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生物化學(xué)知識(shí)點(diǎn)總結(jié)生物化學(xué)知識(shí)點(diǎn)總結(jié)第一章蛋白質(zhì)化學(xué)1、氨基酸的分類:
生物體中的氨基酸常見蛋白質(zhì)氨基酸(20種)不常見蛋白質(zhì)氨基酸非蛋白質(zhì)氨基酸蛋白質(zhì)氨基酸按側(cè)鏈R基的極性分為:記?。?0種蛋白質(zhì)氨基酸的結(jié)構(gòu)式,三字母符號(hào)。例題:1、請(qǐng)寫出下列物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式:賴氨酸,組氨酸,谷氨酰胺。2、寫出下列縮寫符號(hào)的中文名稱:AlaGluAspCys3、是非題:1)天然氨基酸都有一個(gè)不對(duì)α-稱碳原子。2)自然界的蛋白質(zhì)和多肽類物質(zhì)均由L-氨基酸組成。2、氨基酸的酸堿性質(zhì)Henderson-Hasselbalch方程:pH=pKa+lg[質(zhì)子受體]即堿[質(zhì)子供體]即酸例題:1、Henderson-Hasselbalch方程為
。2、當(dāng)溶液中的pH值大于某一可解離的pKa值時(shí),該基團(tuán)有一半以上被解離。3、氨基酸的等電點(diǎn)(pI):使氨基酸處于凈電荷為零時(shí)的pH。對(duì)于R基不解離和酸性氨基酸:pI=1/2(pKα1+pKα2)對(duì)于堿性氨基酸:pI=1/2(pKα2+pKα3)以谷氨酸為中心的聯(lián)合脫氨基作用測(cè)定純度:通過測(cè)定A260/A280的比值鑒定純度,純DNA比值大于1.鑒定多肽鏈的N-末端和C-末端4)酶活性受到調(diào)節(jié)和控制:1、糖酵解:發(fā)生場(chǎng)所,反應(yīng)過程,酶,調(diào)控酶,限速反應(yīng),能量變化及生理意義在外周組織,5-羥色胺有收縮血管的作用顛換:嘧啶和嘌呤交換,或是嘌呤和嘧啶交換9、酶的專一性分為結(jié)構(gòu)專一性和立體異構(gòu)專一性。復(fù)制過程分為:起始,延伸,終止三個(gè)階段R-C-COOH+NH32、當(dāng)溶液中的pH值大于某一可解離的pKa值時(shí),該基團(tuán)有一半以上被解離。模板鏈:用于轉(zhuǎn)錄的DNA鏈。pI=1/2(pKα2+pKα3)4、紫外光譜性質(zhì):三種氨基酸具有紫外吸收性質(zhì)。5′→3′核酸聚合酶活性大部分的解旋酶方向是沿著5’→3’方向1)底物:4種NTP三級(jí)(30)結(jié)構(gòu)(tertiarystructure)(1)螺旋的每圈有3.4、紫外光譜性質(zhì):三種氨基酸具有紫外吸收性質(zhì)。最大吸收波長(zhǎng):酪氨酸——275nm;苯丙氨酸——257nm;色氨酸——280nm。一般考選擇題或填空題。5、化學(xué)反應(yīng):與氨基的反應(yīng):?;磻?yīng)氨基酸與5一二甲氨基萘-1-磺酰氯(dansylchloride,DNS)的反應(yīng)烴基化反應(yīng)與2、4一二硝基氟苯的反應(yīng),與苯異硫氰酸(酯)的反應(yīng)與羧基的反應(yīng):成鹽和成酯反應(yīng)(保護(hù)羧基);成酰氯反應(yīng)和疊氮反應(yīng)(活化羧基)氨基和羧基共同參加的反應(yīng):與茚三酮反應(yīng),成肽鍵反應(yīng)(1)
Millon反應(yīng):檢測(cè)Tyr或含Tyr的蛋白質(zhì)的反應(yīng)。Millon試劑:汞的硝酸鹽與亞硝酸鹽溶液。產(chǎn)物:紅色的化合物。(2)
Folin反應(yīng):檢測(cè)Tyr或含Tyr的蛋白質(zhì)的反應(yīng)。Folin試劑:磷鉬酸、磷鎢酸混合溶液。產(chǎn)物:藍(lán)色的鉬藍(lán)、鎢藍(lán)。(3)
坂口反應(yīng):檢測(cè)Arg或含Arg的蛋白質(zhì)的反應(yīng)。坂口試劑:α—萘酚的堿性次溴酸鈉溶液。產(chǎn)物:磚紅色的沉淀。側(cè)鏈反應(yīng)(顏色反應(yīng)):9、解偶聯(lián)劑:2,4-二硝基苯酚5′→3′核酸聚合酶活性4步反應(yīng):脫氫,加水,脫氫,硫解氨基酸與5一二甲氨基萘-1-磺酰氯(dansylchloride,DNS)的反應(yīng)在外周組織,5-羥色胺有收縮血管的作用無(wú)義突變:氨基酸轉(zhuǎn)變?yōu)榻K止密碼子→蛋白質(zhì)合成停止2)以DNA為模板,并且需要一段引物,引物是一段與模板互補(bǔ)的核酸(DNA或RNA)片斷,有3’-OH。1、脂肪酸的氧化分解——β-氧化R-C-COOH+NH3蛋白質(zhì)合成原料:20種氨基酸,20種氨基酸以氨酰-tRNA的活化形式加入到肽鏈上。3)具有高度專一性:R’-CH-COOHR”-C-COOH目前的定義:是生物體內(nèi)一類具有催9、酶的專一性分為結(jié)構(gòu)專一性和立體異構(gòu)專一性。核糖的顏色反應(yīng)可以對(duì)RNA和DNA進(jìn)行定量AGCTGC2ATP+CO2+NH3+H2O二級(jí)結(jié)構(gòu):三葉草形結(jié)構(gòu)一級(jí)(10)結(jié)構(gòu)(primarystructure)酶:脂酰輔酶A脫氫酶( FAD輔酶),烯酰輔酶A水合酶,3-羥脂酰輔酶A脫氫酶(NAD+輔酶),硫解酶從NADH到O2,P/O比是3;原核生物以NAD+為能量供體,為DNA連接酶提供能量。6、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次一級(jí)(10)結(jié)構(gòu)(primarystructure):指多肽鏈中以肽鍵相連的氨基酸序列。