紫外可見分光光度分析法-為龍

儀器分析

紫外-可見分光光度法一、誤差來源二、顯色反應(yīng)的選擇三、顯色反應(yīng)條件的選擇四、共存離子干擾的消除五、測定條件的選擇六、提高光度測定靈敏度和選擇性的途徑第三節(jié)UV法的誤差與顯色、測量條件的選擇一、紫外-可見吸收光譜法的誤差1.溶液偏離朗伯-比爾定律所引起的誤差2.儀器誤差3.操作誤差二、顯色反應(yīng)的選擇1.選擇顯色反應(yīng)時，應(yīng)考慮的因素

靈敏度高、選擇性高、生成物穩(wěn)定、顯色劑在測定波長處無明顯吸收，兩種有色物最大吸收波長之差：“對比度”，要求△

>60nm。2.配位顯色反應(yīng)

當(dāng)金屬離子與有機(jī)顯色劑形成配合物時，通常會發(fā)生電荷轉(zhuǎn)移躍遷，產(chǎn)生很強(qiáng)的紫外—可見吸收光譜。3.氧化還原顯色反應(yīng)

某些元素的氧化態(tài)，如Mn（Ⅶ）、Cr（Ⅵ）在紫外或可見光區(qū)能強(qiáng)烈吸收，可利用氧化還原反應(yīng)對待測離子進(jìn)行顯色后測定。

例如：鋼中微量錳的測定，Mn2＋不能直接進(jìn)行光度測定

2Mn2＋＋5S2O82-＋8H2O=2MnO4＋+10SO42-＋16H+

將Mn2＋

氧化成紫紅色的MnO4＋后，在525nm處進(jìn)行測定。4.顯色劑無機(jī)顯色劑：硫氰酸鹽、鉬酸銨、過氧化氫等幾種。有機(jī)顯色劑：種類繁多

偶氮類顯色劑：本身是有色物質(zhì)，生成配合物后，顏色發(fā)生明顯變化；具有性質(zhì)穩(wěn)定、顯色反應(yīng)靈敏度高、選擇性好、對比度大等優(yōu)點(diǎn)，應(yīng)用最廣泛。偶氮胂Ⅲ、PAR等。

三苯甲烷類：鉻天青S、二甲酚橙等三、顯色反應(yīng)條件的選擇1.顯色劑用量吸光度A與顯色劑用量CR的關(guān)系會出現(xiàn)如圖所示的幾種情況。選擇曲線變化平坦處。2.反應(yīng)體系的酸度

在相同實(shí)驗(yàn)條件下，分別測定不同pH值條件下顯色溶液的吸光度。選擇曲線中吸光度較大且恒定的平坦區(qū)所對應(yīng)的pH范圍。3.顯色時間與溫度

實(shí)驗(yàn)確定4.溶劑一般盡量采用水相測定，四、共存離子干擾的消除1.加入掩蔽劑

選擇掩蔽劑的原則是：掩蔽劑不與待測組分反應(yīng)；掩蔽劑本身及掩蔽劑與干擾組分的反應(yīng)產(chǎn)物不干擾待測組分的測定。例：測定Ti4＋，可加入H3PO4掩蔽劑使Fe3+(黃色)成為Fe(PO４)23-(無色)，消除Fe3+的干擾；又如用鉻天菁S光度法測定Al3+時，加入抗壞血酸作掩蔽劑將Fe3+還原為Fe2+，消除Fe3+的干擾。2.選擇適當(dāng)?shù)娘@色反應(yīng)條件3.分離干擾離子五、測定條件的選擇1.選擇適當(dāng)?shù)娜肷洳ㄩL

一般應(yīng)該選擇λmax為入射光波長。如果λmax處有共存組分干擾時，則應(yīng)考慮選擇靈敏度稍低但能避免干擾的入射光波長。2.控制適宜的吸光度（讀數(shù)范圍）

不同的透光度讀數(shù)，產(chǎn)生的誤差大小不同：－lgT=εbc微分：－dlgT＝－0.434dlnT=-0.434T-1

dT

=εbdc兩式相除得：

dc/c=（0.434/TlgT）dT

以有限值表示可得：

Δc/c

=（0.434/TlgT）ΔT

濃度測量值的相對誤差（Δc/c）不僅與儀器的透光度誤差ΔT有關(guān)，而且與其透光度讀數(shù)T的值也有關(guān)。是否存在最佳讀數(shù)范圍？何值時誤差最?。?/p>

最佳讀數(shù)范圍與最佳值

設(shè)：ΔT=1%，則可繪出溶液濃度相對誤差Δc/c與其透光度T的關(guān)系曲線。如圖所示：當(dāng)：ΔT=1%，T在20%～65%之間時，濃度相對誤差較小，最佳讀數(shù)范圍。

可求出濃度相對誤差最小時的透光度Tmin為：

Tmin＝36.8%,Amin＝0.434

用儀器測定時應(yīng)盡量使溶液透光度值在T%=20～65%(吸光度A=0.70～0.20)。如果吸光度讀數(shù)范圍不在此范圍，可通過改變稱樣量、稀釋溶液及選擇不同厚度的吸收池。

3.選擇合適的參比溶液

為什么需要使用參比溶液？

測得的的吸光度真正反映待測溶液吸光強(qiáng)度。參比溶液的選擇一般遵循以下原則：

⑴若僅待測組分與顯色劑反應(yīng)產(chǎn)物在測定波長處有吸收，其它所加試劑均無吸收，用純?nèi)軇ㄋ?作參比溶液；⑵若顯色劑或其它所加試劑在測定波長處略有吸收，而試液本身無吸收，用“試劑空白”(不加試樣溶液)作參比溶液；參比溶液的選擇一般遵循以下原則：

⑶若待測試液在測定波長處有吸收，而顯色劑等無吸收，則可用“試樣空白”(不加顯色劑)作參比溶液；

⑷若顯色劑、試液中其它組分在測量波長處有吸收，則可在試液中加入適當(dāng)掩蔽劑將待測組分掩蔽后再加顯色劑，作為參比溶液。請選擇內(nèi)容：第一節(jié)基本原理第二節(jié)紫外-可見分光光度計第三節(jié)顯色與測量條件的選擇第四節(jié)分光光度測定方法第五節(jié)

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