)要求，還可選擇戊二醛、醋將提取的組織或器官檢材放入裝有固定劑的在固定過(guò)程中，應(yīng)定期輕輕攪動(dòng)固定劑，使檢材與固定劑充分接觸，確保固定均勻。固），T/WFSX007.8一2024準(zhǔn)備好取材所需的工具，如鋒利的切片刀、剪刀、鑷子、直尺、載玻片、包取材應(yīng)在清潔、通風(fēng)良好的實(shí)驗(yàn)室或?qū)Ｓ萌〔氖疫M(jìn)行，避免環(huán)境污染和交叉污取材部位應(yīng)根據(jù)病變的特點(diǎn)和研究目的進(jìn)行選擇，包括病變中心、病變與正常正常組織等。對(duì)于多灶性病變或彌漫性病變，應(yīng)在多個(gè)部取材組織塊的大小應(yīng)根據(jù)后續(xù)制片和檢測(cè)方法確定。一般來(lái)說(shuō)，用于常0.2cm×0.2cm×0.2cm-0.3cm×0.3cm×0.3cm；用于冰凍切片的組織塊大小為0.5cm×0.5cm根據(jù)研究需要和病變的復(fù)雜性，確定取材的數(shù)量。一般來(lái)說(shuō)，對(duì)于單個(gè)病變部位，應(yīng)至織；對(duì)于多個(gè)病變部位或不同類(lèi)型的病變，應(yīng)分別取材，使用切片刀或剪刀，從固定后的組織或器官中切取所需的組織塊。取材時(shí)應(yīng)注意保向，避免過(guò)度牽拉和擠壓組織。對(duì)于質(zhì)地較硬的組織，可先將組織進(jìn)行軟化處），將切取的組織塊放入包埋盒中，做好標(biāo)記和記錄，注明組織的來(lái)源、病變類(lèi)型、取材部對(duì)于細(xì)胞涂片，使用鑷子或吸管將涂片從載玻片上取下，放入包埋盒中。對(duì)于離心后的），T/WFSX007.8一20