二級(jí)(20)結(jié)構(gòu)(secondarystructure):指多肽鏈借助氫鍵排列成一些規(guī)則片斷,α-螺旋,β-折疊,β-轉(zhuǎn)角及無(wú)規(guī)則卷曲。三級(jí)(30)結(jié)構(gòu)(tertiarystructure):指多肽鏈借助各種非共價(jià)鍵在二級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上進(jìn)一步彎曲,折疊成具有特定走向的緊密球狀構(gòu)象。四級(jí)(40)結(jié)構(gòu)(quaternarystruture):指寡聚蛋白質(zhì)中各亞基之間在空間上的相互關(guān)系和結(jié)合方式。超二級(jí)結(jié)構(gòu):在球狀蛋白質(zhì)中,若干相鄰的二級(jí)結(jié)構(gòu)單元如α-螺旋,β-折疊,β-轉(zhuǎn)角組合在一起,彼此相互作用,形成有規(guī)則的在空間上能辨認(rèn)的二級(jí)結(jié)構(gòu)組合體,并充當(dāng)三級(jí)結(jié)構(gòu)的構(gòu)件,基本組合有:αα,βαβ,βββ。結(jié)構(gòu)域:結(jié)構(gòu)域是多肽鏈在二級(jí)結(jié)構(gòu)或超二級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上形成三級(jí)結(jié)構(gòu)的局部折疊區(qū),它是一個(gè)相對(duì)獨(dú)立的緊密球狀實(shí)體7、維持蛋白質(zhì)各級(jí)結(jié)構(gòu)的作用力:一級(jí)結(jié)構(gòu):肽鍵二,三,四級(jí)結(jié)構(gòu):氫鍵,范德華力,疏水作用力,離子鍵和二硫鍵。測(cè)定多肽鏈的數(shù)目拆分多肽鏈斷開多肽鏈內(nèi)的二硫鍵測(cè)定每一肽鏈的氨基酸組成鑒定多肽鏈的N-末端和C-末端裂解多肽鏈為較小的肽段測(cè)定各肽段的氨基酸序列利用重疊肽重建完整多肽鏈的一級(jí)結(jié)構(gòu)確定二硫鍵的位置8、蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的測(cè)定(9步)
酶裂解法:蛋白水解酶可以用于肽鏈的斷裂。最常用的酶:胰蛋白酶,胰凝乳蛋白酶(糜蛋白酶),胃蛋白酶,嗜熱菌蛋白酶,梭菌蛋白酶等等。胰蛋白酶:Lys和Arg羧基所參加的反應(yīng)糜蛋白酶:Phe,Tyr,Trp羧基端肽鍵。梭菌蛋白酶:Arg的羧基端溴化氰:只斷裂Met的羧基形成的肽鍵。
α-螺旋結(jié)構(gòu)要點(diǎn):(1)螺旋的每圈有3.6個(gè)氨基酸,螺旋間距離為0.54nm,每個(gè)殘基沿軸旋轉(zhuǎn)100°,上升0.15nm。(2)第n個(gè)肽鍵的羰基氧與遠(yuǎn)在第(n+4)個(gè)氨基酸氨基上的氫形成鏈內(nèi)氫鍵(hydrogenbond),氫鍵的走向平行于螺旋軸,所有肽鍵都能參與鏈內(nèi)氫鍵的形成。R基伸向螺旋的外側(cè)。(3)螺旋中每個(gè)α-C的ψ和Φ分別在-47°和-57°。(4)99%是右手螺旋。
10080氧分壓氧飽和度%60609012015030氧合曲線血紅蛋白氧合曲線肌紅蛋白氧合曲線波耳效應(yīng):當(dāng)H+離子濃度增加時(shí),pH值下降,氧飽和度右移,這種pH對(duì)血紅蛋白對(duì)氧的親和力影響被稱為波耳效應(yīng)(Bohr效應(yīng))。計(jì)算當(dāng)一對(duì)電子從NADH轉(zhuǎn)移到細(xì)胞色素C的反應(yīng)中,標(biāo)準(zhǔn)自由能的變化。無(wú)義突變:氨基酸轉(zhuǎn)變?yōu)榻K止密碼子→蛋白質(zhì)合成停止在外周組織,5-羥色胺有收縮血管的作用(1)
Millon反應(yīng):檢測(cè)Tyr或含Tyr的蛋白質(zhì)的反應(yīng)。是轉(zhuǎn)氨基作用和L-谷氨酸氧化脫氨基作用聯(lián)合反應(yīng)。根據(jù)抑制劑與酶的結(jié)合方式分為化能力和特定空間構(gòu)象的生物大分子。米氏方程變?yōu)椋海?)第n個(gè)肽鍵的羰基氧與遠(yuǎn)在第(n+4)個(gè)氨基酸氨基上的氫形成鏈內(nèi)氫鍵(hydrogenbond),氫鍵的走向平行于螺旋軸,所有肽鍵都能參與鏈內(nèi)氫鍵的形成。顛換:嘧啶和嘌呤交換,或是嘌呤和嘧啶交換二級(jí)(20)結(jié)構(gòu)(secondarystructure)與羧基的反應(yīng):成鹽和成酯反應(yīng)(保護(hù)羧基);反應(yīng)過程:脫氫,水化,脫氫,硫解2)模板:DNA雙鏈中的一條鏈與核苷酸結(jié)合,起始和催化部位。2)肽酰轉(zhuǎn)移酶在P位點(diǎn)切斷肽鏈和tRNA之間的鍵。從頭合成途徑的產(chǎn)所:細(xì)胞質(zhì)9、酶的專一性分為結(jié)構(gòu)專一性和立體異構(gòu)專一性。這種抑制作用不能用增加底物的方式解除。,與苯異硫氰酸(酯)的反應(yīng)15000~600002、酶作為生物催化劑的特點(diǎn)第二章核酸化學(xué)1、核苷酸:四種堿基的結(jié)構(gòu)式,四種核苷酸的結(jié)構(gòu)式,四種脫氧核苷酸的結(jié)構(gòu)式,假尿嘧啶核苷酸的結(jié)構(gòu)式,環(huán)腺苷酸的結(jié)構(gòu)式。2、核酸的一級(jí)結(jié)構(gòu):核苷酸是核酸的基本結(jié)構(gòu)單位。核苷酸以磷酸二酯鍵連接。例題:核酸的基本結(jié)構(gòu)單位是
。3、DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu):雙螺旋Watson雙螺旋的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),雙螺旋類型,雙螺旋的維持力Watson的雙螺旋結(jié)構(gòu)要點(diǎn)1、兩條反向的多核苷酸鏈圍繞同一條中心軸呈右手螺旋盤繞。2、磷酸和脫氧核糖鏈在螺旋的兩側(cè),堿基在螺旋的中間,兩條鏈的堿基兩兩配對(duì),A與T形成兩個(gè)氫鍵,G與C形成三個(gè)氫鍵。3、雙螺旋直徑為2nm,相鄰兩對(duì)堿基垂直距離為0.34nm,每圈螺旋中有10對(duì)堿基每圈螺距為3.4nm。4、在雙螺旋的表面形成大、小兩個(gè)凹槽分別稱為大溝、小溝。5、兩條鏈借堿基之間的氫鍵和堿基堆積力牢固的連結(jié)起來(lái),維持DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)。
DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的不同類型:Watson雙螺旋結(jié)構(gòu)被稱為B-DNA。除此之外還有A型和Z型等等。Z型雙螺旋是左手螺旋。DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的維持力:氫鍵堿基堆積力離子鍵范德華力4、tRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)和三級(jí)結(jié)構(gòu)二級(jí)結(jié)構(gòu):三葉草形結(jié)構(gòu)三級(jí)結(jié)構(gòu):倒L形。5、原核生物和真核生物mRNA的區(qū)別原核生物mRNA為多順反子mRNA。真核生物mRNA具5’端帽子和3’端多聚腺苷酸結(jié)構(gòu),是單順反子。6、限制性內(nèi)切酶:在細(xì)菌中發(fā)現(xiàn)的,具有嚴(yán)格的堿基序列專一性,主要是降解外源的DNA一類酶。7、核酸的紫外吸收在260nm處有最大光吸收DNA和RNA的定量測(cè)定和純度測(cè)定測(cè)定純度:通過測(cè)定A260/A280的比值鑒定純度,純DNA比值大于1.8,純RNA比值大于2.0
8、增色效應(yīng):核酸的光吸收值比核苷酸光吸收值的和少30~40%,當(dāng)核酸變性或降解時(shí)光吸收值顯著增加(增色效應(yīng))減色效應(yīng):核酸復(fù)性后,光吸收值又回復(fù)到原有水平(減色效應(yīng))。Tm:通常把DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)失去一半時(shí)的溫度稱為DNA的熔點(diǎn)或熔解溫度(meltingtemperature,Tm)。DNA的Tm值大小與下列因素有關(guān):(1)DNA的均一性(2)G—C之含量
(3)介質(zhì)中的離子強(qiáng)度
酶7個(gè)酶4個(gè)酶是細(xì)胞內(nèi)不同結(jié)構(gòu)糖分子的重要來(lái)源,并為各種單糖的相互轉(zhuǎn)變提供條件鑒定多肽鏈的N-末端和C-末端一級(jí)(10)結(jié)構(gòu)(primarystructure)2)長(zhǎng)鏈脂肪酸的轉(zhuǎn)運(yùn):脂酰肉堿轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制CH3-(CH2)12-CH-CH2-CO~SCoA1)底物:4種NTP3)多肽鏈,mRNA,tRNA和核糖體分開計(jì)算當(dāng)一對(duì)電子從NADH轉(zhuǎn)移到細(xì)胞色素C的反應(yīng)中,標(biāo)準(zhǔn)自由能的變化。RNA的測(cè)定用地衣酚法。誘導(dǎo)物與操縱基因結(jié)合起動(dòng)轉(zhuǎn)錄2、寫出下列縮寫符號(hào)的中文名稱:最大吸收波長(zhǎng):酪氨酸——2、必需氨基酸:8種,纈氨酸,亮氨酸,異亮氨酸,蘇氨酸,甲硫氨酸,苯丙氨酸,色氨酸,賴氨酸顛換:嘧啶和嘌呤交換,或是嘌呤和嘧啶交換R-C-COOH+NH3(1)螺旋的每圈有3.8、呼吸抑制劑阻斷呼吸鏈的部位:CH3-(CH2)12-C-CH2-CO~SCoA是非題:原核生物的基因往往為斷裂基因,因大多數(shù)基因都被內(nèi)含子所分隔。5′→3′核酸聚合酶活性核糖的顏色反應(yīng)可以對(duì)RNA和DNA進(jìn)行定量9、定糖法原理:根據(jù)RNA中的核糖,DNA中的脫氧核糖的顏色反應(yīng)可以對(duì)RNA和DNA進(jìn)行定量測(cè)定。DNA的測(cè)定用二苯胺法;RNA的測(cè)定用地衣酚法。第三章酶1、酶的概念經(jīng)典概念:是一類由活細(xì)胞產(chǎn)生的,具有特殊催化能力,高度專一性的蛋白質(zhì)。目前的定義:是生物體內(nèi)一類具有催化能力和特定空間構(gòu)象的生物大分子。2、酶作為生物催化劑的特點(diǎn)1)酶易失活:2)催化效率高:3)具有高度專一性:4)酶活性受到調(diào)節(jié)和控制:
4、全酶=酶蛋白+輔助因子5、酶的系統(tǒng)命名法例題:寫出下列反應(yīng)酶的國(guó)際系統(tǒng)命名乳酸丙酮酸6、酶的分類1)氧化還原酶2)轉(zhuǎn)移酶3)水解酶4)裂合酶5)異構(gòu)酶6)合成酶7、酶活力的概念,酶活力單位,比活力,總活力酶活力是指酶催化某一化學(xué)反應(yīng)的能力。用一定條件下所催化的某一反應(yīng)的速率來(lái)表示。酶活力單位:在一定條件下,一定時(shí)間內(nèi)將一定量的底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物所需的酶量(unit,U)。8、酶的專一性假說(shuō):鎖鑰學(xué)說(shuō),誘導(dǎo)契合假說(shuō)9、酶的專一性分為結(jié)構(gòu)專一性和立體異構(gòu)專一性。10、酶的活性部位:酶分子中能和底物結(jié)合并起催化作用的空間部位,分為結(jié)合部位和催化部位。產(chǎn)物:藍(lán)色的鉬藍(lán)、鎢藍(lán)。氫鍵,范德華力,疏水作用力,離子鍵和二硫鍵。效應(yīng)物:能使酶分子發(fā)生別構(gòu)作用的物質(zhì),又分為正效應(yīng)物和負(fù)效應(yīng)物。顛換:嘧啶和嘌呤交換,或是嘌呤和嘧啶交換2)模板:DNA雙鏈中的一條鏈FADH2鏈:FADH2-輔酶Q還原酶,輔酶Q,輔酶Q-細(xì)胞色素c還原酶,細(xì)胞色素c,細(xì)胞色素氧化酶。真核生物mRNA具5’端帽子和3’端多聚腺苷酸結(jié)構(gòu),是單順反子。減色效應(yīng):核酸復(fù)性后,光吸收值又回復(fù)到原有水平(減色效應(yīng))。4步反應(yīng):脫氫,加水,脫氫,硫解半不連續(xù)復(fù)制:DNA雙鏈在進(jìn)行復(fù)制時(shí),一條模板鏈3’→5’方向,復(fù)制鏈以5→’3’方向連續(xù)合成,另一條模板鏈3’→5’方向,復(fù)制鏈以5’→3’方向合成許多DNA片斷,最后連成完整的鏈。6個(gè)氨基酸,螺旋間距離為0.8、蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的測(cè)定(9步)例題:是非題:DNA復(fù)制時(shí),前導(dǎo)鏈只需1個(gè)引物,后隨鏈則需多個(gè)引物。具有特殊催化能力,高度專一性的蛋白質(zhì)。4)酶活性受到調(diào)節(jié)和控制:RNA的測(cè)定用地衣酚法。:指多肽鏈借助氫鍵排列成一些規(guī)則片斷,α-螺旋,β-折疊,β-轉(zhuǎn)角及無(wú)規(guī)則卷曲。FADH2鏈:FADH2-輔酶Q還原酶,輔酶Q,輔酶Q-細(xì)胞色素c還原酶,細(xì)胞色素c,細(xì)胞色素氧化酶。6、乙醛酸途徑中兩個(gè)特有的酶:異檸檬酸裂合酶和蘋果酸合酶Watson雙螺旋結(jié)構(gòu)被稱為B-DNA。最大吸收波長(zhǎng):酪氨酸——轉(zhuǎn)氨作用的機(jī)制:乒乓機(jī)制11、米氏方程米氏常數(shù)的意義:米氏常數(shù)Km是當(dāng)酶的反應(yīng)速率達(dá)到最大反應(yīng)速率一半時(shí)的底物濃度,單位是濃度單位(mol/L)。Km是酶的一個(gè)特性常數(shù),只與酶的性質(zhì)有關(guān)。v=Vmax[S]Km+[S]5、Km的求法:1)Lineweaver-Burk雙倒數(shù)作圖法
1/v1/[S]-1/Km1/Vmax將米氏方程兩邊取倒數(shù),得此方程:=KmVmax×1[S]+1v1Vmax12、溫度系數(shù)(Q10):反應(yīng)提高10℃,其酶促反應(yīng)速率與原來(lái)反應(yīng)速率之比。13、酶的抑制作用:酶的必需基團(tuán)受到某種物質(zhì)影響發(fā)生改變,導(dǎo)致酶活性降低或喪失。抑制作用的類型
根據(jù)抑制劑與酶的結(jié)合方式分為1)不可逆抑制2)可逆抑制1)不可逆抑制作用:抑制劑與酶以共價(jià)鍵結(jié)合,引起酶活性下降或喪失,不能用透析,過濾等方法除去抑制劑使酶復(fù)活??赡嬉种谱饔茫阂种苿┡c酶以非共價(jià)鍵結(jié)合,引起酶活性喪失或者降低,可以用物理化學(xué)方法除去抑制劑,使酶復(fù)活。分為三類:①競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用
②非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用③反競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用①競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用:抑制劑(I)與底物(S)有相似的結(jié)構(gòu),它們競(jìng)爭(zhēng)酶的活性部位,從而影響底物與酶的正常結(jié)合,使酶的活性降低,這種抑制作用可以通過增加底物濃度解除。②非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用:抑制劑與酶活性中心以外的部位結(jié)合,不妨礙酶與底物的結(jié)合,可以形成ESI復(fù)合物,這種復(fù)合物不能進(jìn)一步轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)物。這種抑制作用不能用增加底物的方式解除。③反競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用:酶與底物結(jié)合后才能與抑制劑結(jié)合形成ESI復(fù)合物,這種復(fù)合物不能分解為產(chǎn)物,從而抑制了酶的活性??赡嬉种谱饔玫膭?dòng)力學(xué)1)競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用加入競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑后的米氏方程:v=Vmax[S]Km(1+[I]/Ki)+[S]加入競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑后,Vmax不變,Km變大。2)非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑:加入非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑后的米氏方程:v=Km+[S]Vmax(1+[I]/Ki)[S]加入非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑后,Vmax變小,Km不變。3)反競(jìng)爭(zhēng)抑制作用米氏方程變?yōu)椋?/p>
Vmax(1+[I]/Ki)[S]+[S]v=Km(1+[I]/Ki)加入反競(jìng)爭(zhēng)抑制劑,Vmax和Km都變小。16、決定酶高效率的機(jī)制:鄰近效應(yīng)和定向效應(yīng);誘導(dǎo)契合;酸堿催化;共價(jià)催化;局部微環(huán)境的影響。17、酶的別構(gòu)調(diào)節(jié):酶分子的非催化部位與某些化合物可逆的非共價(jià)結(jié)合,使酶發(fā)生構(gòu)象的改變,進(jìn)而改變酶活性狀態(tài),稱為酶的別構(gòu)調(diào)節(jié)。效應(yīng)物:能使酶分子發(fā)生別構(gòu)作用的物質(zhì),又分為正效應(yīng)物和負(fù)效應(yīng)物。第四章維生素1、維生素:是維持機(jī)體正常生命活動(dòng)不可缺少的小分子有機(jī)物。分為脂溶性維生素和水溶性維生素2、維生素A缺乏癥:夜盲癥3、維生素D缺乏癥:佝僂病4、維生素B1:是TPP的前體;TPP是丙酮酸脫羧酶,乙酰乳酸合成酶,戊糖磷酸途徑中轉(zhuǎn)酮酶的輔酶。缺乏癥是腳氣病。1)是機(jī)體獲得能量的主要途徑原核生物以NAD+為能量供體,為DNA連接酶提供能量。11、硫辛酸作為丙酮酸脫氫酶系中的一個(gè)輔酶。具有特殊催化能力,高度專一性的蛋白質(zhì)。組胺:強(qiáng)烈的血管舒張劑,能增加毛細(xì)血管的通透性。8、蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的測(cè)定(9步)11、硫辛酸作為丙酮酸脫氫酶系中的一個(gè)輔酶。2、堿基對(duì)的置換(點(diǎn)突變):DNA錯(cuò)配堿基在復(fù)制后被固定下來(lái),由原來(lái)的一個(gè)堿基對(duì)被另一個(gè)堿基對(duì)所取代12、磷-氧比(P/O比):指每消耗一分子O2產(chǎn)生的ATP分子數(shù)。聚合速度(核苷酸/分)原理:根據(jù)RNA中的核糖,DNA中的脫氧調(diào)控酶:檸檬酸合成酶、異檸檬酸脫氫酶和α-酮戊二酸脫氫酶2、酶作為生物催化劑的特點(diǎn)1)進(jìn)位:與第二個(gè)密碼子相對(duì)應(yīng)的氨酰tRNA結(jié)合到A位。Phe,Tyr,Trp羧基端肽鍵。6、維生素B2是FAD,F(xiàn)MN的組成成分10、葉酸:是四氫葉酸的前體,四氫葉酸是體內(nèi)一碳單位的載體。乙酰輔酶A的轉(zhuǎn)運(yùn):檸檬酸-丙酮酸循環(huán)第一章蛋白質(zhì)化學(xué)(3)螺旋中每個(gè)α-C的ψ和Φ分別在-47°和-57°。能量產(chǎn)生:乙酰輔酶A進(jìn)入TCA循環(huán),NADH和FADH2進(jìn)入呼吸鏈。原核生物以NAD+為能量供體,為DNA連接酶提供能量。5、維生素PP:是NAD+,NADP+的組成成分。6、維生素B2是FAD,F(xiàn)MN的組成成分7、泛酸是輔酶A的組成成分8、維生素B6是磷酸吡哆胺和磷酸吡哆醛的前體,這兩種物質(zhì)主要作為轉(zhuǎn)氨酶和脫羧酶的輔酶9、維生素B12的缺乏癥:惡性貧血10、葉酸:是四氫葉酸的前體,四氫葉酸是體內(nèi)一碳單位的載體。11、硫辛酸作為丙酮酸脫氫酶系中的一個(gè)輔酶。第五章糖代謝1、糖酵解:發(fā)生場(chǎng)所,反應(yīng)過程,酶,調(diào)控酶,限速反應(yīng),能量變化及生理意義場(chǎng)所:細(xì)胞質(zhì)調(diào)控酶:己糖激酶,磷酸果糖激酶,丙酮酸激酶凈產(chǎn)生2個(gè)ATP糖酵解途徑的生理意義1)在缺氧條件下為機(jī)體提供能量2)為其它合成反應(yīng)提供碳骨架3)把葡萄糖轉(zhuǎn)變?yōu)楸?,為檸檬酸循環(huán)最終的氧化做準(zhǔn)備
2、三羧酸循環(huán):場(chǎng)所,反應(yīng)過程,酶,調(diào)控酶,能量產(chǎn)生,生理意義產(chǎn)所:線粒體調(diào)控酶:檸檬酸合成酶、異檸檬酸脫氫酶和α-酮戊二酸脫氫酶能量產(chǎn)生:10個(gè)ATP檸檬酸循環(huán)的生理意義1)是機(jī)體獲得能量的主要途徑2)是物質(zhì)代謝的中樞3)檸檬酸循環(huán)的中間產(chǎn)物可作為細(xì)胞組分碳骨架的前體物質(zhì)。3、糖原合成和分解:場(chǎng)所和過程4、糖異生:三個(gè)迂回措施5、磷酸戊糖途徑的生理意義是細(xì)胞產(chǎn)生還原力(NADPH)的主要途徑。是細(xì)胞內(nèi)不同結(jié)構(gòu)糖分子的重要來(lái)源,并為各種單糖的相互轉(zhuǎn)變提供條件6、乙醛酸途徑中兩個(gè)特有的酶:異檸檬酸裂合酶和蘋果酸合酶7、胰島素,胰高血糖素,腎上腺素,糖皮質(zhì)激素對(duì)血糖的作用。第六章生物氧化1、生物氧化的概念:是有機(jī)物在活細(xì)胞中進(jìn)行氧化分解生成二氧化碳和水,并釋放出能量的過程。2、呼吸鏈:在生物氧化過程中,基質(zhì)脫下的氫經(jīng)過一系列傳遞體傳遞,最后與氧結(jié)合生成水的電子傳遞系統(tǒng),在具有線粒體的生物中,呼吸鏈分為NADH鏈和FADH2鏈兩種。1)天然氨基酸都有一個(gè)不對(duì)α-稱碳原子。聯(lián)合脫氨基作用:氨基酸與α-酮戊二酸經(jīng)轉(zhuǎn)氨作用生成α-酮酸和谷氨酸,后者經(jīng)L-谷氨酸脫氫酶作用生成游離氨和α-酮戊二酸的過程。原理:根據(jù)RNA中的核糖,DNA中的脫氧能量產(chǎn)生:乙酰輔酶A進(jìn)入TCA循環(huán),NADH和FADH2進(jìn)入呼吸鏈。鑒定多肽鏈的N-末端和C-末端4)酶活性受到調(diào)節(jié)和控制:一級(jí)(10)結(jié)構(gòu)(primarystructure)8、增色效應(yīng):核酸的光吸收值比核苷酸光吸收值的和少30~40%,當(dāng)核酸變性或降解時(shí)光吸收值顯著增加(增色效應(yīng))在外周組織,5-羥色胺有收縮血管的作用原核生物以NAD+為能量供體,為DNA連接酶提供能量。特點(diǎn):連續(xù)性,簡(jiǎn)并性,變偶性,通用性和變異性,糾錯(cuò)性三級(jí)(30)結(jié)構(gòu)(tertiarystructure)8、呼吸抑制劑阻斷呼吸鏈的部位:原核生物以NAD+為能量供體,為DNA連接酶提供能量。(1)
Millon反應(yīng):檢測(cè)Tyr或含Tyr的蛋白質(zhì)的反應(yīng)。8、呼吸抑制劑阻斷呼吸鏈的部位:解旋酶,拓?fù)涿高B接酶,SSB9、酶的專一性分為結(jié)構(gòu)專一性和立體異構(gòu)專一性。大腸桿菌DNA聚合酶的種類特點(diǎn):連續(xù)性,簡(jiǎn)并性,變偶性,通用性和變異性,糾錯(cuò)性3)把葡萄糖轉(zhuǎn)變?yōu)楸幔瑸闄幟仕嵫h(huán)最終的氧化做準(zhǔn)備R’-CH-COOHR”-C-COOH4、呼吸鏈的組成:NADH鏈:NADH-輔酶Q還原酶,輔酶Q,輔酶Q-細(xì)胞色素c還原酶,細(xì)胞色素c,細(xì)胞色素氧化酶。FADH2鏈:FADH2-輔酶Q還原酶,輔酶Q,輔酶Q-細(xì)胞色素c還原酶,細(xì)胞色素c,細(xì)胞色素氧化酶。5、底物水平磷酸化:在代謝過程中,由于底物分子內(nèi)部能量重新分布產(chǎn)生的高能磷酸鍵轉(zhuǎn)移給ADP,產(chǎn)生ATP或GTP的反應(yīng)。6、氧化磷酸化:電子在呼吸鏈傳遞過程中釋放的能量,在ATP合成酶催化下,促使ADP生成ATP,這是氧化與磷酸化相偶聯(lián)的反應(yīng),稱為氧化磷酸化,是生物合成ATP的主要方式。7、氧化作用和磷酸化作用相偶聯(lián)的部位8、呼吸抑制劑阻斷呼吸鏈的部位:NADHNADH-Q還原酶QH2C1C細(xì)胞色素氧化酶魚藤酮安密陀殺粉蝶菌素抗霉素A氰化物疊氮化合物CO9、解偶聯(lián)劑:2,4-二硝基苯酚10、氧化磷酸化抑制劑:寡霉素11、離子載體抑制劑:纈氨霉素
12、磷-氧比(P/O比):指每消耗一分子O2產(chǎn)生的ATP分子數(shù)。從NADH到O2,P/O比是3;從FADH2到O2,P/O比是2。計(jì)算當(dāng)一對(duì)電子從NADH轉(zhuǎn)移到細(xì)胞色素C的反應(yīng)中,標(biāo)準(zhǔn)自由能的變化。(pH=7.0,250C,NAD+/NADH+H+E0,=-0.32V,CytCFe3+/Fe2+E0,=+0.235V)答案:△G0’=-nF△E=-2×23.062×【+0.235―(―0.32)】=-25.6Kcal/mol第七章脂類代謝脂類代謝分解代謝合成代謝脂肪分解磷脂分解酮體代謝脂肪的合成磷脂的合成膽固醇的合成β-氧化:脂肪酸氧化從羧基端的β位碳原子開始,每次分解出一個(gè)2碳片斷,生成一個(gè)乙酰CoA的過程,是脂肪酸氧化的主要方式。1、脂肪酸的氧化分解——β-氧化1)脂肪酸的活化部位:細(xì)胞質(zhì);酶:脂酰輔酶A合成酶需要消耗1個(gè)ATP,2個(gè)高能磷酸鍵。不可逆反應(yīng)。2)長(zhǎng)鏈脂肪酸的轉(zhuǎn)運(yùn):脂酰肉堿轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制線粒體外膜線粒體內(nèi)膜脂酰肉堿轉(zhuǎn)移酶Ⅰ脂酰肉堿轉(zhuǎn)移酶Ⅱ脂酰CoA脂酰CoA肉堿輔酶A脂酰肉堿脂酰肉堿輔酶A脂酰CoA肉堿膜間隙基質(zhì)細(xì)胞質(zhì)載體11、硫辛酸作為丙酮酸脫氫酶系中的一個(gè)輔酶。2、酶作為生物催化劑的特點(diǎn)真核生物的tRNAi攜帶的是甲硫氨酸;4、維生素B1:是TPP的前體;3)把葡萄糖轉(zhuǎn)變?yōu)楸?,為檸檬酸循環(huán)最終的氧化做準(zhǔn)備2)長(zhǎng)鏈脂肪酸的轉(zhuǎn)運(yùn):脂酰肉堿轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制二級(jí)(20)結(jié)構(gòu)(secondarystructure)10、葉酸:是四氫葉酸的前體,四氫葉酸是體內(nèi)一碳單位的載體。解酮作用(ketolysis)在外周組織,5-羥色胺有收縮血管的作用(3)
坂口反應(yīng):檢測(cè)Arg或含Arg的蛋白質(zhì)的反應(yīng)。最大吸收波長(zhǎng):酪氨酸——一級(jí)(10)結(jié)構(gòu)(primarystructure)第一章蛋白質(zhì)化學(xué)3、是非題:除此之外還有A型和Z型等等。(3)介質(zhì)中的離子強(qiáng)度DNA和RNA的定量測(cè)定和純度測(cè)定原理:根據(jù)RNA中的核糖,DNA中的脫氧(3)介質(zhì)中的離子強(qiáng)度以谷氨酸為中心的聯(lián)合脫氨基作用一般考選擇題或填空題。3)β-氧化部位:線粒體反應(yīng)過程:脫氫,水化,脫氫,硫解酶:脂酰輔酶A脫氫酶( FAD輔酶),烯酰輔酶A水合酶,3-羥脂酰輔酶A脫氫酶(NAD+輔酶),硫解酶能量產(chǎn)生:乙酰輔酶A進(jìn)入TCA循環(huán),NADH和FADH2進(jìn)入呼吸鏈。
β-氧化過程4步反應(yīng):脫氫,加水,脫氫,硫解CH3-(CH2)12-CH2-CH2-CO~SCoAαβ脂酰輔酶A脫氫酶FADFADH2CH3-(CH2)12-C=C-CO~SCoAHH脂酰輔酶A△2-tris-烯酰輔酶A烯酰輔酶A水合酶H2OCH3-(CH2)12-CH-CH2-CO~SCoAOH3-羥脂酰輔酶ACH3-(CH2)12-C-CH2-CO~SCoAO3-羥脂酰脫氫酶NADH+H+硫解酶CH3-(CH2)10CH2-CO~SCoACH3-CO~CoA2、磷脂酶A1,磷脂酶A2,磷脂酶C,磷脂酶D的作用位點(diǎn)。CH2-O-C-R1OR2-C-O-CH2OCH2-O-P-O-XOOH3、酮體產(chǎn)生酮體:是一類小分子有機(jī)物,脂肪酸分解代謝產(chǎn)生的特有中間產(chǎn)物,包括乙酰乙酸,β-羥丁酸,丙酮。產(chǎn)所:肝臟線粒體原料:乙酰輔酶A關(guān)鍵酶:β羥-β-甲基戊二酸單酰輔酶A合成酶4、酮體的利用:解酮作用(ketolysis)由于肝內(nèi)缺乏分解酮體所需要的硫激酶,酮體的分解須在肝外組織中進(jìn)行(轉(zhuǎn)硫酶的作用相當(dāng)于硫激酶),最終轉(zhuǎn)變成乙酰CoA進(jìn)入三羧酸循環(huán)途徑氧化供能。5、脂肪酸的合成分為從頭合成途徑和延長(zhǎng)途徑從頭合成途徑的產(chǎn)所:細(xì)胞質(zhì)原料:乙酰輔酶A乙酰輔酶A的轉(zhuǎn)運(yùn):檸檬酸-丙酮酸循環(huán)?;d體蛋白(ACP)的作用:脂肪酸合成酶系中的?;d體。合成氫源:NADPH+H+6、脂肪酸合成與分解代謝的區(qū)別區(qū)別點(diǎn)脂肪酸合成脂肪酸分解發(fā)生場(chǎng)所細(xì)胞質(zhì)線粒體載體ACPCoASH轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制檸檬酸-丙酮酸循環(huán)肉堿載體系統(tǒng)二碳片斷丙二酸單酰CoA乙酰CoA反應(yīng)方向最后合成羧基端最先分解羧基端羥脂基中間體D-型L-型氫受體NADPHFAD,NAD+酶7個(gè)酶4個(gè)酶能量變化吸收能量釋放能量丙酮酸氧化脫羧β-氧化酮體分解乙酰輔酶ATCA循環(huán)脂酸合成生成酮體膽固醇合成第八章氨基酸的代謝氨基酸的代謝分解代謝合成代謝共同代謝途徑碳骨架代謝1、氮的平衡:氮的總平衡;氮的正平衡;氮的負(fù)平衡2、必需氨基酸:8種,纈氨酸,亮氨酸,異亮氨酸,蘇氨酸,甲硫氨酸,苯丙氨酸,色氨酸,賴氨酸3、氨基酸共同代謝途徑脫氨基作用:轉(zhuǎn)氨,脫氨,聯(lián)合脫氨轉(zhuǎn)氨作用的酶:轉(zhuǎn)氨酶(輔酶是磷酸吡哆醛,維生素B6的衍生物)轉(zhuǎn)氨作用的機(jī)制:乒乓機(jī)制轉(zhuǎn)氨基作用轉(zhuǎn)氨基作用由轉(zhuǎn)氨酶(transaminase)催化,將
-氨基酸的氨基轉(zhuǎn)移到
-酮酸酮基的位置上,生成相應(yīng)的
-氨基酸,而原來(lái)的
-氨基酸則轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)的
-酮酸。
R’-CH-COOHR”-C-COOHR’-C-COOHR”-CH-COOH
轉(zhuǎn)氨酶NH2OONH2轉(zhuǎn)氨酶的輔酶是磷酸吡哆醛,維生素B6的衍生物原核生物以NAD+為能量供體,為DNA連接酶提供能量。(2)第n個(gè)肽鍵的羰基氧與遠(yuǎn)在第(n+4)個(gè)氨基酸氨基上的氫形成鏈內(nèi)氫鍵(hydrogenbond),氫鍵的走向平行于螺旋軸,所有肽鍵都能參與鏈內(nèi)氫鍵的形成。32V,CytCFe3+/Fe2+E0,=+0.例題:是非題:DNA復(fù)制時(shí),前導(dǎo)鏈只需1個(gè)引物,后隨鏈則需多個(gè)引物。8、蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的測(cè)定(9步)轉(zhuǎn)氨基作用由轉(zhuǎn)氨酶(transaminase)催化,將-氨基酸的氨基轉(zhuǎn)移到-酮酸酮基的位置上,生成相應(yīng)的-氨基酸,而原來(lái)的-氨基酸則轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)的-酮酸。4、維生素B1:是TPP的前體;酶7個(gè)酶4個(gè)酶聚合速度(核苷酸/分)6)合成酶錯(cuò)義突變:三聯(lián)體密碼子改變→蛋白質(zhì)中某種氨基酸的改變。1、糖酵解:發(fā)生場(chǎng)所,反應(yīng)過程,酶,調(diào)控酶,限速反應(yīng),能量變化及生理意義2)為其它合成反應(yīng)提供碳骨架反應(yīng)過程:脫氫,水化,脫氫,硫解2ATP+CO2+NH3+H2O轉(zhuǎn)氨作用的酶:轉(zhuǎn)氨酶(輔酶是磷酸吡哆醛,維生素B6的衍生物)9、解偶聯(lián)劑:2,4-二硝基苯酚氨基酸與5一二甲氨基萘-1-磺酰氯(dansylchloride,DNS)的反應(yīng)化能力和特定空間構(gòu)象的生物大分子。加入競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑后,Vmax不變,Km變大。復(fù)制子:基因組能獨(dú)立進(jìn)行復(fù)制的單位4)裂合酶脫氨基作用的酶:L-氨基酸氧化酶,谷氨酸脫氫酶(輔酶NAD+NADP+)R-CH-COOHNH2
2H
R-C-COOH+NH3
OH2OR-C-COOHNH
酶聯(lián)合脫氨基作用:以谷氨酸為中心的聯(lián)合脫氨基作用,天冬氨酸的聯(lián)合脫氨基作用聯(lián)合脫氨基作用:氨基酸與α-酮戊二酸經(jīng)轉(zhuǎn)氨作用生成α-酮酸和谷氨酸,后者經(jīng)L-谷氨酸脫氫酶作用生成游離氨和α-酮戊二酸的過程。是轉(zhuǎn)氨基作用和L-谷氨酸氧化脫氨基作用聯(lián)合反應(yīng)。轉(zhuǎn)氨酶氨基酸
-酮酸L-谷氨酸脫氫酶NH3+NADH+H+H2O+NAD+
-酮戊二酸谷氨酸以谷氨酸為中心的聯(lián)合脫氨基作用天冬氨酸的聯(lián)合脫氨基作用COOHCH2H2N-CHCOOH+天冬氨酸(Asp)OHNNNNR-5’-P次黃嘌呤核苷酸(IMP)NNNNR-5’-PCOOHCH2HN-CH-COOH腺苷酸代琥珀酸H2O裂合酶NH2NNNNR-5’-P+COOHCH2CH-COOH延胡索酸腺苷酸(AMP)H2ONH3骨骼肌中氨基轉(zhuǎn)運(yùn):葡萄糖-丙氨酸循環(huán)氨基的去路——尿素循環(huán)產(chǎn)所:線粒體和細(xì)胞質(zhì)限速酶:精氨酸代琥珀酸合成酶尿素循環(huán):是路生動(dòng)物排氨的主要途徑,氨基酸氧化時(shí)產(chǎn)生的氨,在肝臟細(xì)胞線粒體和胞質(zhì)中,經(jīng)過谷氨酸,瓜氨酸,精胺琥珀酸,精氨酸,鳥氨酸循環(huán),生成尿素的過程。胞液線粒體2ATP+CO2+NH3+H2O氨基甲酰磷酸①2ADP+Pi瓜氨酸精氨酸代琥珀酸③ATP+AspAMP+PPiNH3
草酰乙酸蘋果酸鳥氨酸②瓜氨酸Pi延胡索酸精氨酸④尿素鳥氨酸H2O⑤尿素合成的鳥氨酸循環(huán)氨基的脫羧反應(yīng):產(chǎn)物是一級(jí)胺,大部分一級(jí)胺有毒,少數(shù)作為生物活性物質(zhì)。γ-氨基丁酸:抑制性神經(jīng)遞質(zhì)組胺:強(qiáng)烈的血管舒張劑,能增加毛細(xì)血管的通透性。5-羥色胺:腦內(nèi)5-羥色胺可作為抑制性神經(jīng)遞質(zhì)。在外周組織,5-羥色胺有收縮血管的作用第九章核酸代謝核酸代謝核酸降解核酸合成核苷酸的合成DNA的合成RNA的合成1、核酸的降解:蛇毒磷酸二酯酶和牛脾磷酸二酯酶的作用位點(diǎn)PPPPPP
AGCTGCOH5`3`牛脾磷酸二酯酶蛇毒磷酸二酯酶腺苷酸腺苷酸脫氨酶次黃苷酸次黃苷核苷酸酶Pi戊糖-1-磷酸次黃嘌呤核苷磷酸化酶核苷核苷脫氨酶腺嘌呤腺嘌呤脫氨酶黃嘌呤鳥嘌呤尿酸尿囊素尿囊酸尿素+乙醛酸人,猿,鳥其他哺乳類硬骨魚兩棲類,魚嘌呤的降解產(chǎn)物胞嘧啶NH3尿嘧啶二氫尿嘧啶H2OCO2+NH3β-丙氨酸β-脲基異丁酸β-氨基異丁酸H2O丙二酸單酰CoA乙酰CoATCA肝尿素甲基丙二酸單酰CoA琥珀酰CoATCA糖異生胸腺嘧啶嘧啶降解產(chǎn)物2、核苷酸的合成:從頭合成途徑和補(bǔ)救途徑從頭途徑中元素來(lái)源CCCCNN氨甲酰磷酸谷胺酰胺二氧化碳天冬氨酸3、DNA的生物合成半保留復(fù)制:即新的雙鏈DNA中,一股鏈來(lái)自模板,一股鏈為新合成的。復(fù)制子:基因組能獨(dú)立進(jìn)行復(fù)制的單位半不連續(xù)復(fù)制:DNA雙鏈在進(jìn)行復(fù)制時(shí),一條模板鏈3’→5’方向,復(fù)制鏈以5→’3’方向連續(xù)合成,另一條模板鏈3’→5’方向,復(fù)制鏈以5’→3’方向合成許多DNA片斷,最后連成完整的鏈。岡崎片斷:岡崎用電子顯微鏡看到了DNA復(fù)制過程中出現(xiàn)一些不連續(xù)片段,這些不連續(xù)片段只存在與DNA復(fù)制叉上其中的一股。后來(lái)就把這些不連續(xù)的片段稱為岡崎片段。DNA聚合酶ⅠDNA聚合酶ⅡDNA聚合酶Ⅲ不同種類亞基數(shù)目1≥7≥10相對(duì)分子質(zhì)量103000880009000005′→3′核酸聚合酶活性+++3′→5′核酸外切酶活性+++5′→3′核酸外切酶活性+--聚合速度(核苷酸/分)1000~1200240015000~60000持續(xù)合成能力3~2001500≥500000分子數(shù)/細(xì)胞40010010~20功能切除引物,修復(fù)修復(fù)復(fù)制大腸桿菌DNA聚合酶的種類DNA連接酶(ligase)原核生物以NAD+為能量供體,為DNA連接酶提供能量。真核生物以ATP為能量供體,為DNA連接酶提供能量拓?fù)洚悩?gòu)酶:是一類可改變DNA拓?fù)湫再|(zhì)的酶。解旋酶通過ATP水解提供能量,使堿基對(duì)分開大部分的解旋酶方向是沿著5’→3’方向單鏈結(jié)合蛋白和引發(fā)酶DNA聚合酶1)以四種dNTP為底物2)以DNA為模板,并且需要一段引物,引物是一段與模板互補(bǔ)的核酸(DNA或RNA)片斷,有3’-OH。3)合成方向是5’→3’4)合成的DNA分子性質(zhì)與親代DNA相同。復(fù)制過程分為:起始,延伸,終止三個(gè)階段增加負(fù)超螺旋打開雙螺旋單鏈結(jié)合蛋白DnaA拓?fù)洚悩?gòu)酶ⅡDNA的起始過程形成引物DnaB復(fù)制的延伸同時(shí)進(jìn)行前導(dǎo)鏈和滯后鏈的合成共同途徑前導(dǎo)鏈的合成滯后鏈的合成3、復(fù)制的終止50oriter0ter為終止區(qū),有6個(gè)終止位點(diǎn),每個(gè)終止位點(diǎn)有22bp,可與終止蛋白
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